不同类型银杏叶中银杏内酯的含量测定
高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定银杏叶片中4种萜类内酯含量
［ 摘 要 ］ 目 的 优 化 银 杏 叶 片银 杏 萜 类 内酯 Ａ Ｂ、 、 Ｃ及 白 果 内酯含 量 测 定 方 法 。 方 法 采 用 高效 液相 色谱 一 发 蒸
光散 射 检 测 法 （ Ｐ ＣＥ Ｓ ， Ｈ Ｌ —Ｌ Ｄ） 色谱 柱 ：ｕｉ ｈ ｒ ｔ — ｌ ４ ６ｍ ×２０ｍｍ， ｍ） 以 Ａ ： （ １： ９ ［ 四 氢呋 喃一 Ｐ ｒ ｐ ｅ ｓ ｒＣ８ ． ｍ ５ ｓ ａ （ ５Ｉ ， ｘ Ｂ ３ ６ ） Ａ： 乙腈 一
法及 流 动相进 行优 化 ， 善 和 提 高 了 ４种 萜类 内酯 的 改
测 器 检 测 ， 气 ： 气 ， 力 ：５ Ｐ ； 移 管 温 度 ： 载 氮 压 ３０ ｋ ａ 漂 ４ ０℃ ； 阈值 ：． 进 样 量 ： 照 品溶 液 ３ ７ Ｉ ， 试 增 ６ ０； 对 ， Ｌ 供 ｘ 品溶 液 ５ Ｌ 外标 两 点法对 数 方程分 别计 算 。 ，
［ 中图分 类号 ］ Ｒ ８ Ｒ ２ ． ２ ６；９ ７ １
［ 文献标识码 ］ Ａ
［ 文章编号 ］ １０ ０ ４—０ ８ （０ ０ ０ ０ ７ ７ １ ２ １ ） ５— ６ ５—０ ３
银 杏 叶片 收 载 于《 中华 人 民共 和 国药典 ） ０ ５年 ２０
版 一部 。笔 者通 过实 验 研 究 ， 供 试 品溶 液 的制 备 方 对
HPLC-ELSD法测定银杏叶茶中总内酯的含量
HPLC-ELSD法测定银杏叶茶中总内酯的含量目的：采用RP-HPLC法测定低酚酸银杏叶保健茶中总内酯的含量。
方法：采用Agilent C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以甲醇－四氢呋喃－水（25∶10∶65）为流动相，柱温为30℃，蒸发光散射检测器检测。
结果：银杏叶保健茶中银杏内酯A、银杏内酯B、银叶内酯C和白果内酯的进样量的对数与峰面积的对数线性关系较好，线性范围分别为0.485～9.701 μg、0.460～9.204 μg、0.501～11.899 μg、0.935～18.703 μg；银杏内酯A、银杏内酯B、银叶内酯C和白果内酯加样回收率分别为100.45%（RSD为2.79%）、98.29%（RSD为2.90%）、98.22%（RSD为2.53%）、101.32%（RSD为1.81%）。
结论：本方法简便、准确、分离效果好，适合于银杏叶茶总内酯的含量测定。
[Abstract] Objective: To establish an RP-HPLC method for quantitative determination of Ginkgolides in teas of Ginkgo biloba. Methods: The evaporation light scattering detector(ELSD) were employed. The analytical column was C18 column (4.6 mm× 250 mm, 5 μm). The mobile phase was composed of methanol-tetrahydrofuran-water(25∶10∶65) at a flow rate of 1.0 ml/min. Results: The logarithm value of sample size had a good linear relationship with the logarithm value of peak area when the sample size of ginkgolide A,B,C and bilobalide was 0.485～9.701 μg, 0.460～9.204 μg, 0.501～11.899 μg, 0.935～18.703 μg respectively. The average recovery was 100.45%(RSD=2.79%), 98.29%(RSD=2.90%), 98.22%(RSD=2.53%), 101.32% (RSD=1.81%) respectively. Conclusion: This method is sensitive, repeatable and suitable to determine the content of total Ginkgolides in teas of Ginkgo biloba.[Key words] Teas of Ginkgo biloba; Ginkgolides; Determination银杏叶保健茶是由市售银杏叶经过净选、洗净、烘干、粉碎及超临界二氧化碳萃取、分装等工序制备出的袋泡茶剂[1]。
银杏雌树长枝不同叶位叶萜内酯含量变化及分布规律
