南极海洋芳香烃低温降解微生物的拉曼光谱分析
深海pahs降解菌多样性的分析及重要降解菌分子生物学的研究
结果与讨论３结果与讨论３．１一株海洋新鞘氨醇杆菌Ｎｏｖｏｓｐｈｉｎｇｏｂｉｕｍｓｐ．）ｐｈｅ－８的ＰＡＨｓ降解基因和降解特性３．，．１结果与分析３．１．１．１菌株的分离、纯化在菲降解菌的富集过程中，培养物变混浊并变红褐色，分别表明细菌生长和菲被转化、降解。
经过４－５次转接之后，涂平板、划线得到的单菌落的纯培养接种到含菲的ＯＮＲ７ａ培养基中进行降解能力的鉴定。
那些在生长同时又使培养基变为红褐色的细菌，被初步确定为菲降解菌。
经过反复平板划线纯化最终得到了一株降解性能良好的降解菌，并暂时命名为ｐｈｅ～８。
我们采用的菲薄膜筛选方法也得到了预期的结果。
接种到平板上的细菌，由于能够利用菲作为碳源，所以可以形成明显的降解圈（图１）。
相反，如果接种的细菌不能够利用菲作为碳源，那么它根本不会生长，更加不会在完整的菲薄膜卜形成降解圈。
图１菲降解菌在菲薄膜平板上形成的降解圈３．１．１．２ＰＡＨｓ降解范围ｐｈｅ一８能够降解的ＰＡｌｌｓ包括：萘、菲、葸、芴、ＤＢＴ和芘，而苯并芘不能被降解。
另外，甲苯、二甲苯等单环芳烃也不能被利用。
然而，与ｐｈｅ一８的１６ＳｒＤＮＡ序列相似２７结果与讨论构型的质粒ＤＮＡ（图４Ａ）。
ＤＮＡ从凝胶中转移到尼龙膜后，将凝胶浸于ＥＢ染色３０ｍｉｎ并估计转膜效率。
值得注意的是，大片段的ＤＮＡ经脱嘌呤处理后，其转移效率大大提高。
杂交结果表明，该降解基因位于质粒ＤＮＡ上（图４Ｂ）。
图４Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交对ｐｈｎＡａ基因定位Ｍ，ｘＨｉｎｄＩｌｌ分了量标准：１，堆冈组ＤＮＡ；２，质粒ＤＮＡ；３，质粒ＤＮＡＢａｍｔｌＩ酶切产物；４．质粒ＤＮＡＥｃｏＲＩ酶切产物；５．质粒ＤＮＡＨｉｎｄＩＩＩ酶切产物：６，质粒ＤＮＡＳａｌＩ酶切产物。
Ａ，琼脂糖电泳后ＥＢ染色：Ｂ，Ｓｏｕｔｈｅｌｉｌ杂交届在尼龙膜ｌ‘用ＢＣＩＰ／ＮＢＴ直接！ＩＩＩ色。
３．１．１．５对菲和芘降解效率的ＧＯ－ＭＳ测定在试管实验中，ｐｈｅ一８对菲的降解比较彻底，起始浓度为ｌＯＯｍｇ／Ｌ的菲在三周后的降解率分别为８９．８％和９４％（图５）。
低温拉曼光谱分析流体包裹体盐度的条件约束
低温拉曼光谱分析流体包裹体盐度的条件约束陈小兰;周振柱;韩作振;林玉祥【摘要】Knowledge of the salinity of fluid inclusions,including the type of salts and their amounts,is of great importance for the interpretation of geological fluids and their role in rockforming processes like diagenesis,metamorphism,and hydrothermal processes.One of the most vital binary fluid systems for understanding geological processes is the NaCl-H2O system.The salinity of aqueous solutions in fluid inclusions is commonly determined with microthermometry.Moreover,the cryogenic Raman spectra of hydrates of chloride salts in fluid inclusions can be not only used to calculate salinities,but also used to distinguish different brine types.Theoretically,the salinity of one fluid inclusion can't be calculated via the Raman spectrum in a single point because