Y染色体微缺失结果判读表
Y染色体微缺失
好的解释发病原因，提供遗传咨询和指导临床诊疗。
• 1996年将 AZF区划分为 3个区:AZFa、AZFb、 AZFc。1999 年研究发现在 AZFb 和 AZFc 间存在AZFd。研究发现 ,在 Y染色体 AZFa、 AZFb、 AZFc3个区至少发现 15 个与精子发生相关的基因，AZFd区尚未发现相关基因。
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四 Ｙ 染色体微缺失的检测方法
• 选择位于 Y染色体短臂 ( Y p ) 的睾丸决定基因( S RY ) 和锌 指蛋白基因( Z F X ／ Z F Y ) 为对照。Z F X ／ Z F Y既存在于 x染色体短臂， 也存在于 Y p ， 其与 S R Y一起构成2个 目 前推荐使用 的参照基因。每个 A Z F区域至少设置2个 S T S 位点 才能正确有效.
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二 Y染色体微缺失相关基因
• AZFa缺失的病人 , 主要表现为唯支持细胞综 合征伴睾丸体积缩小 ,无精子生成
• AZFb缺失的病人主要表现为生精过程阻滞 在精母细胞阶段 ,无精子生成
• AZFc区缺失病人表现多样化 ,会出现无精子 症和少精子症的不同临床表现
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二 Y染色体微缺失相关基因
• AZFa缺失患者 33%为严重少精子,67%表现为 无精子
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四 Ｙ 染色体微缺失的检测方法
• 由于不 同实验室采用 P C R方法不 同,导致 实验结果各异。为提高诊断质量， 欧洲男 科协 会( E A A ) 和欧洲分子遗传实验质控网 ( E MQ N) 在 1 9 9 9 、 2 0 0 4年先后颁布了 第 1版和第 2版 Y染色体 微缺失分子诊断指 南， 规范了检测微缺失时的Y 染色体序列 标签点( s e q u e n c e t a r g e t e d s i t e s ， S T S ) 与 所采用的内外对照方法。
Y 染色体微缺失快速检测系统 说明书
Y染色体微缺失快速检测系统说明书 ２５人份／盒z概述本试剂盒用于快速检测人（男性）Y染色体AZF座位（Azoospermia Factor）的缺失。
多项研究发现，AZF基因家族共有AZFa、AZFb、AZFc三个座位（在AZFb与AZFc之间还存在AZFd座位，中等程度的少精和精子数目正常却形态异常多会与该区域的缺失有关），其中任何一个座位的微缺失都可导致生精障碍。
本试剂盒共设计15对引物和一对内控（内部质量控制）引物，利用PCR（Polymerase Chain Reaction）技术可从Y染色体上特异性扩增出15条非多态性短片段的序列标签位点（Sequence Tagged Sites，STS）和一条内控基因片段。
这些引物对分别组合成4套多重PCR系统，在相同条件下，进行4管PCR扩增反应，通过电泳结果判定15个序列标签位点（STS）的存在与否。
主要特点：1.可对15个STS序列标签位点进行检测，这15个位点覆盖了所有的AZF区域，其中AZFa有3个位点，AZFd有2个，AZFb有6个，AZFc 有4个位点；2.高特异引物确保结果的可靠性，并具有内控（内部质量控制）基因片断的检测；3.独特的防污染设计，有效避免假阳性的产生；4.符合并超过欧洲生殖学会推荐的检测标准。
应用：胞质内单精子注射（ICSI）技术辅助生育治疗前的检测、少精症与无精症男性患者遗传学检测、精子库的入库前筛查等。
z试剂盒组成组成成分数量保存条件PCR反应液Ⅰ（紫色） 25管(每管14μL ) -20℃PCR反应液Ⅱ（无色） 25管(每管14μL) -20℃PCR反应液Ⅲ（蓝色） 25管(每管14μL) -20℃PCR反应液Ⅳ（黄色） 25管(每管14μL) -20℃纯水z有效期六个月z需自备的仪器及试剂PCR仪（推荐使用PTC-100或PTC-200, M J Research Co.或其它国际知名品牌PCR仪）DNA电泳系统z操作步骤1.基因组DNA的获取使用本公司全血DNA快速提取试剂盒从抗凝全血中抽提人（男性）基因组DNA，按操作说明进行。
