TLC常用显色剂
TLC显色剂配比方法

TLC显色剂配比方法TLC显色剂配比方法做TLC时候,用到的显色剂:5%茴香醛硫酸乙醇溶液,硫酸乙醇,FeCl3怎么配比!显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用有机试剂显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。
l.通用有机试剂显色剂①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110oC 烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
②0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05%高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180oC加热15~20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC 烤薄层。
⑦5%磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色,再喷2mol/L盐酸溶液,则蓝色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:(1)烃类①硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烃类。
溶液:硝酸银O.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素/溴检出物:不饱和烃。
溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
TLC显色剂及其配制方法

配制方法12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL 乙醇香草醛(香兰素) 碘:不饱和或者芳香族化合物配制方法在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶紫外灯含共厄基团的化合物,芳香化合物硫酸铈:生物碱配制方法10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮)广谱, 有荧光活性配制方法0.1% 桑色素+甲醇茚三酮氨基酸配制方法1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸二硝基苯肼(DNP)醛和酮广谱配制方法15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸高锰酸钾含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛配制方法1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH +200mL 水. 使用期3个月溴甲酚绿羧酸,pKa<=5.0配制方法在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M 的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈广谱配制方法235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL 浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1广谱配制方法135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)配制方法茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)磷钼酸(PMA)广谱配制方法10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇茚三酮适合含氮的(仲、伯)氮化合物。
碘能使大多数化合物显色,尤其是含氮化合物(有些酰胺是不灵敏的)。
浓硫酸或者乙醇-硫酸靠炭化发黑显色,电炉加热也是此原理。
