《生物化学》实验教学大纲(临床医学)教学提纲

《生物化学》实验教学大纲(临床医学)

《生物化学》实验教学大纲

（供五年制本科临床医学、口腔医学等专业使用）

Ⅰ前言

生物化学实验教学以学生在实验室实践为主,?发挥学生的主体作用，教师只做必要的实验原理和注意事项的讲解，并注意引导学生拓展所学的内容，通过实验内容的学习了解生物化学技术的原理和操作要点，提高学生的实践能力和创新能力。目的在于培养学生的动手能力和解决实际问题的能力。

本大纲适用于临床医学、口腔医学、医学检验、妇产科学、麻醉学、医学影像学、药品检验、药物制剂、急救医学、临床心理学、医学美容、法医学、五官专业（方向）本科学生使用，现将大纲使用中有关问题说明如下：

一为了使教师和学生更好地掌握教材,大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别,教学内容与教学要求级别相对应,并统一标示(核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示)便于学生重点学习。

二教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内容，有的内容可留给学生自学。

三总教学参考学时为32学时。

四教材：《生物化学实验指导》，自编，2006年。

Ⅱ正文

实验一生物化学实验技术简介

一教学目的

通过本次实验的学习，掌握实验室须知，实验报告的书写格式和要求；掌握分光光度计操作，玻璃仪器的使用和清洗。

二教学要求

（一）掌握实验室须知，实验报告的书写格式和要求。

（二）掌握分光光度计操作，玻璃器皿的正确使用和清洗。

（三）熟悉实验基本技术：分光光度法、层析法、离心法、电泳法等。

（四）了解生化实验样品制备。

三教学内容

（一）观看生化实验基本技术录像片40分钟。

（二）实验室规则，实验报告的书写格式和要求。

（三）介绍生化实验样品制备。

（四）分光光度计操作。

（五）玻璃仪器的正确使用和清洗。

实验二改良微量凯氏定氮法测定血清蛋白质总量

一教学目的

在学习微量凯氏定氮法测定蛋白质的原理及操作的基础上，进一步复习分光光度法测定的实验原理及操作技能，以及了解蛋白质的含量测定的多种方法。

二教学要求

（一）掌握微量凯氏定氮法测定蛋白质的基本原理：利用蛋白质元素组成的特点进行蛋白质含量测定。掌握分光光度法在实验中的应用及实验结果的计算。

（二）熟悉凯氏定氮法的操作步骤及注意事项。

（三）了解利用蛋白质理化性质进行蛋白质含量测定的多种方法。

三教学内容

（一）微量凯氏定氮法测定蛋白质的原理及注意事项。

（二）利用蛋白质理化性质进行蛋白质含量测定的多种方法。

（三）实验操作：制备无蛋白血虑液、稀释血清、消化、显色、用分光光度计进行比色。

（四）计算出血清中蛋白质的含量。

实验三血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳

一教学目的

在学习醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质的基础上，掌握蛋白质分离、纯化常用方法之一——电泳的实验原理，加深对蛋白质两性解离性质的理解。二教学要求

（一）掌握常用电泳的实验基本原理及醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白的原理，掌握血清蛋白质的电泳分类。

（二）熟悉醋酸纤维素薄膜电泳的操作、注意事项；熟悉测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量的方法。

（三）了解血清蛋白质的定性检测，了解A\G的临床意义。

三教学内容

（一）常用电泳的实验基本原理及醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白的原理，操作注意事项。

（二）血清蛋白质的定性检测的原理。

（三）实验操作：点样、电泳对血清蛋白进行分离，血清蛋白定性，比色法测定血清中各种蛋白质的相对百分含量。

（四）通过电泳结果，加深理解血清蛋白质的电泳分类。

实验四血清γ-球蛋白的提纯

一教学目的

学习综合利用盐析、凝胶层析、透析等多种实验技术对蛋白质进行分离纯化的方法。

二教学要求

（一）掌握盐析、凝胶层析、透析法分离纯化蛋白质的基本原理。

（二）熟悉实验操作及注意事项，蛋白质及NH4＋定性检测的几种方法。

三教学内容

（一）盐析、凝胶层析、透析法分离纯化蛋白质的基本原理、实验操作及注意事项。

（二）实验操作：运用分段盐析法分离、提取γ-球蛋白；凝胶层析法将γ-球蛋白与NH4＋分离，以纯化γ-球蛋白；透析法将清蛋白与NH4＋分离，以浓缩、纯化清蛋白。

（三）应用双缩脲试剂或磺柳酸试剂对分离提取液进行蛋白质的定性检测，应用纳氏试剂对液体中的NH4＋进行定性检测，判定分离纯化结果。

实验五酶促反应动力学

一教学目的

学习运用双倒数作图法测定碱性磷酸酶的Km值，观察底物浓度和可逆性抑制剂对酶促反应的影响。

二教学要求

（一）掌握实验原理中与理论课相关的知识：影响酶促反应速度的几种因素，底物浓度影响酶促反应速度的特点，三种可逆性抑制作用的酶促反应动力学特点。（二）掌握用双倒数作图法测定碱性磷酸酶的Km值。

