第七章体液蛋白质检验
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体液蛋白质检验方法介绍
体液蛋白质检验方法介绍一、背景介绍体液蛋白质检验是临床常用的检查方法之一，用于评估机体健康和诊断疾病。
蛋白质是生命体中最重要的有机物之一，对维持机体正常功能起着重要作用。
通过体液蛋白质检验，可以了解体内蛋白质的含量和特性，判断机体的代谢状态和发生疾病的可能性。
二、体液蛋白质检验的常用方法1. 琼脂凝胶电泳法琼脂凝胶电泳法是一种常用的体液蛋白质分析方法，通过使用特定的电荷和孔隙大小，蛋白质可以在电场作用下分离成不同的带状条带。
这些条带可以用染色剂或特定的抗体进行检测和定量分析。
琼脂凝胶电泳法可以用于分析血清、尿液和其他体液中的蛋白质，可以对蛋白质的组成和浓度进行评估。
2. 高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是一种高效的蛋白质分析方法，通过液相色谱柱将混合的蛋白质样品分离。
这种方法具有高分辨率和高灵敏度，可以用于测定体液中特定蛋白质的含量和活性。
HPLC可以用于分析血清、尿液和其他体液中的蛋白质，是一种常用的蛋白质定量和定性分析方法。
3. 免疫测定法免疫测定法是一种常用的体液蛋白质检验方法，通过免疫反应来确定体液中特定蛋白质的含量。
常用的免疫测定方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫测定和免疫印迹等。
这些方法利用特异性抗体和标记物（如酶、放射性同位素或荧光物质）来检测目标蛋白质。
免疫测定法具有高灵敏度和高特异性，可以用于快速、准确地定量和定性检测体液中的蛋白质。
三、体液蛋白质检验的应用体液蛋白质检验广泛应用于临床诊断和疾病监测中。
以下是一些常见的应用场景：1. 诊断疾病体液蛋白质检验可以帮助医生诊断各种疾病，如肾脏疾病、免疫系统疾病和代谢性疾病等。
通过检测体液中的蛋白质含量和组成，可以判断机体的代谢状态、炎症程度和疾病的类型。
2. 监测疾病进展体液蛋白质检验也可以用于监测疾病的进展和治疗效果。
通过定期检测体液中特定蛋白质的含量和活性，可以评估疾病的严重程度和治疗效果，指导后续治疗方案的制定。
《体液蛋白质检验》PPT课件
• 营养监测:
前白蛋白、白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、铁蛋白
• 出 / 凝血疾病:
纤维蛋白原、AT3、纤溶酶原
• 贫血:
触珠蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、可溶精性选P转PT铁蛋白受体
3
检验学部属于蛋白质的实验项目
生化室：总蛋白，白蛋白，球蛋白，载脂蛋白A1，载脂蛋
白B，前白蛋白，脂蛋白（a），高密度脂蛋白，低密度脂蛋 白，极低密度脂蛋白，血清蛋白电泳（白蛋白，α1、α2 、 β 、γ球蛋白），血尿β2微球蛋白，糖化血红蛋白，肌钙 蛋白-T，24小时尿蛋白定量，尿微量白蛋白，酶类。
蛋白质的分离
透析、沉淀、盐析、电泳、层析、超速离心
血浆蛋白质的分类
精选PPT
8
3、血浆蛋白质的分类
• 根据分离方法： ①盐析法：白蛋白和球蛋白两大类（各种蛋白
质的亲水性和所带的电荷均有差别。） ②电泳法（醋酸纤维素薄膜）：白蛋白、α1－
球蛋白 、 α2 － 球蛋白、 β －球蛋白、纤维 蛋白原、γ－球蛋白。
精选PPT
10
根据生理功能分类：
精选PPT
11
二、一些临床常检测血浆蛋白质
1、白蛋白（albumin , Alb)
肝实质细胞合成，分子量66 458，
半衰期15～19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占40～60％。 在肝细胞中没有贮存。
•
分子结构1975年阐明，含585个氨基酸残基的单链多肽，
分子量66458，含17个二硫键（—S—S—），不含糖的组分。
精选PPT
28
7、 1抗胰蛋白酶（1-AT）
• 是具有蛋白酶抑制作用的一种急性时相反应蛋白，分子量 为5.5万，P1值4.8，含有10%-12%糖。在醋酸纤维薄膜 或琼脂糖电泳中泳动于α1区带，是这一区带的主要组分。 区带中的另2个主要组分；α1-酸性糖蛋白含糖量特别高， α1-脂蛋白含脂类特别高，因此蛋白质的染色都很浅。
医学课件体液蛋白质检验
• • • • • •
检验学部属于蛋白质的实验项目
生化室：总蛋白，白蛋白，球蛋白，载脂蛋白A1，载脂蛋