Ｇｉ ｎｋ ｇｏ ｂ ｉ ｌ ｏ ｂ ａ ａ ｍｏ ｎｇ ｌ ｅ ａ ｖ ｅ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ ｄｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎｔ ｐｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ ｆ ｅ ｍａ ｌ ｅ ｌ ｏ ｎｇ —
ｂｒ ａ ｎ ｃ ｈ
ＬＩ ＡＯ Ｙｏ ｎ ｇ — ｌ ｉ ｎ ｇ ， ＣＨＥＮＧ Ｓ ｈ ｕ ｉ ， ｙ ｕ ａ ｎ ， ＸＵ Ｆ ｅ ｎｇ ， ＷＡＮＧ Ｙ ａ ｈ
第３ ３ 卷 第１ １ 期 ２ ０ １ ３年 １ １月
中 南 林 业 科 技 大 学 学 报
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｃｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｌ Ｓ ｏ ｕ ｔ ｈ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｆｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ＆ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ
、 ， ｏ １ ． ３ ３ Ｎｏ ．１ １
Ｎｏ ｖ． ２ ０Ｉ ３
银杏雌树长枝不 同叶位叶萜内酯含量变化及 分布规律
廖咏 玲 。 ， 程水源 ， 许 锋 ， 王 燕
（ １ ． 南京林业 大学 森林 资源与环境学院 ，江苏 南京 ２ １ ０ ０ ３ ７ ；２ ． 长 江大学 园艺 园林学院，湖北 荆 州 ４ ３ ４ ０ ２ ５ ；
３ ． 黄 冈师范学院 经济林木种质 改 良与资源综合 利用湖北省重点实验 室 ，湖北 黄 冈 ４ ３ ８ ０ ０ ０ ；
HPLC-RID法测定银杏叶片中4种萜类内酯的含量
称取辅料淀粉 ２ ３ ． ４ ９ ｍ ｇ ， 糊精 ７ ． ２ ４ ｍｇ ， 微 晶纤
岛津 Ｌ Ｃ — ｌ Ｏ Ａ Ｔ ｖ ｐ 高效液相色谱仪 、 Ｒ Ｉ Ｄ 一 １ ０ Ａ示
差 折 光 检 测器 ， 甲醇 （ 色谱 醇 ） 、 银 杏 内酯 Ａ（ Ｇ Ａ） 、 Ｂ
果 内酯 Ｙ ＝ Ｉ ． ０ ２ ３ ＋ ４ ． ５ ３ ６ ６ ， Ｒ 。 为０ ． ９ ９ ８ ２ ；银 杏 内
精 密称 取 Ｂ Ｂ、 Ｇ Ａ、 ＧＢ 、 Ｇ Ｃ对 照 品 ， 制成 每 １ ｍＬ 分别 含 １ ｍｇ Ｂ Ｂ、 １ ｍｇ Ｇ Ａ、 １ ｍ ｇ Ｇ Ｂ、 ０ ． ５ ｍ ｇ Ｇ Ｃ 的 混合 甲醇溶 液 ， 作为 对照 品溶 液 。 ２ ． ３ 供试 品 溶液 的制 备
中 药 制 剂 ＂ １ － 程 与 技 术
］ ｌ ＝ ｔ ” ． ＿ ．
２ ０１ ３年
詹 ／ ｊ ｆ 阮学 诼
第 １ ４卷 第 ３期
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ — Ｒ Ｉ Ｄ法测定银杏 叶片中 ４种萜类 内酯 的含量
窦国义 ， 高宝益 ， 李红梅 。
（ １ ． 天津生物工程职业技术学院 ， 天津 ３ ０ ０ ４ ６ ２ ； ２ ． 山西药科职业学院 ， 山西 太原 ０ ３ ０ ０ ３ １ ； ３ ． 太原大宁堂药业有限公司 ， 山西 太原 ０ ３ ０ ０ ３ ２ ）
１ ０ ｍ Ｌ 、 １ ０ ｍ Ｌ 、 １ ０ ｍＥ ） 。 合并 提取 液 ， 用５ ％醋酸 钠洗
及抗菌。 中国药典 ２ ０ １ ０ 年版规定其所含萜类 内脂含
量测 定 方法 为 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ — Ｅ Ｌ Ｓ Ｄ Ｅ ” ， 本 实 验 拟采 用 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ — Ｒ Ｉ Ｄ法测 定银 杏 内酯含 量 ，为 银杏 叶片 生产 企业 制 定 内控 标 准提 供依 据 。
银杏不同部位黄酮、内酯和银杏酸含量分析
银杏不同部位黄酮、内酯和银杏酸含量分析吴竹;王秋萍;田漫漫;王黔阳;何珺【摘要】为分析银杏不同部位黄酮、内酯和银杏酸含量,采用高效液相色谱法测定其含量,研究其分布规律.结果表明:雌树不同部位中,叶的黄酮和内酯含量高于其他部位,外种皮中银杏酸含量高于其他部位;雄树不同部位中,叶的黄酮和内酯含量高于树枝,树枝的银杏酸含量高于叶.综上所述,雌雄银杏的不同部位黄酮、内酯和银杏酸的含量有一定的差异,应对其不同部位进行合理利用从而加快银杏产业进一步发展.