of the heterogeneity of the fluid inclusion at low temperature and the location of focus range of the laser beam.In order to have a better understanding of the characteristics of phase change of fluid inclusions at low temperature and reveal their Raman spectra responses to salinities,this paper studied the crystallization process and Raman spectroscopy of ice and hydrohalite in NaCl solutions with 5 different salinities.The result shows that in the process of freezing and heating,the crystallization of hydrohalite occurs from an interstitial,hypersaline liquid among the prior formed ice crystals.The forming of hydrohalite may depend on the concentration of brine.The relative intensities of p1 [(3 402±1)cm-1] and p2 [(3 419±1)cm-1],whichare the two of four characteristic Raman peaks,are very stable,while the variation of the relative intensities of the other two peaks p3 [(3432±2)cm-1] and p4 [(3 535±4)cm-1] increase with the salinity increasing because of different relative crystal orientations of hydrohalite compared to the polarized laser beam.Therefore,the characteristic ratios of Raman peaks at different points in the same sample are usually variable,and the traditional method of calculating salinities of the fluid inclusion using cryogenic Raman spectrum at one single point makes a big error.Based on large data statistics and analysis,the results indicate that the statistical average value of characteristic Raman peaks maybe reflects the salinity of the fluid inclusion better for the first time.With respect to the relative intensity and the width at half height of the characteristic Raman peaks,the total peaks' area shows the best linear dependence on the salinity,which is the first choice for the calculation of the salinity of brine.The results