白B，前白蛋白，脂蛋白（a），高密度脂蛋白，低密度脂蛋 白，极低密度脂蛋白，血清蛋白电泳（白蛋白，α1、α2 、 β 、γ球蛋白），血尿β2微球蛋白，糖化血红蛋白，肌钙 蛋白-T，24小时尿蛋白定量，尿微量白蛋白，酶类。
心
血浆蛋白质的分类
3、血浆蛋白质的分类
• 根据分离方法： ①盐析法：白蛋白和球蛋白两大类（各种蛋白 质的亲水性和所带的电荷均有差别。） ②电泳法（醋酸纤维素薄膜）：白蛋白、α1－ 球蛋白 、 α2 － 球蛋白、 β －球蛋白、纤维 蛋白原、γ－球蛋白。
电泳法分类
白蛋白（40－60％）
α1-球蛋白（α1-抗胰蛋白酶、血清 类粘蛋白、α1-酸性糖蛋白、甲胎 蛋白）
尿中蛋白超过以上数值则称蛋白尿。
2、前白蛋白（prealbumin, PA）
肝细胞合成，分子量54 000，半衰期12小时。 在pH8.6电泳中移速比白蛋白快而得名。 • ⑴功能：①营养 半衰期12小时； • ②运载 结合T3、T4、结合维生素A。
参考范围 PA 0.18~0.45g/ L
生理功能
α2-球蛋白（α-脂蛋白、触珠蛋白、 铜蓝蛋白、α2-巨球蛋白）
β-球蛋白（转铁蛋白、血红素结合 蛋白、 β微球蛋白、纤维蛋白原、 β脂蛋白、补体） γ-球蛋白（各种免疫球蛋白主要位 置及C-反应蛋白）
根据生理功能分类：
பைடு நூலகம்
二、一些临床常检测血浆蛋白质
1、白蛋白（albumin , Alb) 肝实质细胞合成，分子量66 458， 半衰期15～19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占40～60％。 在肝细胞中没有贮存。 • 分子结构1975年阐明，含585个氨基酸残基的单链多肽， 分子量66458，含17个二硫键（—S—S—），不含糖的组分。
体液蛋白质检验
★
1）血液中的白蛋白
由于白蛋白在血浆中浓度高而且分子量小，其主 要生理功能是维持血液胶体渗透压（血液中80％ 的渗透压是由白蛋白承担的)/缓冲酸碱。 另外，白蛋白能结合诸如胆红素之类的疏水分子。 在体内担负转运各种离子、酶类、脂溶性物质、 激素和药物的功能。在机体营养作用中也起重要 作用（内源性氨基酸）。
血凝室：纤维蛋白原，AT-Ⅲ（α2-球蛋白），各种凝血因
子除第Ⅳ因子（Ca2+）均为蛋白质，FDP,D-D是纤维蛋白 降解产物。
检验学部属于蛋白质的实验项目
免疫室
免疫球蛋白IgM, IgG, IgA, C反应蛋白，前S1蛋白、类风湿因子 肝炎抗原抗体类：HAV-IgM， HBSAg, HBSAb, HBEAg, HBEAb,
•
⒋ 恶性肿瘤患者CRP大都升高。如CRP与AFP的联 合检测，可用于肝癌与肝脏良性疾病的鉴别诊断。CRP测定 用于肿瘤的治疗和预后有积极意义。手术前CRP上升，手术 后则下降，且其反应不受放疗、化疗和皮质激素治疗的影响， 有助于临床估价肿瘤的进程。
⒌ CRP用于评估急性胰腺炎的严重程度。当CRP高 于250㎎╱L时，则可提示为广泛坏死性胰腺炎。
★第一个被认定为急性时相反应蛋白, ★由肝细胞合成, 可结合多种细菌、真菌及原虫
体对内的多糖。 ★能激活补体，引发调理作用，增强 细胞的吞噬功能，对血小板凝聚和血块收缩 有抑制作用。
γ-球蛋白（各种免疫球蛋白主要位置及C-反应蛋白）：电泳分布在慢γ
区带，有时可以延伸到β区带 •【参考范围】＜8.0mg/L
• • • • • •
检验学部属于蛋白质的实验项目
生化室：总蛋白，白蛋白，球蛋白，载脂蛋白A1，载脂蛋
白B，前白蛋白，脂蛋白（a），高密度脂蛋白，低密度脂蛋 白，极低密度脂蛋白，血清蛋白电泳（白蛋白，α1、α2 、 β 、γ球蛋白），血尿β2微球蛋白，糖化血红蛋白，肌钙 蛋白-T，24小时尿蛋白定量，尿微量白蛋白，酶类。
第七章体液检查第一节脑脊液检查
意义见表7-13。
• 7．髓鞘碱性蛋白测定
• 【检测原理】髓鞘碱性蛋白（MBP）是神经组织独 有的蛋白质，是脑组织实质性损伤的特异性标记，也是
反映神经细胞有无实质性损伤的灵敏指标，其含量高低
与损伤范围、病情的严重程度相关。
•
•
【参考区间】＜4μg/L。
【临床意义】MBP增高是髓鞘遭到破坏的近期指标，
存在胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离（蛋白质明显增 高，细胞正常或轻度增高）称为Froin-Nonne综合征。
• 4．比重
