全血水杨酸钠药物代谢动力学参数测定
【最新精选】水杨酸钠药代动力学实验分析
全血水杨酸钠药物代谢动力学参数的测定一、实验目的：掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法，掌握用分光光度法测定水杨酸钠（sodium salicylate）的血药浓度。
二、实验动物：家兔体重2.585kg 性别：雌三、实验药品：20%乌拉坦、生理盐水、0.5%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、蒸馏水水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸（salicylic acid），与三氯化铁生成一种紫色络合物。
该络合物在520nm 波长下比色，其光密度与salicylic acid 浓度成正比。
反应式为：四、实验器材：电子天平、兔台、5ml和1ml枪头、5ml注射器、6号针头、手术器械、动脉插管、棉球、头皮针、10ml离心管、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器五、实验方法1、取10支10ml试管，用0.5%肝素润湿管壁。
2、家兔称重，从兔耳缘静脉注射20%乌拉坦（1g/kg体重，注射了13ml），待兔麻醉后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头(此时家兔惊醒，补助乌拉坦6ml)。
3、剪去颈前部兔毛，正中切开皮肤5-6cm，用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉，暴露器官及与气管平行的颈动脉。
分离颈动脉，行颈动脉插管。
手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖手术创口。
静脉注射肝素，剂量为1000U/kg体重（约为2.58ml）。
4、取1支10ml试管，家兔颈动脉取血1.5ml，摇匀试管内血液，防止凝血。
5、沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg（因注射过程中发现部分药品漏出，补注了一部分，估计约为3.9ml）。
于注射后1、3、5、10、20、50、80、110min分别颈动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。
6、取10支10ml离心管，水杨酸注射前取血管子标为“对照”，水杨酸注射之后不同时间取血管标为相应“取血时间”，另有1个管子没有取血，直接加入配置好的0.06%水杨酸钠标准液标为“标准”，按下表加入样品及试剂：7、8、各试管取上清液3ml加入另一套干净试管中，再加入10%三氯化铁0.3ml，混匀显色。
讲稿水杨酸钠半衰期测定
川北医学院讲稿水杨酸钠半衰期（t1/2）的测定【实验前预习】药物代谢动力学。
【实验目的】用比色法测定水杨酸钠的血药浓度并计算半衰期。
【实验原理】药物血浆半衰期（或称消除半衰期，elimination half-life time，t）1/2是指血浆药物浓度下降一半所需的时间。
绝大多数药物是按一级动力学的规律消除，其血浆半衰期的数值是固定的。
水杨酸钠在酸性条件下与三氯化铁反应生成一种紫色络合物。
该络合物在波长510nm下比色，其光密度与水杨酸浓度成正比。
利用比色法测定药物在血中两个以上浓度值，即可求得药物的血浆半衰期。
【实验器材与药品】V1100分光光度计，离心机，10m1试管，试管架，5ml注射器及针头，吸耳球，计算器，10%水杨酸钠溶液，10%三氯醋酸溶液，10%三氯化铁溶液，0.1%肝素(heparin)溶液，蒸馏水。
【实验对象】家兔。
【实验方法与步骤】1．取离心管3支，分别标记为A、B、C，各加入10%三氯醋酸7ml。
2．取家兔1只，称重后由心脏(或颈动脉、耳缘静脉)取血2ml，置A管中(注射器内壁用0.5%肝素生理盐水溶液润湿)。
3．由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠2 ml/kg，并记录注射完毕的时间。
4．给药后10min和40min，先后自心脏取血2 ml，分别置入离心管B及C 中,记录取血的准确时间。
5．将3支离心管摇匀，以2000转/min的转速离心5 min。
准确吸取离心后的上清液各6 ml分别置入编号的试管中，每管加10%三氯化铁溶液0.5 ml，摇匀，显色。