高锰酸钾和磷钼酸铵是无机物溶液显色剂。
TLC显色试剂及配方大全

TLC显色试剂及配方大全3(6)含氮化合物①FCNP(硝普钠/铁氰化物)试剂检出物:脂肪族含氮化物,如氨基氰、胍、脲与硫脲及其衍生物,肌酸及肌酐。
溶液:10%氢氧化钠溶液、10%硝普钠溶液、10%铁氰化钾溶液与水按1:1:1:3混合,在室温至少放置20min,冰箱保存数周,用前将混合液与丙酮等体积混合。
②Dragendorff(碘化铋钾试剂)试剂检出物:芳香族含氮化合物,如生物碱类、抗心律不齐药物。
溶液:I.碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中;Ⅱ.碘化钾8g溶于水20ml中。
将上述溶液I及Ⅱ等量混合,置棕色瓶中作为储备液,用前取储备液lml、冰醋酸2ml与水l0ml混合。
结果:呈橘红色斑点。
③4-甲基伞形酮检出物:含氮杂环化合物。
溶液:本品0.02g溶于乙醇35ml,加水至100ml。
方法:喷板后置25%氨水蒸气的容器中,取出后于紫外灯(365nm)下观察。
④碘铂酸钾检出物:生物碱类及有机含氮化物。
溶液:10%六氯铂酸溶液3ml与水97ml混合,加6%碘化钾溶液,混匀。
临用前配制。
⑤硫酸高铈铵/硫酸检出物:生物碱及含碘有机化物。
溶液:硫酸铈1g混悬于4ml水中,加三氯乙酸1g,煮沸,逐滴加入浓硫酸直至混浊消失。
方法:喷后薄层于1l0oC加热数分钟。
结果:阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检出。
⑥Ehrlich (对二甲氨基苯甲醛/盐酸)试剂检出物:吲哚衍生物及胺类。
溶液:1%本品的浓盐酸溶液与甲醇按1:1混合。
方法:喷后板于50oC加热20min。
结果:呈不同颜色的斑点。
(7)胺类①硝酸/乙醇检出物:脂肪族胺类。
溶液:50滴65%硝酸于乙醇100ml中。
方法:需要时120oC加热。
②2,6-二氯醌氯亚胺检出物:抗氧剂、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氢化物、药物、苯氧基乙酸除草剂等。
溶液:新鲜制备的0.5%~2%本品乙醇溶液。
方法:喷后薄层于110oC加热10min,再用氨蒸气处理。
最全的TLC经验薄层层析显色剂

最全的TLC经验薄层层析显色剂TLC(Thhin-layer chromatography)是一种常用的分析技术,利用固定相上的物质分离样品中的化合物。
在TLC分析中,选择合适的显色剂是非常重要的,它可以使分离后的化合物形成明显的色斑,便于后续的观察和分析。
以下是一些常用的TLC显色剂及其应用经验:1.碘气(I2)显色剂:碘气广泛应用于氨基酸、激素、脂肪类化合物等的分析。
在整个TLC显色的过程中,容器内需维持相对湿润的环境,这有助于碘分子与分离出的化合物结合并形成色斑。
2.磷钼酸(H3PO4-MoO3)显色剂:磷钼酸显色剂对一些有机物具有较高的选择性,适用于血红素、古菌素等类似化合物的分析。
但是,过多的样品可能会导致背景的显色。
3.臭氧-有机酸显色剂:臭氧-有机酸显色剂可用于许多有机物的分析,如甾体激素、有机酸等。
显色过程中需要在高浓度臭氧气体下进行,非常危险,必须小心操作。
4.特殊显色剂:一些特殊化合物需要使用特殊的显色剂才能形成色斑,例如卡尔曼反应、尼特罗蒽酮反应等。
这些显色剂需要额外的处理步骤,并需要小心操作以避免有毒物质的接触。
此外,除了选择合适的显色剂,还有一些TLC操作经验值得注意:1.选用合适的固定相:根据分析样品的理化性质选择合适的固定相。
非极性固定相适用于极性化合物的分离,疏水性固定相适用于疏水化合物的分离等。
2.控制溶剂系统:在TLC中,正确的溶剂系统对于样品的分离非常重要。
使用不同比例的溶剂混合物,根据样品的极性和亲水性来优化分离效果。
3.控制样品施加的量:在施加样品前,要先进行样品的预处理,并确保样品施加均匀。
过多的样品可能会导致色斑扩散,影响分离效果。
4.控制板子的浸渍时间:浸渍时间的控制也非常重要,如果时间过短,样品可能没有完全被吸附;如果时间过长,可能会扩散过多的色斑,导致分离效果不佳。
5.注意保护眼睛和皮肤:在整个TLC显色的过程中,一些显色剂具有刺激性和毒性。
在操作时,必须佩戴适当的防护设备,如手套、护目镜等,以避免对人体健康的影响。
TLC常用显色剂