• 【参考区间】腰椎穿刺：1.006～1.008； 脑室穿刺：1.002～1.004；小脑延髓池穿刺： 1.004～1.008。 • 【临床意义】比重增高常见于各种颅 内炎症；比重减低见于脑脊液分泌增多。
• 3．氯化物 关。
脑脊液氯化物含量与血氯浓度、酸碱
度、血-脑脊液屏障通透性和脑脊液蛋白质含量有
•
【检测原理】氯化物测定方法与血清氯化物
测定方法相同，常用方法有硝酸汞滴定法、硫氰
酸汞比色法、离子选择电极法、电量分析法等。
• 【方法学评价】常用脑脊液氯化物测定的方
法学评价见表7-10。
• 【质量保证】 • ①电量分析法：如试剂含有杂质，可影响电 流效率。可用纯试剂进行空白校正，并通过预电
• （2）蛋白质定量检查：脑脊液蛋白定量检 查主要方法有磺基水杨酸-硫酸钠比浊法、 双缩脲法和染料结合法。 • 【方法学评价】脑脊液蛋白质定性检 查的方法学评价见表7-6。脑脊液蛋白质定 量检查的方法学评价见表7-7。
• 【参考区间】①定性：阴性或弱阳性。②定量： 腰椎穿刺：0.2～0.4g/L；小脑延髓池穿刺：0.1～
解除去杂质。
• ②电极法：氯电极使用一段时间后，电极上
• 7．髓鞘碱性蛋白测定
• 【检测原理】髓鞘碱性蛋白（MBP）是神经组织独 有的蛋白质，是脑组织实质性损伤的特异性标记，也是
反映神经细胞有无实质性损伤的灵敏指标，其含量高低
与损伤范围、病情的严重程度相关。
•
•
【参考区间】＜4μg/L。
【临床意义】MBP增高是髓鞘遭到破坏的近期指标，
存在胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离（蛋白质明显增 高，细胞正常或轻度增高）称为Froin-Nonne综合征。
• 4．比重
• 【参考区间】腰椎穿刺：1.006～1.008； 脑室穿刺：1.002～1.004；小脑延髓池穿刺： 1.004～1.008。 • 【临床意义】比重增高常见于各种颅 内炎症；比重减低见于脑脊液分泌增多。
• 3．氯化物 关。
脑脊液氯化物含量与血氯浓度、酸碱
度、血-脑脊液屏障通透性和脑脊液蛋白质含量有
•
【检测原理】氯化物测定方法与血清氯化物
测定方法相同，常用方法有硝酸汞滴定法、硫氰
酸汞比色法、离子选择电极法、电量分析法等。
• 【方法学评价】常用脑脊液氯化物测定的方
法学评价见表7-10。
• 【质量保证】 • ①电量分析法：如试剂含有杂质，可影响电 流效率。可用纯试剂进行空白校正，并通过预电
• （2）蛋白质定量检查：脑脊液蛋白定量检 查主要方法有磺基水杨酸-硫酸钠比浊法、 双缩脲法和染料结合法。 • 【方法学评价】脑脊液蛋白质定性检 查的方法学评价见表7-6。脑脊液蛋白质定 量检查的方法学评价见表7-7。
• 【参考区间】①定性：阴性或弱阳性。②定量： 腰椎穿刺：0.2～0.4g/L；小脑延髓池穿刺：0.1～
解除去杂质。
• ②电极法：氯电极使用一段时间后，电极上
体液蛋白质检验
★
1）血液中的白蛋白 ）
由于白蛋白在血浆中浓度高而且分子量小， 由于白蛋白在血浆中浓度高而且分子量小，其主 要生理功能是维持血液胶体渗透压（血液中80％ 要生理功能是维持血液胶体渗透压（血液中 ％ 的渗透压是由白蛋白承担的)/缓冲酸碱 缓冲酸碱。 的渗透压是由白蛋白承担的 缓冲酸碱。 另外，白蛋白能结合诸如胆红素之类的疏水分子。 另外，白蛋白能结合诸如胆红素之类的疏水分子。 在体内担负转运各种离子、酶类、脂溶性物质、 转运各种离子 在体内担负转运各种离子、酶类、脂溶性物质、 激素和药物的功能。 激素和药物的功能。在机体营养作用中也起重要 作用（内源性氨基酸） 作用（内源性氨基酸）。 血清白蛋白35～ 参考范围：血清白蛋白 ～55g／L ／
• 参考范围：CSF白蛋白 ～237mg／L 白蛋白134～ 白蛋白 ／
3）、微量白蛋白尿（MA） ）、微量白蛋白尿（ ）、微量白蛋白尿 ）
尿ALB 正常成人尿ALB 大约 大约3.90～24.4mg/24h 正常成人尿 ～ 0～ 13.3mg/24h 儿童 尿ALB ～ 肌酐)<2.5mg／mmol 尿Alb／Cr(肌酐 ／ 肌酐 ／ 尿中蛋白超过以上数值则称蛋白尿。 尿中蛋白超过以上数值则称蛋白尿。
