苦荞中查尔酮合成酶全长基因的克隆及序列分析
大豆查尔酮合成酶基因克隆、表达及其在雪莲提取液中代谢产物分析的开题报告
大豆查尔酮合成酶基因克隆、表达及其在雪莲提取
液中代谢产物分析的开题报告
一、问题描述
大豆查尔酮合成酶是植物中关键的代谢酶之一，其能够催化对雌激
素的合成。
然而，目前对于这一酶基因的研究仍然相对不足。
本实验将
尝试进行大豆查尔酮合成酶基因的克隆、表达，并且进一步研究其在雪
莲提取液中的代谢产物，以期为大豆查尔酮合成酶的研究提供新的思路
和实验依据。
二、研究方法
1. 大豆查尔酮合成酶基因的克隆与序列分析
利用头芽芥基因库中的大豆查尔酮合成酶基因序列作为模板，设计
引物对大豆查尔酮合成酶基因进行PCR扩增。
将所得PCR产物进行回收、纯化、测序等工作，并且对其序列进行比对和分析。
2. 大豆查尔酮合成酶基因的表达
将大豆查尔酮合成酶基因克隆入pET28a载体中，将其导入大肠杆菌中进行表达，最后通过Western blotting加以检测和验证。
3. 雪莲提取液中的代谢产物分析
将大豆查尔酮合成酶表达菌株添加到雪莲提取液中进行代谢反应，
并且采取薄层层析法和HPLC等分析技术对其代谢产物进行鉴定和分析。
三、预期结果
1. 成功克隆和验证大豆查尔酮合成酶基因的表达
2. 确立大豆查尔酮合成酶对雪莲提取液中代谢产物的代谢关系
3. 提供大豆查尔酮合成酶基因研究的新思路和实验依据。
四、意义与价值
1. 深入了解大豆查尔酮合成酶的生物学功能和调控机制
2. 为开发从雪莲中提取大豆查尔酮的新方法提供科学依据
3. 为开展相关激素、内分泌疾病等领域的研究提供新的思路和实验依据。
植物查尔酮合成酶分子生物学研究进展
植物查尔酮合成酶分子生物学研究进展河南农业科学植物查尔酮合成酶分子生物学研究进展王燕,许锋,程水源(1,长江大学园艺园林学院,湖北荆州434025;2,黄冈师范学院生命科学与工程学院,湖北黄冈438000)摘要:查尔酮合成酶(chalconesynthase,CHS,EC2.3.1.74),是植物类黄酮物质合成途径中的第一个酶,也是植物次生代谢途径中的关键酶之一,对植物具有非常重要的生理意义.为此,综述了查尔酮合成酶基因结构,基因进化,表达调控机理以及诱导因子,概述了查尔酮合成酶基因工程在植物生理方面的研究,并进一步对查尔酮合成酶的分子生物学研究做了展望.关键词:植物;查尔酮合成酶;分子生物学;基因工程中图分类号:943.2文献标识码:A文章编号:1004—3268(2007)08—0005—05查尔酮合成酶(chalconesynthase,CHS,EC2.3.1.74)是植物类黄酮物质合成途径中的第一个酶.它催化该途径的第一步,即3个分子的丙二酰一CoA和1个分子的对香豆酰一CoA结合形成第一个具有C15架的黄酮类化合物一查尔酮.该产物进一步衍生转化构成了各类黄酮化合物l1].此中间物的异构化和功能基团的进一步取代都能导致黄酮,异黄酮和花色素苷的合成.这些化合物为自然界提供了颜色,并参与了植物的多种生理过程,包括防紫外线辐射,抗病,生长素运输,花粉的育性等,.现已对许多植物查尔酮合成酶基因进行了分离克隆和测序,很多学者通过转基因方法成功地将外源查尔酮合成酶基因导入植物,提高了转基因植物查尔酮合成酶活性,并且这些植物都表现出了目的生理性状.而且查尔酮合成酶在植物中是普遍存在的,它的分子进化存在多种途径,也有许多查尔酮合.成酶基因的分子进化途径的研究报道.在此基础上对国内外植物查尔酮合成酶分子生物学及基因工程的研究进展进行了综述.1查尔酮合成酶基因结构自从第一个荷兰芹的chs序列在l983年发表以来,到目前为止,已从多种双子叶,单子叶和裸子植物中克隆了s基因,例如,玉米,高粱,兰花,矮牵牛引,拟南芥,金鱼草l.],豆类～.和松树|l等.所有报道的chs基因都属于多基因家族,chs基因在结构上非常保守,除金鱼草的1个chs基因AMCHS含有2个内含子外[1o2.