%In order to analyse the content of flavonoids, terpene lactones and ginkgo acids in different parts of Ginkgo biloba, the content of these components were determined by the high performance liquid chromatography (HPLC).For female, the content of flavonoids and terpene lactones was higher in leaves than in other parts;and the content of ginkgo acid was higher in episperm than in other parts.For male, the content of flavonoids and terpene lactones was higher in leaves than in branches;and the content of ginkgo acid was higher in branches than in leaves.It is clear that different parts of female and those of male have different contents of flavonoids, terpene lactones and ginkgo acid.Therefore, different parts of Ginkgo biloba should be used rationally in order to accelerate the development of ginkgo industry.【期刊名称】《山地农业生物学报》【年(卷),期】2017(036)004【总页数】4页(P72-75)【关键词】银杏;黄酮;内酯;银杏酸;含量分析【作者】吴竹;王秋萍;田漫漫;王黔阳;何珺【作者单位】贵州大学药学院,贵州贵阳 550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳550025;贵州大学药学院,贵州贵阳 550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳550025;贵州大学药学院,贵州贵阳 550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳 550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】R284.1银杏(Ginkgo biloba L.)为银杏科、银杏属多年落叶乔木。
银杏叶药材标准检验操作规程
银杏叶药材标准检验操作规程本品为银杏科植物银杏的干燥叶。
秋季叶尚绿时采收，及时干燥。
【性状】本品多皱折或破碎，完整者呈扇形，长3～12cm，宽5～15cm。
黄绿色或浅棕黄色，上缘呈不规则的波状弯曲，有的中间凹入，深者可达叶长的4/5。
具二叉状平行叶脉，细而密，光滑无毛，易纵向撕裂。
叶基楔形，叶柄长2～8cm。
体轻。
气微，味微苦。
【鉴别】（1）取本品粉末1g，加40%乙醇10ml，加热回流10分钟，放冷，滤过，取滤液作为供试品溶液。
另取银杏叶对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。
（2）取本品粉末1g，加50%丙酮溶液40ml，加热回流3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加15%乙醇5ml使溶解，加入已处理好的聚酰胺柱（30～60目，1g，内径为1cm，用水湿法装柱）上，用5%乙醇40ml 洗脱，收集洗脱液，置水浴上蒸去乙醇，水液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品及白果内酯对照品，加丙酮制成每1ml各含银杏内酯 A 0.5mg、银杏内酯 B0.5mg、银杏内酯C 0.5mg、白果内酯1mg的混合溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇（10:5:5:0.6）为展开剂，在15℃以下展开，取出，晾干，在醋酐蒸气中熏15分钟，在140～160℃中加热30分钟，置紫外光灯（365nm）下检视。
银杏不同类型枝条叶片萜内酯含量年周期变化规律
