全自动生化仪参数设置

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全自动生化分析仪的使用流程及操作步骤

全自动生化分析仪的使用流程及操作步骤

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全自动生化分析仪使用及维护标准操作规程

全自动生化分析仪使用及维护标准操作规程

全自动生化分析仪使用及维护标准操作规程1、开机前检查首先查看实验室温度湿度是否满足全自动生化分析仪使用条件、检查水源和水管连接、电源、通讯线和电源线连接、打印纸、废液桶、废液至下水道的连接、针杆、稀释/强化清洗剂余量。

1.1调整实验室温度湿度符合全自动生化分析仪使用条件。

1.2可能添加强化清洗剂和(或)清空废液桶。

注意:每天开始测试前,请将试剂盘盖上的防冷凝水塞子取下;否则,可能导致机械复位失败,采样针被撞弯。

测试完成后,再塞好冷凝塞子。

2、开机2.1手动开机2.1.1按下列顺序依次打开:分析部主电源开关、分析部电源开关、打印机、操作部显示器和主机电潮。

2.1.2登录Windows操作系统后,自动启动操作软件。

在登录窗口输入用户名和密码,点击确定。

2.2自动开机2.2.1选择应用>系统设置,点击仪器设置F1。

2.2.2选择休眠/开机设置>定时开机设置。

2.2.3设置一周内自动开机的日子和时间,然后点击设置。

2.2.4当达到设定的日子和时间后,仪器和操作软件自动启动。

在登录窗口输入用户名和密码,点击确定。

3、确队仪器状态确认系统状态(打印机状态、ISE模块状态和LIS连接状态)、故障/报警状态、试剂/校准状态、维护报警状态,以及子系统状态。

4、准备试剂(生化试剂及预处理液)4.1手动装载4.1.1选择试剂>试剂/校准或试剂>试剂盘状态,点击试剂装载F1,手动输入试剂信息。

4.1.2在试剂/校准界面点击打印F7打印试剂列表。

4.1.3将试剂放在试剂盘设定的位置上。

4.2自动装载:将贴有条码标签的试剂或预处理液放在试剂盘的空闲位置上,关闭试剂盘盖。

点击装载完成后,系统自动扫描试剂位,并获取试剂信息。

4.3特殊试剂选择试剂>试剂/校准,选择ISE试剂、ISE清洗剂、稀释清洗剂、针清洗剂、生理盐水,点击试剂装载F1,输入试剂信息,然后将试剂装载到以下位置:ISE试剂:分析部左侧ISE模块安装位ISE清洗剂:样本盘内圈D1位置稀释清洗剂:分析部样本针清洗剂:样本盘D2位置试剂针清洗剂:试剂盘D位置生理盐水:样本盘W位置、试剂盘W位置5、校准测试5.1选择试剂>试剂/校准,选择需要校准的项目,点击校准申请F5。

