饲料中基本营养成分测定标准
饲料营养成分的测定
饲料营养成分的测定1、饲料中水分的测定饲料中的水分存在形式有两种，一是游离水（又叫初水），二是吸附水。
因此水分的测定一般包括初水和吸附水的测定，总水的计算。
有些饲料如子实、糠麸类饲料和秸杆、干草等都处于风干状态，因此只测吸附水（也就是总水），不测初水和计算总水分的含量。
1.1 初水分的测定1.1.1 仪器设备工业天秤，电热式恒温烘箱，剪刀，粉碎机，样本瓶，药匙，培养皿，筛子。
1.1.2 测定原理含水分高的新鲜饲料在60-65℃烘箱中烘干至恒重，逸失的重量即为初水。
1.1.3 测定步骤取平均样品200-300g，置于已知重量的培养皿中，先在80℃条件下，烘15min，然后放在60-65℃的烘箱中，进行干燥，干燥到样品容易磨碎（5-6h）。
将烘干的样品放在室内自然的条件下冷却4-6h（不少于2h），便成为风干状态。
称重：重复上述操作，直到两次称重之差不超过0.5g为止。
初水分=烘干前后重量之差/鲜样品重*100%1.2 吸附水分测定（干物质测定）1.2.1 测定原理在105℃±2烘箱内，在大气压下烘干，直至恒重，逸失的重量为试样吸附水分。
在该温度下干燥，不仅饲料中的吸附水被蒸发，同时一部分胶体水分也被蒸发，另外还有少量挥发油挥发。
1.2.2 仪器设备称量瓶，烘箱，药匙，干燥器（用氯化钙或变色硅胶作干燥剂），分析天平，坩埚钳，小毛刷。
1.2.3 测定步骤洁净的称量瓶，在105℃烘箱中烘1h，取出，在干燥器中冷却30min ，称重，准确至0.0002g。
重复以上动作，直至两次重量之差小于0.0005g为恒重。
在已知重量的称量瓶中称取两份平行试样，每份2-5g（含水重0.1g以上，样厚4mm以下），准确至0.0002g，称量瓶不盖盖，在105℃烘箱中烘3h（温度到达105℃开始计时），取出，盖好称量瓶盖，在干燥器中冷却30min，称重，再同样烘干1h，冷却，称重，直到两次重量差小于0.0002g。
肉牛饲料营养价值研究之饲料原料常规成分
饲料常规成分含量的高低是评价肉牛饲料营养价值的基础，也是肉牛饲养的基础。
饲料的常规成分主要指概略养分和洗涤纤维分析成分，其中前者包括水分[通常以干物质（DM ）表示]、粗蛋白（CP ）、粗脂肪或醚浸出物（EE ）、粗灰分（Ash ）、粗纤维（CF ）和无氮浸出物（NFE ），后者包括中性洗涤纤维（NDF ）、酸性洗涤纤维（ADF ）、木质素（Lig ）、中洗不溶蛋白（NDICP ）、酸洗不溶蛋白（ADICP ）和有效中洗纤维（eNDF ）等。
根据肉牛营养需要量计算的要求，本文的饲料成分表只列出肉牛饲养中常用的DM 、CP 、EE 、Ash 、NDF 、eNDF 、ADF 、Lig 、NDICP 、ADICP 等10个指标，其他成分部分将在后续的系列文章中逐步列出。
肉牛饲料的常规成分直接用来计算饲料的有用能值、瘤胃降解蛋白和氨基酸等含量指标，同时还用来对饲料配方预期饲喂效果进行评估。
准确评价饲料常规成分的含量，对于肉牛养殖企业制定科学的饲料配方和实现养殖效益的最大化，具有重要的指导意义。
饲料常规成分的分析是在实验室完成的，可采用概略养分分析、洗涤纤维分析、筛分以及近红外等快速方法进行分析。
有关分析方法的内容，用户可参阅专门的文献或国家标准，这里不再赘述。
值得说明的是，饲料的常规成分数值会因饲料种类、品种、产地、施肥、管理、加工、取样、分析方法等不同而有很大的差异。
因此，本文饲料成分表所列的成分只代表这一类饲料常规成分的平均值范围，而不能准确代表你的企业或牛场正在使用的饲料的数值。
可靠的方法是，用户在应用自产或购买的新饲料原料时，应当按照科学的规范采样和进行实验室分析，获得可靠的饲料实测数据再进行饲料配方。
需要特别强调的是，用户在使用本文饲料原料的作者简介：孟庆翔，教授，博士生导师，研究方向为肉牛营养与饲料。