Y染色体微缺失检测
Y染色体微缺失检测试剂盒背景介绍根据国际卫生组织调查数据，约15%育龄夫妇存在生育障碍，其中男性因素引起的生育障碍约占一半。
在已知的导致男性不育的遗传学因素中，发病率最高的两种是Y染色体的微缺失和克氏综合症。
Y染色体具有大量重复基因序列及回文结构，这些结构在维持Y染色体进化稳定性的同时也使回文结构内部基因易于丢失，进而导致不育。
缺失率最高的三个影响精子发生的区域被命名为AZFa，AZFb和AZFc，它们之中任何一个出现缺失都有可能导致育性下降或不育。
Y染色体微缺失在无精症或少精症患者中发病率在10-15%，已成为男性不育患者的常规检查项目。
图1，Y染色体AZF区结构示意图（AZFa区两端有两段原病毒序列、AZFb/c区内部有5个序列高度一致的大的回文结构，这些序列和结构导致相应染色体片段易发生同源重组，造成缺失或复制。
）欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控协作网（EAA/EMQN）2004年发表“Y染色体微缺失分子诊断指导意见”建议通过对各AZF区的共6个STS位点和两个对照位点检测Y染色体微缺失。
产品简介本剂盒通过“多重定量荧光PCR技术”（Multiplex Quantitative Fluorescent PCR），以一个高度复合的扩增体系中扩增至少15个Y染色体微缺失检测相关的位点，并根据各位点有无扩增产物及扩增产物剂量判断缺失类型。
对于Y染色体微缺失，由于各AZF区片段相对较小，常规核型分析等方法难以发现其缺失。
本项目采用的检测方法是：在各AZF区上分别选择具有序列特异性的多个位点，通过多重定量荧光PCR方法检测各位点。
根据有无扩增产物判定样本染色体是否包含所检测的序列特异性位点，进而推断样本染色体是否在位点所在AZF区域发生缺失；通过部分位点扩增产物相对剂量确定相关位点拷贝数比例，根据拷贝数比例推断相关位点对应区域是否发生缺失或复制，并对于AZFb和/或AZFc区部分缺失或复制，实现了首次检测。
不育男性Y染色体微缺失与辅助生殖助孕结局的关系
ＤＯＩ：１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０２１．０４．０７·生殖检验·不育男性Ｙ染色体微缺失与辅助生殖助孕结局的关系 侯建华，马玉珍，孙文芳，陈红，任宇（内蒙古自治区人民医院生殖医学中心，呼和浩特０１００５１）摘要：目的 探讨男性不育症患者Ｙ染色体微缺失与辅助生殖技术助孕结局的关系。
方法 用ＰＣＲ技术对３４６例男性不育症患者Ｙ染色体无精子因子（ＡＺＦ）６个序列标签位点（ＳＴＳ）基因进行微缺失检测，并同时进行男性性激素、染色体核型分析及精液常规检查，其中９４例同期在我中心进行了体外受精（ＩＶＦ）／卵细胞质内单精子注射（ＩＣＳＩ）助孕治疗。
结果 ３４６例男性不育症患者中共检出ＡＺＦ微缺失１７例，总缺失率为４．９１％（１７／３４６）。
其中无精子症１０５例（Ａ组）中，９例缺失有ＡＺＦｃ区缺失、ＡＺＦｂ区缺失、ＡＺＦａ＋ｂ＋ｃ区缺失；重度少精子症７５例（Ｂ组）中，６例缺失均为ＡＺＦｃ区缺失；轻、中度少精子症１６６例（Ｃ组）中，２例缺失均为ＡＺＦｃ区缺失；Ａ组的缺失率（８．５７％，９／１０５）、Ｂ组的缺失率（８．００％，６／７５）高于Ｃ组（１．２６％，２／１６６），但Ａ组与Ｂ组相比较，差异无统计学意义。
同期９４例进行ＩＶＦ／ＩＣＳＩ助孕治疗的患者中，９例有Ｙ染色体微缺失，妊娠率为５５．６％（５／９），活产４例（１例因胎儿畸形行孕中期引产）；８５例无Ｙ染色体微缺失，妊娠率为４８．２％（４１／８５），活产３９例，流产２例；两组妊娠率及活产率均无统计学差异。
结论 Ｙ染色体微缺失是无精子症及重度少精子症的重要原因之一，且缺失区域以ＡＺＦｃ区最多见，ＡＺＦｂ区次之，ＡＺＦａ区罕见。