CS600B全自动生化分析仪标准化操作程序文件

CS600B全自动生化分析仪标准化操作程序文件

CS-600B 全自动生化分析仪标准化操作程叙文件【仪器运行条件】为保证仪器的正常运行,仪器必须满足下列条件:1.灰尘少、通风良好的环境,避免阳光直接照射。

2.地面水平良好(斜度<1/200),地面强度要能够承受仪器的分量(850kg)。

3.室内温度保持在15~32℃,温度变化不超过±3℃/小时。

4.室内相对湿度应保持在45~85℃,且不结露。

5.纯水供应:反渗水或者离子交换水。

出水量: 40 升/小时,水压: 0.5~3.5kg/cm2。

6.电源供应:220V±10%,50~60Hz,最大功率 4KVA。

有保护性接地(接地电阻<10Ω下)。

7.放置本仪器的房间请不要带入以下电器:手机、对讲机等发出特定电磁波的小功率电器。

【开机程序】1)开机前检查1.供电系统(包括 UPS)是否正常。

2.供水系统是否正常。

3.检查样品针、试剂针、搅拌针、清洗针是否有弯曲、阻塞、污物、漏水等,如有上述情况发生,参照仪器维护、保养说明书处理。

4.检查清洗液(迪瑞原厂供应) ,包括样品针、搅拌针、去污剂箱及试剂位 45 (抗菌无磷)和 45 位(碱性)各种清洗液,必要时补足。

5.检查打印机是否正常、打印纸是否安装好及是否联机(打印机上 Online 灯亮) 。

6.仪器及操作台面表面干净、无污物,机房空调正常开启。

2)开机为保证试剂舱的冷藏作用,位于仪器右后下方的总电源 (ON) 可长期处于开启状态,同时 UPS 长期处于工作状态。

1.打开仪器右侧电源(ON)开关,记录开机时间。

2.待仪器自检及程序装载( 15 分钟)结束,仪器至备用(Ready)状态,如有错误( Trouble) ,根据错误代码查找维护保养说明书检查原因,及时处理。

3. 自动开机在自动开机程序中设置开机时间:MAIN MENU F5:DEFINE F6:DEFINE OPTIONAL PARAMETERSF2:FOR AUTOMATIC STARTUP CONDITION3) 执行开机程序 Startup1 或者 Startup2开机程序设置:MAIN MENU F5 :DEFINE F6 :DEFINE OPTIONAL PARAMETERSF3:FOR STARTUP1 或者 F4:FOR STARTUP2开机程序至少应包括:1.更换仪器内水箱纯水一次。

自动生化分析仪试验参数设置

自动生化分析仪试验参数设置
自动生化分析仪 分析参数设置
张孝永
您遇到过这样的医疗纠纷吗? 您遇到过这样的医疗纠纷吗?
A医院的生化室使用全自动生化仪器,每天早上做两 医院的生化室使用全自动生化仪器, 医院的生化室使用全自动生化仪器 个水平的质控合格后才开始测试标本。某天, 个水平的质控合格后才开始测试标本。某天,检测了一例 病人标本ALT(丙氨酸氨基转移酶)结果为 病人标本 (丙氨酸氨基转移酶)结果为20U/L。生化 。 室的检验人员没有仔细检查其它项目就匆匆发了报告。 室的检验人员没有仔细检查其它项目就匆匆发了报告。 此人是一个严重的肝炎患者, 此人是一个严重的肝炎患者,当他拿到一个正常的 ALT结果的报告单,大为疑惑,于是第二天到另一家权威 结果的报告单, 结果的报告单 大为疑惑, 医院抽血化验,得到2500U/L的ALT报告,一场医疗纠纷 报告, 医院抽血化验,得到 的 报告 产生了!结果 结果……. 产生了 结果 检测人员很不理解,两个水平的质控都在靶值上, 检测人员很不理解,两个水平的质控都在靶值上,说 明试剂和仪器状态均正常, 明试剂和仪器状态均正常,为什么病人结果却相差如此悬 而且仪器也没有报警。 殊,而且仪器也没有报警。
延迟时间(Delay Time)
• 概念:指试剂与样本混合后到监测开始之间的时 间 • 应用:连续监测法或两点速率法法用 • 原因:酶与底物混匀后需要一定的时间才被激活, 直到线性期的零级反应后才能开始监测;有的项 目需要用工具酶将内源性代谢产物耗尽后才能监 测 • 方式: 以S“秒”或P(Point)测定点设置 • 项目和方法学不同时差别很大:CHE/CREA/ALT/ALP/CK/TBA
HITACHI P800 C501 OLYMPUS ABBOTT
• 样本与试剂的比例 样本与试剂的比例(SV:RV)即样本体积分数: 定义:样本体积与反应液总体积的比值(SV/TV) • 比例选择原则

全自动生化分析仪技术参数

全自动生化分析仪技术参数

全自动生化分析仪技术参数★1、全自动随机任选分立式,急诊优先测试;纯生化测试恒速≥800测试/小时,并可选配ISE模块,支持全血糖化功能,样本针自动吸取样本液面下的红细胞,自动吸取缓冲液和糖化试剂,无需手工吸取红细胞和缓冲液。

