美国及欧洲药典系统适应性要求

系统适应性——美国药典

系统适应性是气相和液相色谱分析方法的重要组成部分，用于证明色谱系统的分离度和重现性能满足样品的分析要求。

测试基于这样的原理：仪器、电路、方法和样品组成一个整体系统，我们可以对这个系统进行测试评估。

影响色谱系统的因素包括：

●流动相的组成、离子强度、温度和pH

值

●柱子大小、流速、柱温和压力

●固定相特点，包括填料类型，载体形状、

粒径、孔径、表面积等。

●常用固定相为反相硅胶，以十八碳烷基

健合硅胶最常用，其它经过化学修饰的

硅胶也有使用。

分离度R s是理论塔板数n的函数（也叫柱效），α是分离因子，k是容量因子（所有符号的意义见前文“色谱定义和说明”部分）。在规定的色谱条件下，n表示洗脱物中相邻化合物的分离程度，可作为衡量色谱系统柱效能的指标，但是不如直接测试的结果可靠。峰的尖锐程度部分反映柱效，这个参数对检查微量物质至关重要。

标准品或者标准溶液需要重复进样以确保精密度。除非个论中有规定, 系统适用性五针的数据的相对标准偏差不超过2.0%, 如果超过2.0%的话, 需要进样六针。

在含量测定中，如果纯品含量100%，则相对标准偏差没有最大值限制，这个值可根据多次进样对照溶液来计算：

%RSD=KB/t90%，n-1K为常数0.349，由公式k=(0.6/)×(t90%,5/)计算得来，表示B=1.0时六次进样的相对标准偏差。B是个案中规定的上限。n是对照溶液的进样次数（3≤n≤6），t90%,n-1是自由度为n-1、置信水平为90%，双侧检验时的t值。

除非另有规定，RSD不能超过下表中的值。此规定不适用于相关物质检测。

Relative Standard Deviation Requirents

进样次数

3456

B%RSD上限

2.00.410.590.730.85

2.50.520.740.92 1.06

3.00.620.89 1.10 1.27

对称因子AS，用于衡量峰的对称性，完全对称时值为1。拖尾越严重，AS的值越大（见图4）。偶尔也会有值小于1的情况。如果对称因子和1的差值越大，则积分的精密度越差。

信噪比（S/N）是系统适应性的一个重要参数，计算公式如下（图5）：

S/N = 2H/h

H是峰高，即峰最高点到基线的距离；h是噪音最大值和最小值之间的差值。

系统适应性测试的数据通过重复进样标准品或者特定文件中规定的对照溶液而得到，

此文件中对相关参数的定义同样适用于其它操作条件，以下情况可做相应调整：

●标准品（包括参考物质）对适应性测试

中的所有化合物均适用

●在系统适应性测试中为改进色谱系统性能

而作适当调整

对色谱系统的调整不能弥补柱子和系统本

身的缺陷。

为满足系统适应性要求而对分析方法调整时，除非另有规定，以下每个变量的最大值都应考虑；这些调整需要附加有效数据。为验证新方法的系统适应性，需要对改变条件后的分析方法重新评价。多处改动会对系统性能产生积累效果，在分析之前能仔细考虑。在梯度洗脱中不推荐改变流动性组成，如果必须改变，则只对溶剂体积或滞后体积改变。

流动相pH（HPLC）：在配备流动相时，水相缓冲液的pH波动范围在正负0.2个单位

缓冲液盐浓度（HPLC）：在满足pH值条件下，缓冲液中盐的浓度波动范围在±10%。

流动相的组成（HPLC）：以下调整限度适用于流动相中的小组分（比例小于等于50%）。这些组分的量可在正负30%范围内调整。但是不能超过总流动相的10%。下面是两相体系和三相体系组分的调整范围。

两相体系：

溶剂比为50:50时，50的30%是15%，超过了10%的限度，因此流动相比例只能在40:60到60：40范围内调整。

容积比为2：98时，2的30%时0.6%，因此改变范围在1.4：98.6到2.6:97.4

三相体系：

溶剂比为60:35:5时，第二组分35的30%时10.5%，超过10%的限度，只能在25%到45%的范围内改变。第三组分5的30%是1.5%。加上组分一共同构成洗脱体系。因此三相体系的比例变化范围是50:45:5到70:25:5或者58.5:35:6.5到61.5:35：3.5。

紫外-可见光检测器的波长：操作过程中不允许波长有误差，厂家或者其它机构对检测器波长的校正误差不超过3nm。

固定相:

柱长：可变范围为原柱长的±70%

柱内径（HPLC）：如果线速度恒定可做适当调节，见流速项（HPLC）下.

柱内径（GC）：调整范围为原柱内径的±50%

薄膜厚度（毛细管GC）：调整范围为-50%到100%

粒径（HPLC）：填料颗粒尺寸可以减小50%，但是不能增大。

粒径（GC）：在满足色谱系统适应性要求的情况下，粒径由大换小或者由小换大都可以，调料的粒径比率由最大颗粒的直径除以最小颗粒的直径而来。

流速（GC）：流速可调范围在±50%

流速（HPLC）；柱子尺寸改变时，流速可由下式计算：

F2=F1l2d22/l1d12

F1是文件中规定的流速，单位是mL/min，F2是调整后的流速；l1是文件中规定的柱长，l2是使用柱长；d1为文件中规定的柱内径，d2为使用柱内径。流速可变范围是±50%。

进样体积（HPLC）：只要满足精密度和检测限，进样体积可以适当减少，但不能增加。

进样体积和分流体积（GC）：检测器和重现性较好时可做适当调整。

柱温（HPLC）：柱温波动范围在±10º

进样口温度（GC）：可调范围±10º

程序升温（GC）：温度可做适当改变，需要保持一定温度或者改变到另一温度值时，温度变化做大容许范围是±20º。

除非另有规定，系统适应性参数由待测物峰的数据计算、

样品的Rr，RF，tR实测值应和对照品的实测值一致，文件中给的相对保留时间值是为了方便峰的指认，对于相对保留时间没有评判标准。

适应性测试时为了确保最终操作结果的有效性。实验过程中为确保系统适应性，进样前应做适当的准备工作。

配置待测溶液时，溶液中包括一定量的待测物和一些其它物质（如药品辅料或者杂质）。当色谱系统有显著变化时，或者要用特殊试剂，则要重新做系统适应性实验，否则不能进行样品分析。