收稿日期：2020-06-03肉牛饲料营养价值研究之饲料原料常规成分■孟庆翔（中国农业大学动物科技学院，北京100193）摘要：文章列出了我国肉牛常用6大类饲料基于干物质基础的常规成分数据，包括水分、粗蛋白、醚浸出物、粗灰分、中性洗涤纤维、有效中洗纤维、酸性洗涤纤维、木质素、中洗不溶蛋白、酸洗不溶蛋白等。
《动物营养学》实验指导--八项常规测定
常规营养成分的测定1．鲜重：鲜活的植物采集后立即称重的重量。
本试验是，马饲喂的草料在一定风干基础上，短时间内收集后称重。
2．风干重：采集的草料在65℃的电热恒温鼓风干燥箱中，在一定的大气压下进行烘干，损失游离水分，至恒重，剩余的即为风干物，称重。
3．干物质：试验样品在105±2℃的电热恒温鼓风干燥箱中，在一定的大气压下进行烘干，失去水分，至恒重，剩余的即为干物质。
4．有机物：是有机化合物的简称，通常把含碳元素的化合物叫做有机化合物，简称有机物。
实验一、干物质含量的测定目的：掌握饲料中吸附水的测定方法及饲料总水分的计算。
（一）原理试验样品在105±2℃的电热恒温鼓风干燥箱中，在一定的大气压下烘干，直至很重，烘后失去水分，剩余的即为干物质。
（二）仪器设备分析天平：感量0.0001g；实验室用样品粉碎机；分析筛：孔径0.45mm（40目）；电热式恒温烘箱：可控制温度为105±2℃；称样皿：玻璃或铝质（铝盒）、直径40mm以上、高25mm以下；干燥器：用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶作干燥剂。
（三）测定步骤1.试验样品的处理：样品（草样，粪样）用60-180目孔径的粉碎机进行粉碎，分装到封口带中，将空气排出，每个样品约200g，放入阴凉干燥处保存。
2.将铝盒称样皿（铝盒）洗净后，编号，置于105±2℃的电热恒温鼓风干燥箱干燥6h，至恒重。
取出置于干燥器中，冷却至室温。
用感量为0.0001g的电子天平称重，记录为W0。
3.样品（草样，粪样）准确称取1g（精确到0.0002g），放入铝盒中，记录为W1，每个样品做一个平行。
然后置于105±2℃的电热恒温鼓风干燥箱中干燥6h，至恒重。
取出置于干燥器中，冷却至室温。
用感量为0.0001g的电子天平称重，记录为W2。
（四）测定结果计算计算公式：干物质含量（%）干物质含量（%）=W2-W0×100% W1-W0公式中：W0：铝盒重（g）W1：铝盒重+样重（g）W2：铝盒重+干燥后样重（g）思考题：1.测定水分时应该注意哪些问题？2.某种饲料半干样本的105℃干物质为90%，该饲料70℃干物质为32%，计算该种饲料新鲜时干物质的含量？实验二、有机物的测定实验目的：掌握饲料中粗灰分的测定方法，并用以测定各类饲料中粗灰分含量。
饲料原料评价标准
饲料原料评价标准饲料原料评价标准是衡量饲料原料营养价值和安全性的一套指标体系。
评价标准的制定旨在为饲料行业提供科学、客观、可操作的方法，以确定饲料原料的合格性，确保饲料生产的质量和安全。
一、营养成分评价标准1. 蛋白质含量：蛋白质是动物生长、发育和免疫力维持所必需的主要营养素。
评价蛋白质含量有两个主要指标：粗蛋白和真蛋白含量。
2. 能量含量：能量是支撑动物生命活动和生产所必需的能量来源，评价能量含量的主要指标是饲料的代谢能。
3. 纤维含量：纤维是影响饲料在消化道中的通畅程度和对动物的能量利用效率的重要因素。
评价纤维含量的主要指标有粗纤维和中性洗涤纤维。
4. 矿物质含量：饲料中的矿物质对动物的正常生长、骨骼发育、体内代谢等都具有重要作用。
评价矿物质含量的主要指标有钙、磷、铜、锌、铁等。
5. 维生素含量：维生素是动物正常生理和生长所必需的微量有机化合物。
维生素含量评价的主要指标有维生素A、维生素D、维生素E等。
6. 氨基酸含量：氨基酸是蛋白质的构成成分，对于动物的生长发育和免疫功能维持非常重要。
评价氨基酸含量的主要指标有赖氨酸、色氨酸、苏氨酸等。