★2、生化测试恒速≥800测试/小时。

★3、开放试剂:试剂应全开放,实现成本控制,并可提供原厂配的试剂、质控、校准品、以保证溯源性。

(提供质控品、校准品注册证复印件及校准品溯源性报告复印件)。

4、测试原理:终点法、比浊法、两点法、动力学法。

5、常规样本位≥190个,更多的样本位可以减少加载样本的次数,减少检测流程工作时间,提高工作效率,支持原始样本管和微量样本杯。

★6、样品量:1.5µl-25µl,0.1µl步进。

7、样本盘具有防静电刷,抗静电干扰,增强液面检测可靠性,并提供实物照片验证。

8、样本针具有液面探测、随量跟踪、立体防撞、堵针检测、空吸检测功能,支持样本稀释测试,可设置稀释倍数。

★9、单盘试剂位≥180个,2~8℃24小时冷藏。

10、同时分析项目:生化≥180个,保证检测项目齐全。

★11、搅拌针≥4个,反应杯≥165个,比色杯光径≤5mm。

12、清洗机构:≥8组清洗针8阶自动温水清洗,保障反应杯清洗更彻底。

★13、单个测试最小反应体积≤80µl,最大反应体积≤300µl 。

携带污染率:≤0.1%。

14、反应杯:高透光塑料反应杯。

★15、恒温系统:固体直热,温控精度37℃±0.1℃,后续使用免维护保养和投入。

16、光学系统:多倍聚能聚焦全息式光栅技术,波长:340-850nm,≥12个波长,吸光度线性范围:0~3.4Abs。

17、80L/小时水处理一台、品牌电脑工作站及打印机一套、续航时间≥1小时UPS电源一个。

18、仪器具备远程维护功能,能够快速高效的解决仪器故障。

19、免费质保期3年(包含易损易耗件),质保期内免费提供维修配件。

浅谈全自动生化分析仪的实验参数设置及调试

浅谈全自动生化分析仪的实验参数设置及调试
因些 ,头孢 他啶可与上述 l 5 种注射剂配 伍。 2 . 2 头孢 他 啶与 奥硝 唑 、盐酸 氨溴索 、穿琥 宁配 伍的 稳定性 :头孢 他 啶 与奥硝 唑配 伍后 颜色 发生 改变 ;与穿 琥宁 配伍 ,配 伍液 的颜色 发生 改变 ,静 止2 0 mi n 后 出现油 脂样 改变 ,与盐酸 氨溴 索 也有配 伍
1 04 . 1 0 5.
中国药 物应 用与监 测, 2 0 0 8 , 5 ( 4 ) : 1 1 - 1 3 .
【 5 ] 钱琳 . 替硝 唑注 射 液与 三种 头孢菌 素 的配 伍稳 定性 考察 [ J ] . 药学
实 践杂 志, 2 0 0 8 , 2 6 ( 5 ) : 3 6 7 — 3 6 9 .
参考 文献
[ 1 ] 王海 平 , 赖 善 城, 简小 燕, 等. 头孢 他 啶在 木 糖醇 注 射 液 中的稳 定 性考 察 [ J 】 . 海 峡药 学, 2 0 1 0 , 2 2 ( 9 ) : 6 3 — 6 4 .
[ 1 1 ]潘 代 勇, 韦敏 . 长 春 西汀 与 3 种 头孢 类抗 生 素 配伍 的 稳定 性 考察
置 为开放 式 ,美系 及少数 欧 系仪器 多为 封 闭式 。封闭 式的仪 器一 般
也 会 留l O 个 检测 项 目左 右 的空 白通 道 作为开 放通道 , 自动生 化分 析 仪 的分析参数 一般分为基 本分析参 数和特殊 分析参数 】 。因此我 们有
2 0 0 8 , 1 1 ( 9 ) : 1 1 2 4 — 1 1 2 5 .
【 7 ] 翁春 梅 , 刘广 军 , 张娟 . 头孢 他 啶与 利 巴韦林 的配伍 稳 定性 [ J ] . 中 国 医院药 学杂 志, 2 0 0 7 , 2 7 ( 4 ) : 5 5 5 .