• ④白蛋白减少在不少疾病时常见：白蛋白的合成减少—— 白蛋白减少在不少疾病时常见：白蛋白的合成减少 急性或慢性肝炎；营养不连或吸收不良；遗传性缺陷—— 急性或慢性肝炎；营养不连或吸收不良；遗传性缺陷 无白蛋白血症是一种极少见的代谢性缺损， 无白蛋白血症是一种极少见的代谢性缺损，血浆白蛋白含 量常低于1g/L，但可以没有症状（如水肿等），可能部分 ），可能部分 量常低于 ，但可以没有症状（如水肿等）， 由于血浆中球蛋白含量代偿性升高；组织损伤（ 由于血浆中球蛋白含量代偿性升高；组织损伤（外科手术 或创伤）或炎症（感染性疾病） 或创伤）或炎症（感染性疾病）引起的白蛋白分解代谢增 白蛋白的异常丢失——肾病综合症、慢性肾小球肾炎、 肾病综合症、 加；白蛋白的异常丢失 肾病综合症 慢性肾小球肾炎、 糖尿病、 等尿中白蛋白损失， 糖尿病、SLE等尿中白蛋白损失，烧伤及渗出性皮炎可以 等尿中白蛋白损失 从皮肤丧失大量蛋白质；白蛋白的分布异常——门静脉高 从皮肤丧失大量蛋白质；白蛋白的分布异常 门静脉高 压引起腹水中有大量蛋白质。是从血管内渗漏入腹腔。 压引起腹水中有大量蛋白质。是从血管内渗漏入腹腔。 • ⑤白蛋白的遗传变异：已发现 多中种。 白蛋白的遗传变异：已发现20多中种 多中种。
体液蛋白质检验
生物学特性：肝细胞与单核吞噬细胞系统中合成，半寿期5 生物学特性：肝细胞与单核吞噬细胞系统中合成，半寿期5 MW=62～ 分子量最大，由四个相同的亚基组成， 天。MW=62～80 万,分子量最大，由四个相同的亚基组成，含 糖量约８ 5.4，电泳位于α2 糖量约８％。 pI 值为5.4，电泳位于α2 -球蛋白区带 生理功能：与多种分子和离子结合， 生理功能：与多种分子和离子结合，影响蛋白水解酶活性 主要的蛋白酶抑制剂具有选择性保护某些酶的作用）。 （主要的蛋白酶抑制剂具有选择性保护某些酶的作用）。
第八章
体液蛋白质检验
人类白蛋白分子
1
本章内容概要： 本章内容概要：
第一节 概述 第二节 体液蛋白质测定
2
第一节 概
机体蛋白质：
述
含量 种类 功能
机体主要的生物大分子
体液蛋白质的检测： 体液蛋白质的检测：
疾病发生
体液蛋白质
异常
3
一、血浆蛋白质的组成、功能及分类 血浆蛋白质的组成、
种类： 种类：500种 种
9
临床意义 PA降低常见于： PA降低常见于： 降低常见于 营养不良（敏感指标） 营养不良（敏感指标） 肝功能不全（敏感指标） 肝功能不全（敏感指标） 比白蛋白更敏感
急性炎症、恶性肿瘤、 急性炎症、恶性肿瘤、创伤等 炎症 肾炎
10
白蛋白（ALB） （二）白蛋白（ALB）
生物学特性：肝细胞合成但不储存，半衰期为15生物学特性：肝细胞合成但不储存，半衰期为15-19 天，是 15 血浆中含量最多的蛋白质，占总蛋白的40% 60%。585个aa残 40%－ 血浆中含量最多的蛋白质，占总蛋白的40%－60%。585个aa残 基构成的单链多肽， 17个二硫键 MW=66458，pI=4－5.8， 个二硫键， 基构成的单链多肽，含17个二硫键，MW=66458，pI=4－5.8， 7.4时带负电 时带负电。 pＨ7.4时带负电。 生理功能：营养作用，载体功能（高亲和力），维持血浆渗 生理功能：营养作用，载体功能（高亲和力），维持血浆渗 ）， 透压和正常p 透压和正常pＨ值。 测定方法： 测定方法：详见第二节 参考值：35g/Ｌ 参考值：35-55 g/Ｌ 临床意义： 临床意义：详见第二节
第八章
体液蛋白质检验
人类白蛋白分子
1
本章内容概要： 本章内容概要：
第一节 概述 第二节 体液蛋白质测定
2
第一节 概
机体蛋白质：
述
含量 种类 功能
机体主要的生物大分子
体液蛋白质的检测： 体液蛋白质的检测：
疾病发生
体液蛋白质
异常
3
一、血浆蛋白质的组成、功能及分类 血浆蛋白质的组成、
种类： 种类：500种 种
9
临床意义 PA降低常见于： PA降低常见于： 降低常见于 营养不良（敏感指标） 营养不良（敏感指标） 肝功能不全（敏感指标） 肝功能不全（敏感指标） 比白蛋白更敏感
急性炎症、恶性肿瘤、 急性炎症、恶性肿瘤、创伤等 炎症 肾炎
10
白蛋白（ALB） （二）白蛋白（ALB）
生物学特性：肝细胞合成但不储存，半衰期为15生物学特性：肝细胞合成但不储存，半衰期为15-19 天，是 15 血浆中含量最多的蛋白质，占总蛋白的40% 60%。585个aa残 40%－ 血浆中含量最多的蛋白质，占总蛋白的40%－60%。585个aa残 基构成的单链多肽， 17个二硫键 MW=66458，pI=4－5.8， 个二硫键， 基构成的单链多肽，含17个二硫键，MW=66458，pI=4－5.8， 7.4时带负电 时带负电。 pＨ7.4时带负电。 生理功能：营养作用，载体功能（高亲和力），维持血浆渗 生理功能：营养作用，载体功能（高亲和力），维持血浆渗 ）， 透压和正常p 透压和正常pＨ值。 测定方法： 测定方法：详见第二节 参考值：35g/Ｌ 参考值：35-55 g/Ｌ 临床意义： 临床意义：详见第二节