7. 抗营养因子含量：抗营养因子是指影响饲料营养利用效率和生产性能的物质，如抗胰蛋白酶因子、抗淀粉因子等。
评价抗营养因子含量有利于了解饲料的安全性和营养效益。
二、安全性评价标准1. 重金属含量：饲料中的重金属如铅、镉、砷等，对动物健康造成潜在的危害。
评价重金属含量有助于确保饲料的质量和安全。
2. 农药残留：农药残留是指饲料原料中残留的农药及其代谢产物，评价农药残留有助于饲料的安全性评估。
3. 饲料中毒物质：如黄曲霉毒素、赤霉毒素等，对动物肝功能和免疫功能产生负面影响。
评价饲料中毒物质含量的主要指标是毒素限量标准。
4. 残疾物质和重金属：饲料原料中的残疾物质如霉菌、细菌、寄生虫、真菌等对动物的健康产生潜在的威胁，评价残疾物质含量的指标是饲料卫生指标。
三、生产过程评价标准1. 收获方式和处理：饲料原料的收获方式和处理过程会影响其质量和安全性。
饲料成品国家标准
基础营养成分指标（%）
TP≥ 氯化钠≤
1.0 ～ 11..60 ～ 11..60 ～ 1.6 1.0 ～ 1.6 0.9 ～ 10..495 ～ 10..495 ～ 11..405 ～ 11..60 ～ 11..60 ～ 11..60 ～ 1.6
—— —— —— —— —— —— —— —— —— —— ——
12.0 4.00 #####
10.0 ##### 4.50
10.0 10.0 12.0
##### 2.50 2.50
4.50
10.0 ～ 1160..00 ～ 20.0
16.0
3.50
6.0～ 10.0
12.0
2.50
5.0～ 12.0
Ca≤
1.30 1.30 1.30 —— —— —— 1.00 1.00 0.5～1.0 0.5～1.0
一级 ##### 16.0
长毛 兔配 合饲 料
二级 浓缩饲料
##### 14.0 ##### 30.0
精料补充料 ##### 18.0
粗灰 粗脂 粗纤 分≤ 肪≥ 维≤
25.0 5.00 6.00
25.0 5.00 8.00
25.0 5.00 8.00
16.0 5.00 5.00
13.0 4.00 8.00
14.0 14.0 14.0
15.0 8.0 14.0 8.0 13.0 90.0
1.50 1.50 1.50
7.00 0.6～0.9 #### 0.30～0.80 0.90
7.00
0.55～ 0.80
#### 0.30～0.80 0.75
8.00 0.5～0.80 #### 0.30～0.80 0.60
营养成分营养价值评定饲料安全饲料卫生
饲料营养价值的评定方法：化学分析，消化试验，代谢试验，饲养试验，比较屠宰实验。
饲料养分的表示：⏹百分数(%) 主要用以表示概略养分、常量元素、氨基酸的含量。
⏹毫克/千克(mg/kg) 通常用以表示微量元素、水溶性维生素等养分(有时还用µg/kg)。
⏹国际单位(international unit，IU) 常用以表示脂溶性维生素等在饲料中的含量。
样品状态（根据饲料的含水量不同，其养分含量的表示基础不同）：3种存在状态：⏹新鲜基础：有时称为湿重或鲜重，原样基础的水分变化很大，不便于进行饲料间的比较。
⏹风干基础指空气中自然存放基础或自然干燥状态，亦称风干状态。
该状态下饲料水分含量在13%左右。
⏹绝干基础：指完全无水的状态或100%干物质状态。
用于比较样品成分含量。
概略养分分析法：Weende分析法Henneberg与Stohmann二人创建了该分析方法。
测定水分、粗灰分、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维与无氮浸出物。
概略养分：水分、粗蛋白质、粗纤维、粗脂肪、无N浸出物和粗灰分,将这些养分叫概略养分。
由于各类组分并非化学上某种确定的化合物，因此叫“粗养分”。
是饲料营养价值评定的基础。