6．以A管为对照，用V1100分光光度计在510nm波长处分别测定B管和C管的光密度值D1和D2，测定方法如下：1.接通V1100分光光度计电源，打开检测室盖板，调整波长为510mm；2.合盖→拉滑杆3.将黑体放入光路中→按MODE键到T档→按0%T键校零；4.将A管对准光路→按MODE键到A档→按100%T键调零；5.将B、C管依次对准光路→测出D1和D2值7．根据K＝CD将测得的D1和D2代入下面的公式计算水杨酸钠的血浆半衰期。
药理学实验讲义
药理学实验讲义南方医科大学药学院２０１０－７目录实验一实验动物操作的基本机能 (2)实验二不同给药途径对药物作用的影响 (4)实验三全血水杨酸二室模型药物代谢动力学参数测定 (5)实验四肝肾功能对药物作用的影响 (6)实验五药物镇痛实验 (7)实验六巴比妥类药物的抗惊厥作用 (9)实验七利多卡因对抗氯化钡引起的心律失常实验 (13)实验八有机磷酸酯类中毒及解救 (14)附录1 药理学实验基本要求 (19)附录2 药理学在新药研究中的应用 (22)实验一、实验动物操作的基本机能一、目的：学习实验动物编号、捉持、给药、采血等基本操作方法。
二、实验材料（一）动物：小白鼠10只，雌雄各半，体重18g ~ 22g。
家兔1只，雌雄均可。
（二）器材：1 ml注射器，5 ml注射器，针头，灌胃针头，大烧杯，天平。
三、方法1. 性别鉴别小鼠的性别鉴别通常以肛门与生殖孔之间的距离来判断，距离近者为雌性，距离远者为雄性。
家兔可以从生殖器分辨其性别。
2. 编号可根据情况和习惯而定，符合清晰易辨、简便耐久的要求即可。
例如小鼠，右前肢皮肤外侧涂色标记为1号，腹部右外侧皮肤涂色标记为2号，右后肢皮肤外侧涂色标记为3号，头部皮肤涂色标记为4号，背部正中皮肤标记为5号，尾巴根部标记为6号，7、8、9号在左侧同1、2、3号，第10号不色。
3.捉持右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠笼）上面，轻轻向后拉其尾，此时小鼠前肢抓住粗糙面不动；用左手的拇指和食指捏住其头部皮肤和双耳；其余三指和掌心夹住其背部皮肤及尾部。
这样小鼠便可被完全固定在手中。
4. 给药(1)小鼠的给药方法①灌胃（po）：将小鼠固定后，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角处插入口腔，沿上腭插入食道。
如遇阻力，可将灌胃针头抽出再另插，以免穿破食道或误入气管，造成动物死亡。
灌注量一般为0.1～0.2ml/10g，不超过0.5ml/只。
②肌内注射（im）：两人合作，注射部位多选后腿上部外侧。
药物代谢和药动学参数的测定和评价
药物代谢和药动学参数的测定和评价药物代谢和药动学参数对于药物的研究和应用过程中至关重要。
药物代谢主要包括药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程。
药动学参数则包括药物的半衰期、最大浓度、峰时间、面积积分等指标。
这些参数的测定和评价是有很多细节和方法的。
一、药物代谢的测定1.药物吸收的测定药物的吸收是药物进入体内的第一步，其测定方法多种多样。
其中，最常用的方法是口服给药后测定血浆药物浓度，通过测定药物在体内的代谢和排泄过程来计算其吸收速率和吸收率。
2.药物分布的测定药物在体内的分布对于药物的效果、安全性等方面至关重要。
药物分布的测定方法包括动物实验、分布/Fu值法、药物致融解分析法等。
其中，动物实验法是最常用的方法，通过在动物实验中，给药物标记放射性同位素，进而测定药物在不同体组织中的分布，得出药物分布规律和药物在体内的留存时间。
3.药物代谢的测定药物在体内被代谢和转化成的代谢产物对于药物的疗效和安全性有着至关重要的作用。
药物代谢的测定方法包括体外试验和动物实验，其中体外试验可以测定药物在人体内的代谢途径和代谢产物的结构等，而动物实验则可以在体内测定药物在肝脏等器官中的代谢酶活性和代谢产物的浓度等。
4.药物排泄的测定药物在体内的排泄过程对于药物的效果和安全性也具有影响。
药物排泄的测定方法包括动态分析法、动物实验法、单次静脉注射法等。
其中，动物实验法是最常用的方法，通过测定药物在体内的消失速率和排泄清除率等指标，得出药物在体内中的留存时间和药物在尿液和粪便中的排泄情况等。
二、药动学参数的测定1.药物的半衰期药物的半衰期是指药物在体内分解降解的时间，通常用于预测药物在体内的留存时间和药物的清除速率。
药物的半衰期的测定方法包括单次静脉注射法、动态分析法等。
2.药物的最大浓度和峰时间药物的最大浓度是指药敏感感受器觉察到药物浓度最高的时间点，通常用于预测药物的吸收速度。
药物的最大浓度通常会与药物的峰时间同步。
血药浓度测定及药动学参数的计算
1
实验原理
水杨酸钠可与氯化高铁产生显色反应， 其光密度与水杨酸钠浓度成正比）×标准管浓度
2
实验目的
