《枸杞中12种农药残留快速检测方法胶体金免疫层析法》
胶体金免疫层析法对重金属汞残留的快速检测
摘 要 ：采用免疫竞争法，将抗重金属汞单克隆抗体一胶体金复合物包被在胶体金结合垫上，将人工合成
（ T 的重金属汞抗原包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线 线 ），其与待测样品中重金属汞竞争结合胶体金标记 T C 的重金属汞单克隆抗体，并通过 线 和 线上肉眼可见的颜色显示检测结果。检测水质时，灵敏度最低值可达 l l x g .L - 1，整个检测过程只需3 ~5 min。胶体金免疫层析法具有较高的灵敏度及特异性，操作便捷，可用于快
收稿日期 基金项目 作者简介 通信作者
2017-03-23 绍 兴 市 公 益 性 技 术 应 用 研 究 计 划 项 目 （2014B70047) 王 森 （1982— ），男 ，浙 江 新 昌 人 ，农 艺 师 ，硕 士 ，从 事 农 产 品 质 量 检 测 工 作 ，E-mail: 47419714@ 。 胡 叶 军 ，E-mail: hyj6 6 4 @ 1 6 3 . com。
目前，国内外检测水质中重金属的常见方法包
括 原 子 吸 收 光 谱 法 （AAS) [1]、 电感耦合等离子体 法 （ICP) [2]、原 子 荧 光 光 谱 法 （AFS) [3]、 溶出伏 安法[4]、 高 效 液 相 色 谱 法 （HPLC)[5]、 分光光度
法 [6]、酶 抑 制 法[7]、 生 物 化 学 传 感 器 [8]等 ，其中
Hg2+螯 合 物 单 抗 ，放 置 12 h 后 加 入 5 % B S A 至 BSA最 终 质 量 分 数 为 1 % ，离心纯化后沉淀用
0. 01 m d •L -1 PB 溶 液 （含 1 % BSA 和 0. 0 5 % NaN3) 重悬 ，4 °C 保存备用。
胶体金免疫层析法对重金属汞残留的快速检测
果蔬中农药残留快速检测规范化操作初探——以胶体金快速检测法为例
(１ 杭州市余杭区农产品质量安全检验检测站ꎬ 浙江 杭州 ３１１１１５ꎻ
２ 浙江禾兮中药材股份有限公司绍兴市博士创新站ꎬ 浙江 绍兴 ３１２０００ꎻ ３ 杭州傲敏生物科技有限公司ꎬ 浙江 杭州 ３１００２０ꎻ
析分析技术等多种方法的固相标记免疫检测技术ꎮ 其
基本原理是以长方形 ( 或条状) 纤维层析材料为固定
相ꎬ 利用毛细作用使样品溶液在固定相上泳动ꎬ 当泳
动至胶体金标记物处时ꎬ 如样品溶液中含有待检物受
体 ( 抗体或抗原) ꎬ 会立即发生免疫反应形成免疫复
合物ꎬ 被富集或截止在固定相的选定区域ꎬ 进而使标
抗体间的竞争抑制免疫层析原理ꎬ 待测物中的目标农
性、 生态平衡等方面产生了诸多负面影响ꎬ 更成为不
药和胶体金标记的制备抗体相结合ꎬ 致使抗体与试纸
同国家和地区间初级农产品贸易的重要壁垒ꎮ 蔬菜和
条或层析卡上 Ｔ 线 ( 检测线) 上抗原的结合受到抑
水果富含维生素、 膳食纤维ꎬ 是营养金字塔的重要组
成部分ꎬ 随着我国居民可支配收入的提高ꎬ 农产品消
的农残提取液ꎬ 使用移液枪加入提取液时应注意: 准
使用方法基本一致ꎬ 主要分为样品前处理和样品检测
确加入提取液ꎬ 吸取对应提取液的移液枪头ꎬ 专项专
两步ꎬ 下面按照检测流程的操作顺序ꎬ 依次具体介绍
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