Van Soest粗纤维分析方案纯养分分析法NSP ：非淀粉多糖，是植物的结构多糖，除了淀粉之外的，所有碳水化合物的总称，是植物细胞壁的重要成分。
（不包括木质素）SNSP ：可溶性非淀粉多糖（如阿拉伯木聚糖，β-葡聚糖等，粘性增加）；INSP ：不溶性非淀粉多糖ANF ：饲料抗营养因子，有些饲料存在某些能破坏营养成分或以不同机制阻碍动物对营养成分的消化、吸收和利用并对动物的健康状况产生副作用的物质。
消化实验：动物食入的某饲料养分减去粪中排出的该养分，即称可消化养分。
消化率就是指饲料某养分的可消化养分占饲料中该养分总量的百分率消化率分表观消化率和真消化率，同一饲料养分的表观消化率总是低于其真实消化率。
（存在内源性产物，即粪代谢性产物）用真消化率表示饲料养分的消化程度(评定饲料)比用表观消化率更真实、可靠。
饲料成品国家标准
配合饲料主要营养成分含量
饲料名称
水分 粗蛋 粗灰 粗脂 粗纤 ≤ 白≥ 分≤ 肪≥ 维≤
斑节 对虾 配合 饲料
幼虾料 中 虾料 成虾料
##### 38.0 15.0 4.50 5.00 ##### 37.0 15.0 4.50 5.00 ##### 35.0 15.0 4.50 5.00
稚鱼饲料 ##### 44.0 16.0 6.00 5.00
12.0 6.0 —— ##### 0.6～1.2 #### 0.30～0.80 南方 12.5
13.5 6.0 —— 8.00 0.6～1.2 #### 0.30～0.90
消化能≥MJ/kg（Mcal）：12.13（2.96） 消化能≥MJ/kg（Mcal）：12.13（2.90） 消化能≥MJ/kg（Mcal）：11.72（2.80） 消化能≥MJ/kg（Mcal）：12.13（2.90）
0.6～1.2 #### 0.30～0.80 0.66
0.6～1.4 #### 0.30～0.80 0.45
2.0～3.0 #### 0.30～0.80 0.60
3.0～4.2 #### 0.30～0.80 0.65
3.0～4.4 #### 0.30～0.80 0.60
0.8～1.2 #### 0.30～0.80 1.00
—— 10.00 7.00 1.00
—— 10.00 7.00 1.00
备注
配合饲料主要营养成分含量
饲料名称
水分 粗蛋 粗灰 粗脂 粗纤 ≤ 白≥ 分≤ 肪≥ 维≤
稚鱼饲料 ##### 42.0 16.0 6.00 5.00
美国 红鱼
幼鱼饲料 中鱼饲料
##### 40.0 16.0 6.00 5.00 ##### 38.0 16.0 6.00 5.00
饲料营养价值评定
饲料营养价值评定研究方法饲料营养价值是指饲料本身所含营养分以及这些营养分被动物利用后所产生的营养效果。
饲料中所含有的营养成分是动物维持生命活动和生产的物质基础，一种饲料或饲粮含的营养分越多、而这些养分又能大部分被动物利用的话，这种饲料的营养价值就高，反之，若饲料或饲粮所含营养分低、或虽营养分含量高，但能被动物利用的少，则其营养价值就低。
动物的组织及体外产品都是动物摄取的饲料营养物质在机体内代谢与转化的结果（产物），或者说是饲料养分在动物体内的沉积。
饲料营养价值的评定也就必须依据饲料中的营养物质含量和饲料中营养物质在动物体内的营养效果，定量分析饲料的营养价值。
本章将主要讨论饲料营养价值的评定方法、饲料能量和蛋白质营养价值的评定以及维生素和矿物元素营养价值的评定。
第一节饲料营养价值的评定方法近一个世纪以来，饲料营养价值主要通过化学分析、消化试验、代谢试验、平衡试验和饲养试验来评定。
各国学者对评定方法进行了大量的研究和改进，已使饲料营养价值的评定成为许多营养实验室的常规工作之一。
一、化学分析（一）分析用样品的采集与制备样品采集是饲料营养价值评定工作中最重要的一步，采集的样品必须具有代表性，即代表全部被检物质的平均水平。
否则，即使实验室分析的仪器和方法先进、科学，也不能得出科学、公证和实用的结果。