1.测定血药浓度 2.制作时量曲线，计算半衰期
3
实验步骤
1.家兔称重，麻醉，固定
2.颈总动脉插管供采血
3.耳缘i.v. 肝素1ml/kg全身肝素化
分别测量各采血点和标准管的药物 吸光度值 不要触碰比色皿的光面
7
实验结果
1.计算各采血点的血药浓度
2.制作时量曲线
3.计算半衰期
8
①各管搅拌1min； ②加蒸馏水2.5ml，搅拌1min； ③离心10
min， ④上清比色
注意事项
采血、混合液和离心
采血前须放血1毫升 放血0.5毫升，移液管吸取0.3毫升
和混合液搅拌后应立即离心测量
一般可采血2次后再分别混合、离心
采血时间间隔可增加或缩小
6
分光度计测量
已制作好空白管，已用空白管调零
4.耳缘i.v. 10％水杨酸钠溶液2ml／kg
5.颈总动脉采血0.3ml
4
全血水杨酸钠浓度测定步骤（ml） 给药前 5分 10分 20分 35分 50分 70分 90分 标准 空白
混合液 2 全血 0.3 0.04%水杨酸 0 蒸馏水 0 2 0.3 0 0 2 2 0.3 0.3 0 0 0 0 2 0.3 0 0 2 0.3 0 0 2 0.3 0 0 2 2 0.3 0 0 0.3 0 0 2 0 0 0.3
机能实验学
南方医科大学本科专业教学大纲机能实验学Functional Experimentation基础医学专业临床医学专业医学实验技术专业等医学相关专业执笔人：李明，金春华审定人：金春华学院负责人：冯天元南方医科大学教务处二○○六年十二月课程代码：B010010 (机能实验学一)/ B010011 (机能实验学二)一、课程简介机能实验学是一门主要研究机体功能变化规律的实验课程，主要涉及生理学、病理生理学和药理学这三门课程的实验内容，从正常-病理状态-药物影响三个不同角度系统地观察和探讨机体器官功能的变化规律。
教学的基本要求和目的是使学生学习和了解生理学、病理生理学和药理学这三门课程的经典实验内容，比较系统地学习和掌握以生理实验技术为基础的各种动物实验知识和操作技能，学习和模拟科研的基本过程，初步培养学生的综合实验能力和创新思维能力。
本课程的先修课程是解剖学、组织胚胎学、生理学、病理学、病理生理学、药理学、统计学等课程。
后续课程为诊断学及临床课程。
本课程适用基础医学、临床医学、医学实验技术、中医药学及其它医学相关专业。
教学时数为100学时，分成第四、第五两个学期上课，分别称为机能实验学(一)和机能实验学(二)。
第四学期主要上基础性实验，42学时，1.5学分；第五学期主要上综合性和探索性实验，58学时，1.5学分。
“Functional Experimentation” is an integrated experimental course with 3 credits and 100 class hours for the undergraduate students who are major in medicine-related subjects. The contents of the course consists of three levels of experiments, e.g. the basic and classical experiments of physiology, pathophysiology and pharmacology, the integrated experiments from those subjects and the self-designed experiments by students themselves. The aims of the course is to train the students to have a good command of the common animal experimental techniques and methods for determining the organ and system functions in animals, so as to enhance their experimental skills remarkably and study the research principles and methods to cultivate their preliminary innovative idea in medical science research.二、教学内容与要求本课程主要包括三部分的内容：第一部分，介绍实验基本知识、技术和方法。
全血水杨酸钠药物代谢动力学参数测定
水杨酸钠药物代谢动力学参数测定前言：本实验通过测定不同时间点的血药浓度，作出相应的药-时曲线，用一定的数学方法对曲线加以拟合，根据相关统计学指标最终确定药物的房室模型，并计算主要药代动力学参数。
