血脂各个项目的不同测定方法

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血脂脂蛋白及载脂蛋白测定

血脂脂蛋白及载脂蛋白测定
(2)Zak反应 胆固醇经冰醋酸,浓硫酸脱 水生成3.5-胆烷二烯阳离子,然后在Fe3+存 在下氧化生成紫红色胆烷四烯阳离子,灵敏 度较L-B反应高7倍,且呈色稳定性好,但试 剂腐蚀性极大,不能用于自动化分析。
血脂脂蛋白及载脂蛋白测定
2、酶法
胆固醇酯
CE胆H 固醇 + 脂肪酸
胆固醇 + O2 ChOD胆烷-4-烯-3酮 +H2O2 H2O2 + 4AAP +酚 POD 红色亚胺醌 + H2O
病理性低胆固醇血症 严重贫血、甲亢、营 养不良。
血脂脂蛋白及载脂蛋白测定
(三)血清甘油三脂测定
TG是有一分子甘油与三分子脂肪酸组成 的化合物,主要存在于VLDL和CM中,临 床化学中往往以测定甘油代表TG的含量。 TG的测定方法很多,如气相色谱法、高效 液相色谱法、红外分光光度法。但上述方 法需特殊的仪器设备和技术,故一般只用 于研究工作中。临床实验室主要用化学法 和酶法。
HDL2 d = 1.063~1.125g/ml
HDL3 d = 1.125~1.210g/ml
HDL2脂类60% 蛋白质40% ;
HDL3脂类45% 蛋白质55%
血脂脂蛋白及载脂蛋白测定
高密度脂蛋白亚组分的分析方法有超速 离心法、柱层析法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、 多价阴离子分级沉淀法。
其中多价阴离子分级沉淀法具有快速、经 济、简便更为实用,是目前临床实验室最常 用的方法。常用的沉淀剂有硫酸葡聚糖Mg2+、聚乙二醇(PEG)。
作剧烈运动。 3.应在禁食12~14小时后空腹抽血。 4.除卧床的患者外,一般应坐位休息5分钟后抽血。 5.抽血前最好停用影响血脂的药物数天或数周,否
则应记录用药情况。
血脂脂蛋白及载脂蛋白测定

血脂测量技术实验报告

血脂测量技术实验报告

血脂测量技术实验报告引言血脂是指人体内血液中的脂质类物质,包括胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白等。

血脂的测量对于评估身体健康状况以及预防心血管疾病具有重要意义。

本次实验旨在比较不同血脂测量技术的准确性和可靠性,为临床血脂测量提供参考。

实验材料1. 血液样本(包括胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白)2. 血脂测量仪器(包括光度计、离心机和试剂盒)3. 试剂(用于血脂测量的试剂盒)实验步骤步骤一:血样采集和离心1. 选择实验对象,采集空腹血样。

2. 将血液样本倒入离心管中,在3000rpm离心5分钟。

步骤二:血脂测量仪器校准1. 打开血脂测量仪器,根据说明书进行仪器校准。

2. 选择相应的测试项目,如胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白。

步骤三:血脂测量1. 取出离心管中的上清液,将其加入试剂盒中。

2. 打开光度计,将试剂盒放入光度计进行测量。

3. 根据仪器显示结果,记录血脂测量值。

步骤四:统计和分析数据1. 将实验数据整理成表格,包括不同血脂指标的测量值。

2. 对数据进行统计学分析,如计算平均值和标准差。

结果与讨论实验结果显示,不同的血脂测量技术在测量血脂指标时存在一定的差异。

通过比较不同技术的测量结果,可以得出以下结论:1. 不同技术的血脂测量结果相对一致,测量的可靠性较高。

2. 在本次实验中,校准后的血脂测量仪器表现出较高的准确性和可靠性。

3. 不同血脂指标的测量结果之间存在一定的相关性,如胆固醇和低密度脂蛋白之间的关系。

然而,需要注意的是,本次实验的结果仅为实验室测量结果,并不能直接应用于临床医学。

在实际应用中,还需结合临床病史和其他检查结果进行综合分析和诊断。

结论血脂测量技术对于评估身体健康和预防心血管疾病具有重要意义。

本次实验结果表明,校准后的血脂测量仪器具有较高的准确性和可靠性。

然而,在临床应用中还需综合考虑其他因素,并进行进一步的研究和改进。

参考文献[1] 张三, 李四. 血脂测量技术的研究进展. 《医学科学进展》,2019,23(3): 231-238.[2] 王五, 赵六. 不同血脂测量技术的比较研究. 《测试与测量技术》,2020,45(2): 98-105.。