of this study expounds the suitable experimental operation and data analysis methods of the salinity calculation of brine using cryogenic Raman spectroscopy,and illustrates the applied conditions of this method in fluid inclusions analysis.Although it's a complex operation process to calculate salinity using cryogenic Raman spectra,this method is very important because of its anti-interference,large applied range and reliability.%流体包裹体盐度及类型是分析地质流体作用的重要地球化学参数.NaCl-H2O体系是地质体中最常见的流体体系之一,其盐度通常由显微测温法获得,而盐水合物的低温拉曼光谱不仅可以用来计算流体包裹体盐度,还可以区分盐水类型.理论上讲,低温冷冻条件下的流体包裹体并非均匀体系,单一测点的拉曼光谱具有较强的局限性,由其计算的盐度并不能代表整个流体包裹体的盐度.为了更好地了解低温条件下流体包裹体的相变特征及其拉曼光谱对盐度的响应,本文通过配置五种不同浓度的NaCl溶液,研究了其在低温下的结晶过程及拉曼光谱特征.结果显示,在反复冷冻与升温过程中,冰晶首先形成,而水石盐的形成依赖于盐溶液的浓缩,多形成于冰晶间的缝隙中.水石盐的四个拉曼特征峰中,p1[(3 402±1)cm-1]和p2[(3 419±1)cm-1]相对强度稳定,p3[(3 432±2)cm-1]和p4[(3 535±4)cm-1]相对强度随盐度增加发生大幅度变化,从而导致相同盐度样品不同测点的拉曼特征比值随盐度增加而愈发离散.因此,传统的流体包裹体单一测点低温拉曼测盐误差较大,数据分析显示多点测试统计平均值才能更好的反映流体的真实盐度.相对于强度和半高宽,总峰面积与盐度相关性最好,是计算盐度的首选参数.该研究阐述了低温拉曼测盐的实验操作和数据处理方法,并阐明了其在流体包裹体分析中的应用条件.尽管操作过程较复杂,但其抗干扰强,应用盐度范围广,计算结果可靠,是重要的测盐方法.【期刊名称】《光谱学与光谱分析》【年(卷),期】2017(037)008【总页数】6页(P2446-2451)【关键词】低温拉曼光谱;流体包裹体;盐度;NaCl-H2O体系【作者】陈小兰;周振柱;韩作振;林玉祥【作者单位】山东科技大学地球科学与工程学院,山东青岛 266590;山东科技大学地球科学与工程学院,山东青岛 266590;国土资源部金矿成矿过程与资源利用重点实验室(山东省地质科学研究院),山东济南 250013;山东科技大学地球科学与工程学院,山东青岛 266590;山东科技大学地球科学与工程学院,山东青岛 266590【正文语种】中文【中图分类】P599流体包裹体盐度是地质流体研究中重要的地球化学参数，对于分析流体性质及其在成岩、成矿过程中的作用具有重要价值[1]。
深海热液喷口流体中溶解气体的激光拉曼光谱原位定量分析
深海热液喷口流体中溶解气体的激光拉曼光谱原位定量分析深海热液喷口是地球上非常特殊的地质现象，其周围环境极端恶劣，水深可达数千米，水温高达几百度。
深海热液喷口中的流体中存在大量溶解气体，包括二氧化碳、氢气、硫化氢等等。
而这些溶解气体的成分和浓度对热液喷口中生物群落的分布和生存具有重要影响。
因此，对于深海热液喷口流体中溶解气体的激光拉曼光谱原位定量分析具有重要的科学意义。
激光拉曼光谱是一种基于物质散射光谱的光谱分析方法，通过激光照射样品，在照射光线中散射回来的光中，通过测量其频率偏移和强度变化，可以得到样品中的分子振动信息，从而准确定量分析样品中的成分和浓度。
与传统的化学分析方法相比，激光拉曼光谱具有非破坏性、高灵敏度、速度快、无需复杂的前处理等优点，尤其适用于原位分析。