1、实验目的掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法2、实验动物家兔，体重2.5～3kg，性别不拘。
3、实验药品10%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、0.5%肝素、生理盐水、盐酸利多卡因注射液、蒸馏水。
4、实验器材电子天平、兔手术台、试管架、10ml试管、10ml离心管、5ml和1ml加样枪及枪头、5ml注射器、6号针头、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器、手术器械、动脉插管、棉球、烧杯、头皮针。
5、实验方法 1. 取10支10ml试管，用0.5%肝素润湿管壁。
2. 家兔称重，固定于手术台，剪去颈部前被毛。
在盐酸利多卡因局部麻醉下作一侧颈动脉插管，取血3ml，摇匀试管内血液，防止凝血，血管钳夹闭导管，生理盐水纱布覆盖手术部位。
3. 沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg，于注射后1、3、5、10、20、50、80、110min分别动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。
4. 取10支10ml离心管，分别标为“对照”、“标准”及相应“取血时间”，按下表加入样品及试剂。
试管号10%三氯醋酸（ml）全血（ml）0.06%水杨酸钠（ml）蒸馏水（ml）对照 4 1 0 1标准 4 1 1 0各取血时间 4 1 0 15. 各管用涡旋混匀器充分混匀，2000rpm，离心10min。
6. 各管取上清液3ml加入另一套干净试管中，在各加入10%三氯化铁0.3ml，混匀显色。
以对照管调零，在722分光光度计上读取520nm的OD值。
7. 求出水杨酸钠在家兔体内各时间点的血药浓度（Y）。
先求出标准管浓度（Y0）与OD值（X0）的比值（K），K=Y0/X0 ，Y=XK。
8. 绘出时-药曲线，以水杨酸钠浓度的对数值作为纵坐标，对应时间为横坐标作图，分析水杨酸钠动力学模型及药动学参数计算。
家兔血浆中水杨酸钠浓度测定与药代动力学参数测定-文档资料
测定和药代动力学参数测定
【相关理论知识】
药理学研究的内容 药效学 药物 药动学 机体
【药代动力学参数】
（１）药物消除半衰期 （ t1/2 ） ：是血药浓度下降一半 所需要的时间。反映了药物在体内的消除速度。 （２）表观分布容积 （Vd ）：当血浆和组织内药物分 布达到平衡后，体内药物按此时的血浆药物浓度在体 内分布时所需体液容积称表观分布容积。
计算结果
动脉插管时
插管后固定
【注意事项】
1. 注意颈总动脉插管术。 2. 取血时，要先用0.1%肝素润湿注射器和针头，取血 后用肝素封管，避免血液凝固，每次取出血第1ml 弃去不用，再吸取2ml置于离心管内。 3. 给药时间及给药后取血时间要记清。 4. 取上清夜时，要先将上清液倒入编号相对应的试管 中，再吸取所需的ml数，以免吸入沉淀影响比色， 注意吸管要对号使用。 5. 计算Vd、CL时注意单位换算。
（3）清除率 （ CL ）：是机体消除器官在单位时间内 清除药物的血浆容积。是另一个常用来表示药物消ຫໍສະໝຸດ 过程特征的参数。【实验目的】
1．以水杨酸钠为例了解血浆药物 浓度随时间变化的时量关系。
2．了解药代动力学参数的临床意义。
【实验动物】 家兔， 体重2~2.5kg， 雌／雄
【实验材料】 1.器材 试管5支、离心管3支、试管架、 小玻棒、10ml吸管、注射器(１ml、5ml、 10ml）、手术器械、动脉插管、动脉夹、 721分光光度计、离心机 2.试剂和药品 25％氨基甲酸乙酯、10％ 及0.02％水杨酸钠溶液、10％三氯醋酸 溶液、10％三氯化铁溶液
3、清除率(CL)
CL=0.693／t1/ 2× Vd （单位：ml/min.kg） 注：Vd单位L／kg
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水杨酸钠药物代谢动力学参数测定
前言：本实验通过测定不同时间点的血药浓度，作出相应的药-时曲线，用一定的数学方
法对曲线加以拟合，根据相关统计学指标最终确定药物的房室模型，并计算主要药代动力学
参数。
1、实验目的掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法
2、实验动物家兔，体重2.5〜3kg,性别不拘。