血脂六项讲解

血脂六项讲解

血脂六项讲解
血脂六项检查主要包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A和载脂蛋白B。

这些检查项目的主要目的是评估患者的健康状况,以及是否需要用药来调节血脂水平,以降低发生动脉粥样硬化等心脑血管疾病的风险。

其中,总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的水平是主要的参考指标。

如果血浆中的总胆固醇水平超过/L、低密度脂蛋白超过/L,或者甘油三酯水平超过/L,就可以称之为高脂血症。

甘油三酯是人体含量最多的脂类,是脂肪的主要成分,也是体内储量最大和产能最多的能源物质。

血清甘油三酯增高可见于家族性高甘油三酯血症,和继发于某些疾病如糖尿病、甲状腺功能减退、肾病综合征和胰腺炎、动脉粥样硬化、糖原贮积病等。

而甘油三酯的病理性降低则与甲状腺功能亢进症、肾上腺皮质功能降低、肝功能严重低下、慢性阻塞性肺疾患、脑梗塞、营养不良、先天性α-β脂蛋白血症等疾病有关。

如果总胆固醇超过/L,甘油三酯超过/L,可以先通过饮食、运动调理。

如果治疗1~2周后血脂仍持续增高者,需要应用药物治疗。

平时要注意清淡饮食,不要吃高热量的食物。

总的来说,血脂六项检查是一项重要的健康检查项目,它可以帮助人们了解自己的血脂状况,预防和及时治疗与高血脂相关的疾病。

如有任何疑问,建议咨询医生以获得专业诊断和建议。

检测血脂的化学方法

检测血脂的化学方法

检测血脂的化学方法血脂是指血液中的脂质物质,包括胆固醇和甘油三酯等。

血脂的检测对于评估人体健康状况和预防心血管疾病起着重要作用。

下面将介绍一种常用的化学方法来检测血脂。

血脂检测方法的原理是通过化学试剂与血液中的特定成分发生反应,产生可测量的信号来确定血脂含量。

其中一种常用的方法是酶法。

酶法是通过酶促反应来检测血脂中的特定成分。

以胆固醇检测为例,首先需要将血液样品与试剂混合,在一定的温度下进行搅拌。

试剂中的酶会与血液中的胆固醇反应生成一种可测量的产物。

产物的含量可以通过光密度或颜色的变化来测量。

这种酶法检测血脂的方法有其优点和局限性。

优点之一是可以快速、准确地测量血液中的胆固醇含量。

此外,这种方法还可以测量其他重要的血脂指标,如甘油三酯。

然而,酶法也存在一些局限性。

首先,酶法是一种间接测量方法,它通过测量反应产物来推算出血脂的含量。

这个过程中可能存在误差,影响结果的准确性。

其次,这种方法对试剂的质量和操作的标准要求较高,如果不严格控制实验条件,可能会产生较大的误差。

除了酶法,还有一些其他化学方法可以用来检测血脂。

比如,光度法是一种通过测量血液中特定物质对光的吸收能力来确定血脂含量的方法。

这种方法的原理是根据特定物质对特定波长的光吸收的特性。

通过测量光的强度变化,可以计算血脂的浓度。

此外,还有一些色谱法、电化学法等也可以用来检测血脂。

这些方法通常需要专业的设备和技术支持,其优点是测量结果准确可靠,但相应地也增加了检测的成本和时间。

总的来说,血脂的化学检测方法在临床中具有重要的应用价值。

不同的方法各有优缺点,选择合适的检测方法需要根据具体的情况来进行权衡。

在进行血脂检测时,应该严格按照操作规范来进行,以保证测量结果的准确性和可靠性。

血脂检测不仅可以帮助医生评估患者的健康状况,还可以提醒患者注意饮食和生活习惯的调整。

通过检测血脂,可以及早发现和预防心血管疾病的发生,保障人们的身体健康。

因此,对于个人和社会而言,血脂的检测都具有重要的意义。

血脂和脂蛋白检测方法

血脂和脂蛋白检测方法

血脂和脂蛋白检测是评估血液中脂质代谢状况的常见方法。

下面是几种常用的检测方法:
1. 血液样本采集:在进行血脂和脂蛋白检测之前,需要抽取一定量的静脉血液样本。

常用的采血方法是在手腕、手臂或手背处使用安全针针头进行采血。

2. 总胆固醇(TC):血液中的总胆固醇含量是评估脂质代谢的一个重要指标。

总胆固醇检测常常通过血液生化分析仪器来测定,这些仪器可以测量血液中胆固醇的浓度。

3. 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C):LDL-C 是致动脉粥样硬化的主要因素之一。

测量LDL-C 的常见方法是使用直接法或间接法。

直接法通过将血液样本中的LDL-C 直接测量出来。

间接法通常使用血液生化分析仪器,计算得出LDL-C 的浓度。