其余的chs 均只包含1个内含子和2个外显子.而且这个内含子的位置在已发现的序列中均相同,即位于第65位(以欧洲赤松PinusSylvestris的PSCHS为标准)的半胱氨酸密码子内第一和第二位碱基之间,其长度从几十碱基对到几千碱基对不等.外显子l较短,只编码约60个氨基酸,且长度变异较大;外显子2编码约340个氨基酸,在进化中较保守,易于排序,提供的进化信息较多|1.王金玲等的研究也表明,可用CHS基因外显子2代表全基因进行研究口. Koes等研究矮牵牛的CHS基因家族包括8～l0个成员,在植物正常发育中仅CHs—A和CHs—J在花中表达,前者转录mRNA占CHS总mRNA的90[8l2查尔酮合成酶基因进化CHS在植物中是普遍存在的,现认为最早在陆生植物中出现,例如,轮藻纲和苔藓植物『2.有资料显示,CHS是从脂肪酸代谢途径中的一个酶进化而来.越来越多的证据显示,在进化的过程中,CHS的功能有过多次转变,例如,不断重复地转变成芪合成酶(stilbenesynthase,STS).Tropf等收稿日期:2007—03—14基金项目:湖北省自然科学基金(2002AB094);湖北省青年杰出人才基金(2003AB014);教育部新世纪优秀人才计划(NCET一04—0746);湖北省教育厅重大科技项目(Z200627002)作者简介:王燕(1967一),女,江苏南通人,吾0教授,主要从事银杏次生代谢分子生物学方面的研究.通讯作者:程水源(1965一).男,湖北天门人,教授,博士生导师,主要从事银杏次生代谢方面的研究.5?2007年第8期通过CHS和STS的进化指出,在进化的历史中,STS曾经几次从CHS独立地进化出来.Lanz等指出,CHS在植物的不同类群中是很保守的,已有数据表明,CHS基因是一个较大的基因家族,其编码区比较保守,长约1.2kb,科之间的氨基酸同源性在7O～90[243.Ursula等首次尝试用CHS基因编码区的DNA序列来研究物种的进化关系引,当时他们只分析了7个种8个序列;王金玲等于2000年共分析了19个科的83个序列_1川.基于最筒约法对所研究的CHS基因外显子2部分DNA序列构建的系统进行自展分析的结果表明:各科序列在分支图上的分布情况不同,对于大部分分科,同一科的序列都形成一组,只有少数科的序列分布在相距很远的分支中,在CHS基因的进化中,经常发生基因重复一分歧(duplication—divergence). 攀枝花苏铁的2个克隆CPA1和CPA5分布在相距很远的分支中,说明CHS基因的重复在裸子植物就已经发生.杨俊波等的研究表明l2:山茶属CHS基因家族在进化过程中已分化为A,B,C3个家族,包括A1,A2,A3,B1,B2,C等6类不同的基因成员.其中只有A2类成员为全部被研究的5种植物所共有,而其他类成员只在部分被研究的植物中发现.所有这些CHS成员具有很高的同源性,在核苷酸水平上同一亚家族内基本上高于9O,不同亚家族间也在78%以上.从推测的氨基酸组成看,山茶属内CHS基因的功能一旦发生了分化,各类成员的碱基替代率会有较大差异.进一步分析认为,该属CHS基因的分化直到近期还在活跃地进行.Ferrerd等也指出不同种的进化式样有一定的差别,这种不同的进化式样可能是物种形成后受不同环境因素影响而形成的.近几年来的研究结果表明,CHS只是植物聚酮化合物合成酶家族中的一个成员.通过功能和序列鉴定这个家族的其他成员包括:STS,ACS,2PS,这些蛋白与CHS的序列同源性在65～75之间. Durbin等指出,CHS非常适合于基因复制的研究和基因家族起源的调查引.但是,目前还没有从假定的早期陆生植物中或者其可能的祖先植物中分离得到CHS及其相关的基因,关于这些植物中CHS 相关蛋白合成的次生代谢产物也没有研究.3CHS基因表达的调控研究3.1CHS表达的调控机理CHS是类黄酮生物合成过程中第一个关键酶,6CHS基因的表达受多种内外因素的调控.