银杏不同类型枝条叶片萜内酯含量年周期变化规律黄小花;廖咏玲;许锋;程水源;王燕【摘要】为了了解不同时期银杏不同枝型叶片萜内酯的含量,采用气相色谱法对银杏雄叶丛枝、雌叶丛枝、雄长枝、雌长枝和雌短枝银杏叶萜内酯含量的年周期变化进行了测定.结果表明:不同枝型按照银杏叶的总萜内酯含量由大到小排列依次为:雄叶丛枝、雌长枝、雌叶丛枝、雄长枝、雌短枝,除雌短枝外,其它枝型总萜内酯含量均在9月初达到1年中的最大值;GA是所测4种萜内酯中含量最丰富的,不同枝型按照GA含量由大到小排列依次为:雄叶丛枝、雄长枝、雌叶丛枝、雌长枝、雌短枝,除雌短枝GA含量在10月初到达含量的高峰外,其它均在9月初达到高峰;GB、GC和BB含量低,变化规律较一致,落叶前含量基本稳定.【期刊名称】《经济林研究》【年(卷),期】2013(031)001【总页数】5页(P48-52)【关键词】萜内酯;银杏叶;枝型;含量【作者】黄小花;廖咏玲;许锋;程水源;王燕【作者单位】长江大学园艺园林学院,湖北荆州434025;黄冈师范学院经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室,湖北黄冈438000;长江大学园艺园林学院,湖北荆州434025;长江大学园艺园林学院,湖北荆州434025;黄冈师范学院经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室,湖北黄冈438000;湖北省林业厅科教处,湖北武汉438007【正文语种】中文【中图分类】S664.3银杏叶萜内酯具有重要的药用价值，主要用于治疗肺虚咳嗽、冠心病、心绞痛、高脂血症等[1]。
萜内酯的含量是银杏叶及其制剂质量控制的关键指标。
其含量较低，一般在0.25%以下[2]。
银杏萜内酯按照结构大致可分为银杏内酯（银杏内酯A、B、C和J，缩写为GA、GB、GC和GJ）和白果内酯（BB）2类[3]。
有报道称，银杏植株不同器官中萜内酯含量差异明显，芽中萜内酯含量最高，其次为叶片，茎中含量最低，不同器官中GA、GB、GC和BB 4 种萜内酯所占比例差异明显[4]；萜内酯含量与植株性别、树龄、光照、水肥管理以及不同采收季节等紧密相关[5-9]。
6个银杏新品种叶片黄酮内酯含量的测定
２ ． ２ 试 验 方 法
内酯 含 量 进 行 测 定 。
１ 试 验 地 概 况
６个 银 杏 新 品 种 叶 片 黄 酮 内酯 含 量 的 测 定
仲 凤 维 ～， 王 迎 ， 万 晓 ， 宋承 东 ， 张 志玲 。 ， 杜 辉 ， 孔 凡 伟
（ １ ． 泰 安 市 泰 山林 业 科 学 研 究 院 ， 山 东 泰安 ２ ７ １ ０ ０ ０ ； ２ ． 山东 农 业 大 学 ； ３ ． 泰安市林业局）
究 首 次 对 ６个 银 杏 新 品 种 的 黄 酮 类 化 合 物 和 银 杏 总
局 植 物 新 品种 权 ， 分 别 是 夏 金 、 松 针 、金 带 、 聚 宝
、
玉帘 、 魁 梧 。前 ５个 新 品 种 于 ２ ０ ０ ６年 春 季 采 用 插
皮 接嫁 接 ， 砧木基径约 ３ ｃ ｍ， 截干于 １ ． ２ ｍ处嫁接 。 魁梧于 ２ ０ ０ ９年春 季 嫁接 ， 嫁接方式、 砧木 选 择 等 处 理和其 它 ５个 新 品种 一 致 。每个 品 种 嫁 接 ３ Ｏ株 。 本实 验于 ２ ０ １ ２年 ９月 １日对 该 ６个 新 品种 进 行 调 查、 取 样 。每个 品种选取 ５ 株， 从每株 上 随机采集 轮 生叶 ５ ０片 ， 簇生 叶 １ ０片 。将 采来 的银杏 叶洗净 ， 于 ６ Ｏ ℃烘干至 恒重 ， 研磨粉 碎 ， 过８ Ｏ目筛 ， 用 于 内含物
山东 林 业 科技
２ ０ １ ３年第 ５期
总 ２ ０ ８ 期
Ｓ ＨＡ Ｎ Ｄ ＯＮ Ｇ Ｆ Ｏ Ｒ Ｅ Ｓ Ｔ Ｒ Ｙ Ｓ Ｃ Ｉ Ｅ ＮＣ Ｅ ＡＮ Ｄ Ｔ Ｅ Ｃ ＨＮ ＯＬ Ｏ Ｇ Ｙ
２ ０ １ ３ ． Ｎ ｏ ． ５
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RS D 为0147%(n =6);用LC -10A 高效液相色谱仪Inertsil ODS -3测定,含量为10111%,RS D 为0126%(n =6)。
313 溶液稳定性 取对照品溶液在0,3,5,7,12,14h 进行试验,尼尔雌醇峰的峰面积平均值为2597078,RS D 为0137%(n =6),表明该溶液较稳定。
314 线性范围 配制相当于尼尔雌醇测定浓度的20%,40%,60%,80%,100%,120%,140%,160%,180%,200%对照品溶液,进行线性考察。
结果表明,在浓度为20108～20018μg ・m L -1的范围内,尼尔雌醇峰面积对浓度的线性关系良好,回归方程为:Y =25093123X +2848417 r =0199994 样品测定采用建立的方法,对样品进行含量测定,并与紫外分光光度法进行了比较,结果见表2。
5 结论511 甾体类化合物一般都采用甲醇-水流动相体系,本文经试验确定在甲醇-水(80∶20)条件下尼尔雌醇能与其各杂质峰完全分离。
表2 样品测定(%,n =2)T ab 2 Determination of sample批号(Lot N o.)HP LC methodUV method 98030110018991198030210110991398030399199817512 碱性介质中的分解产物、酸性介质中的分解产物、氧化性介质中的分解产物和光照试验产物的色谱分离结果表明,本方法不仅适用于含量测定,而且也可用于有关物质测定。
513 本方法将收载于中国药典2000年版二部,经有关单位复核,证明方法可靠,无论是进口色谱柱,还是国产色谱柱都能够满足实验的要求。