关键词：Ｙ染色体微缺失；无精子因子；辅助生殖；助孕中图分类号：Ｒ４４６ 文献标志码：Ａ 据ＷＨＯ统计，育龄期夫妇中不孕不育比率约为１０％～１５％，男性因素占３０％～５０％［１］，其中由染色体所致的遗传因素约占男性因素的３０％［２ ３］，是男性不育症的重要因素之一。
Y染色体微缺失检测结果的分析
（ ６ ９ ／ ３ ７ １ ２ ） ， Ａ ｚ Ｆ ｂ ５ ． ２ ８ ％（ １ ９ ６ ／ ３ ７ １ ２ ） ， Ａ ｚ Ｆ ｃ ９ ． ５ ６ ％（ ３ ５ ５ ／ ３ ７ １ ２ ） ， Ａ ｚ Ｆ ｄ ９ ． ８ ６ ％ （ ３ ６ ６ ／ ３ ７ １ ２ ） ．Ａ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ １ ９ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ
（ Ｆ ａ ｍ ｉ ｌ ｙ Ｐ ｌ ａ ｎ ｎ ｉ ｎ ｇ Ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｌ ａ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ 。 Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ５ １ ０ ６ ０ ０， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｄ ｉ ｓ ｃ ｕ ｓ ｓ Ｙ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ｏ ｓ ｏ ｍ ｅ ｍ ｉ ｃ ｒ ｏ ｄ ｅ ｈｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｙ ｐ ｅ ｓ ａ ｎ ｄ ｉ ｔ ｓ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ．Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ： Ｙ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍｏ －
ｄ ｅ ｌ ｅ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｙ ｐ ｅ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｆ ｏ ｕ ｎ ｄ。 ｔ ｈ ｅ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｍｏ ｓ ｔ ｃ ｏ ｍｍｏ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｄ ｅ ｌ ｅ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｙ ｐ ｅ ｓ ａ ｃ ｃ ｏ ｕ ｎ ｔ ｅ ｄ ｆ ｏ ｒ ８ ４ ． ２ ０ ％ ｏ ｆ ａ ｌ ｌ ｄ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｄ ｅ ｌ ｅ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｙ ｐ ｅ ｓ 。
摘要 ： 目的 探讨 Ｙ染色体 微缺失类型及其临床意义。方法 回顾分析我 院门诊 不育症男性 Ｙ染色体微缺 失 （ Ａ Ｚ Ｆ ） １ ５个基 因位 点的检 测结 果。结果 ３ ７ １ ２例 Ａ Ｚ Ｆ基 因检 测 结果 显示 ， Ａ Ｚ Ｆ总的缺 失 率 为 １ ０ ． ９ １ ％， Ａ Ｚ Ｆ ａ 、 Ａ Ｚ Ｆ ｂ 、 Ａ Ｚ Ｆ ｃ 、 Ａ Ｚ Ｆ ｄ的缺 失率分别为 １ ． ８ ６ ％（ ６ ９ ／ ３ ７ １ ２ ） 、 ５ ． ２ ８ ％（ １ ９ ６ ／ ３ ７ １ ２ ） 、 ９ ． ５ ６ ％（ ３ ５ ５ ／ ３ ７ １ ２ ） 、 Ａ Ｚ Ｆ ｄ ９ ． ８ ６ ％（ ３ ６ ６ ／ ３ ７ １ ２ ） 。