4. 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C):HDL-C 被认为是“好胆固醇”,具有保护心血管健康的作用。

测量HDL-C 通常使用血液生化分析仪器,通过测定血液样本中HDL-C 的浓度来进行评估。

5. 三酰甘油(TG):三酰甘油是血液中最常见的脂质之一,它通常与胆固醇一起进行检测。

血液生化分析仪器可以测量血液中TG 的浓度。

6. 脂蛋白:脂蛋白是一种将脂质从一个部位输送到另一个部位的复合物。

脂蛋白检测通过血液生化分析仪器,可以评估血液中不同类型脂蛋白的浓度和比例,如低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等。

这些是常见的血脂和脂蛋白检测方法,具体的检测项目和方法可根据医生或实验室的要求进行选择。

在进行检测之前,建议咨询医生或专业人员,以了解具体的检测方法和准备事项。

临床血脂的测定与标准化研究新进展

临床血脂的测定与标准化研究新进展

临床血脂的测定与标准化研究新进展摘要】临床血脂的测定项目以血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)为主,脂蛋白(a)、载脂蛋白A1和载脂蛋白B亦较为常见;对于TC、TG的测定方法以化学法和酶法为主,LDL-C、HDL-C的测定方法以超速离心结合化学抽提法为主,脂蛋白(a)、载脂蛋白A1和载脂蛋白B的测定方法以酶联免疫吸附试验、免疫浊度法为主;TC、TG具有完整的参考系统,一级参考物质、参考方法均较为明确,LDL-C、HDL-C、脂蛋白(a)、载脂蛋白A1和载脂蛋白B均尚缺决定性方法、一级参考物质。

【关键词】血脂;标准化研究;测定【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2017)24-0008-02New progress in the determination and standardization of clinical blood lipids【Abstract】The clinical determination of blood lipid in serum total cholesterol (TC), three glycerol (TG), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), lipoprotein (a), apolipoprotein A1 and apolipoproteinB are more common; for the determination of TC and TG by chemical method and enzyme method, the determination of LDL-C, HDL-C by ultracentrifugation combined with chemical extraction, lipoprotein (a), method for the determination of apolipoprotein A1 and apolipoprotein B by enzyme-linked immunosorbent assay, immune turbidimetric method; TC, TG has a complete reference system the primary reference material and reference methods are more clear, LDL-C, HDL-C, lipoprotein (a), apolipoprotein A1 and apolipoprotein B, decisive methods are still lack of a reference material.【Key words】Blood lipid; Standardization; Determination临床血脂的测定对于诊断心脑血管疾病、评估疾病发生风险和病情严重程度、指导临床治疗均具有积极作用,具有重要的临床意义[1]。

脂蛋白和脂质测定方法学评价

脂蛋白和脂质测定方法学评价

脂蛋白和脂质测定方法学评价血浆脂蛋白和脂质测定是临床生物化学检验的常规测定项目,其临床意义主要是:早期发现与诊断高脂蛋白血症,协助诊断动脉粥样硬化,评价动脉硬化疾患如冠心病和脑梗死等危险度,在监测评价饮食与药物治疗效果等方面有重要的临床意义。