将CHS基因的启动子片段与GU5报告基因连接,导入植物细胞,通过转基因,原生质体瞬时表达,定点专一突变等手段对CHS基因的启动子进行研究,在CHS 基因启动子区找到了一些作用元件.正是这些元件以及他们与转录因子之间的相互作用,决定了CHS 基因的表达方式受发育和内外因素的复杂调控【2. 与查尔酮基因表达相关的顺式作用元件与反式作用因子已陆续被发现川,如ACE元件(ACGele—ment)『3l,.,H区(H—box)_33],富含AT元件(A T —richelement)_34I.,沉默子(Silencer)[.,P区(BoxP)[37J,工区和Ⅱ区(BoxI和BoxⅡ)_3.3.2CHS表达的诱导因子查尔酮合成酶往往受不同的发育调控和组织特异性调控,对不同外界刺激的敏感程度也不同. Senebier在18世纪末最早发现类黄酮的生物合成受光的调控,在一些植物中,花色素苷只有在光照下才会产生.Arthur也认为,刺激花色素苷合成最有效的光是蓝光/UV—A和UV—B.CHS的表达产生mRNA受到蓝光,紫外光的调节.在香菜细胞培养中,CHS表达产生最大量mRNA同时需要蓝光和紫外光.在自芥和香菜中,暗生长的幼苗CHS表达产生mRNA受光敏色素调节,而成熟叶片中, UV—B和uV—A/蓝光受体介导CHS表达产生mRNA.拟南芥中,紫外光和蓝光控制幼苗CHS表达产生mRNA和成熟叶组织的CHS表达.光敏色素对幼苗的CHS表达起作用[3.除了受光诱导外,CHS的表达还受病原微生物侵染和机械损伤等各种外界因子所诱导c4¨.4CHS基因工程与植物生理代谢4.1CHS转基因在植物花色的影响方面研究截至目前,大多数花卉新品种都是通过传统育种方法来获得的[4.而传统的方法存在着很多的局限性.遗传工程技术的发展给观赏植物产业的发展开辟了一条新的途径,在大多数植物种类中,类黄酮化合物是最重要的花色素.类黄酮生物合成基因的克隆,为遗传工程手段改变花色奠定了基础.目前,遗传工程技术可以从两个方面来改变花的颜色. 第一:抑制类黄酮生物合成基因的活性,导致中间产物的积累和花色的改变;第二,引入新基因来补充某些品种缺乏合成某些颜色的能力【l4.抑制类黄酮生物合成基因的活性有2种方法:一是通过反义RNA技术将目的基因的反义链连接河南农业科学在启动子后面,并转化植物,使目的基因的表达受到抑制;二是通过向植物中引入额外数量的目的基因拷贝,以共抑制技术方式,使目的基因的表达受到抑制[4.CHS基因的反义抑制和共抑制技术已经在牵牛,天竺葵,菊花和玫瑰中取得了成功].用遗传工程技术改变花色的另一条途径是通过转基因技术.例如,牵牛中的二氢黄酮醇4～还原酶不能把二氢黄酮醇(dihydrokaempfero1)转化为合成花葵素糖苷的中间产物,用传统的方法很难培育出橘红色的牵牛花.Meyer等利用遗传工程技术,将玉米的dfr基因转化进入开白花的牵牛中,使该DFR基因在牵牛中表达,产生的dIr酶能使二氢黄酮醇转化为相应的中间产物,进一步合成花葵素糖苷,培育出了橘红色的牵牛花[4.4.2CHS基因工程在植物育性方面的研究类黄酮与植物的育性有密切的关系.它在花粉中主要的合成部位是绒毡层,然后运输到子囊腔并最后进入花粉粒的外壁,成为组成外壁的一个重要的成分.因此,类黄酮在花粉粒的形成中起着非常重要的作用.研究认为,chs—a转基因植物雄性不育现象的产生可能是由于chs在花药中的转录.邵莉等人将正向chs—a基因转入矮牵牛中,在成功地改变了花的颜色的同时还发现了转基因植物也出现了雄性不育的现象.在玉米中,人们早就发现由于CHS突变(C2, Whp)而产生的不育的白色花粉粒.与此同时,水稻中类CHS基因的异常表达也可能导致花粉粒败育l_4.