饲料样本的制备在于确保样品十分均匀，在分析时，取任何部分都能代表全部被检测物质的成分。
根据被检物质的性质和检测项目要求，可以用摇动、搅拌、切碎、研磨或捣碎等方法进行。
互不相溶的液体，分离后分别取样。
（二）饲料养分的表示百分数（%）：是最为常用的表示方法，即表示饲料中某养分在饲料中的重量百分比。
主要用以表示概略养分、常量元素、氨基酸的含量。
mg/kg：通常用以表示微量元素、水溶性维生素等养分（有时还用µg/kg）。
IU（国际单位）：常用以表示脂溶性维生素等在饲料中的含量。
CIU(鸡国际单位，chicken international unit)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实际上，100多年来世界各国一直沿用的是由德国科学家Hennberg和Stohman所创立的Weende饲料分析体系。
该分析体系是把饲料分成6种组分来分析测定：①水分(干物质)；②粗灰分(矿物质)；②粗蛋白(N x 6．25)；④粗脂肪(乙醚浸出物)⑤粗纤维；⑧无氮浸出物(NFE，计算值)。
这种饲料分析体系显然是饲料的概略分析(Feed Proximate Analysis) ，但也是最基本的饲料成分分析。
按照GB10648-1999 饲料标签的规定：蛋白质饲料、配合饲料、浓缩饲料和复合顶混料等饲料都要把水分、粗蛋白、粗纤维和粗灰分做为保证值项目进行标注。
饲料组成成分的分析对饲料组成成分的分析是研究营养物质的利用，评价饲料营养价值最基础的工作。
饲料中最重要的营养物质有碳水化合物、蛋白质、脂类、矿物质和维生素。
概略养分分析法把饲料组成成分分为水分、粗灰分、粗蛋白质（CP）、粗脂肪或乙醚浸出物（EE）、粗纤维（CF）和无氮浸出物（NEF）。
(一)水分饲料中的水分有两种存在形式，游离水和结合水。
饲料分析中经常测定总水分，采用干燥失重的方法。
对于不同饲料，干燥的方法应考虑其理化性质而有所区别。
尽管饲料中的水分营养价值不大，但是测定饲料中的水分可得出饲料干物质的含量，这与饲料的能量含量密切相关，因此水分的测定意义重大。
本方法依据GB6435—86 饲料中水分的测定，它适用于配合饲料和单一饲料水分含量的测定，但不适用于做饲料的奶制品、动植物油中的水分测定。
1.方法原理试样在(105±2)℃烘箱内和常压条件下烘干至恒重的质量为水分。
2.仪器设备(1)植物样品粉碎机或研钵；(2)试验筛：孔径0.42mm（40目）(3)分析天平：分度值0．0001g；(4)称量皿：玻璃或铝质，直径40mm、高25mm(5)电热式恒温烘箱：控制±2℃；(6)干燥器：变色硅胶干燥剂3．样品的制备(1)选取有代表性的原始样品不少于1000g。
按四分法缩分到250g，风干或以60℃烘干，用植物样品粉碎机碾细，过0.42mm试验筛(注意一定要将样品全部过筛，并混合均匀)。
封入样品袋，放在阴凉处保存，以备测定。
(2)如果饲料样品是含多汁的鲜样，如青贮、牧草等，无法直接粉碎，应进行预干燥处理：称取200-300g(准确至0.01g)鲜样，在105℃烘箱中烘杀15min，立即把温度降至65℃，烘6-8h，取出，在空气中冷却4h，称量。
失重即初水分w0(H20)。
将得到的烘干样，粉碎，过筛，装袋，以备测定。
4测定步骤(1)将称量皿洗净，在(105±2) ℃烘箱内烘干1—2h，取出在干燥器内冷却30min，用分析天平称量。
再放入烘箱烘干30min，冷却，称量，直至两次称量之差小于0．0005g为恒重。
(2)用分析天平称取2-5g样品，均匀平摊在已恒重的称量皿中，厚度小于0．5cm。
不盖称量皿盖，在(105±2) ℃恒温烘箱内烘干2—4h。
取出，盖上称量皿盖，放在干燥器内冷却30min，称量，同样再烘1h，冷却、称量。
直至两次称量之差小于0．002g为恒重。