【医学PPT课件大全】 体液蛋白质检验
90%左右，主要是对抗由多形核白细胞吞噬作用时释 放的溶酶体蛋白水解酶，其作用具明显pH依赖性，中 性/弱碱性环境中活力大，pH4.5时活性基本丧失，属 APR。
2020/10/15
遗传分型： 分离鉴定33种等位基因，最多见PiMM型，另有PiZZ、 PiSS、PiSZ、PiMZ、PiMS等。
临床意义： 低血浆AAT见于胎儿呼吸窘迫综合征； M型AAT缺陷时，蛋白水解酶的过度作用损伤组织 弹性纤维，可导致肺气肿，肝硬化等。
2020/10/15
(六) 结合珠蛋白 （haptoglotin Hp） 理化性质：电泳中属α2区带球蛋白，分子为α2β2 两对肽链四聚体。 遗传分型：α链有α1和α2两型，α1又有α1F和α1S 两种遗传分型，由α1F、α1S、α2三种等位基因编码 形成αβ聚合体使个体存在多种遗传表现型，又决 定了不同遗传表现型个体血浆中Hp性质上差异。
2020/10/15
(四)α1-酸性糖蛋白 (α1-acid glycoprtein AAG) 理化性质：MW近4万，含糖45% ，PI 2.7~3.5。 来源：肝及某些肿瘤组织；脓毒症时粒/单核细胞。 功能：APR，急性炎症时显著升高，与免疫防御有关。 临床意义：作为急性时相反应指标，炎症、风湿病、 恶性肿瘤心肌梗死等上升；营养不良，严重肝损害等 下降。
2020/10/15
(五) 甲胎蛋白(α1-fetoprotein AFP) 来源：胎儿肝 理化性质：MW6.9万，胎儿期占血浆蛋白总量1/3，出生时为
<5mg/L，周岁接近成人水平(低于10μg/L)。 临床意义： 1. 产妇羊水或母体血浆AFP用于胎儿产前监测：高于正常提
示可能有开放性神经管缺陷、无脑儿、脐膨出、先天性 食管闭锁等。 2. 成人AFP用于肝癌，生殖细胞癌等监测(返祖现象)， 是原发性肝癌最灵敏特异的肿瘤标志物。
2020/10/15
遗传分型： 分离鉴定33种等位基因，最多见PiMM型，另有PiZZ、 PiSS、PiSZ、PiMZ、PiMS等。
临床意义： 低血浆AAT见于胎儿呼吸窘迫综合征； M型AAT缺陷时，蛋白水解酶的过度作用损伤组织 弹性纤维，可导致肺气肿，肝硬化等。
2020/10/15
(六) 结合珠蛋白 （haptoglotin Hp） 理化性质：电泳中属α2区带球蛋白，分子为α2β2 两对肽链四聚体。 遗传分型：α链有α1和α2两型，α1又有α1F和α1S 两种遗传分型，由α1F、α1S、α2三种等位基因编码 形成αβ聚合体使个体存在多种遗传表现型，又决 定了不同遗传表现型个体血浆中Hp性质上差异。
2020/10/15
(四)α1-酸性糖蛋白 (α1-acid glycoprtein AAG) 理化性质：MW近4万，含糖45% ，PI 2.7~3.5。 来源：肝及某些肿瘤组织；脓毒症时粒/单核细胞。 功能：APR，急性炎症时显著升高，与免疫防御有关。 临床意义：作为急性时相反应指标，炎症、风湿病、 恶性肿瘤心肌梗死等上升；营养不良，严重肝损害等 下降。
2020/10/15
(五) 甲胎蛋白(α1-fetoprotein AFP) 来源：胎儿肝 理化性质：MW6.9万，胎儿期占血浆蛋白总量1/3，出生时为
<5mg/L，周岁接近成人水平(低于10μg/L)。 临床意义： 1. 产妇羊水或母体血浆AFP用于胎儿产前监测：高于正常提
示可能有开放性神经管缺陷、无脑儿、脐膨出、先天性 食管闭锁等。 2. 成人AFP用于肝癌，生殖细胞癌等监测(返祖现象)， 是原发性肝癌最灵敏特异的肿瘤标志物。
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13
APR的机制
❖ 炎症损伤部位释放的细胞因子，包括白介素、肿瘤坏死 因子α和β、干扰素以及血小板活化因子等， 引发肝细 胞中上述蛋白质合成量的改变。
❖ 正向APP是机体防御机制的一个部分，如： 增加的蛋白酶抑制剂控制组织中的酶活性 触珠蛋白保护从破坏红细胞中释放的Hb C反应蛋白等可活化补体
❖ 负向APP多作为营养蛋白，此时合成减异常电泳图谱及其扫描曲线
α2 β
典型的β-γ桥
不典型β-γ桥
1.肾病综合征
9
2.功能分类法
（（22））蛋蛋白白酶酶抑抑制制物物：：白包白包酶括酶括、α、α11-α-α抗抗22胰--胰巨巨蛋蛋球球白白蛋蛋酶酶白白、、等等αα6611种-种-抗抗以以糜糜上上蛋蛋 （（33））血血清清酶酶类类：：血血浆浆固固有有酶酶如如LLCCAATT等等