在深海热液喷口流体中，溶解气体常常以气泡的形式存在，通过采用特殊的触采样器，可以将气泡带入拉曼光谱仪中进行原位分析。
首先，通过高分辨率的光学显微镜观察和控制气泡的抽取，使得分析气泡所在的环境不会受到显著干扰。
然后，将气泡进入光谱仪的探测区域，利用激光照射气泡并测量其散射光谱。
通过光谱分析，可以将散射光谱和已知标准光谱进行比对，从而准确确定气泡中各种溶解气体的成分和浓度。
在深海热液喷口流体中溶解气体的激光拉曼光谱原位定量分析面临一些挑战。
首先，水的存在对于光的传播和信号强度有很大影响。
对于这个问题，可以通过选择合适的激光波长和设计合适的测量系统来降低水的影响，或者通过使用散斑抑制器等技术来抑制散射光谱中的背景噪声。
其次，由于深海环境的极端条件，光谱设备需要具备防水、耐高压和耐高温等特性。
此外，还需要解决流体采样、保护、输送与控制等技术问题，以确保溶解气体样品的原位分析过程的准确性和可靠性。
在实际应用中，深海热液喷口流体中溶解气体的激光拉曼光谱原位定量分析可以为科学家提供宝贵的数据和信息，以深入理解深海热液喷口的化学和生物过程，探索地球生命的起源和进化。
【国家自然科学基金】_低温微生物_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
推荐指数 4 2 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
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2011年 科研热词 南极微生物 低温降解 芳香烃 微生物活性 天山冻土 低温 鲜度变化 高粘性膨胀 非生物胁迫 铁还原细菌 铁 酿酒酵母 酶促反应 酒精耐受 遗传分化与演变 货架期 藻蓝蛋白 萜类化合物 萘 荧光光谱 色谱-质谱 腐败菌 腐败 脱氮除磷 胞外酶 胚胎晚期富集蛋白 聚类分析 综合大洋钻探计划iodp 紫茎泽兰 紫外光谱 系统发育类型 竞争替代 离子交换层析 磷酸化修饰 磁铁矿 硫酸盐还原菌(srb) 硝酸盐还原菌(nrb) 石油烃 盐生杜氏藻 甲烷氧化细菌 甲烷循环 生物降解 生物矿化 生态适应 环境因素 热液活动 激光镊子拉曼光谱技术 激光镊子拉曼光谱 潮汐流 温度波动 深部生物圈 活性污泥 推荐指数 4 3 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2008年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
流体包裹体成分测定的低温相变和显微拉曼光谱分析技术研究进展
流体包裹体成分测定的低温相变和显微拉曼光谱分析技术研究进展葛云锦;陈勇;周瑶琪【摘要】论述了包裹体低温分析技术的原理以及进展.传统的流体包裹体低温分析技术是以显微冷冻测温测定无机盐体系为主,目前已发展到应用低温原位拉曼光谱技术对包裹体中的阳离子和阴离子进行定量一半定量分析.油气包裹体原位低温分析技术也取得了较大的突破,对不同成分油气包裹体低温下的相变过程取得了一定的认识,据此对油气包裹体进行分类,推测其主要成分,为油气包裹体计算提供基础参数.【期刊名称】《岩矿测试》【年(卷),期】2008(027)003【总页数】4页(P207-210)【关键词】低温分析;原位拉曼光谱技术;油气包裹体【作者】葛云锦;陈勇;周瑶琪【作者单位】中国石油大学(华东)地球资源与信息学院,山东东营,257061;中国石油大学(华东)地球资源与信息学院,山东东营,257061;中国石油大学(华东)地球资源与信息学院,山东东营,257061【正文语种】中文【中图分类】O657.37;P578.6低温分析技术是包裹体分析技术中非常重要的一种方法，主要包括传统的冷冻法以及先进的低温原位拉曼光谱技术。
低温原位拉曼光谱技术是冷冻法与光谱技术相结合的一门新技术，可以给出包裹体中的分子信息，是流体包裹体低温分析技术最重要的进展。
近年来，油气包裹体日益受到重视，在石油勘探中得到广泛应用，油气包裹体组成的低温原位拉曼光谱技术也取得了一定的成果。
本文在简单介绍传统冷冻法的基础上，阐述了低温原位拉曼光谱技术和油气包裹体低温分析技术的研究进展。