5．结果计算(1)饲料中水分含量按公式(3—1)计算式中：W(H2O)—饲料中水分的质量分数，％；m1—105℃烘干前试样和称量皿总质量，m2一105℃烘干后试样和称量皿总质量，m0—105℃烘干的称量皿质量，g。
(2)每个试样应取两个平行样测定，以算术平均值为测定结果。
两个平行样的相对误差应小于0.2％。
(二)粗灰分粗灰分是饲料中有机物被全部氧化除去后剩余的残渣，主要为矿物质氧化物和盐类等无机物质。
粗灰分的测定方法为高温灼烧法，即将饲料样品放入别550℃±5℃的高温电炉中灼烧，至灰白色，称残渣的重量。
测定饲料中的粗灰分含量，对评定饲料矿物质营养价值意义不大。
(三)粗蛋白质饲料中的一切合氮物质的总称为粗蛋白质，用饲料中的含氮量乘以6.25进行计算。
粗蛋白质包括真蛋白质(TP)和非蛋白质性含氮化合物。
饲料总氮中的非蛋白氮(NPN）部分对水产动物几乎无用，评定饲料蛋白质营养价值有时需要对饲料中真蛋白质进行分析，如虾粉中含有大量的几丁质氮。
本方法依据GB／T6432—94饲料中粗蛋白测定方法，适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料中粗蛋白的测定。
1原理凯氏法测定试样蛋白质含量，是在催化剂作用下用浓硫酸将含氮化合物转化为硫酸铵，将生成的硫酸铵在强碱性条件下馏出氨，经硼酸溶液吸收，再用标准酸溶液滴定，将测得的氮含量乘以换算系数6．25，即粗蛋白的含量。
2仪器设备(1)植物样品粉碎机或研钵。
(2)试验筛：孔径0，42mm(40 目)。
(3)分析天平：分度值0．0001g(4)专用消煮炉或可调电炉。
(5)酸式滴定管：10mL或25mL。
(6)专用消化管或250mL凯氏瓶。
(7)凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏也可采用专用定氮仪。
(8)三角烧瓶：150mL或250mL。
3试剂(1)硫酸(AR，ρ=1.84)。
(2)混合催化剂：0.4硫酸铜(CuSO4·5H2O，AR )和6g硫酸钾(K2SO4，AR)，磨细混均。
(3)40％氢氧化钠溶液：称取40g氢氧化钠(NaOH,CP)溶于1mL蒸馏水中。
(4)2％硼酸溶液：称取20g硼酸(H3BO3，AR)1000mL蒸馏水中。
(5)混合指示剂：将0.1％甲基红乙醇溶液与0.5％溴甲酚绿乙醇溶液，按1：1等体积混合。
(6)0.1000mol/L盐酸(HCl)标准溶液：取8．3mL盐酸(AR)注入1000ml蒸馏水。
用无水碳酸钠(280℃烘干)法标定准确浓度。
称取0．2000g，溶于50mL水，加混合指示剂，用0.1mol/L盐酸滴定至暗红色。
同时滴定空白，加以校正。
(7)蔗糖(AR)(8)硫酸铵(AR)4操作步骤(1)选取有代表性的样品用四分法缩分至200g，风干或以65℃烘干后粉碎，过0.42mm 试验筛，封入样品袋，在阴凉处保存，以备分析。
(2)用分析天平准确称取0.3—1.0g制好的试样，放入专用消化管或凯氏瓶中，加入混合催化剂2.0g和12mL硫酸，盖好专用消化管盖或凯氏瓶口盖一漏斗，置于专用消煮炉或可调电炉上消煮，开始用小火加热消煮，待泡沫消失后再加大火力保持微沸状态，直至溶液透明呈蓝绿色并继续消煮2h.(3)将消化的试样放冷，加入50-60mL蒸馏水，摇匀，冷却。
将蒸馏装置冷凝管末端浸入内装25mL 2％硼酸溶液的三角瓶底部，加入2滴混合指示剂。
然后小心地向消化液内加入50mL40％氢氧化钠溶液，立即进行加热蒸馏，直至馏出液体体积为100mL为止。
取下三角瓶使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏1-2min，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，停止蒸馏。