迈瑞全自动生化分析仪BS400参数设置

迈瑞全自动生化分析仪BS400参数设置

产品名称C3 C4 IGA IGM IGG GLU-HK GLU-POD方法学免疫比浊法 免疫比浊法 免疫比浊法 免疫比浊法 免疫比浊法 己糖激酶终点法氧化酶终点法 测定方法终点法 终点法 终点法 终点法 终点法 终点法 终点法反应方向上升 上升 上升 上升 上升 上升 上升结果单位mg/dl mg/dl mg/dl mg/dl mg/dl mmol/L mmol/L主波长340 340 340 340 412 340 510次波长700 700 700 700 700 412 660样本量 2 2 2 2 2 2 3试剂1量250 250 250 250 250 200 300试剂2量50 50 50 50 50 40线性段- - - - - - -反应起始时间41 41 41 41 41 41 0反映终止时间80 80 80 80 80 75 75孵育时间30 30 30 30 30 30 -底物耗尽限- - - - - - -反应度范围上限- - - - - - -反应度范围下限- - - - - - -第一试剂空白上限 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0第二试剂空白下限-5 -5 -5 -5 -5 -5 -5混和试剂空白上限- - - - - - -混和试剂空白下限- - - - - - -线性范围上限220 80 1000 400 2000 40 40线性范围下限0 0 0 0 0 0 0计算因数- - - - - - -初始速率限- - - - - - -产品名称HbA1C HB TG CHO HDL LDL ALP方法学免疫凝集法 比色法 酶法 酶法 直接测定法 直接测定法 SFBC速率法 测定方法终点法 终点法 终点法 终点法 终点法 终点法 动力学法 反应方向上升 上升 上升 上升 上升 上升 上升结果单位g/dL g/dL mmol/l mmol/l mmol/L mmol/L U/L主波长700 630 510 510 600 600 405次波长- - 700 700 700 700 540样本量 6 19 3 3 3 3 5试剂1量150 250 300 300 210 210 250试剂2量150 - - - 70 70 50线性段- - - - - - -反应起始时间44 0 0 0 41 41 55反映终止时间79 55 75 75 80 80 65孵育时间30 - - - 30 10 30底物耗尽限- - - - - - -反应度范围上限- - - - - - -反应度范围下限- - - - - - -第一试剂空白上限 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0第二试剂空白下限-5 -5 -5 -5 -5 -5 -5混和试剂空白上限- - - - - - -混和试剂空白下限- - - - - - -线性范围上限 2.06 23 35.0 50.0 3.9 25.8 800线性范围下限0.3 0 0 0 0 0 0计算因数- - - - - - 3298初始速率限- - - - - - -产品名称ALT AST GGT DBIL TBIL DBIL TBIL方法学IFCC速率法 IFCC速率法 速率法 重氮盐法 重氮盐法 钒酸盐氧化法 钒酸盐氧化法 测定方法动力学法 动力学法 动力学法 终点法 终点法 终点法 终点法反应方向下降 下降 上升 上升 上升 下降 下降结果单位U/L U/L U/L umol/L umol/L umol/L umol/L主波长340 340 405 560 546 450 450次波长410 410 540 700 700 546 546样本量20 40 10 20 20 10 10试剂1量200 200 200 200 200 200 200试剂2量40 40 40 - - 50 50线性段- - - - - - -反应起始时间55 55 55 0 0 41 41反映终止时间65 65 65 75 75 80 80孵育时间30 30 30 - - 30 30底物耗尽限- - - - - - -反应度范围上限- - - - - - -反应度范围下限- - - - - - -第一试剂空白上限 1.0 1.0 1.0第二试剂空白下限-5 -5 -5混和试剂空白上限- - - -混和试剂空白下限- - - -线性范围上限600 600 500 340 340 430 680线性范围下限0 0 0 0 0 0 0计算因数2090 2090 2630 - - - -初始速率限- - - - - - -产品名称TBA CRP RF ASO TP ALB 方法学循环酶法 免疫比浊法 免疫比浊法 免疫比浊法 双缩脲终点法 溴甲酚绿终点法 测定方法动力学法 终点法 终点法 动力学法 终点法 终点法 反应方向上升 上升 上升 上升 上升 上升 结果单位umol/L mg/dl IU/ml IU/ml g/L g/L 主波长405 340 340 600 540 630 次波长660 700 700 700 700 700 样本量 4 10 10 3 5 3 试剂1量270 250 200 250 300 300 试剂2量90 50 40 50 - - 线性段- - - - - -反应起始时间55 41 41 55 0 0反映终止时间65 80 80 65 75 8 孵育时间30 30 30 30 - - 底物耗尽限- - - - - -反应度范围上限- - - - - -反应度范围下限- - - - - -第一试剂空白上限 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0第二试剂空白下限-5 -5 -5 -5 -5 -5混和试剂空白上限- - - - - -混和试剂空白下限- - - - - -线性范围上限200 20 300 2000 200 100.0线性范围下限0 0 0 0 0 0 计算因数- - - - - -产品名称BUN UA APOA1 APOB CRE CRE 方法学尿酶UV法 尿酸酶POD法 免疫比浊法 免疫比浊法 氧化酶法 苦味酸法 测定方法动力学法 终点法 终点法 终点法 终点法 动力学法 反应方向下降 上升 上升 上升 上升 上升 结果单位mmol/L mg/dl g/L g/L mg/dl umol/L 主波长340 546 340 340 600 510 次波长660 700 700 700 700 660 样本量 2 4 2 3 3 15 试剂1量200 200 260 250 180 150 试剂2量40 40 65 50 60 150 线性段- - - - - -反应起始时间55 41 41 41 41 55反映终止时间65 80 80 80 80 65 孵育时间30 30 30 30 30 30 底物耗尽限- - - - - -反应度范围上限- - - - - -反应度范围下限- - - - - -第一试剂空白上限 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0第二试剂空白下限-5 -5 -5 -5 -5 -5混和试剂空白上限- - - - - -混和试剂空白下限- - - - - -线性范围上限500 2000 2.5 2.5 6000 2210 线性范围下限0 0 0 0 0 0 计算因数- - - - - -产品名称LDH HBDH CK AMY CK-MB 方法学乳酸基质速率法 紫外动力学法 DGKC法 Eps速率法 DGKC法 测定方法动力学法 动力学法 动力学法 动力学法 动力学法 反应方向上升 下降 上升 上升 上升 结果单位U/L U/L U/L U/L U/L 主波长340 340 340 405 340 次波长410 410 700 540 546 样本量 4 10 10 8(血)/4(尿) 10 试剂1量200 200 200 200 200 试剂2量40 40 50 40 50 线性段- - - - -反应起始时间55 55 55 55 55反映终止时间65 65 65 65 65 孵育时间30 30 30 30 30 底物耗尽限- - - - -反应度范围上限- - - - -反应度范围下限- - - - -第一试剂空白上限 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0第二试剂空白下限-5 -5 -5 -5 -5混和试剂空白上限- - - - -混和试剂空白下限- - - - -线性范围上限1000 400 1200 2400 1000 线性范围下限0 0 0 0 0 计算因数9807 4020 4180 9848血/19317尿 8360。