1 冷冻法原理(无机体系)低温分析，也称冷冻法，传统的低温分析是指将包裹体冷却到室温以下时观察液相向固相的转变过程。
冷冻法的基本原理是通过在冷台上改变温度，观察包裹体所发生的相变过程，并与已知的有关体系的实验相图进行对比，测定包裹体中流体所属体系和流体成分[1]。
由于冷冻时，流体包裹体具有亚稳定特点，只能在比预计(理论值)低得多的温度下才能形成新相。
石油降解希瓦氏菌
第21卷第2期极地研究Vol.21,No.2 2009年6月CH I N ESE JOURNAL OF P OLAR RESE ARCH June2009研究论文影响南极海洋石油烃低温降解菌希瓦氏菌NJ49生长和降解率的环境因素研究刘芳明1,2 缪锦来1,2 臧家业1 董春霞3 王以斌1,2 (1国家海洋局第一海洋研究所,青岛266061;2海洋生物活性物质国家海洋局重点实验室,青岛266061;3颐中(青岛)实业有限公司,青岛266021)提要 以柴油为唯一碳源和能源,从南极海水海冰微生物资源库中筛选到一株石油烃低温降解菌希瓦氏菌NJ49,并对影响其生长和降解率的环境因素(pH、温度、盐度、营养盐和表面活性剂)进行了初步研究。
结果表明:希瓦氏菌可作为低温海域石油烃污染生物修复的菌源,其生长和降解的最适条件为:初始pH7.5,温度15℃,盐度6%,摇瓶装量80m l,最佳氮源硝酸铵,最佳磷源为磷酸二氢钾和磷酸氢二钾的混合物,添加表面活性剂可促进希瓦氏菌NJ49的生长和生物降解率。
关键词 南极海洋 低温降解菌 柴油 生物降解 环境因素0 引言随着海上石油开采、运输和各类交通活动的日益频繁,海洋中石油烃污染物逐渐增多,而大规模溢油事件也时有发生,给海洋生态及近岸环境造成严重危害,由于自然微生物的生物修复是清除海洋石油烃污染的一种重要机制[1],因此备受关注。
国内研究者对海洋中温降解菌的生物降解曾进行了广泛研究[2—4],但对低温环境中石油烃降解研究较少。
南极低温微生物资源丰富,从中获取低温降解菌成为新的研究热点,国外学者已从南极海洋中分离筛选得到不同种属的降解细菌,如Ha lo m onas[5]、R hodococcus[6]和Sphin2 go m onas[7],有的降解菌可以在4℃条件下降解烷烃[8],甚至在更低的温度条件下降解多环芳烃[9],为低温环境石油烃污染修复提供了新的思路。
柴油是一种复杂的蒸馏混合物,内含碳原子数为C9—C20范围的石油烃,因此是研[收稿日期] 2008年11月收到来稿,2009年2月收到修改稿。
光镊拉曼光谱在南极细菌低温降解石油烃中的应用
光镊拉曼光谱在南极细菌低温降解石油烃中的应用摘要光镊拉曼光谱技术（LTRS）是将光学囚禁技术与显微拉曼光谱技术相结合，用同一束光来实现囚禁单个悬浮细胞并激发细胞分子的拉曼光谱。
利用LTRS系统，可以实现对单个南极石油烃降解嗜冷菌细胞内的生化代谢过程的实时监测，了解其参与石油烃分解代谢的过程，获知单个细胞内部生化分子变化与环境变化的相互关系，更好的了解其降解机制。
关键词光镊拉曼光谱技术；南极细菌；石油烃；低温降解1光镊拉曼光谱技术特点激光拉曼光谱法被公认为是研究生物大分子结构、动力学和功能的有效方法，是生命科学研究领域很有应用潜力的工具。
从拉曼光谱特征峰的位置、强度和线宽可以获得样品的分子组成及结构信息，拉曼光谱已成为研究物质分子结构的有效手段。
共焦显微拉曼光谱技术可以研究单个细胞甚至细胞器，但由于人为的用物理或化学手段固定研究对象，细胞周围的环境发生改变，甚至细胞死亡，对细胞的生理带来了未知的影响。
最近，光镊拉曼光谱技术（laser-tweezers-Raman-spectroscopy，LTRS）的出现，使人们可以在接近自然的生理状态下研究单个悬浮细胞或细胞器[1，2]。
LTRS是将光学囚禁技术与显微拉曼光谱技术相结合，用同一束光来实现囚禁单个悬浮细胞并激发细胞分子的拉曼光谱，其原理是利用高度汇聚的激光束产生的梯度力囚禁溶液中的活细胞，使之固定在激光微束中，再通过瞬时增强的光束来激发细胞内分子的拉曼光谱，从而实时获得该细胞的拉曼光谱及其生化性质。
由于细胞被囚禁在光束焦点位置，共焦光路优化了散射光的收集，从而可获得高灵敏度。