一.血浆脂质测定(1)总脂质测定血清总脂质主要包括FC,CE,PL和TG 等测定方法分两大类:一类是抽提法,另一类是直接测定法,无需抽提。

参考范围成人4.0-7.5克/升儿童3.0-6.0克/升(2).总胆固醇测定血清中总胆固醇包括CE和FC,脂型的CE占70%,游离型FC占30%。

血清总胆固醇测定方法分为化学法和酶法两大类。

目前常规应用酶法测定,快速准确,标本用量少,便于自动生物化学分析器做批量测定。

参考范围成人 2.8-5.2mmol/升,儿童<4.4mmol/升。

(3).甘油三酯测定甘油三酯又称中性脂肪,由于其甘油骨架上分别结合3分子脂肪酸,2分子脂肪酸或1分子脂肪酸,所以分别存在有甘油三酯(TG),二酰甘油(DG)和一酰甘油(MG)。

血清中90%-95%是TG,TG中结合的脂肪酸分别为油酸(44%),软脂酸(26%),亚油酸(16%)和棕榈油酸(7%)。

血清中TG的化学组成并不单一,准确求其分子量较为困难。

因标准不同,测定结果存在差异。

参考范围成人1.7mmol/L( 4.)磷脂测定磷脂(PL)并非单一的化合物,而是含有磷酸基和多种脂质的一类物质的总称。

血清中PL包括:1.卵磷脂(60%)和溶血卵磷脂(2%-10%),2.磷脂酰乙醇胺等(2%),3.鞘磷脂(20%).血清PL定量方法包括测定无机磷化学法和酶法两大类,以酶法广泛应用于临床自动化监测。

参考范围成人0.56-1.7mmol/L(5)游离脂肪酸测定临床上将C10以上的脂肪酸成为游离脂肪酸(FFA)。

正常血清中含有油酸(18:1)占54%,软脂酸(C16:1)占34%,硬脂酸(18:1)占6%,是其主要的FFA。

诊断学血脂检查

诊断学血脂检查

【临床意义】

TC↑∝年龄↑,性别差别不大
01
TG ↑∝年龄↑,F > M
02
LDL ↑∝年龄↑
03
HDL性别差别不大
04
结果异常,重复检测后再作判断
05
判断结果应考虑方法,是否空腹,饮食
06
习惯,地区差异等分析前因素对血脂测定
07
的影响
08
血浆脂蛋白及血脂参考值
6
C M 代 谢
极低密度脂蛋白(VLDL) VLDL是血液中第二种富含甘油三酯的脂蛋白,密度为,呈球形,核心部分为非极性脂类,表面为单层极化分子。VLDL主要在肝合成,是内源性甘油三酯的转运形式。
IDL LDL (Apo-100 )
01
表面残基(PL FC Apo-C) HDL
TG
CⅡCⅢ E
奶油层 混浊
LPL缺陷CM VLDL处理↓
继发性高脂蛋白血症
SUMMARY
血脂成分 脂蛋白分类 脂蛋白代谢 临床意义
思 考 题
试述高脂蛋白血症的分型。
病案分析
简述LDL受体途径过程。
某女,73岁,两年前患者出现头痛、头晕,测
1
血压高,最高达200/100mmHg,此后多次查血压
血 浆 脂 蛋 白
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概 述
血浆(清)脂类测定又称血脂测定,是临床生化常规检查的重要项目。由于脂类代谢紊乱所致的心脑血管疾病的发生有上升趋势,其死亡率已超过癌症而位居第一。
血脂和血浆脂蛋白
血脂是指血浆中的脂类。 血浆胆固醇(Chol)和甘油三酯(TG)含量增高与动脉硬化有密切的关系,是堵塞性心脑血管疾病的主要病因。因此,定期检查血脂、了解血脂变化趋势对防治这类疾病具有十分重要的意义。
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血清脂类测定
血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。

目前,对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程,均必须检测血浆(清)中的脂类,通过其含量的变化,对临床疾患提供协助诊断的依据。

有关医学科研工作,脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。

1.胆固醇测定
血浆中胆固醇及其酯的含量检测,从方法学上可分为两大类:一类是化学法包括抽提法和直接测定法,这类方法目前仍在沿用;另一类是酶法测定,方法敏感特异快速,并能自动化分析,已常规应用。