组组织织细细胞胞少少量量释释放放的的细细胞胞内内酶酶 细细 胞胞破破裂裂而而进进入入血血循循环环的的细细胞胞内内酶酶 （（44））蛋蛋白白类类激激素素：：胰胰岛岛素素、、胰胰高高血血糖糖素素、、生生长长激激素素等等 （（55））凝凝血血蛋蛋白白类类 （（66））免免疫疫球球蛋蛋白白类类 （（77））补补体体蛋蛋白白类类
第七章 体液蛋白质检验
人类白蛋白分子
1
❖本章内容概要：
第一节 概述 第二节 体液蛋白质测定
2
❖本章教学要求：
1、掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类；个别血浆蛋白质 （前白蛋白、白蛋白）的来源和生理功能；血清总蛋白和白 蛋白的测定方法和原理。 2、熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类；血清球蛋白和纤 维蛋白原的测定方法。
APPs提供更多的氨基酸原料。
14
APR的时相
❖ C-反应蛋白：首先升高 ❖ α1-酸性糖蛋白：12小时内也升高 ❖ α1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4和纤维蛋白原然后
升高 ❖ C3和铜蓝蛋白：最后是升高
❖ 通常在2～5天内这些APPs达到最高值
15
测定APP的临床意义
帮助监测炎症的发生、变化和观察治疗反应， 尤其是那些升高最早和最多的蛋白质
16
二、血清蛋白质电泳组分的临床分析
血血浆浆蛋蛋白白质质和和血血清清蛋蛋白白质质有有何何不不同同？？ 血血浆浆：：为为生生理理状状况况 血血清清：：为为常常用用检检测测标标本本
30
（一）血清蛋白质电泳的正常组分及其含量
醋纤膜或琼脂糖电泳正常区带
扫描图谱 区带图谱
醋纤膜电泳正常百分含量
清清蛋蛋白白：： 575％7％～～686％8％ αα11球球蛋蛋白白：：11.0.0％％～～55.7.7％％ αα22球球蛋蛋白白：：44.9.9％％～～1111.2.2％％ ββ球球蛋蛋白白：： 7％7％～～131％3％γ γ球球蛋蛋白白：： 9.98.％8％～～18.2 1％8.2％
mg
g
来源：肝脏是蛋白质主要的加工厂
血浆蛋白质的功能
❖ ①营养作用，修补组织蛋白; ❖ ②维持血浆胶体渗透压：主要是白蛋白； ❖ ③作为PH缓冲系统的一部分：酸性或碱性蛋白质； ❖ ④运输作用：作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、
药物等的载体； ❖ ⑤体液免疫防御系统：作为免疫球蛋白与补体等免疫分子； ❖ ⑥催化作用：酶的本质； ❖ ⑦代谢调控作用；作为底物，酶或中间产物抑制或激活组织
聚聚丙丙烯烯酰酰胺胺凝凝胶胶电电泳泳：： 可 可以以分分出出303多0多种种蛋蛋白白质质
3.功能分类法
（1）运输载体类
血浆脂蛋白：包括CM、VLDL、LDL、HDL等 前清蛋白与清蛋白 甲状腺素结合球蛋白 皮质素结合球蛋白 类固醇激素结合球蛋白 视黄醛结合蛋白 转铁蛋白 触珠蛋白 血色素结合蛋白 铜蓝蛋白
急性时相反应蛋白(acute phase reactive protein， APP)：对急性炎症和组织损伤起非特异反应从而出现浓度变化 的血浆蛋白质。
增加的蛋白质称为正向APP
下降的蛋白质称为负向APP
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机体哪些情况会出现急性时相反应？
急性细菌性感染如急性肺炎、链球菌感染性肾炎 急性非特异性炎症如风湿性关节炎、类风湿性 关节炎、风湿性心脏病等 急性心肌梗死 恶性肿瘤 手术、创伤
蛋白酶； ❖ ⑧参与凝血与纤维蛋白溶解；：除Ⅳ因子外均可。
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血浆蛋白质的分类
盐析法：白蛋白/球蛋白（pH7.0半饱和的硫酸铵溶液）
❖分离方法
醋酸纤维素薄膜电泳：6种
分
电泳法： 琼脂糖凝胶电泳：13种
辨 率
聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种
增
SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳：300种 高
--
纤维蛋白原
醋酸纤维素薄膜
（三）影响血浆蛋白质浓度的因素
1. 急性时相反应
急性时相反应（acute phase reaction，APR）： 血浆蛋 白质对急性炎症和组织损伤的非特异性反应。