用不混用ꎻ 装枪头时不要反复撞击枪头ꎬ 长期这样操
操作要点及注意事项ꎮ
作会导致移液枪中的零部件因猛烈撞击而松散ꎬ 应该
４ 杭州市余杭区农业生态与植物保护服务站ꎬ 浙江 杭州 ３１１１２１)
摘 要: 随着农药残留免疫胶体金检测技术的广泛应用ꎬ 同时面对农产品质量安全监管、 检测的新要求ꎬ 强化风
枸杞中吡虫啉、阿维菌素农药残留量的测定
枸杞中吡虫啉、阿维菌素农药残留量的测定
王晓菁;潘灿平;张艳;牛艳
【期刊名称】《西北农业学报》
【年(卷),期】2007(016)002
【摘要】建立了高效液相色谱法分析枸杞中吡虫啉、阿维菌素残留量的方法.样品采用酸性乙腈溶液提取,以高效液相色谱法分离检测,面积外标法定量分析,吡虫啉标准曲线的线性关系系数为0.9997,阿维菌素为0.9995,线性范围为10.0～1 000 μg/L.枸杞中吡虫啉平均回收率92.0%～110%,最小检测浓度0.047 μg/kg;阿维菌素平均回收率86.0%～98.0%,最小检测浓度0.33 μg/kg.该分析方法具有良好的重现性,定量结果的相对标准偏差均小于10%,可满足检测分析要求.
【总页数】4页(P250-252,256)
【作者】王晓菁;潘灿平;张艳;牛艳
【作者单位】中国农业大学理学院,北京,100029;宁夏农林科学院,银川,756002;中国农业大学理学院,北京,100029;宁夏农林科学院,银川,756002;宁夏农林科学院,银川,756002
【正文语种】中文
【中图分类】S481+.8
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定水果中吡虫啉农药残留量 [J], 何进林;张志华
2.稻谷中吡虫啉农药残留量的固相萃取高效液相色谱测定 [J], 戴华;李拥军;张莹
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4.液相色谱串联质谱法测定苹果中吡虫啉农药残留量 [J], 王蕊;张黎梅;江群
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枸杞中二氧化硫、农残的快速检测方法.doc
枸杞中二氧化硫、农残的快速检测方法6月23日，天津何先生怀疑自己的购买的枸杞和二氧化硫和农药残留超标，遂致电消费者体验中心咨询，后快递送检。
检测样品：枸杞检测项目：二氧化硫、农药残留检测仪器：多功能食品安全快速检测仪、农残仪以下为检验过程：一、检测项目：二氧化硫实验仪器：多功能食品安全快速检测仪1、样品处理：称取样品1.25g至25mL比色管中，加入C溶液0.5mL，加蒸馏水约20mL，超声浸提15min。
2、加入A溶液和B溶液各0.5mL，然后加蒸馏水至25mL刻度线，摇匀，静置5min，过滤，滤液（即样品液）备用。
3、取一支10mL比色管，加入1mL样品液，加入C溶液80μL，加蒸馏水至10mL 刻度线，加入D溶液0.5mL，摇匀，开盖静置10min4、加入F溶液0.5mL，迅速盖塞颠倒两次，迅速加入E溶液1mL，盖塞混匀，静置7min。
空白管：空白管内加入蒸馏水替代样品液，其余步骤与样品管相同。
5、将装有空白液的比色皿放入检测仪器，点击“校正”。
点击校正后，弹出“正在获取数据请稍后”对话框，此时不能进行任何操作。
当该对话框消失后，将装有样品液的比色皿放入检测仪器点击“检测”，当检测结果在下方显示时，检测完成。