全自动生化分析仪参数

全自动生化分析仪参数

全自动生化分析仪参数
*1.系统概述:整机为原装进口全自动生化分析仪自带ISE系统。

2.测试速度:光学速度≥300测试/小时;ISE速度≥450测试/小时
3.检测通道数:可同时开展≥42个检测项目,ISE3个项目
4.项目数:项目参数最大可设置117个,ISE为3个;计算项目8个
*5.样本类型:血清、血浆、全血(HbA1c)
6.样本输入:装载容量:≥100个位置;条码自动阅读,样本自动检测功能;
真正即时急诊功能,运行中可随时添加样本
7.样本管类型:原始管,样本杯,微量杯,管内杯
8.样本反应量:1.0–35μL,以0.1μL步进
9.样本稀释功能:3–121倍,稀释〉100μL
10.样本凝块检测功能:有
*11.搅拌方式:超声波混匀方式
12.最小样本量:原始管:700μl;样本杯:100μl;微量杯:50μl
13.温控方式:使用循环水浴恒温系统,恒温精度37 0.1℃
14.重测/反射功能:自动,手工重测功能;系统自动反射功能
15.条码治理:具有试剂条码和样本条码治理。

*16.试剂:可提供原厂生产的配套试剂、定标品、质控品〔必须提供原厂注册证〕。

*17.必须由生产厂家提供安装、调试、培训服务,售后服务必须由生产厂家或区域总代理提供。

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自动生化分析仪的分析参数设置自动生化分析仪是一种把生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、恒温反应、自动监测、数据处理以及实验后清洗等步骤进行自动化操作的仪器,它完全模仿并代替了手工操作,目前已经成为医疗机构进行临床诊断所必可不少的仪器之一。

它的应用大大提高了生化检验的准确性、精密度和工作效率,适应了临床医学发展对检验医学的要求,然而这一切不仅需要生化分析仪的技术基础,也需要仪器内每个项目都有一组最优化的分析参数。

并且目前大多数生化分析仪为开放式,封闭式的仪器一般也会另外留一些检测项目的空白通道由用户自己设定分析参数,因此我们有必要了解生化分析仪各个分析参数的基本含义以及设置方法。

1.试验名称常以项目的英文缩写来设置,如总蛋白设置为TP,白蛋白设置为ALB等。

2.方法类型生化分析仪常用的方法有终点法、连续监测法、比浊法等,根据被检物质的检测原理等选择其中一种分析方法。

2.1终点法又称为平衡法,是基于反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其对光吸收强度的大小对物质进行定量分析的一类方法,有一点终点法和两点终点法两类。

一点终点法的特点是使用一种或两种试剂,当待测物与试剂反应达到终点时,测定混合溶液的吸光度来计算待测物的浓度,该法常用的有总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法、葡萄糖氧化酶法等,手工操作的大多数方法都是一点终点法。

两点终点法也称固定时间法,如果是单试剂分析,当测定波长同干扰物质的吸收光谱有重叠时,通过选用两点终点法可消除样品空白引起的干扰,其分析过程是在样品与试剂混合后经过一段延滞期读取一个点A1,一定时间后再读取A2,然后比较标准和测定的ΔA(ΔA=A2-A1)值,求得待测物的浓度。

肌酐苦味酸法就是一个典型的单试剂两点法的例子。

如果是双试剂分析,选用二点终点分析法除了可消除样品空白引起的干扰外,还可消除内源性干扰物质的干扰,其分析过程是加入试剂1后读取A1,加入试剂2后读取A2,A1相当于读出样品空白值,A2才是实际呈色反应,然后比较标准和测定的ΔA(ΔA=A2-A1)值,求得待测物的浓度。

为了提高终点法检测的准确性,选择该法时应设置终点法零点读数、样品空白等两个分析参数,前者是在反应前即开始读数,可以扣除反应前试剂和样品混合液的空白读数;后者是样品加空白试剂所得到的吸光度,反应需要占用一个比色杯。

2.2连续监测法又称动态分析法、速率法等,基本原理是在酶促反应的最适条件下,用物理、化学或酶促反应的分析方法,在反应速度恒定期(零级反应期)内连续观察和记录一定反应时间内底物或产物量的变化,以单位时间酶反应初速度计算出酶活力的大小和代谢物的浓度。

具体方法有两点速率法和多点速率法:两点速率法是通过观察在零级反应期内两个时间点的吸光度,用两个点的吸光度的差值(ΔA)除以时间(分),计算出每分钟的吸光度变化值;多点速率法是在零级反应期内每隔一定时间(2-30s)进行一次监测,连续监测多次,求出单位时间内的反应速度,这种方法又可分为最小二乘法、多点δ法、回归法、带速率时间法等。

该法具有明显的优点就是大大提高了分析速度和准确性,主要适用于酶活性及其代谢产物的测定。

在连续监测法过程中,即使不加样品,试剂中的底物也会自动降解得到一个结果,因此应设置试剂空白速率,不同批号试剂的试剂空白速率不一样,其值为以水代样品测得的项目结果,样品测定结果应扣除试剂空白速率的数值。