选用适当的激光波长、功率和激发时间，激光束不会伤害细胞，被囚禁的细胞依然悬浮在不受干扰的环境中，得到的是接近自然生理状态的单个活细胞的拉曼光谱。
2LTRS在单细胞中的应用情况光镊拉曼光谱技术可以在接近自然的生理状态下研究单个细胞或细胞器，探索接近生理状态下的单细胞生命活动，可以无损地提供丰富的分子结构和物质成分的信息，是一种很有应用潜力的工具，正在生命科学研究领域广泛应用。
南极低温降解卡拉胶菌株的筛选鉴定产酶条件及酶学性质的初步研究
南极低温降解卡拉胶菌株的筛选鉴定产酶条件及酶学性质的初步研究随着全球变暖和气候变化的严重影响，南极作为地球上最为寒冷的地区之一，一直备受关注。
在南极寒冷的环境下，存在着丰富的微生物资源，这些微生物对于适应极端环境条件有着独特的生物学特性，可能具有一些特殊的生物活性物质。
其中，卡拉胶是一种常见的多糖类生物胶，具有多种重要的应用价值，如稳定性好、抗氧化、黏度高等特点。
因此，本研究旨在筛选和鉴定南极低温环境下的卡拉胶降解菌株，探究其产酶条件及酶学性质，为开发和利用南极微生物资源提供实验依据。
一、菌株的筛选和鉴定通过对南极土壤样本的采集和分离纯化工作，从中分离到一株降解卡拉胶的菌株，并进行初步的形态学观察和鉴定工作。
进一步进行16SrRNA序列测定和比对，确定其系统进化地位和亲缘关系。
根据鉴定结果，确认了该菌株为一株属于XX属的XX种菌株，为南极冰原环境下新发现的一种降解卡拉胶的微生物资源。
二、产酶条件的优化在实验室条件下，对该菌株的降解卡拉胶酶活性进行了初步的研究。
通过对碳源、氮源、金属离子、pH值和温度等条件的单因素和多因素实验研究，确定了最适产酶条件。
结果显示，XX碳源、XX氮源、XX金属离子浓度、pH值为XX、温度为XX℃时，酶活性最高，为XXU/mL。
为后续的产酶条件优化提供了实验基础。
三、酶学性质的研究对该菌株产生的卡拉胶酶进行酶学性质的研究。
首先进行了酶的分子量、基本生化性质等的初步分析。
随后对其酶动力学参数进行了测定，包括酶的最适反应温度、最适反应pH值、热稳定性和储存稳定性等。
研究结果显示，该酶对XX底物具有较高的催化活性，最适反应温度为XX℃，最适反应pH值为XX，同时具有一定的热稳定性和储存稳定性。
这些结果为深入探究该菌株的酶学性质提供了重要的实验数据。
综上所述，本研究对南极低温环境中卡拉胶降解菌株的筛选、鉴定、产酶条件及酶学性质进行了初步研究，为南极微生物资源的开发和利用提供了一定的实验基础。
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程 。生物体 内蛋 白质 、 肪 、 酸和糖类等 的组成成 分、二 脂 核
级结构和交互作用等有用信息都可 以从光谱 中拉曼特征峰 的 位置 、强度 和线 宽 中获 得＿ ］ ２ ，近年来 光镊拉 曼光谱 在探 “ 索 细胞 的结构 、 功能及细胞生长 、 亡等方面取得 了迅速发 凋
展 ，已 成 为探 究 生 物 体 内如 ＤＮ Ａ、Ｒ Ａ、蛋 白质 、 类 、 Ｎ 脂 糖 类 等生 命 物 质 结 构 的 有力 手段 Ｌ ］ １。
低温降解芳香烃过程 的分析 ， 过实 时观察 监测单个南极细 通 菌细胞低温降解芳香烃 的动态过程 ， 结合光镊 进行细胞分选
并记录芳香烃低温 降解过程 中胞 内、 胞外 的芳 香烃浓度变化 以及细胞生化代谢 过程 中各种细 胞产物 的变 化 ， 得、分析 获 低温菌降解芳 香烃 过程 和细胞生长变化 的拉曼 光谱 ， 探讨其
摘
要
激光镊子拉曼光谱技术 可以实现在 自然状态下对单个 细胞或细胞器较 长时间 的观察研究 。应用激
光镊 子拉 曼光谱技术实时观察南极微生物低温降解芳香烃过程 中单个南极 细菌 的细胞生 长和胞 内生物大分 子的动态变化过程 ， 收集 、 析其拉曼光谱 ， 分 结果发现 ： 细胞 的拉曼光谱反映了其细胞 内部的生命物质组 单 成， 南极动球菌 Ｎ ４ 和希瓦 氏菌 Ｎ ４ 生长和 降解芳香烃过程 中产生 蛋 白类和葡 聚糖类 物质较 多，而假交 Ｊ１ Ｊ９ 替单胞菌 Ｎ ２ ９生长 和降解芳香烃过程中产生脂类物质较 多 ， 次才是蛋 白类 物质 ； 菌株 产生蛋 白类 物 Ｊ８ 其 各 质的多少是与产生 的降解限速酶对应 的，也是与低温 降解芳香烃 的能力是直接相关 的。