参考文献1 ChP (中国药典).1995.V ol Ⅱ(二部):192(本文于2000年1月17日收到)3基金项目:山东省中医药科技发展规划项目,N o 9724634不同类型银杏叶中银杏内酯的含量测定3管玉民 尤慧莲 王健 林晓(山东省药品检验所 济南 250012)摘要 目的:建立HP LC 法测定各种类型银杏叶中银杏内酯的含量。
方法:色谱柱为S UNIER K romasil C 18(5μm ,416mm ×250mm ),以33%甲醇为流动相,流速:1m L ・min -1,示差检测器(RI ),以银杏内酯A 、B 、C 及白果内酯4种对照品为对照。
结果:测定了各种类型的银杏叶内酯的含量。
结论:找出了银杏叶的最佳采集时间。
关键词 银杏叶 银杏内酯A 、B 、C 白果内酯 高效液相色谱法Determination of G inkgolides in V arious Ginkgo LeavesG UAN Y u -min ,Y OU Hui -lian ,W ANGJian and LI N X iao(Shandong Provincial Institute for Drug Control ,Jinan 250012)Abstract Objective :T o determine ginkg olides in various G inkgo leaves by HP LC.Method :The analysis was per 2formed on S UNIER K romasil C 18column (5μm ,416mm ×250mm )with 33%methanol as m obile phase ,at a flow rate of 1m L ・min-1.The differential refractometer was used as detector and ginkg olide A 、B 、C and bilobalide wereused as com paris on.R esult :The content of ginkg olides in various G inkgo leaves have been determined.Conclusion :The best time of picking G inkgo leaves was defined.K ey w ords G inkgo leaves ,ginkg olide A 、B 、C ,bilobalide ,HP LC・701・ 21(2),2001 银杏叶为银杏科植物银杏G inkgo biloba L.的干燥叶,具有敛肺、平喘、活血、化瘀、止痛之功效。
银杏叶的主要有效成分为银杏黄酮和银杏内酯类化合物[1]。
目前国内外生产银杏叶制剂的厂家多,银杏叶的需求量大,造成银杏叶的采收混乱。
我们收集了银杏叶生产基地1～10年生幼苗及成年大树从春季到秋季的树叶。
HP LC 法测定银杏叶总内酯虽有报道[2],但对银杏叶生产田的各种类型银杏叶未见含量测定报道,为了保证药品质量,本文测定了各种类型的银杏叶中银杏内酯的含量。
为指导银杏叶的生产提供了依据。
1 仪器与材料SP -8800高效液相色谱仪,SP -RI -150示差检测器,Chrom fet 积分仪。
试剂为分析纯或色谱纯。
银杏内酯A (ginkg olide A ,G A )、银杏内酯C (ginkg olide C ,G C )、白果内酯(bilobalide ,BB )对照品由中国药品生物制品检定所提供,银杏内酯B (ginkg olide B ,G B )对照品购自SIG MA 公司。
在本色谱条件下都呈现单一色谱峰。
样品:(1)1997年4～11月采自济南成年树(JN9707-11);(2)1998年采自郯城(T ),1年生(A )、3年生(B )、5年生(C )、10年生(D )、成年树(E )(由郯城药检所张现玉主任药师帮助采集)。
甲醇为色谱纯,石油醚(30℃～60℃)及醋酸乙酯为分析纯。
2 方法与结果211 色谱条件 色谱柱:S UNIER K romasil C 18(5μm ,416mm ×250mm ),流动相:33%的甲醇,流速:1m L ・min -1,检测示差(RI differential refrac 2tometer ),灵敏度:2RI U ,柱温:30℃,衰减(AT 2TE N ):32,进样量:10μL 。
在上述条件下,BB 、G C 、G A 、G B 色谱峰保留时间分别约为11min ,1415min ,2916min ,34min ,与其他峰分离完全,理论板数按G A 峰计大于5000,见图1。