张毅等研究证明了在水稻花药中特异表达的类查尔酮合成酶基因D5mRNA的积累在四分体时期达到高峰并持续到小孢子时期,而这一时期与外壁的形成密切相关,而且有报道表明,拟南芥的雄性不育突变体msl2即为花粉外壁形成的缺陷型.4.3CHS基因工程在植物防御反应中的研究对于chs在植物防御反应中的调控方式的研究正在两个方向上进行:一是观察植物受到病原微生物侵染后的各种生理变化;另一个是研究与CHS表达相关的调控因子及其基因的调控方式.在病原微生物与植物相互作用的过程中,各种激发因子和抑制因子大都存在于细胞之外,而CHS 及其他与真菌有关的基因的表达均发生在细胞内, 细胞外的信号如何传递到细胞内,是一个引人注目的问题.目前已确证与CHS表达有关的信号传递过程是磷酸肌醇(PI)途径.不少研究结果显示.植物在遭受病原微生物侵染后,CHS活性显着增强,chs活跃转录,这些结果表明,由CHS调控的苯丙烷代谢反应很可能是植物抵抗病原物侵染的重要防卫反应之一[5.齐放军等用水稻抗白叶枯病近等基因系材料及转基因系材料,研究了水稻白叶枯病菌互作中,水稻防卫基因chs的转录特征[5.Northern检测结果显示,在与白叶枯病菌非亲和性互作中,水稻chs基因的转录均不受到诱导或只是受到很微蜀弓的诱导. 表明由chs基因调控的苯丙烷核心反应的启动和产物的合成,有助于增强水稻对白叶桔病菌的抗性.试验结果显示:互作中水稻chs基因是否受到白叶枯病菌的诱导,不仅与水稻中抗病基因有关,而且还与抗病基因的种类有关.表明水稻chs基因在互作中是否受到诱导转录,取决于其水稻功能性抗病基因产物对白叶枯病菌的专化性识别[5.从植物受到病原微生物侵染开始,到chS被诱导表达一系列调控过程至今还缺乏一个完整的认识.相信随着chs这一模式基因在植物防御机制中的作用研究的不断深入,人类不但将进一步认清植物基因调控的机理,而且可以通过利用它们的调控途径来改变某些基因的表达效应,从而为改良作物品种,提高作物抗病能力开辟一条崭新的途径.5展望迄今,有关学者至少对1o余种植物查尔酮合成酶基因进行了转化研究,如烟草,核桃,芸香,水稻,玫瑰,百合,矮牵牛,黄瓜,玉米等,尤其是在观赏植物花色的转基因研究方面最为深入.在未来农业中,开展CHS基因的克隆,结构特点,表达部位和时空表达模式的研究.以便有目的的用之于转化植物,使之在转基因植物中大量,持久地表达,提高目的次生代谢产物的含量,使植物查尔酮合成酶转基因应用进入产业化具有重要意义.参考文献:[1]程水源,颐曼如,束怀瑞.银杏叶黄酮研究进展[J].林业科学,2000,36(6):110一l15.[2]KoesRE,FrancescaQ,JosephNM.Theflavonoid biosyntheticpathwayinplants:functionandevolution 口].Bioessays,l994,16:123—132.[3]MartinCR.Structure,function,andregulationofthe chalconesynthase[C]//.InternationReviewofCytolo gy,l993,147:233—284.[4]ReimoldU,KroegerM,KreuzalerF,eta1.Coding72007年第8期E5J[6]E7]E8][9][io3[11][12][13][14][15]and3noncodingnucleotide thasemessengerRNAandsequenceoftheenzyme[J].18O6.sequenceofchalconesyn—assignmentofaminoacidEMBOJ,1983,2:1801一FrankenP,NiesbachKU.WeydemannU,eta1.The duplicatedchalconesynthasegenesC2andWhp(white pollen)ofZeamaysareindependentlyregulated;evi—dencefortranslationalcontrolofWhpexpressionby theanthocyaninintensifyinggene[J].EMBOJ,1991,10:2605—2612.LoC,CoolbaughRC.NicholsonRI.Molecular characterizationandinsilicoexpressionanalysisof chalconesynthasegenefamilyinsorghumbicolor[J]. 