第３卷， ２ １ 第 期
２０ １１年 ２月
光
谱
学
与
光
谱
分
析
Ｓ ｅ ｔｏ ｃ ｐ ｎ ｐ ｃｒ ｌＡｎ ｌ ｓｓ ｐ ｃ ｒ ｓ ｏ ｙ ａ ｄ Ｓ ｅ ｔ ａ ａ ｙ ｉ
Ｖｏ ． １ Ｎｏ ２ ｐ ４ ８ ４ １ １３ ， ． ，ｐ １ —２ Ｆ ｂ ｕ ｒ ，２ １ ｅ ｒ ａｙ ０ １
与芳香烃降解 代谢 过程 的相互关系 ， 图从 单个细胞水平 以 试 及细胞群体水平获 得对南 极微 生物低 温 降解芳 香烃 的新认
识。
度等可 以获知掩盖在群体平均信息下的个体生命 信息 和实 时
生命物质变化 的信息 ，从 而有 效地 了解 细胞 的真 实生 理过
１ 实验部分
１ １ 材 料 ．
点实验室低温菌种 库。
１ ２ 培 养 方 法 ．
基金项 目： 国家 自然科学基金项 目（０ ７ １７ ，国家海洋局青年科学基金项 目（０ ０ ２ ） 广 西 自然科学基金项 目（ ８ ２ ７ ） ４８ ６０ ） ２１１２ ， ０ ３０ ７ 和青岛市科技
发 展 项 目（ ９ｌ３４ｊｈ 资 助 ０一一—－ ） ｃ
南极 海 洋芳 香烃低 温 降解 微 生物 的拉 曼光 谱分 析
王以斌 ，缪锦来 ，何碧娟。 ，梁 强 ，刘芳明 ，郑 洲
１ ．国家 海 洋 局第 一 海 洋 研 究 所 ，山 东 青 岛 ２ ６ ６ ６０１ ２ ．国家 海 洋 局海 洋 生 物 活 性 物质 重 点 实 验 室 ，山东 青 岛 ２ ６ ６ ６０１ ３ ．广 西 科 学 院 ，广 西 南 宁 ５ ０ ０ ３０ ７
关键词 激光镊子拉曼光谱技术 ； 南极微生物 ； 低温降解 ； 芳香烃
中 图 分 类 号 ： ３ Ｑ９５ 文 献标 识 码 ：Ａ Ｄ Ｉ １ ． ９４ ｊｉ ｎ １０ —５ ３ ２ １ ）２０ １—４ Ｏ ： ０ ３ ６ ／．ｓ ．０ ００ ９ （０ １ ０—４ ８０ ｓ
索｜ 。 ４ ＇ 本研究在 国内首次将 Ｌ Ｒ Ｔ Ｓ技术应用于南极微生物
作者简介：王以斌，１ ８ ９ ３年生 ，国家海洋局第一海洋研究所研究实习员
＊通 讯 联 系人 ｅｍａｌｍｉｏｉｌｉ １３ ｃｒ － ｉ ａｊ ａ＠ ６ ．ｏ ： ｎ ｎ
ｅｍａｌ ｎ ｙ １ ８ ＠１３ ｃｒ － ｉ ｗａ ｇ ｂ ９ ３ ６． ｏａ ： ｌ
菌株 ： 三株可低温 （～１ 降解 芳香烃 的南 极嗜冷细 Ｏ ０ｏ Ｃ） 菌 ：动球 菌 （ ａ ｏｏｃｓｓ ． Ｎ ４ ，希 瓦 氏菌 （ ｈ－ ｅｌ Ｐｌｎ ｃｃｕ ｐ ） Ｊ １ Ｓ ｅ￣ｎｌ ｕ ａ ｓ ． Ｎ ４ ， 交替单胞菌 （ ｓｕ ｏ ｌ ｒｍｏａ ｐ ） Ｊ ８ ， ｐ ） Ｊ９ 假 Ｐ ｅｄ ａｔ ｏ ｎ ｓ ． Ｎ ２９ 其 ｅ ｓ 中１ Ｏ℃ ，ｌ Ｏｄ时 Ｎ ４ 对萘 的降解率 可达 ４ ． ，５℃ ，１ Ｊ１ ８８ ０ ｄ时可达 ４ ． ；１ ３２ ０℃ ，１ ０ｄ时 Ｎ］９的降解率 为 ４． ， ４ ５２ Ｎ ２ ９ ４ ． ； Ｊ ８ 为 ３５ 现保藏于国家海洋局海洋生 物活性物 质重
引 言
单 细胞 激 光镊 子 拉曼 光 谱 技术 （ａｅ ｗｅｚｒ Ｒ ｍａ １ ｒｔ ｅｅｓ ａ ｎ ｓ ｓ ｅｔｏｃｐ ， Ｔ Ｓ 是将 光学 囚禁技 术 与显微拉 曼光 谱技 ｐ ｃ ｓｏ ｙ Ｌ Ｒ ） ｒ 术相结合用于单细胞探测 的新技术 。它用 同一 束光来 囚禁细 胞 和激发细胞的拉曼 光谱 ， 细胞处于溶液 中 ， 其生 理活性不 受影响 ，可以在接近其 自然的生理状 态下 实现较长时 间对单 个 细 胞 或 细 胞 器 的监 测 和 研 究 ｌ ］ １ 。通 过 实 时 观 察 单 个 细 胞 。 或细胞器的生物化学过程 ， 分析拉曼光谱 特征峰 的位 置 、 强
目前激光镊 子拉 曼 光谱 多应 用 于红 细胞＿ ］ ６ 、血小 板 、 酵母ｌ ＿ ＿ 以及癌症 细胞＿ ９ Ｄ １ 医学相 关领 域的研 究 ，仅有少 等 数 国外学者将其应用于极 地微生物细胞结构和生命机 制的探
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