TLC常用显色剂适用范围显色剂名称配制方法使用方法显色通用碘蒸气将碘结晶置于密闭容器产生饱和碘蒸气放入碘蒸汽数分钟黄棕色硫酸浓H2SO4:MeOH(1:1)或5%H2SO4乙醇溶液喷雾110℃加热5min各种颜色磷钼酸试液5%5%磷钼酸乙醇溶液磷钼酸乙醇溶液喷雾120℃加热蓝色具还原性物质中性KMnO40.05%KMnO4水溶液喷雾淡黄色背景黄色斑点生物碱改良碘化铋钾试剂Dragendoff’sreagentⅠ.碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸和40mlH2O Ⅱ.8g碘化钾溶于20mlH2O贮存液:Ⅰ与Ⅱ等体积混合喷雾剂:1ml贮存液、2ml冰醋酸和10mlH2O混合喷雾桔红色碘-碘化钾试剂(wagner’s reagent) 1gI2和10gKI加50mlH2O溶解,再加2ml冰醋酸,用H2O稀释至100ml 喷雾棕褐色硫酸铈-硫酸试剂将0.1g硫酸铈悬浮与4mlH2O,加1g三氯乙酸煮沸,后滴加浓H2SO4至浑浊消失喷雾110℃加热8min各种颜色还原糖草酸苯胺试剂0.9g苯胺溶于0.1N草酸水溶液100ml中喷雾100℃加热粉红-棕红糖茴香醛-硫酸试剂1ml浓H2SO4加至含0.5ml茴香醛的50ml乙醇溶液中(用时配)喷雾105℃加热颜色不一a-萘酚-硫酸试剂(Molish’reagent)21ml 15%-萘酚乙醇溶液,13ml浓H2SO4,87mlEtOH,8mlH2O混合喷雾100℃加热3~6min蓝色(鼠李糖橙色)黄酮碱性试剂氨气,10%NaOH或KOH甲醇溶液喷雾前后在日光和紫外灯下观察本身颜色或荧光加强或改变三氯化铝试剂1%或5%AlCl3乙醇溶液醋酸镁试剂2%MgAc2甲醇溶液三氯化铁试剂1-2%FeCl3乙醇溶液蒽醌酸性试剂氨气,10% KOH甲醇,3%NaOH或NaCO3溶液喷雾日光和紫外灯下观察同上醋酸铝试剂0.5%AlCl3溶液醋酸镁试剂0.5%MgOAc2甲醇溶液喷雾90℃显色5min 紫色或红色等1适用范围适用范围 显色剂名称显色剂名称配置方法配置方法使用方法使用方法显色显色香豆素,酚芳香胺和能偶合的杂环化合物重氮化氨基苯磺酸试剂酸试剂0.9g 对氨基苯磺酸加热溶解于9ml 12N HCl 中,用水稀释至100ml,100ml,取取10ml,10ml,冷却,冷却,加热冰冷的4.5%4.5%亚硝酸钠亚硝酸钠10ml,010ml,0℃放置℃放置15min,用前加等体积1%NaCO 3喷雾喷雾不同颜色不同颜色酚 三氯化铁-铁氰化钾试剂化钾试剂 Ⅰ. 2%FeCl 3乙醇溶液乙醇溶液Ⅱ. 2%铁氰化钾水溶液铁氰化钾水溶液 使用前Ⅰ、Ⅱ等量混合使用前Ⅰ、Ⅱ等量混合喷雾喷雾蓝-紫色蓝-紫色 挥发油挥发油香草醛-硫酸试剂5%5%香草醛乙醇溶液香草醛乙醇溶液100ml,100ml,临用临用加4ml 浓H 2SO 4喷雾喷雾110℃加热℃加热各种颜色各种颜色 茴香醛-硫酸试剂1ml 浓H 2SO 4加入50ml 冰醋酸中冷却加0.5ml 茴香醛茴香醛 喷雾喷雾 105℃加热℃加热各种颜色各种颜色 有机酸有机酸甲红-溴酚兰指示剂示剂1g 甲红、3g 溴酚兰溶于95%EtOH100ml 如展开剂有HOAc,HOAc,先于先于先于 120℃挥去喷雾喷雾 黄色背景红色斑点红色斑点 溴甲酚绿指示剂溴甲酚绿指示剂1ml 浓H 2SO 4加至含0.5ml 茴香醛的50ml 乙醇溶液中(用时配) 蓝色背景黄色斑点黄色斑点皂甙皂甙血球试液血球试液取羊血或兔血1份,加玻璃球不断振摇除去玻璃球和凝集的血蛋白,加pH7.4磷酸缓冲液7份稀释而成份稀释而成喷雾喷雾 红色背景白色斑点白色斑点皂甙、萜皂甙、萜磷钼酸试剂磷钼酸试剂5%5%磷钼酸乙醇溶液磷钼酸乙醇溶液磷钼酸乙醇溶液喷雾喷雾140℃加热℃加热5~10min深蓝色深蓝色皂甙、强心苷、甾、萜三氯化锑试剂三氯化锑试剂 25%25%或饱和三氯化锑氯仿溶液或饱和三氯化锑氯仿溶液或饱和三氯化锑氯仿溶液 喷雾喷雾 100℃加热℃加热 5min同上同上五氯化锑试剂五氯化锑试剂25%25%五氯化锑氯仿溶液五氯化锑氯仿溶液五氯化锑氯仿溶液 同上同上 各种颜色各种颜色 甾体、三萜三萜 氯磺酸-乙酸试剂 氯磺酸-乙酸氯磺酸-乙酸(1:2) (1:2)喷雾喷雾 130℃加热℃加热 5min 各种颜色紫外灯下观察观察 皂甙皂甙 三氯乙酸试剂三氯乙酸试剂 三氯乙酸:乙酸三氯乙酸:乙酸(1:2) (1:2) 喷雾喷雾 120℃加热℃加热黄色黄色 强心苷、甾体三氯乙酸试剂三氯乙酸试剂Ⅰ.25%.25%三氯乙酸的乙醇或氯仿三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液Ⅱ.