2.3比浊法自动生化分析仪一般只能做透射免疫比浊分析,当光线通过一定体积的含免疫复合物的溶液时,由于溶液中存在的抗原-抗体复合物粒子对光线的反射和吸收,引起透射光的减少,测定的光通量和抗原抗体复合物的量成反比。

它常用于终点法测定,目前主要用于血清特种蛋白的检测,如载脂蛋白、微量蛋白、急性时相反应蛋白、免疫球蛋白以及某些药物监测等。

但是如果样品中待测抗原浓度过高,抗原与抗体形成的免疫复合物分子将会变小,而且易发生解离,使浊度反而下降,因此免疫比浊分析过程中必须设置前区检查,比较分析过程中后两个读数点的差别,如果后一点比前一点的吸光度低,则表示抗原已过剩,应将样品稀释后重测。

3.反应温度自动生化分析仪通过温度控制系统保持温度恒定,以保证反应的正常进行,其保持恒温的方式有三种:干式恒温器加热、水浴式循环加热、恒温器循环间接加热。

恒温控制器可以对25℃、30℃、37℃三种温度进行恒温,根据需要可以任意选择,半自动生化分析仪恒温器属于这种。

全自动生化分析仪的温度控制器一般只能控制37℃一种温度,少数也可以控制30℃和37℃两种温度。

4.反应波长当测定体系中只有一种组分或混合溶液中待测组分的吸收峰与其他共存物质的吸收波长无重叠时,可选用单波长,如果待测物质有几个吸收峰,可选用吸光度最大的一个波长,或者选择在吸收峰处吸光度随波长变化较小的某个波长。

当被检溶液混浊或存在较多的干扰物质时,测定过程中会出现光散射和非特异性光吸收,从而影响测定结果的准确性,此时可用双波长甚至多波长测定,以提高测定结果的准确性,而在实际应用中选择辅助波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸的干扰。

由于脂质、血红蛋白、胆红素在较宽的波长范围内有较强的光吸收,常常同测定波长有重叠,此时测得的吸光度包含待测物质的吸光度和干扰物质的吸光度,因此必须选用合适的辅助波长来消除干扰物质的吸光度。

辅助波长的设置原则是根据测定波长选择辅助波长,要求干扰物质在测定波长同辅助波长有相同的吸光度。

5.反应方向有正向反应和负向反应两种,反应过程中吸光度增加为正向反应,吸光度下降为负向反应。

6.样品量与试剂量样品与试剂量的确定一般按照试剂说明书上的比例,并结合仪器的特性进行设置,亦可根据手工法按比例缩减或重新设计,但要考虑到检测灵敏度、线性范围,尽可能将样品稀释倍数大些,以降低样品中其他成分的影响。

在样品与试剂量的设置过程中主要应注意以下几个方面:①稀释水量,添加样品稀释水的是为了洗出粘附在采样针内壁上的微量血清,减少加样误差,添加试剂稀释水是为了避免试剂间的交叉污染,两种稀释水的量应在复溶试剂时按比例扣除。

如果采用液体试剂盒时因不再用水,无法扣除稀释水量,所以两种稀释水应尽量减少,以免试剂被过量稀释。

②最小样品量,即分析仪进样针能在规定的误差范围内吸取的最小样品量,随着技术的不断改进,仪器的最小样品量逐渐减小,目前有少至1.6μl的。

在样品含高浓度代谢产物或高活性酶浓度的情况下往往需采用分析仪的最小样品量作为减量参数,从而使仪器的检测范围上限得以扩大。

③总反应容量,在不同的分析仪有一个不同的规定范围,在设置的时候样品量和试剂量之和不能超过这一范围。

该值受仪器的光路系统所影响,直射式光路由于光束较宽,难于减少所测试反应液体积,集束式光路则是通过一个透镜使光束变窄,可检测低至180μl的反应液混合体,近年来又出现了点光源技术,它的光束更小,照射到样品杯时仅为一个点,可使反应液的量降至120μl。