212 线性关系的考察 精密称取G A 、G B 、G C 、BB 对照品加甲醇制成每1m L 分别含1135,1135,1108,2122mg 的混合溶液作为对照品储备液,分别吸取上述溶液1,2,3,4,5m L 稀释定容至10m L ,摇匀,分别精密吸取上述溶液10μL ,注入高效液相色谱仪,按上述条件测定,求出G A 、G B 、G C 、BB 进样量与峰面积的直线回归方程分别为:Y =11049×10-6X +01091 r =019997Y =11105×10-6X -01166 r =019997Y =11146×10-6X -01074 r =019993图1 样品(A )与对照品(B )高效液相色谱图Fig 1 HP LC chromatograms of sam ple (A )and chem ical reference substance (B )Y =11070×10-6X -01505 r =019994进样量分别在1135～6175,1135～6175,1108～5140,2122～1111μg 范围内与积分面积呈良好的线性关系。
213 回收率试验 精密称取T C9809号(含量见表1)样品粉末(过4号筛)约1g ,置索氏提取器中,加石油醚(30℃～60℃)100m L 回流提取2h ,弃去石油醚,挥干,分别精密加入对照品G A 01675mg 、G B 01675mg 、G C 0154mg 、BB 1111mg 。
再加入甲醇适量,同样品测定项测定,计算出回收率(n =5)分别为10018%,9913%,9711%,10214%;RS D 分别为315%,114%,215%,218%。
214 精密度试验 精密吸取对照品储备液3m L 加甲醇稀释定容至10m L ,按上述色谱条件连续进样5次,测得G A 、G B 、G C 、BB 峰面积RS D 分别为311%,315%,115%,118%。
表明仪器精密度良好。
215 稳定性试验 对供试品溶液在0,1,2,4,8,12,24h 进样测定,峰面积无显著性变化,表明供试品溶液在24h 内稳定。
216 样品测定 精密称取本品粉末(过4号筛)2～5g ,置索氏提取器中,加石油醚(30℃～60℃)100m L 回流提取2h ,弃去石油醚,挥干,加甲醇适量回流提取4h ,提取液浓缩至少量,加聚酰胺(80～100目)1g ,拌匀,挥干,转移至聚酰胺小柱上(自装,80～100目,4g <110cm ),用30%乙醇200m L 洗脱,洗脱液浓缩至约30m L ,放・801・ 药物分析杂志 冷,转移至分液漏斗中,用醋酸乙酯提取4次,每次30m L,合并提取液,用5%醋酸钠和水各40m L 洗涤,合并醋酸钠及水液,用醋酸乙酯30m L提取1次,分取醋酸乙酯层,用水20m L洗涤1次,弃去水液,合并醋酸乙酯提取液,蒸干,残渣用甲醇溶解定容至5m L,滤过,滤液作为供试品溶液。
精密吸取对照品储备液3m L,加甲醇定容至10 m L,即得对照品溶液。
分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,按上述条件测定,测得34批样品含量(n=2)见表1。
表1 样品含量测定结果(mg・g-1)T ab1 The results of determinationBB (bilobalide)G C(ginkg olide C)G A(ginkg olide A)G B(ginkg olide B)总量(total)JN97043011820106401382011380177 JN9705018520109701148011101121 JN9706110210120001663011632105 JN9707116220142911077015473168 JN9708113860115201474011892120 JN9709115060127601435013332155 JN9710114370136101795014453104 JN9711018250157601741015232168 T A9809116150180521065112435173 T B9807215661120611104111005154 T B9808117850177511189111314188 T B9809117710193311043016074136 T B9810211101108011254017485119 T B9811114011101111105110114153 TC9807219561104011024017175174 TC9808119370157111186014064110 TC9809111990151001845016003116 TC9810115850157511141014373174 TC9811117070167401981015393190 T D9807012810113801245010720174 T D9808013030114301977014201184 T D9809012080111301242010900165 TE9807012930109901169011270169 TE9808015460112701172010630191 TE9809015190127401443015771180 3样品采集的地点、日期。