检测结果：枸杞二氧化硫含量为6.5mg/kg，远小于国家规定的限量350mg/kg.二、检测项目：农药残留实验仪器：农药残留检测仪1、称取2g枸杞样品于样品提取瓶中。
2、加8ml农残缓冲液，轻微震荡摇匀3、因样品液颜色太深，为防止干扰检测结果，将提取液过滤4、取两根试管，分别作为样品管和对照管。
在样品管加入3ml样品液，在对照管中加入3ml缓冲液，随后分别加入20ul显色剂和50ul酶试剂。
盖塞混匀静置10min。
5、10min加入20ul底物，混匀后迅速倒入比色皿，将对照组放入第一通道，样品液放入第二通道，盖上样品仓。
检测结果：农药残留抑制率为7%，小于50%（农残抑制率大于等于50%，农残超标），表明农残未超标。
微生物降解宁夏枸杞中农药残留技术的研究与应用
微生物降解宁夏枸杞中农药残留技术的研究与应用作者：何微来源：《科技创新导报》2019年第17期摘 ; 要：枸杞是宁夏的支柱产业，更是宁夏食品药品监督管理局近年来的重点监管任务。
目前各地枸杞存在的质量安全问题大致相同，主要体现在农药残留，SO2残留、卫生指标这三个方面，其中农药残留超标最为严重，因此找寻一种合适的降解枸杞中农药残留的方法尤为重要，利用微生物菌种来降解农药残留为目前最合理的方法。
关键词：枸杞 ;农药残留 ;微生物降解中图分类号：S48 ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; 文献标识码：A ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; 文章编号：1674-098X（2019）06（b）-0079-02枸杞具有食药两用性，因其多方面的养生作用且获取较为方便，深受消费者的喜爱。
虽我国很多地区均有枸杞种植，但宁夏枸杞的种植量和产量仍然占据全国枸杞产量的第一位。
枸杞在宁夏人工种植的历史已超过600年，其不仅是宁夏的支柱产业，更是宁夏食品药品监督管理局近年来的重点监管对象。
目前各地枸杞存在的质量安全问题大致相同，主要体现在农药残留，SO2残留、卫生指标不合格这3个方面。
我区虽设有地方标准DBS64/001-2017，其中规定了枸杞的安全标准，但这仅起到了监管和辅助作用，并不能从根本上保障枸杞及其制品的安全性。
调查显示，随着农田生态系统的变化，宁夏栽培枸杞的主要病虫害也在不断演变，化学防治所用农药和使用方法也随之不断更新，据不完全统计，枸杞在种植环节，有机磷、菊酯类等农药的使用已然成为主流，难以在短期之内扭转。
大量的农药使用使得其残留量不断增高，这将威胁大众的健康。
科研表明农药施于大田后，可通过多種途径迁移转化，如挥发、扩散、淋溶、吸附、水解、光解、生物降解、化学氧化等。
其中，前四种方式不改变农药的化学结构，只是简单地将农药由施药田扩散至表层土壤、地下水、河流、湖泊、大气等;而其他几种转化过程虽伴随着农药分子结构的改变，在这其中，农药可通过降解作用转变成无毒物质，但也可通过化学结构的改变转变成毒性更高的物质[1]。
胶体金免疫层析法同时检测果蔬中四种农药残留
胶体金免疫层析法同时检测果蔬中四种农药残留叶茂;沈晓玲;陈青舟;夏武强;张敏;张少恩【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2023(44)6【摘要】目的:研制一种胶体金免疫层析四线卡,可同时检测果蔬中毒死蜱、氟虫腈、克百威、多菌灵4种农药残留。