化学测定法种类多,由于显色反应的特异性不同,其结果有一定的差异。

目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B
反应)法。

另外,三氯化铁-硫酸反应法(Zak法)具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法,胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点,缺点是特异性差,干扰因素比L-B法多,如冰醋酸中含有的乙醛酸,血清样品中的血红蛋白,胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性,Zak法更适合于科研使用。

酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用,国产试剂已能满足临床的需要。

胆固醇测定用的标准品,按美国国家标准局(NBS)出品纯度达99.8%,是国际公认的参考物,国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品,已供临床检测血清胆固醇使用。

2.甘油三酯测定
血浆甘油三酯的测定,目前多以化学法和酶法定量。

化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性,水解成甘油,并以甘油为计算依据。

酶法是以特异酶水解甘油三酯,除去脂肪酸,再测定甘油,方法特异,准确而快速,临床广为应用。

目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据,然而血清样品中存在有游离甘油,如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油,多年来一直在研究讨论这一问题。

若不减去,其测定值将会高于血清样品中的真值,如果要减去,就必须先测出血清样品中的游离甘油,甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤,实际工作中难以做到。

有报道血清样品中的游离甘油实际量是0.07~0.13mmol/L,相当于甘油三酯的0.5~6.0mmol/L,为此建议,实测的甘油三酯量减去一个校正系数即:
甘油三酯(mmol/L)=[0.98×总甘油(mmol/L)]-0.07(mmol/L)。

这一校正系数也仅适用于健康人,对临床病人并不一定适用。

据报道,血清样品的游离甘油一直是个未知数,无法测准。

为此,目前临床测定血清甘油三酯时,基本上未考虑游离甘油,因为其含量很少,暂且忽略不记。

甘油三酯测定的参考物,推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物(2:1,W/W),此参考物适用于化学法。

在酶法测定中,仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。

3.磷脂测定
血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。

如需要分别检测各种磷脂,可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。

目前,临床仅测定血清磷脂总量。

血清磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。

化学法是以磷脂中的磷为定量依据,因为每磷脂分子中都含有一个磷酸根,故将磷脂的磷称为脂性磷。

由于血清中磷脂大部分为卵磷脂,其分子量中磷约占4%,故将脂性磷换算成磷脂的系数,一般为25。

由于化学法均需要抽提,再测抽提液中的磷脂的磷,血清中的磷酸盐不可能混入抽提液中,因此血清中的磷酸盐对磷脂测定的干扰很少。

酶法是利用磷脂酶进行定量测定。

生物体中磷脂酶包括磷
脂酶A
1、A
2
、C和D四种。

磷脂酶D特异性差,均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和
神经磷脂,三者约占血清总磷脂的95%,临床多用含磷脂酶D 的试剂进行磷脂的定量测定。

4.游离脂肪酸测定
游离脂肪酸属于未酯化的一类脂肪酸,故又称为非酯化脂肪酸,其量很少,采用方法必须是灵敏的方法,还需要避免脂肪水解产生脂肪酸的干扰。

测定方法有:①滴定法需要微量滴定装置,因为要通过肉眼观察颜色,难免会有主观因素的影响,所以难以测定准确,很难用于常规;②光度法,以铜皂法常用;③酶法,主要采用特异性不强的脂肪酶D进行检测,方法特异,快速准确,已常规应用于临床。

第一节胆固醇测定
血清中胆固醇包括CE和FC,酯型的CE占70%,FC占30%。

CE中的C
3
的-OH在LCAT作用下,可分别结合亚油酸(43%)、油酸(24%)、软脂酸(10%)、亚麻油酸(6%)、花生四烯酸(6%)、硬脂酸(3%)等脂肪酸结合而成。

血清中胆固醇在LDL中最多,其次是HDL和VLDL、CM最少。

血清总胆固醇测定方法分为化学法和酶法两大类。

1.化学法
化学法一般包括:①抽提;②皂化;③毛地黄皂苷沉淀纯化;④显色比色四个阶段。

代表性的方法有Sperry-Webb法,通过①~④步骤操作过程。

常规操作中多采用省去了②、③。

或者用省去②、③步骤的Zak-Henly法及省去③步骤的Abell-Kendall法,现将此法作为标准参考方法予以引用。

2.酵法测定
CE在胆固醇酯酶(cholesterol esterase)作用下水解成FC和NFFA,TC再经
胆固醇氧化酶(cholesterol oxidase,COD)氧化成△4胆甾烯酮和H
2O
2。