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苦荞谷胱甘肽转移酶(FtGST)基因的克隆与序列分析
苦荞谷胱甘肽转移酶(FtGST)基因的克隆与序列分析赵海霞;李双江;李成磊;陈惠;吴琦【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2012(000)007【摘要】采用RACE技术,从苦荞(Fagopyrum tatarium)中克隆得到一个谷胱甘肽转移酶(Glutathione S-transferase protein,FtGST)基因.序列分析表明,FtGST 基因全长DNA序列和cDNA序列编码区分别为746 bp和666bp,DNA序列含有一个长度为80bp(342-421 bp)的内含子；开放阅读框(ORF)长666bP,编码221个氨基酸.生物信息学分析表明,FtGST基因推导的蛋白质含有Tau家族典型的底物结合口袋、谷胱甘肽结合位点(G-site)和疏水性底物结合位点(H-site)氨基酸残基,表明FtGST为Tau家族蛋白.【总页数】7页(P70-76)【作者】赵海霞;李双江;李成磊;陈惠;吴琦【作者单位】四川农业大学生命科学与理学院,雅安625014;四川农业大学生命科学与理学院,雅安625014;四川农业大学生命科学与理学院,雅安625014;四川农业大学生命科学与理学院,雅安625014;四川农业大学生命科学与理学院,雅安625014【正文语种】中文【相关文献】1.苦荞中查尔酮合成酶全长基因的克隆及序列分析 [J], 刘凯;胡耀辉;王冠;于寒松2.苦荞糖基转移酶的鉴定与基因克隆 [J], 赵丹3.苦荞蔗糖合酶基因克隆及序列分析 [J], 燕雪芬;李玉萍;张海纳;陈鹏4.苦荞4-香豆酸辅酶A连接酶基因（Ft4CL）的克隆及序列分析 [J], 凌瑶;高飞;王安虎;李成磊;陈惠;吴琦5.苦荞糖基转移酶基因的克隆及活性鉴定 [J], 李茂菲;周婧;姚攀锋;赵学荣;李成磊;吴琦因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
査尔酮合成酶基因及其分子进化研究进展
査尔酮合成酶基因及其分子进化研究进展
李苗;李国旗
【期刊名称】《中国农学通报》
【年(卷),期】2015(31)18
【摘要】查尔酮合成酶基因在植物苯丙氨酸代谢途径中的作用至关重要,直接或间接影响着植物代谢产物合成、抗性调节、花色形成等生理生化过程。
为了进一步加强对查尔酮合成酶基因功能的发掘与利用,本研究综合归纳了査尔酮合成酶基因及其克隆、遗传多样性和分子进化等方面研究进展,得出查尔酮合成酶基因克隆采用的主要方法,进而指出査尔酮合成酶基因分异进化研究的未来方向,同时为特色基因资源开发方面研究提供技术资料检索帮助和研究方法参考。
【总页数】5页(P116-120)
【关键词】查尔酮合成酶基因;克隆;遗传多样性;分子进化
【作者】李苗;李国旗
【作者单位】宁夏农业生物技术重点实验室;宁夏大学西北退化生态系统恢复与重建教育部重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】Q7
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2.嫁接陆地棉查尔酮合成酶与查尔酮异构基因的克隆及r表达分析 [J], 宋成攀;夏