方法:以硝酸纤维素膜为载体,农药竞争抗原为包被抗原,胶体金为标记材料,制备胶体金免疫层析四线卡,并对标记抗体浓度、检测线包被浓度、样品提取剂、提取时间等参数条件进行优化,评价四线卡的灵敏度、特异性、稳定性和准确性。
结果:优化后四线卡制备工艺参数中毒死蜱、氟虫腈、克百威、多菌灵的最适标记抗体浓度为3.2、2.4、3.2、3.2μg/mL,T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)抗原包被浓度分别为0.65、0.80、0.65、0.5 mg/mL。
毒死蜱检出限为0.1 mg/kg、氟虫腈为0.02 mg/kg、克百威为0.02 mg/kg、多菌灵为0.05 mg/kg,除了克百威与丁硫克百威的交叉反应率为20%,毒死蜱、氟虫腈和多菌灵与结构类似物的交叉反应率均小于5%,在室温条件下可保存至少12个月。
经验证,对60份果蔬样品检测结果与仪器法检测结果一致。
结论:本研究制备的四线卡操作简便、准确度高、快速、稳定,可以用于果蔬中毒死蜱、氟虫腈、克百威、多菌灵残留的现场快速筛查和检测。
【总页数】9页(P300-308)【作者】叶茂;沈晓玲;陈青舟;夏武强;张敏;张少恩【作者单位】杭州南开日新生物技术有限公司;象山县水产品质量检测中心;郑州市农产品质量检测流通中心【正文语种】中文【中图分类】TS207.3【相关文献】1.胶体金免疫层析法快速检测四种血源传播性疾病在临床中的应用2.基于免疫磁珠的胶体金免疫层析法快速检测水产品中地西泮残留3.胶体金免疫层析法与酶抑制率法快速检测果蔬中农药残留比较研究4.胶体金免疫层析法快速检测禽蛋中甲硝唑残留分析研究5.胶体金免疫层析法快速检测肉类中恩诺沙星、四环素、头孢氨苄残留的应用验证研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
GC-MS检测中药枸杞中有机磷类农药残留
乙腈袁丙酮 分析纯袁购自合肥大药房曰氯化钠 分 (上层)于小烧杯中袁置于水浴内 30～ 40℃ 袁溶液上方加氮气
析 纯 袁 经 120℃ 下 烘 8h袁 购 自 合 肥 大 药 房 .Agilent 吹扫袁蒸发至近干袁加入 5mL 丙酮袁研洗残渣袁混匀后供气相
表 1 各农药组分的采集时间尧特征离子
农药名称
0.02耀0.2
3
乐果
0.02耀0.2
4
关键词院 枸杞曰有机磷农药曰气相色谱 - 质谱法 中图分类号院O657 文献标识码 院A 文章编号院1673- 260X渊 2013冤 06- 0006- 02
枸杞味甘袁性平.主要归肝尧肾尧肺经.其化学成分主要含 6890/5973GC/MS 气相色谱－ 质谱联用仪,带有 7683 自动进
胡萝卜素尧硫胺素尧核黄素尧烟酸尧抗坏血酸尧β - 谷甾醇尧亚 样器尧分流 / 不分流进样口及 EPC(电子自动控制)模式袁Agi-1Fra bibliotek9,97,291
291
8
三唑磷
313.20
14.05
13.90
14.30
161,77,172
161
基金来源 院安徽 省教育厅 优秀青年人才基金项目渊2009SQRZ197冤 -６ -
色谱－ 质谱联用仪分析用.
2 结果与分析
2.2 标准曲线尧线性范围和检出限
2.1 色谱行为
将混合农药标准储备液配制成相应质量浓度的系列标
量较大袁而其中的农药残留问题一直是出口的瓶颈袁枸杞生
色谱柱院HP－ 5MS 色谱柱 (30m× 0.32mm× 0.25μ m)熔
产中发生的 虫害主要为蚜虫尧红瘿蚊尧锈螨和负泥虫等袁病 融石英毛细管柱.