此时许多蛋白质：如α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、结合珠蛋白、 铜蓝蛋白、 C4、C3、纤维蛋白原和C-反应蛋白等浓度显著升高或升高， 而少数蛋白质如前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白则出现相应下降。
还还有有许许多多种种类类的的蛋蛋白白质质未未被被认认识识
（二）血浆蛋白质的功能
1. 作为运载蛋白 2. 组织蛋白酶抑制物 3. 在血浆中起催化作用的酶 4. 参与代谢调控作用的蛋白质和肽类激素 5. 参与凝血与纤维蛋白溶解 6. 组成体液免疫防御系统（Ig与补体 ）
生物 化学
所有血浆蛋白质能 维持血浆胶体渗透压 组成血液pH缓冲系统
3、了解其他蛋白质的来源和生理功能；尿液蛋白和脑脊液 蛋白的检测 。
3
第一节 概述
一、血浆蛋白质的分类和功能 二、血清蛋白质电泳组分的临床分析 三、血浆蛋白质及其异常 四、其他体液蛋白质
4
一、血浆蛋白质的分类和功能
（一）血浆蛋白质的组成、功能及分类
❖组成：
种类：1000种
500种
200种
含量：μg
+-
7
2.电泳分类法
醋醋纤纤膜膜电电泳泳或或琼琼脂脂糖糖电电泳泳：：55个个成成
分 清分蛋清白蛋白
αα11球球蛋蛋白白 αα22球球蛋蛋白白 ββ球球蛋蛋白白
是临床实验室常 用的血浆蛋白质
电泳方法
γγ球球蛋蛋白白
分辨分率辨高率时高：时可：有可7有个7成个分成 有分β1有和ββ12和β2 α2中也可 α有2两中条也可有两条
APR的机制
❖ 炎症损伤部位释放的细胞因子，包括白介素、肿瘤坏死 因子α和β、干扰素以及血小板活化因子等， 引发肝细 胞中上述蛋白质合成量的改变。
❖ 正向APP是机体防御机制的一个部分，如： 增加的蛋白酶抑制剂控制组织中的酶活性 触珠蛋白保护从破坏红细胞中释放的Hb C反应蛋白等可活化补体
❖ 负向APP多作为营养蛋白，此时合成减异常电泳图谱及其扫描曲线
α2 β
典型的β-γ桥
不典型β-γ桥
1.肾病综合征
9
2.功能分类法
（（22））蛋蛋白白酶酶抑抑制制物物：：白包白包酶括酶括、α、α11-α-α抗抗22胰--胰巨巨蛋蛋球球白白蛋蛋酶酶白白、、等等αα6611种-种-抗抗以以糜糜上上蛋蛋 （（33））血血清清酶酶类类：：血血浆浆固固有有酶酶如如LLCCAATT等等
组组织织细细胞胞少少量量释释放放的的细细胞胞内内酶酶 细细 胞胞破破裂裂而而进进入入血血循循环环的的细细胞胞内内酶酶 （（44））蛋蛋白白类类激激素素：：胰胰岛岛素素、、胰胰高高血血糖糖素素、、生生长长激激素素等等 （（55））凝凝血血蛋蛋白白类类 （（66））免免疫疫球球蛋蛋白白类类 （（77））补补体体蛋蛋白白类类
第七章 体液蛋白质检验
人类白蛋白分子
1
❖本章内容概要：
第一节 概述 第二节 体液蛋白质测定
2
❖本章教学要求：
1、掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类；个别血浆蛋白质 （前白蛋白、白蛋白）的来源和生理功能；血清总蛋白和白 蛋白的测定方法和原理。 2、熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类；血清球蛋白和纤 维蛋白原的测定方法。
APPs提供更多的氨基酸原料。
14
APR的时相
❖ C-反应蛋白：首先升高 ❖ α1-酸性糖蛋白：12小时内也升高 ❖ α1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4和纤维蛋白原然后
升高 ❖ C3和铜蓝蛋白：最后是升高
❖ 通常在2～5天内这些APPs达到最高值
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测定APP的临床意义
帮助监测炎症的发生、变化和观察治疗反应， 尤其是那些升高最早和最多的蛋白质
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二、血清蛋白质电泳组分的临床分析
血血浆浆蛋蛋白白质质和和血血清清蛋蛋白白质质有有何何不不同同？？ 血血浆浆：：为为生生理理状状况况 血血清清：：为为常常用用检检测测标标本本
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（一）血清蛋白质电泳的正常组分及其含量