再分别
定量O
2的消耗或者H
2
O
2
的生成量,或者△4胆甾烯酮生成量,以作为TC的定量依
据。

该法是目前常规的应用方法,快速准确,标本用量少,便于自动生化分析仪作批量测定。

一、Abell-Kendall改良法
1.原理
血清加入醇溶性氢氧化钾,使胆固醇从脂蛋白中分离出来,同时使胆固醇酯加水分解成游离胆固醇,加石油醚振摇、抽提,使胆固醇移入石油醚层,分离并取一定量的石油醚层,蒸发至干,再进行Liebermann-Burchard 显色反应,620nm 比色定量。

该法可用于基本功训练及组织细胞胆固醇的提取定量。

2.试剂组成
代号种类浓度组成贮存
2~
8℃
有效时间
R1 乙醇优质纯
R2 石油醚沸点68℃,特级纯R3 水醋酸分析纯
R4 无水醋酸胆固醇分析用,不含HCI
R5 浓硫酸分析纯
R6 KOH液33%(W/W) KOH10g+H
2
O20ml
R7 乙醇性KOH液R194ml+R66ml 临用前配制R8 Liebermann 配制后
Burchard R420体积+R51体积
+R310体积
1h
试剂* 内用完
R9 胆固醇标准液 5.17mmol/L 胆固醇标准品
200mg+R1→100ml
*:在三角烧瓶内,加入无水醋酸,于冰水中冷至10℃以下,再慢慢加入浓硫酸,混合,静置10min,又加冰醋酸混匀,备用。

3.操作
图15-1 血清胆固醇(Abell法)测定操作图4.计算
标准总胆固醇浓度=E
SA /E
ST
×5.17(mmol/L)
二、酶法(CEH、COD-POD法)
首先将血清中胆固醇酯在胆固醇酯酶(CEH)水解为游离胆固醇和脂肪酸,胆固
醇在胆固醇氧化酶(COD)作用下,生成△4-胆甾烯酮和H
2O
2
,再H
2
O
2
经过氧化
物酶(POD)作用在4-氨基安替比林(4-AA-P)及N-乙基-N-(3-磺基醋酸)-3甲氧基苯胺(N-ethyl-N-(3-sulfopropyl)-manisidine,ESPAS)参与下,生成红色醌亚胺色素。

H2O2+ESPAS+4-氨基安替比林→红色醌亚胺色素
(一)手工测定法
1.试剂组成
代号种类浓度组成贮2~8℃有效时间
Na
2HPO
4
50mmol/L
Na
2H
2
PO
4
50mmol/L
胆酸钠3mmol/L
4-氨基安替比林0.82mmol/L
R1* ESPAS 14mmol/L 24h Carbowax-6000 0.17mmol/L
CEH 33U/L
COD 117U/L
POD 6700U/L
R2 标准液 5.17mmol/L 用异丙醇溶解胆固醇
*混匀,调pH至6.70±0.10(25℃),或购买试剂盒。

酶以活性单位表示。

2.操作
按图15-2操作。

3.计算
标准总胆固醇浓度=E
SA /E
ST
×5.17(mmol/L)
(二)自动化分析仪测定
以CL-7200型全自动生化分析仪检测为例。

1.试剂组成
A液:CEH、POD、抗坏血酸氧化酶等。

B液:COD、4-氨基安替比林等。

图15-2 血清胆固醇测定(酶法)操作图
2.上机参数
项目参数
方法终点法
波长双波长(540nm,700nm)
反应温度37℃
试剂A反应时间2~3min
试剂B反应时间5~6min
样本用量3μl
试剂A用量250μl
试剂B用量120μl
单位mmol/L
3.操作过程
4.计算
以△A=A2-A1,根据同样处理之标准或质控物计算,打印结果。

5.注意事项
(1)试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。

(2)试剂在有效内2~8℃避光食保存。

(3)胆固醇含量超过200mmol/L,需用生理盐水稀释再测。

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