④试剂量/样品量比值,不要为节省试剂而过分地减少试剂用量,因为在终点比色法中,缩小试剂量/样品量比值会降低线性范围,遇高浓度样本会因试剂量不足而使结果偏低。

7.分析时间分析时间包括孵育时间、延迟时间、监测时间等,选择不同的分析方法应选择相应的分析时间。

7.1孵育时间选择终点法时设置,在一点终点法是样品与试剂混匀开始至反应终点为止的时间,在两点终点法是第一个吸光度选择点开始至第二个吸光度选择点为止的时间。

在设置孵育时间时,有些分析方法要特别注意,如选择溴甲酚绿法测定血清白蛋白时,由于血清中α1-球蛋白、转铁蛋白等也可与溴甲酚绿呈色,尽管其反应速率较白蛋白为慢,但是实际上当血清与白蛋白混合时,“慢反应”已经发生,因此为减少非特异性结合反应,应在溴甲酚绿与血清混合后30s读取吸光度。

当选择酶法的Trinder反应测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯时,由于37℃酶反应较慢,因此必须测定这些酶试剂反应达到终点的时间,自动分析仪用试剂盒一般可以在全部加样后5分钟内反应完全,所以应选择分析仪的最大反应时间。

7.2延迟时间 选择连续监测法或两点终点法时设置,即在样品与反应试剂(第二试剂)混匀开始至第一个吸光度选择点之间的时间。

在连续监测法过程中,当酶与底物混合后需要一定的时间让酶激活,直至线性反应期才能开始监测,有的项目需要用工具酶将内源性代谢产物耗尽,消除干扰。

一般单试剂法只需要30s ,常用项目中谷氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶需要特别注意,但是对于双底物反应或需要辅酶参与者,通常为1-3min 。

7.3监测时间 酶促反应延滞期后,在过量底物的存在下,反应速率加快并达到稳定的阶段,即酶促反应以恒定的速率进行,不受底物浓度的影响,这段时间称为线性反应期或零级反应期,自动生化分析仪的监测时间即为此期。

连续监测法在零级反应期至少应监测90-120s 或至少4点(3个ΔA ),少于3个ΔA 不能称为连续监测法,因为不能计算线性度;监测时间过长则容易发生底物耗尽,可测范围变窄。

8.计算因子(F 值)和实测F 值 用连续监测法进行酶活性测定时,不需作标准管或标准曲线,根据摩尔吸光系数很容易进行酶活性浓度的计算。

先测定在线性范围内每分钟吸光度的变化(ΔA/min ),以U/L 代表酶活性浓度时,则可按下式进行计算:/min min U L 6ΔA ΔA V 10F =εv L ×××××式中V :反应体系总体积(ml );106:将mol 换算成μmol ;ε:摩尔吸光系数(cm 2/mol ); v :样品体积(ml );L :比色杯光径(cm )。

当条件固定时,从理论上讲V 、v 和L 均为固定值,ε值为常数,所以F 值是恒定的。

F 值对酶的测定十分重要,过高虽然测定的线性较宽,但重复性差,反之精密度虽好,但检测线性窄,因此应根据实际情况进行合理的设置和应用。

但是在临床实际工作中,仪器诸多因素如波长的准确性、半波宽的大小、比色杯光径及磨损与清洁度、温控的准确性、加样系统状况等若不符合要求或发生变化都会影响指示物的ε值或上述公式中的相关项,因此应在具体仪器条件下,定期检查和实际测定指示物的实测ε值和F 值。

因为纯NAD (P )H 溶液不稳定,所以NAD (P )H 的ε值需用葡萄糖己糖激酶法实测,实际操作为将某一浓度的葡萄糖溶液重复5-10次测定,得到相应的一组吸光度A 值,求出A ¯ ±s ,注意s 必须低于规定的批内允许值,再根据下面两个公式分别计算出NAD (P )H 的实测ε值和F 值:A ×V ε=××v C L ;661010V F A ==××ε××C v L式中C 为标准液浓度(mol/L )。

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