共发现 １ ９种不 同的缺失类型 ， 最 常见三种缺 失类型所 占全 部缺 失类 型的 ８ ４ ． ２ ０ ％， 它们 分别 为： Ｓ Ｙ １ ５ ２＋ Ａ Ｚ Ｆ ｃ缺失 ， ４ ４ ． ４ ４ ％（ １ ８ ０ ／ ４ ０ ５ ） ； Ａ Ｚ Ｆ ｂ＋Ａ Ｚ Ｆ ｃ ＋Ａ Ｚ Ｆ ｄ缺失， ２ ７ ． ４ １ ％（ １ ｌ １ ／ ４ ０ ５ ） ； １ ５个基 因位点全缺 失， １ ２ ． ３ ５ ％（ ５ ０ ／ ４ ０ ５ ） 。结论 Ａ Ｚ Ｆ各 区缺 失 率从高 到低依 次为 ： Ａ ｚ Ｆ ｃ ＞Ａ Ｚ Ｆ ｂ＞Ａ ｚ Ｆ ａ 。Ａ Ｚ Ｆ缺 失 患者 中， Ｓ Ｙ １ ５ ２＋Ａ ｚ Ｆ ｃ 缺 失 的有 ５ ％表现为少精子症， 其余为无精 子症 ； Ａ Ｚ Ｆ ａ 、 Ａ ｚ Ｆ ｂ 有缺 失 的患者 均表现 为无精 子症。Ａ Ｚ Ｆ ｄ的存在 意义及 Ｓ Ｙ １ ５ ２ 的 归属问题有待进 一步探讨 。 关键词 ： Ｙ染色体 ； 微 缺失； 临床 意义
Y染色体微缺失检测指导
丫染色体微缺失是严重少精子或无精子症的重要原因，是导致男性不育的第二大遗传因素，其发生率仅次于Klinefelter综合征（克氏综合征）。
从1999年开始，欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控网（EAA/EMQN为提高诊断质量，出版了丫染色体微缺失分子诊断指南，并提供了客观的实验质量评价方法。
最新版的实验室指南是2013年9月EAA/EMQN根据12年的临床积累和专家共识，在1999版和2004版的基础上修订而成。
新指南重点阐明：在少精子症或无精子症男性中发现的丫染色体微缺失区域，主要是无精子因子（azoospermia factor，AZF）区域仅包含AZFa AZFb AZFbc AZFc和AZFabc区，独立的AZFd区并不存在；AZFc 区中gr/gr 缺失是影响精子生成的一个危险因素，但临床意义尚存争议，不作为常规检查指标；检测位点增加并不能提高检测灵敏度，反而可能使结果复杂化；基于两管多重PCR的检测方法仍适用于整个AZF缺失检测。
EAA/EMQN 12年国际质量评估计划（EQA计划）的实施表明，参与实验室通过规范实验操作，改善报告质量，可有效降低诊断错误率。
丫染色体微缺失在中国不育男性中的发生频率为11.5%，处于较高水平，我们建议将AZF检测作为男性严重少精子或无精子症的常规检测项目，呼吁国内AZF检测实验室加入EQA计划，完善中国丫染色体微缺失检测实验操作规范。
丫染色体微缺失分子检测在中国已开展多年，国内专家对AZF缺失模式、检测序列标签位点（sequenee- tagged site, STS的数量、检测方法和内部质量控制等临床问题未达成共识。
各实验室的诊断操作方法有很大不同，导致不准确或错误诊断时有发生，迫切需要建立丫染色体微缺失诊断标准和质量控制标准。
EAA/EMQN 更新的2013版指南对以上问题都给出了明确的专家共识，对我国建立自己的检测指南有重要的指导意义。
一、丫染色体微缺失发生频率丫染色体微缺失在健康人群中发生率约为1/4 000，但在不育男性中显着升高，微缺失发生频率为2%〜10%（甚至更高）。
y染色体微缺失检测报告
y染色体微缺失检测报告Y染色体微缺失检测报告是通过分析个体的Y染色体上的基因组信息，来判断是否存在Y染色体上的微小缺失。
Y染色体微缺失通常是指在Y染色体上缺失了一小段DNA序列，可能导致生殖系统发育异常，进而可能影响男性生育能力。
该检测报告的撰写需要结合临床数据和分子生物学实验结果，从以下几个方面进行描述和讨论：1. 检测目的和方法：- 描述检测的目的，即确定是否存在Y染色体微缺失。
- 说明采用的具体检测方法，如多聚酰胺凝胶电泳或其他分子生物学分析技术。
2. 检测样本信息：- 描述样本来源，包括个体的基本信息和临床病史。
- 指明分析的样本类型，如血液或其他生物组织。
3. 实验结果：- 描述实验的结果，包括检测到的Y染色体微缺失情况。
- 列出具体的DNA序列变化，如缺失的起始和终止位置，缺失的碱基数目等。
4. 结果解读：- 对实验结果进行解读，包括指出是否存在Y染色体微缺失以及缺失的具体位置。
- 讨论缺失的大小和可能的影响，如是否涉及重要基因或调控区域。