（三）熟悉实验操作及注意事项，熟悉标准曲线的绘制，酶活性单位的计算。(四) 了解米曼氏公式的推导。

三教学内容

（一）实验原理：影响酶促反应速度的几种因素，底物浓度影响酶促反应速度的特点，三种可逆性抑制作用的酶促反应动力学特点；米曼氏公式的推导。

（二）实验操作步骤及注意事项。

（三）根据实验结果计算各管酶活性单位，以代表各管酶促反应速度；以1/[S]为横坐标,1/V为纵坐标绘制标准曲线；计算出碱性磷酸酶的Km值。

（四）根据加抑制剂——磷酸氢二钠前后碱性磷酸酶Km和Vm值的变化特点，判断磷酸氢二钠为何种抑制剂。

实验六细胞核的分离与核酸的测定

一教学目的

学习核酸提取和鉴定方法的基础上，掌握核酸在细胞中的分布，掌握离心机的工作原理及正确使用。

二教学要求

（一）掌握核酸在细胞中的分布，掌握离心机的工作原理及正确使用。

（二）熟悉细胞核分离提取的操作步骤及注意事项。

（三）熟悉核酸定性鉴定的方法。

(四) 了解亚细胞器分离提取的常用方法。

三教学内容

（一）实验原理：核酸在细胞中的分布情况，亚细胞器分离提取的常用方法，离心法的分类及工作原理，DNA、RNA定性鉴定的原理；实验注意事项。

（二）实验操作：制备肝匀浆，分离细胞质与细胞核，DNA、RNA定性鉴定。（三）离心机的正确使用。

实验七血糖测定（葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法）及肾上腺素对

血糖浓度的影响

一教学目的

学习葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度的基础上，掌握血糖的正常参考值，掌握肾上腺素对血糖浓度的影响，熟悉尿糖的半定量检测。

二教学要求

（一）掌握血糖的正常参考值，复习血糖的来源与去路；掌握肾上腺素对血糖浓度的影响机理。

（二）熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的操作步骤及注意事项。

（三）熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理，血清的制备，血糖浓度及血糖增高率的计算，尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理及方法。

(四) 了解动物耳缘静脉取血法，血糖调节的几种因素及血糖测定的临床意义。三教学内容

（一）实验原理：血糖的正常参考值，血糖的来源与去路，血糖调节的几种因素，肾上腺素对血糖浓度的影响机理，血糖测定的临床意义，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理；尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理。

（二）实验操作：血糖测定及肾上腺素对血糖浓度的影响（收集注射肾上腺素前后耳缘静脉血，制备血清，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度）；尿糖半定量检测。

（三）计算血糖浓度及血糖增高率。

实验八血清白蛋白的分离纯化与鉴定

一教学目的

利用所学理论知识及实验方法设计实验，从牛血清中分离纯化及鉴定牛血清白蛋白。

二教学要求

（一）掌握实验设计的基本过程和方法，培养分析问题、解决问题的能力。（二）熟悉常用实验仪器及玻璃器皿的正确使用。

三教学内容

（一）学生灵活运用已学过的知识，进行实验设计。

（二）根据设计的实验，进行规范操作及正确使用常用实验仪器及玻璃器皿。（三）完成实验报告。

Ⅲ教学组织与方法

一实施机构：由基础医学院生化教研室执行。

二组织内容：集体教学备课、教案讲义审核、教学方法研究、教学手段应用。三教学方法：

1. 实验教学：采用启发式、讨论式课堂教学方式，辅助现代和传统教学手段。一

般内容以自学为主。

2. 教学点：在生物化学实验室教学，承担教师由生物化学教研室委派。

3. 辅导形式：课堂答疑、讨论、复习等结合。

四考核办法：实验成绩包括实验平时成绩和实验考试成绩；实验考试成绩占实验总成绩的30%；实验成绩占总评成绩的20%。实验考核不合格者

不能参加理论课考试。

Ⅳ教学时数分配表