醋纤膜或琼脂糖电泳正常区带
扫描图谱 区带图谱
醋纤膜电泳正常百分含量
清清蛋蛋白白：： 575％7％～～686％8％ αα11球球蛋蛋白白：：11.0.0％％～～55.7.7％％ αα22球球蛋蛋白白：：44.9.9％％～～1111.2.2％％ ββ球球蛋蛋白白：： 7％7％～～131％3％γ γ球球蛋蛋白白：： 9.98.％8％～～18.2 1％8.2％
mg
g
来源：肝脏是蛋白质主要的加工厂
血浆蛋白质的功能
❖ ①营养作用，修补组织蛋白; ❖ ②维持血浆胶体渗透压：主要是白蛋白； ❖ ③作为PH缓冲系统的一部分：酸性或碱性蛋白质； ❖ ④运输作用：作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、
药物等的载体； ❖ ⑤体液免疫防御系统：作为免疫球蛋白与补体等免疫分子； ❖ ⑥催化作用：酶的本质； ❖ ⑦代谢调控作用；作为底物，酶或中间产物抑制或激活组织
聚聚丙丙烯烯酰酰胺胺凝凝胶胶电电泳泳：： 可 可以以分分出出303多0多种种蛋蛋白白质质
3.功能分类法
（1）运输载体类
血浆脂蛋白：包括CM、VLDL、LDL、HDL等 前清蛋白与清蛋白 甲状腺素结合球蛋白 皮质素结合球蛋白 类固醇激素结合球蛋白 视黄醛结合蛋白 转铁蛋白 触珠蛋白 血色素结合蛋白 铜蓝蛋白
急性时相反应蛋白(acute phase reactive protein， APP)：对急性炎症和组织损伤起非特异反应从而出现浓度变化 的血浆蛋白质。
增加的蛋白质称为正向APP
下降的蛋白质称为负向APP
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机体哪些情况会出现急性时相反应？
急性细菌性感染如急性肺炎、链球菌感染性肾炎 急性非特异性炎症如风湿性关节炎、类风湿性 关节炎、风湿性心脏病等 急性心肌梗死 恶性肿瘤 手术、创伤
蛋白酶； ❖ ⑧参与凝血与纤维蛋白溶解；：除Ⅳ因子外均可。
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血浆蛋白质的分类
盐析法：白蛋白/球蛋白（pH7.0半饱和的硫酸铵溶液）
❖分离方法
醋酸纤维素薄膜电泳：6种
分
电泳法： 琼脂糖凝胶电泳：13种
辨 率
聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种
增
SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳：300种 高
--
纤维蛋白原
醋酸纤维素薄膜
（三）影响血浆蛋白质浓度的因素
1. 急性时相反应
急性时相反应（acute phase reaction，APR）： 血浆蛋 白质对急性炎症和组织损伤的非特异性反应。
此时许多蛋白质：如α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、结合珠蛋白、 铜蓝蛋白、 C4、C3、纤维蛋白原和C-反应蛋白等浓度显著升高或升高， 而少数蛋白质如前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白则出现相应下降。
还还有有许许多多种种类类的的蛋蛋白白质质未未被被认认识识
（二）血浆蛋白质的功能
1. 作为运载蛋白 2. 组织蛋白酶抑制物 3. 在血浆中起催化作用的酶 4. 参与代谢调控作用的蛋白质和肽类激素 5. 参与凝血与纤维蛋白溶解 6. 组成体液免疫防御系统（Ig与补体 ）
生物 化学
所有血浆蛋白质能 维持血浆胶体渗透压 组成血液pH缓冲系统
3、了解其他蛋白质的来源和生理功能；尿液蛋白和脑脊液 蛋白的检测 。
3
第一节 概述
一、血浆蛋白质的分类和功能 二、血清蛋白质电泳组分的临床分析 三、血浆蛋白质及其异常 四、其他体液蛋白质
4
一、血浆蛋白质的分类和功能
（一）血浆蛋白质的组成、功能及分类
❖组成：
种类：1000种
500种
200种
含量：μg
+-
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2.电泳分类法
醋醋纤纤膜膜电电泳泳或或琼琼脂脂糖糖电电泳泳：：55个个成成
分 清分蛋清白蛋白
αα11球球蛋蛋白白 αα22球球蛋蛋白白 ββ球球蛋蛋白白
是临床实验室常 用的血浆蛋白质
电泳方法
γγ球球蛋蛋白白
分辨分率辨高率时高：时可：有可7有个7成个分成 有分β1有和ββ12和β2 α2中也可 α有2两中条也可有两条