取Ⅰ取Ⅰ10ml 10ml 加过氧去氢4滴或与新配置的3%3%氯胺氯胺T 水溶液4:1混合混合喷雾喷雾110℃加热℃加热7~10min 紫外灯下观察荧光观察荧光皂甙及甾醇 醋酐-浓硫酸试剂(Liebermann-Bur chard chard’’s reagent)冷却下,小心将5ml 醋酐与5ml 浓硫酸混合,并将其加入50ml 无水乙醇中(用前配置)无水乙醇中(用前配置) 喷雾喷雾100℃加热℃加热 10min 长波紫外灯下观察灯下观察强心甙强心甙Kedde Kedde’’sreagent 2%3,5-2%3,5-二硝基苯甲酸甲醇溶液与二硝基苯甲酸甲醇溶液与2N 氢氧化钾溶液用前1:1混合混合喷雾喷雾 紫红色紫红色 碱性三硝基苯试剂Ⅰ.间三硝基苯试剂100mg 溶于二甲基甲酰氨40ml 40ml,再加浓硫,再加浓硫酸3~4滴加水至100ml Ⅱ.Ⅱ.5%5%5%碳酸钠溶液碳酸钠溶液碳酸钠溶液先喷雾Ⅰ再喷雾Ⅱ90~100℃ 加热5min 浅橙色背景橙色红斑点斑点氨基酸氨基酸茚三酮试剂茚三酮试剂 茚三酮0.3g 溶于正丁醇100ml,加冰醋酸3ml 或0.2%0.2%乙醇溶液乙醇溶液乙醇溶液 喷雾喷雾110℃加热℃加热 蓝紫色蓝紫色 1,2-1,2-萘醌萘醌萘醌-4--4--4-磺酸磺酸试剂试剂1,2-1,2-萘醌萘醌萘醌-4--4--4-磺酸磺酸0.02g 溶于5%碳酸钠溶液100ml 中(用前配置)置) 喷雾喷雾 室温干燥室温干燥 各种颜色各种颜色。
TLC(薄层色谱)显色试剂及配方大全

薄层色谱的显色反应显色试剂显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。
l.通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110oC烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
②0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05%高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180oC加热15~20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC烤薄层。
⑦5%磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色,再喷2mol/L盐酸溶液,则蓝色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:(1)烃类①硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烃类。
溶液:硝酸银O.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素/溴检出物:不饱和烃。
溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
做薄层层析时显色剂的选择

TLC 显色试剂的选择显色试剂显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多,列举一些常用的显色剂。
l.通用显色剂硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L 硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110oC烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
中性0.05%高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
酸性高锰酸钾试剂喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180oC加热15~20min。
酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC烤薄层。
5%磷钼酸乙醇溶液喷后120℃烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色,再喷2mol/L盐酸溶液,则蓝色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:(1) 烃类①硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烃类。
溶液:硝酸银O.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射; 结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素/溴检出物:不饱和烃。
溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
TLC常用试剂配制及显色方法

常用试剂配制及显色方法(一)通用显色剂1.重铬酸钾——硫酸一般有机物均能显色,不同化合物显示不同颜色。
喷洒剂:5克重铬酸钾溶于100ml,40%硫酸中。
喷洒后加热至150o C斑点出现。
2.碘:检查一般有机物(1)碘蒸汽:在一个密闭玻璃皿先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色,有时在缸内放一盛水的小杯,增加缸内的湿度,可提高显色的灵敏度。
(2)0.5%碘的氯仿溶液,取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液,斑点转成蓝色。
3.碘——碘化钾溶液:很我有机物虽黄色(配法见后)。
4.5%——磷钼酸乙醇溶液:喷后120o C烤,还原性物质显兰色,再用氨气熏,则背景变为无色。
5.20%磷酸乙醇溶液:喷后120o C,还原性物质显兰色。
6.碱性高锰酸钾试剂:还原性物质在淡红背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液。
溶液II:5%碳酸钠溶液。
溶液I和溶液II等量混合使用。
7.中性0.05%高锰酸钾溶液:易还原性物质在淡红背景上显黄色。
8.硝酸银——氢氧化铵(Tollen’s--zoffaronl)试剂,喷后105o C烤5~10分钟,还原性物质显黑色。
溶液I:0.1N硝酸银溶液。
溶液II:氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和溶液II以1:5混合。
注意:放久则形成爆炸性的叠氦化银。
9.硝酸银——高锰酸钾试剂:还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。
溶液I:0.1N硝酸银溶液:2N氢氧化铵溶液:2N氢氧化钠(1:1:2)。
临用前配制。
溶液II:高锰酸钾0.5g,碳酸钠1g,加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。
10.四唑试剂:还原性物质,在室温或微加热时显紫色。
溶液I:0.5%四唑兰甲醇溶液。
溶液II:6N氢氧化钠溶液。
临用前溶液I和溶液II等量混合。
11.铁氰化钾:三氯化铁试剂:还原性物质显兰色,再喷射2N/L盐酸溶液,则兰色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液。
溶液II:2%三氯化铁溶液。
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碱性试剂
氨气,10%NaOH或KOH甲醇溶液
喷雾前后在日光和紫外灯下观察
本身颜色或荧光加强或改变
三氯化铝试剂
1%或5%AlCl3乙醇溶液
醋酸镁试剂
2%MgAc2甲醇溶液
三氯化铁试剂
1-2%FeCl3乙醇溶液
蒽醌
酸性试剂
氨气,10% KOH甲醇,3%NaOH或NaCO3溶液
喷雾日光和紫外灯下观察
同上
TLC常用显色剂
适用范围
显色剂名称
配制方法
使用方法
显色
通用
碘蒸气
将碘结晶置于密闭容器产生饱和碘蒸气
放入碘蒸汽数分钟
黄棕色
硫酸
浓H2SO4:MeOH(1:1)或5%H2SO4乙醇溶液
喷雾110℃加热5min
各种颜色
磷钼酸试液
5%磷钼酸乙醇溶液
喷雾
120℃加热
蓝色