害发生较重的是锈病尧白粉病尧黑果病等袁可用于 枸杞的农
甘肃省枸杞农药残留状况及出口风险分析
甘肃省枸杞农药残留状况及出口风险分析枸杞是茄科植物属的多分枝灌木植物，果实称枸杞子是甘肃省“十大陇药之一，也是甘肃省传统道地药材。
近年来，依托区位优势和得天独厚的自然环境，甘肃省枸杞种植面积和产量快速增加，现已发展为国内枸杞主要产区。
但在快速发展的过程中，也出现了一些制约产业持续健康发展的关键问题，其中农药使用不规范造成的农药残留超标是其中重要方面。
目前，我国出口枸杞所遭遇的主要技术性贸易壁垒就是农药残留问题。
2010 年以来，我国多批枸杞产品被境外官方通报，通报的问题主要为农药残留超标，从全国范围看，2018 年被境外官方通报的情况仍时有发生，涉及的国家及地区有美国、欧盟、中国台湾等，通报的项目包括啶虫脒、哒螨灵、三唑醇、氰戊菊酯、甲氰聚酯、双甲咪等。
为了掌握甘肃省枸杞农药残留状况，助力枸杞产业持续健康发展，推动甘肃枸杞实现出口，我们通过对195 份枸杞中的22 种农药残留进行分析，并与我国及主要贸易国家或地区农药残留限量标准进行了对比，找出了风险较大的农药残留项目，同时分析了出口方面的风险点。
1 材料与方法1.1 材料与取样供检测的枸杞干果 98 份、枸杞鲜果 97 份分别取自甘肃瓜州、玉门、张掖、古浪、民勤、靖远等地，共计195 份。
枸杞鲜果采取五点取样法取样，枸杞干果采取随机抽样。
各地取样点取样情况见表 1。
1.2 检测项目和方法检测项目共 22 种，分别为阿维菌素、毒死蜱、高效氯氟氰菊酯、顺式氯氰菊酯、噻虫嗪、炔螨特、唑螨酯、啶虫脒、三唑酮、氰戊菊酯、甲氰菊酯、辛硫磷、螺螨酯、吡虫啉、哒螨灵、三唑醇、丙环唑、多菌灵、四螨嗪、三环唑、噻螨酮、吡蚜酮。
检测方法主要依据食品中阿维菌素残留量的测定液相色谱- 质谱/质谱法23200.20- 桑枝、金银花、枸杞子和413 种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱- 质谱法23200.11、《茶叶中448种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱- 质谱法23200.13- 、桑枝、金银花、枸杞子和荷叶中488 种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱质23200.10- 等。
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《枸杞中12种农药残留快速检测方法胶体金免疫层析法》
团体标准编制说明
1概况
1.1任务来源
本标准编制任务来源于以下成果的应用转化：
（1）自有发明专利《一种提高竞争免疫分析灵敏性的方法》（ZL 201210233377.2）在枸杞农药快速检测上的转化应用。
上述专利为国家知识产权局于2014年11月26日授权。
（2）自立项目《枸杞农药残留快速检测系统》的成果转化。
该项目已于2018年5月通过宁夏回族自治区科技咨询评估中心成果鉴定，并在宁夏回族自治区科学技术厅进行了成果登记，登记号为9642018Y069。
1.2标准起草单位与标准主要起草人
本标准主要起草单位：杞源堂（宁夏）生物科技有限公司、宁夏中农艾森检测有限公司、深圳市易瑞生物技术股份有限公司、宁夏食品安全协会、宁夏食品检测研究院、宁夏食品质量监督检验二站、中宁县枸杞产业发展服务局、宁夏百瑞源枸杞产业发展有限公司、宁夏红枸杞产业有限公司。
本标准主要起草人：余君伟、金虹、孟跃军、乔长晟、岳苑、伊倩茹、张慧玲、凌锡喆、付辉、刘娟、严立宁、王文辉、张金宏、周学义、张美娟、曾楚怡、曹琛、马涛、严义勇、井辉隶、王炳志、沈晗、朱嘉辉、严海霞、马莹、郭小瑞。
1.3目的和意义
枸杞是宁夏最具地方特色和品牌优势的主导产业。
为促进枸杞产业健康可持续发展提供保证，有效的控制枸杞中的农药残留是势在必行。
对降低农药残留检出率切实可行的措施是在种植过程中以及收购环节大力推广农药残留的快速检测方法，从源头加强过程监测。
与此同时，在国家标准和行业标准均缺失的情况下，尽快出台枸杞中农药残留快检方法的相关标准，使快检方法尽快成为监管部门的合法执法手段也是很有必要的。