松波;王孝刚;张教海;秦鸿德;张友昌;冯常辉;别墅
3.洋葱查尔酮合成酶基因的分子克隆和表达分析 [J], 霍凤梅;缪军;张一卉;杨妍妍;刘冰江;霍雨猛;杨建平;吴雄
4.植物查尔酮合成酶超基因家族的分子进化 [J], 包颖;郭昌锋;陈少华;刘梅
5.盐芥査尔酮合成酶基因的生物信息学预测与分析 [J], 高亚平;李玮;刘艳
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决明查尔酮合成酶全长基因序列的克隆与分析
决明查尔酮合成酶全长基因序列的克隆与分析钟德馨;方袁梦梦;郭壮浩;安红强;董银松;丁若凡;王万军;廖海;周嘉裕【摘要】从决明(Cassia tora)的新鲜子叶中提取基因组DNA作为模板,利用一对特异引物进行PCR扩增,然后克隆测序得到决明查尔酮合成酶(CHS)的基因全长.测序结果表明,决明CHS基因全长为1 766 bp,含有2个外显子和1个内含子.将其提交GenBank,登录号为(JX676773).决明CHS基因的内含子位于188-765 bp之间,长度为578 bp,内含子的剪切符合GU-AG规律,含有多个酶切位点和顺式调控元件,可能与决明CHS基因的表达调控有关.CHS基因内含子具有多态性,可能是由不同植物存在多样性的生活史与生活环境导致的.决明CHS基因外显子2较为保守,编码几乎所有CHS的功能位点.构建外显子2编码氨基酸序列的NJ系统发育进化树,能够正确反映不同植物的亲缘关系,可用于不同植物的遗传分化和分子进化研究.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2013(000)005【总页数】6页(P99-104)【关键词】决明;查尔酮合成酶;内含子;基因克隆;序列分析【作者】钟德馨;方袁梦梦;郭壮浩;安红强;董银松;丁若凡;王万军;廖海;周嘉裕【作者单位】西南交通大学生命科学与工程学院,成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,成都610031【正文语种】中文真核生物基因的一个基本特征是它们被一个或多个内含子所间隔，这些内含子在转录后被除去以形成具有完整读码框的mRNA。
金荞麦查尔酮合成酶基因CHS的克隆及序列分析
１ 材 料 与 方 法
１ １ 试 验 材 料 及 菌 种 ．
金荞 麦 ２ ０ ０ ９年 ７月采 自四川 雅 安老板 山 ， Ｉ 大肠杆 菌 （ ｓｈ ｒｃ ｉ ｏｉＤＨ５ Ｅ ｃ ｅｉ ａｃｌ） ｈ ａ由本实验 室保存 。
１ ２ 试 剂 ．
质粒 Ｄ ＮＡ 小 量 提 取 试 剂 盒 、 回 收试 剂 盒 购 自 Ｏｍｅ ａ公 司 ； Ｔ ｑ 胶 ｇ ｒ ａ ＤＮＡ 聚 合 酶 、 隆 载 体 ｐ １ 一 克 ＭＤ ８Ｔ、
１ ６２— １６ ９
草 业
学
报
第 １ ９卷
第 ３期
２ｌ Ｏ Ｏ年 ６月
Ａ ＣＴ Ａ ＰＲＡ ＴＡ ＣＵ ＩＴＵ Ｒ ＡＥ Ｎ Ｉ Ｓ１ ＣＡ
Ｖｏ ＿ ９， ． ｌ １ Ｎ０ ３
金 荞 麦查 尔酮 合成 酶基 因 Ｃ ＨＳ的 克 隆 及 序 列 分 析
蒙华 ， 成 磊 ， 李 吴琦 ， 继 荣 ， 邵 陈惠
（ 四川 农 业 大 学 生 命科 学 与理 学 院 ， 川 雅 安 ６ ５ １ ） 四 ２０ ４
摘 要 ： 用 同源 克 隆 的 方 法 获 得 金 荞 麦 查 尔 酮 合 成 酶 基 因 （ ＨＳ 的保 守 片 段 ５ ４ｂ ， 一 步 采 用 染 色 体 步 移 法 采 Ｃ ） ５ ｐ 进