具还原性物质
中性KMnO4
0.05%KMnO4水溶液
喷雾
不同颜色
酚
三氯化铁-铁氰化钾试剂
Ⅰ.2%FeCl3乙醇溶液
Ⅱ.2%铁氰化钾水溶液
使用前Ⅰ、Ⅱ等量混合
喷雾
蓝-紫色
挥发油
香草醛-硫酸试剂
5%香草醛乙醇溶液100ml,临用加4ml浓H2SO4
喷雾
110℃加热
各种颜色
茴香醛-硫酸试剂
1ml浓H2SO4加入50ml冰醋酸中冷却加0.5ml茴香醛
喷雾
105℃加热
1gI2和10gKI加50mlH2O溶解,再加2ml冰醋酸,用H2O稀释至100ml
喷雾
棕褐色
硫酸铈-硫酸试剂
将0.1g硫酸铈悬浮与4mlH2O,加1g三氯乙酸煮沸,后滴加浓H2SO4至浑浊消失
喷雾
110℃加热
8min
各种颜色
还原糖
草酸苯胺试剂
0.9g苯胺溶于0.1N草酸水溶液
100ml中
喷雾
100℃加热
各种颜色
有机酸
甲红-溴酚兰指示剂
1g甲红、3g溴酚兰溶于95%EtOH100ml
如展开剂有HOAc,先于
120℃挥去喷雾
黄色背景红色斑点
溴甲酚绿指示剂
1ml浓H2SO4加至含0.5ml茴香醛的50ml乙醇溶液中(用时配)
蓝色背景黄色斑点
皂甙
血球试液
取羊血或兔血1份,加玻璃球不断振摇除去玻璃球和凝集的血蛋白,加pH7.4磷酸缓冲液7份稀释而成
喷雾
淡黄色背景黄色斑点
生物碱
改良碘化铋钾试剂Dragendoff’s reagent
Ⅰ.碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸和40mlH2O
Ⅱ.8g碘化钾溶于20mlH2O
贮存液:Ⅰ与Ⅱ等体积混合
喷雾剂:1ml贮存液、2ml冰醋酸和10mlH2O混合
喷雾
桔红色
碘-碘化钾试剂(wagner’s reagent)
喷雾
红色背景白色斑点
皂甙、萜
磷钼酸试剂
5%磷钼酸乙醇溶液
喷雾
140℃加热
5~10min
深蓝色
皂甙、强心苷、甾、萜
三氯化锑试剂
25%或饱和三氯化锑氯仿溶液
喷雾
100℃加热
5min
同上
五氯化锑试剂
25%五氯化锑氯仿溶液
同上
各种颜色
甾体、三萜
氯磺酸-乙酸试剂
氯磺酸-乙酸(1:2)
喷雾
130℃加热
5min
各种颜色紫外灯下观察
皂甙
三氯乙酸试剂
三氯乙酸:乙酸(1:2)
喷雾
120℃加热
黄色
强心苷、甾体
三氯乙酸试剂
Ⅰ.25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液Ⅱ.取Ⅰ10ml加过氧去氢4滴或与新配置的3%氯胺T水溶液4:1混合
喷雾
110℃加热
7~10min
紫外灯下观察荧光
皂甙及甾醇
醋酐-浓硫酸试剂(Liebermann-Burchard’s reagent)
粉红-棕红
糖
茴香醛-硫酸试剂
1ml浓H2SO4加至含0.5ml茴香醛的50ml乙醇溶液中(用时配)
喷雾
105℃加热
颜色不一
-萘酚-硫酸试剂
(Molish’reagent)
21ml 15%-萘酚乙醇溶液,13ml浓H2SO4,87mlEtOH,8mlH2O混合
喷雾
100℃加热
3~6min
蓝色(鼠李糖橙色)
冷却下,小心将5ml醋酐与5ml浓硫酸混合,并将其加入50ml无水乙醇中(用前配置)
喷雾
100℃加热
10min
长波紫外灯下观察
强心甙
Kedde’s reagent
2%3,5-二硝基苯甲酸甲醇溶液与2N氢氧化钾溶液用前1:1混合
喷雾
紫红色
碱性三硝基苯试剂
Ⅰ.间三硝基苯试剂100mg溶于二甲基甲酰氨40ml,再加浓硫酸3~4滴加水至100ml
Ⅱ.5%碳酸钠溶液
先喷雾Ⅰ再喷雾Ⅱ90~100℃
加热5min
浅橙色背景橙色红斑点
氨基酸
茚三酮试剂
茚三酮0.3g溶于正丁醇100ml,加冰醋酸3ml或0.2%乙醇Fra bibliotek液喷雾
110℃加热
蓝紫色
1,2-萘醌-4-磺酸试剂
1,2-萘醌-4-磺酸0.02g溶于5%碳酸钠溶液100ml中(用前配置)
喷雾
室温干燥
各种颜色
醋酸铝试剂
0.5%AlCl3溶液
醋酸镁试剂
0.5%MgOAc2甲醇溶液
喷雾90℃显色5min
紫色或红色等
适用范围
显色剂名称
配置方法
使用方法
显色
香豆素,酚芳香胺和能偶合的杂环化合物
重氮化氨基苯磺酸试剂
0.9g对氨基苯磺酸加热溶解于9ml 12N HCl中,用水稀释至100ml,取10ml,冷却,加热冰冷的4.5%亚硝酸钠10ml,0℃放置15min,用前加等体积1%NaCO3