目前枸杞中农药残留的国家标准检测方法分为两类：一类是检测费用高、周期长、操作复杂的仪器分析方法，该方法虽然准确但难以在基层大面积推广应用GB 23200.10-2016 《食品安全国家标准桑枝、金银花、枸杞子和荷叶中488种农药及相关化学品残留量的测定气相色
谱-质谱法》和GB 23200.11-2016 《食品安全国家标准桑枝、金银花、枸杞子和荷叶中413种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-质谱法》，另一类是快速测定方法—酶抑制率法，然而该方法只适用于检测有机磷和氨基甲酸酯类农药，GB/T 5009.199-2003 《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》由于该方法的局限性，不能全部满足枸杞的第一个食品安全标准DBS64/ 001—2017《食品安全地方标准枸杞》中10种农药的快速检测，只有毒死蜱和克百威2种农药可用此方法，且该方法灵敏度低，准确率低。
本标准研究的胶体金免疫层析方法可有效克服酶抑制率法的灵敏度、准确率、适用范围上的缺点，而检测耗时并未显著增长，是今后基层农药残留监测主要的技术发展方向。
因此，建立枸杞中农药残留的快速检测方法是枸杞行业标准化建设的重要环节。
该标准的制定可将农残检测关口前移，大幅提高监管部门监管与检测效率，降低监管部门、检验部门、商家的检测成本，对提升宁夏枸杞品牌知名度、再造宁夏枸杞产业发展新优势具有重要意义。
1.4编制过程
2018年5月课题组针对枸杞中农药残留情况进行详细调研。
主要集中于三类调研：（1）学术论文的报道；（2）原宁夏出入境检验检疫局、原宁夏食品药品监督管理局等不合格枸杞的通报；（3）宁夏枸杞种植基地的调研。
2018年6月-11月样本前处理方法的优化。
主要根前期调研结果，筛选出宁夏枸杞中易超标的12种农药。
根据农药的水溶性特点，优化并验证两种不同的样本提取液及对应前处理方法。
验证结果表明：水溶性的农药宜采用蒸馏水作为提取液，水不溶农药宜采用50%乙醇为提取液。
2018年12月-2019年1月标准编制小组初步拟定标准文本与标准说明，形成标准草案，报宁夏食品安全协会申请立项。
宁夏食品安全协会于2018年12月29日发布《关于发布团体标准的通知》，并于2019年1月4日在全国团体标准信息平台发布。
本团体标准正式立项。
2019年1月-2019年3月检测方法的验证，标准文本与编制说明的修订。
对于标准检测方法，在宁夏回族自治区食品质量监督检验二站、宁夏中农艾森检测有限公司、深圳市通量检测科技有限公司等具有农产品检测资质的检测机构进行验证。
验证结果表明三家检测机构对12种农药的检出限，均与团体标准一致。
标准编制小组同时对标准文本草案与标准说明进行格式语法上的调整，使之更规范。
2019年4月对标准公开征求意见，标准编制小组根据意见（见附件1）修改形成报批稿。
2019年4月3日，宁夏食品安全协会受标准研制小组委托组织宁夏枸杞产业发展中心、宁夏回族自治区市场监管厅、宁夏回族自治区卫生健康委法规处、宁夏农产品质量安全检测中心、宁夏农产品质量标准与检测技术研究院、中宁县枸杞产业发展服务局等单位的6位专家公开征求意见。
共收到意见11条，相关处理意见请见附件。
所有专家均赞成本标准。
2与国内外有关法律法规和其它标准的关系
目前农药残留快速检测已有的标准方法只有由卫生部和国标委于2003年8月11日联合发布的《GB/T 2009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》。
该标准只适用于两大类农药，而对拟制定标准适用范围中的啶虫脒、吡虫啉、多菌灵、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、苯醚甲环唑、哒螨灵、炔螨特等9种农药不适用。
且枸杞中的色素易干扰GB/T 2009.199-2003检测方法，拟制定标准方法采用胶体金免疫层析技术则不受干扰。
3标准的制定与起草原则
本标准是按GB/T 1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写，技术内容是参照GB/T 20001.4-2015《标准编写规则第4部分：试验方法标准》确定。
4各项技术内容确定的依据
见附件2。