根含 有 的一 类原 花色素 苷的 缩 合 性单 宁混 合 物 如 表 儿茶 素 ， 矢 车 菊 素 Ｂ ２等 不 仅 能够 抑 制 某 些 肿瘤 细胞 生 原 一 长［ ， ＝ 还能祛 痰抗炎 、 ２ ］ 抑制 血小板 聚集 ， 降低还 原 反应和 增强 巨噬细胞 的吞 噬＿ 。 ３ ］ 金荞 麦作 为栽 培荞 麦 的野生近缘 种 ， 子粒 营养成 分含 量丰 富 ， 其 具有 很高 的营养 价值 。张政 和林 汝法Ｌ 的研 ４ 究 表 明， 荞麦子 粒高 达 １ ． 的蛋 白质含量 ， 金 ２６ 已达 到优 质 禾 谷类 粮食 的标 准 ， 且微 量 元 素 、 生 素 的含 量也 很 维
豆科植物查尔酮合成酶基因密码子偏好性分析
Ｔｈ ｅ ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ａ ｂ ｏ ｕ ｔ ｃ ｏ ｄ ｏ ｎ ｂ ｉ ａ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ ＣＨＳ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｏ ｆ ｌ ｅ ｇ ｕ ｍｉ ｎ ｏ ｕ ｓ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ｓ ｈ ａ ｓ ｇ ｒ ｅ ａ ｔ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｉｃ ｆ ａ ｎ ｃ ｅ ｔ ｏ ｉ ｎ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ
Ｃ Ｈ Ｓ基 因 密 码 子 的 偏 好 性 ， 对提 高 豆 科植 物 Ｃ Ｈ Ｓ基 因 的表 达 水 平 具 有 重 要 意 义 。 为 此 ， 运用 Ｃ Ｈ Ｉ Ｐ Ｓ 、 Ｃ Ｕ Ｓ Ｐ和 Ｃ ｏ ｄ ｏ ｎ Ｗ
程序分析豆科植物 Ｃ Ｈ Ｓ基 因密 码 子 的偏 好 性 ， 并用决 明 Ｃ Ｈ Ｓ基 因对 分 析 结 果 的 可 信 度 进 行 验 证 。结 果 表 明 ， 在 豆 科 植物 Ｃ Ｈ Ｓ基 因 的密 码 子 中 ， 以 Ａ或 ｕ结 尾 的 密 码 子 偏 好 性 较 强 。基 于 Ｃ Ｈ Ｓ基 因 Ｒ Ｓ Ｃ Ｕ值 的 聚 类 结 果 显 示 ， 豆 科 植 物
与茄科植物 （ 包括烟 草） 聚为一类 ， 表 明 烟草 作 为研 究 豆 科 植 物 Ｃ Ｈ Ｓ基 因功 能 的模 式 植 物 较 为 合 适 。通 过 对 决 明 Ｃ Ｈ Ｓ
基 因 密 码 子 偏 好 性 与 大 肠 杆 菌 和 酵 母 基 因组 密 码 子 偏 好 性 的 比 较 ， 发现两 者均存在 差异 ， 但 酵 母 的 差 异 低 于 大 肠 杆 菌， 表 明 酵母 表 达 系 统 更 加 适 合 作 为 决 明 Ｃ Ｈ Ｓ基 因 的外 源 表 达 系统 。 然 而 ， 若 要使决 明 Ｃ Ｈ Ｓ基 因 能 够 在 酵 母 表 达 系 统 中高 效 表 达 ， 仍 需对其密码子进行优化。
查尔酮合酶基因的克隆,全序列分析及在大肠杆菌中的高效表达
查尔酮合酶基因的克隆,全序列分析及在大肠杆菌中的高效表
达
邵莉;陈敏
【期刊名称】《生物工程学报》
【年(卷),期】1995(011)002
【摘要】类黄酮是植物中的一种重要的次级代谢产物，它与植物的花色形成有关。
查尔酮合酶是类黄酮合成途径中的一个关键酶，在植物体内，ＣＨＳ表达量的增加或减少都可能改变花的。
从矮牵牛花瓣的ｃＤＮＡ中克隆到了ＣＨＳ－Ａ基因，进行了全序列分析，并与国外已报道的ＣＨＳ－Ａ－序列进行了同源性比较。
【总页数】5页(P145-149)
【作者】邵莉;陈敏
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】Q559.9
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兆平;王小菁
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