(4)滴定：用0.1mol/L 盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变为红色为终点。
(5)空白测定：称取0．5g蔗糖代替试样，按上述操作步骤测定。
5．结果计算(1)饲料中粗蛋白质的含量按公式计算式中：w(CP) —饲料中粗蛋白的质量分数，％；V—滴定试样时所消耗的标准盐酸溶液的体积，mLV0—滴定空白时所消耗的标准盐酸溶液体积，mLC B—标准溶液盐酸的量浓度，MryLI0.0140 —氮的摩尔质量，kg/mol；m—试样质量，g(2)每试样取两个平行样进行测定，取平均值为分析结果方法允许相对偏差≤5％。
6注意事项(1)方法的可靠程度可用硫酸铵代替试样进行测定氮含量，与化学式计量氮作比较，误差应为±0．2％。
例如，准确称取0.2000g硫酸铵测定含氮量应为(21.19±0．2)％(2)如果试样中蛋白质含量高，可适当减少称样量，同时考虑蒸馏完全的问题，可适当多蒸几分钟，以保证蒸馏完全，防止对下一个样品造成的记忆效应。
(3)凯氏定氮法己沿用了l00多年，目前已有全自动定氮仪，这类仪器从消化、蒸馏到滴定可自动完成，但仪器价格较贵。
目前国产半自动定氮仪实际上是一套蒸馏装置，消化、滴定还要另行试验。
(4)GB6432—94 国标方法中规定样品消化时要加入玻璃球以防爆沸，但我们的经验证明，由于加入大量混合催化剂呈颗粒状，不产生爆沸，故无需加入。
另外，本实验考虑消化需要回流过程和减少蒸馏逸出造成的氨损失，建议消化管或凯氏瓶要加盖消化。
(5)国标方法中使用邻苯二甲酸氢钾作为基准物标定盐酸溶液。
实际上使用无水碳酸钠基准物质标定盐酸溶液也是很方便的。
(四)粗脂肪粗脂肪包括了饲料中可溶于乙醚的所有成分，故又称乙醚浸出物。
通常用索氏抽提器回流浸提饲料样品进行粗脂肪的测定。
按照国标GB／T6433—94，饲料中粗脂肪的测定方法适用于各种单一饲料、混合饲料和配合饲料的分析。
1原理采用索氏(Soxhlet)脂肪提取器用乙醚抽提试样，抽提物的总质量为粗脂肪含量。
2．仪器设备(1)植物样品粉碎机或研钵.(2)试验筛：孔径0．42mm(40 目)(3)分析天平：分度值0.0001g(4)电热恒温水浴锅：室温-100℃。
(5)鼓风电热烘箱：50-200℃。
(6)索氏脂肪提取仪(带球形冷凝管)100-150mL(7)滤纸或滤纸筒：中速，脱脂。
(8)干燥箱：变色硅胶或无水氯化钙作干燥剂3试剂无水乙醚（AR）4．分析步骤(1)选取有代表性的试样，用四分法缩分至200g，风干或以65℃烘干后粉碎，过0.42mm 试验筛，混匀封于样品袋内，于阴凉处保存，以备分析。
(2)索氏提取器应干燥无水，把抽提瓶(内装数粒沸石)在(150±2)℃烘箱内烘干1—2h，取出放入干燥器内冷却30min，称量。
再烘30min，同样冷却，称重。
两次称量之差小于0．0008g 为恒重。
(3)视饲料中脂肪含量称取l—5g(准确至0．0002g)置于滤纸筒内，或用滤纸包好，放入l05℃烘干1—2h，取出放入抽提器内，滤纸包应完全浸入乙醚，向抽提瓶内加60-100mL乙醚，装好回流装置，在65-75℃水浴上加热回流，控制乙醚回流速度为每小时8-10次，共回流50-70次。
取出试样，仍用原抽提瓶回收乙醚，取抽提瓶，在水浴上蒸除残存乙醚。
(4)将抽提瓶外水分擦干，放入(150±2)℃烘箱内烘干2h，取出放入干燥器内冷却30min，称量。
同样再烘lh，冷却，称量。
两次称量之差小于0.001g为恒重。
5结果计算(1)饲料中粗脂肪的含量按公式计算式中：w(EE)——饲料中粗脂肪的质量分数，％：m2——己恒重的抽提瓶质量，g；m l——己恒重的拍提瓶和粗脂肪的总质量m——风干试样质量，g。
(2)母个试秤取两个平行样测定，取平均值作为分析结果相对误差应小于5％。
6．注意事项(1)本文介绍的方法又称为油重法，GB/T6433—94中称为仲裁法。
如果样品数量多，又不作为仲裁，可采用减重法。