5. 临床意义：- 探讨Y染色体微缺失与男性生育能力的关系，如可能导致的生殖系统发育异常及不育症。
- 分析缺失的具体基因或区域对生殖系统发育的影响，提供临床参考依据。
6. 建议和辅助诊断：- 根据检测结果提出建议，如是否需要进一步的检测确认或治疗。
- 推荐辅助诊断方法，如遗传咨询或其他相关检测。
总结：针对Y染色体微缺失的检测报告需要结合实验结果和临床数据，全面地分析和描述缺失情况，并对其临床意义进行解读和讨论。
通过该报告，可以为医生提供指导和帮助，为患者提供更准确的诊断和治疗方案。
中国人Y染色体微缺失分子诊断指南(草案)
中国人Y染色体微缺失分子诊断指南（草案）2005.4 上海前言在精子发生障碍引起的男性不育患者中，Y染色体微缺失的发生率仅次于Klinefelter’s syndrome(克氏综合征)，是居于第二位的遗传因素。
Y染色体微缺失已成为男性不育患者的常规检查项目。
欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控协作网为提高诊断质量，在1999年和2004年先后发布了第一版和第二版Y染色体微缺失分子诊断指南。
经过多年的临床实践证明该指南准确、灵敏和易于操作。
2005年4月在上海召开了中国人Y 染色体微缺失分子诊断的研讨会，成立了Y染色体微缺失分子诊断协作网。
会议在欧洲指南的基础上起草了符合目前我国男性不育诊疗现状，并反应最新生物技术发展的中国人Y染色体微缺失分子诊断指南。
本指南重点讨论Y染色体微缺失分子诊断具体实施时的标准化和规范化，推荐的相关方法和设计是根据欧洲指南和我国已有的实验研究基础上综合而成。
对机理研究和背景知识介绍部分在本指南中不再详细讨论。
男性不育症患者Y染色体微缺失分子筛查适应症常规检测的适应症：1、男性不育症患者选择单精子卵泡浆内注射（ICSI）或体外受精（IVF）生育子代前；2、非梗阻性无精子症患者；3、严重少精子症患者（精子数目少于5×106/ml）；4、无精子症患者进行睾丸活检术前；5、男性不育症患者（如精索静脉曲张）手术前；6、原因不明的男性不育症患者用药前。
推荐检测的适应症：1、少精子症患者（精子数目少于20×106/ml）；2、精子密度正常，但原因不明的男性不育症患者；3、男性不育伴隐睾和精索静脉曲张的患者；4、妻子有不明原因习惯性流产的患者。
诊断实验指南Y染色体上存在影响精子发生的无精子因子（AZF）区域，进一步可分为AZFa,AZFb和AZFc三个区域。
Y染色体微缺失分子诊断实验利用多重聚合酶链反应（multiplex－PCR）特异性扩增Y染色体AZF区域的序列标签位点（STS），扩增产物用电泳或杂交等方法进行检测。
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I管（紫色） 条带 STS SRY 产物 座位 472bp / 条带
II管（白色） STS SRY 产物 座位 条带
III管（蓝色） STS SRY 产物 座位 条带
IV管（黄色） STS SRY 产物 472bp / 座位
472bp /
Y染色体微缺失电泳检测结果判读表
产物座标 （bp) 450 400 350 300 250 200 150 100 50 0 1、正常男性（阳性对照）Y染色体微缺失电泳结果显示15个STS位点无缺失（即：以上的所有条带都应该有。） 2、SRY是内控，4个管中都有，都应该显带，没有显带说明结果存在问题，操作或试剂质量产生问题的可能性都有。 结果解读： 3、如果某管中的某个STS位点未出现（如sY143和sY242)，说明该位点缺失，结果报相应的座位缺失： 如：AZFb+AZFc联合缺失 sY255 126p AZFc sY152 125bp AZFc
472bp /
sY254 400bp AZFc
sY143 310bp AZFb
sY840bp AZFa
sY134 301bp AZFb sY82 264bp /
sY127 274bp AZFb sY242 233bp AZFc sY293 200bp AZFc
sY128 228bp AZFb sY133 177bp AZFb