红细胞裂解液
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)

红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介: 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测,尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成:操作步骤(仅供参考):注意:绝大多数情况下,应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用,流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心,弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液:新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)

红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介: 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测,尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成:操作步骤(仅供参考):注意:绝大多数情况下,应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用,流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心,弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。
4℃,离心,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液:新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入1×RBC Lysis Buffer ,轻柔吹打混匀,裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
ACK红细胞裂解液ACKLysisBuffer

注意事项:
1、制备细胞悬液是应根据具体实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。 2、后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。 3、离心步骤尽量在 4℃离心机上操作。 4、对于常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗 涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程, 洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。 5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。 6、如果经过 ACK Lysis Buffer 处理后的样品后续用于总 RNA 的提取,在处理细胞时不必 使用 DEPC 处理的溶液,即无需在该操作中特意去除 RNase。 7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 6 个月有效。
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产品编号 CC0007 CC0022 CC0033 CC0045 CC0130 CPBS,无钙镁) D-Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红) Hanks 平衡盐溶液(1×HBSS,无酚红) Earle's 平衡盐溶液(1×EBSS,无钙镁糖酚红) 胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%) Tris-氯化铵红细胞裂解液
Leagene ACK Lysis Buffer 对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽类的红细胞, 效果不佳,裂解类似细胞时,不建议采用。本裂解液经过滤除菌,经过 ACK Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取 及各种常规的分析和检测。
(四)血液样本的快速操作(无需洗涤)
北京雷根生物技术有限公司
1、新鲜抗凝血中加入 10 倍体积的 ACK Lysis Buffer,轻轻吹打混匀,裂解 4~15min。 本操作步骤在 4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。(特别提醒:对于鼠的血液,裂解 4~5min 已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至 10min,但通常不宜超过 15min, 并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。 2、加入 20~30ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀。 3、400~500g 离心 5min,弃红色上清。4℃离心效果更佳。 4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤 2 和步骤 3 一次。 5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
裂解液配制方法

裂解液配制方法 The manuscript was revised on the evening of 20211、红细胞裂解液(去除红细胞)配制试剂所需材料:1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solutiona) NH4Cl (1.5 M) 80 gb) KHCO3 (100 nM) 10 gc) Na4EDTA (10 nM) 3.7 gd) Distilled H2O 1000 mL2. 1N HCl or 1N NaOH(调节pH值用)配制步骤:1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中;2.调节溶液pH值到,加去离子水定容到1000ml;3.在制备工作液时,将此储存液稀释10倍后使用。
保存:储存液储存于2-8°C不能超过半年(六个月);2.在使用前,工作液每天都应该新鲜配制放置于室温,当日用不完的弃掉。
2、ripa裂解液NP-40 or Triton-100 1%TrisHCl (pH 50mmol/LNaCl 150mmol/LPMSF(苯甲基磺酰氟) L(100μg/ml)Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/Lμg/ml)Leupeptin(亮抑制肽) mlAprotinin(抑蛋白酶肽)μmol/L(1μg/ml)(注:PMSF 贮存液:100mmol/L即ml于异丙醇中;Aprotinin 贮存液:10mg/ml溶于LHEPES;Leupeptin 贮存液:10mg/ml溶于水中;Pepstatin 贮存液 10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存)3、细胞裂解液(Tris-HCL)1.1M Tris 溶液的配置取Tris242.2g,加ddH2O至1600ml,加热溶解。
2.1M Tris-HCL Ph=溶液的配置取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=(需浓盐酸约),加ddH2O定容至200ml,高压灭菌备用。
Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书

北京索莱宝科技有限公司Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书货号:R1012规格:500mL保存:4℃保存,12个月有效。
产品说明:在生物科研领域,经常需要去除红细胞,去除红细胞的方法有多种,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。
Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH4Cl。
Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。
本裂解液经过滤除菌,经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料:胰蛋白酶、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液、胎牛血清注意事项:1、制备细胞悬液时应根据实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
4、常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、如果经过ACK Lysis Buffer处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液,即无需在该操作中特意去除RNase。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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红细胞裂解

对于组织细胞样品:1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2. 加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml的红细胞裂解液。
本步骤在室温或4度操作均可。
3. 400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5. 洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。
可再重复1次,共洗涤1-2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
4℃离心效果更佳。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤:1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2. 对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
本步骤在室温或4度操作均可。
3. 加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
4. 400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
5. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明:对于常规步骤,多一步洗涤过程中的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。
快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
对于血液样品:1. 取新鲜抗凝血,400-500g离心5分钟,离心弃上清。
2. 加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入6-10ml的红细胞裂解液。
C3702 红细胞裂解液(碧云天)

红细胞裂解液产品简介:碧云天生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称ACK Lysis Buffer,是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本裂解液经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
本裂解液的主要有效成分为氯化铵。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
保存条件:4℃保存,一年有效。
室温保存, 3个月有效。
注意事项:本裂解液为无菌产品,请注意保持无菌,使用本产品时宜在超净工作台内进行。
如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:对于组织细胞样品:1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2.加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。
例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml的红细胞裂解液。
本步骤在室温或4度操作均可。
3.400-500g离心5分钟,弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5.洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。
可再重复1次,共洗涤1-2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
4℃离心效果更佳。
6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤:1.新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
红细胞裂解液工作原理

红细胞裂解液工作原理
红细胞裂解液是一种用于分离红细胞,进而提取其他血细胞或血液成分的试剂。
其主要通过破坏红细胞、溶解红细胞、去除杂质以及提取所需物质等步骤来实现其工作原理。
1. 破坏红细胞
红细胞裂解液的第一步是破坏红细胞。
这一步通常通过使用渗透压改变或化学试剂的方法来实现。
渗透压改变通常通过使红细胞所处的环境高盐或低盐,使得红细胞膨胀或收缩,最终破裂。
而化学试剂通常选择能够破坏细胞膜的物质,直接导致红细胞破裂。
2. 溶解红细胞
在红细胞被破坏后,下一步是溶解红细胞。
这一步通常是通过一些能够与血红蛋白结合的物质,如硫氰酸盐或戊二醛等来实现。
这些物质与血红蛋白结合后,能够将血红蛋白从红细胞的细胞质中提取出来,从而实现红细胞的溶解。
3. 去除杂质
在溶解红细胞后,得到的溶液中除了血红蛋白外,还可能含有其他杂质,如白细胞、血小板等细胞的残留物以及血清等。
这些杂质需要通过离心或过滤等方法去除,以确保后续提取的物质纯净。
4. 提取所需物质
最后一步是提取所需物质。
根据实验或生产需求,可以从溶解后的溶液中提取出不同的物质。
例如,如果需要提取DNA,可以通过加入适当的盐溶液沉淀出DNA;如果需要提取RNA,可以通过醇沉淀等方法实现;如果需要提取膜蛋白,可以通过相应的亲和层析等方法进行。
总之,红细胞裂解液的工作原理主要涉及破坏红细胞、溶解红细胞、去除杂质以及提取所需物质等步骤。
通过这些步骤,可以有效地从血液中分离出所需的物质,为生物医学研究、血液分析等领域提供有力的支持。