3、实验药品10%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、0.5%
肝素、生理盐水、盐酸利多卡因注射液、蒸馏水。
4、实验器材电子天平、兔手术台、试管架、10ml试管、10ml离心管、5ml和1ml加样
枪及枪头、5ml注射器、6号针头、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器、手术器械、动
脉插管、棉球、烧杯、头皮针。
5、实验方法 1.取10支10ml试管，用0.5%肝素润湿管壁。
2. 家兔称重，固定于手术台，剪去颈部前被毛。
在盐酸利多卡因局部麻醉下作一侧颈动脉插
管，取血3ml，摇匀试管内血液，防止凝血，血管钳夹闭导管，生理盐水纱布覆盖手术部
位。
3. 沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg，于注射后1、3、5、10、
20、50、80、110min分别动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。
4. 取10支10ml离心管，分别标为“对照”、“标准”及相应“取血时间”，
按下表加入样品及试剂。
5. 各管用涡旋混匀器充分混匀，2000rpm，离心10min。
6. 各管取上清液3ml加入另一套干净试管中，在各加入10%三氯化铁0.3ml ,
混匀显色。
以对照管调零，在722分光光度计上读取520nm的ODf直。
7. 求出水杨酸钠在家兔体内各时间点的血药浓度（丫）。
先求出标准管浓度（Y0）与0D值（X））的比值（K）, K=Y/X o , Y=XK
8. 绘出时-药曲线，以水杨酸钠浓度的对数值作为纵坐标，对应时间为横坐标
作图，分析水杨酸钠动力学模型及药动学参数计算。
6、实验结果
各时间点取出血样离心后的上清液加三氯化铁显色后，用分光光度计所测出其0D值。
由标准组0D值X o和标准组血药浓度Y0,求出K= 0.7634。
用此比值，可得到各组血药浓度（表1）。
时间（h）OD值浓度（mg/L）
0.0166670.10580.157
0.050.11789.3178
0.0833330.08262.5988
0.1666670.07658.0184
0.3333330.07254.9648
0.8333330.07557.255
1.3333330.02216.7948
1.8333330.003
2.2902
表1.各时间点血药浓度
水杨酸钠C-T 曲线
图中上升支为最初几分钟药物在体内的吸收分布相， 的代谢排泄相。
以T 为横坐标、lnC 为纵坐标，作InC-T 曲线
4.B 1
+
4 ' * * *
3.2 -
+
2.4 - 1.6 - OB -
*
Q Q 2 0.4 0.6 O.B 1 1.2 1.4 1,6 l.S Z
Ln-T 散点图
初步观察可知，散点图形在10min 处出现转折，血药浓度呈现先快后慢的衰减曲线，
r — A P - a, _|_ D e - P l
r
可初估为二室模型，试拟合双指数方程 ’ 「
' 。
其中「为血药浓度，t 为时
间，a 、B 分别为二室模型中分布速率常数和消除速率常数。
A 、B 为延伸线在纵轴的截
距。
实验数据处理采用“残差法”来计算双指数方程有关系数以及药物动力学参数，直 线拟合采用最小二乘法，具体步骤由计算机软件
Excel2007完成。
拟合的结果为:
0.4
0.8 1.2
持续较长时间的下降支为药物
9C
A=20.905 , B=97.319 , a=33.082 , 3=4.141。
拟合药-时方程为
c r = 20.905厂貂吨+ 97.3 血⑷4"
利用以上参数，代入以下计算公式可进一步求出水杨酸钠各药代动力学参数。
G)=A+B V=D/ C o
(a=0.693/ a, ( 3)=0.693/ 3
K2l=(A 3+Ba)/(A+B), K e= a 3K21 , K i2= a+3-K2i-K e
AUC=A/a+ B/ 3 V d=D o/ 3 " ： , V2=V d-V i
其中，V d表示表观分布容积，V1表示中央室表观分布容积，V2表示外周室表观分布容积
1 - (a为药物分布半衰期，•(3)为药物消除半衰期。
各参数值见表2。
参数单位数值参数单位数值
A mg/L20.905Ke1/h 4.825
a1/h33.082K121/h 2.280
B mg/L97.319Vd L/Kg 2.957
31/h 4.141V1L/Kg 2.537
t1/2(a h0.0331V2L/Kg0.419
t1/2(3)h0.167AUC mg/h24.133
K211/h17.941CL L/(Kg?h)12.244
表2.二室模型拟合方程及药动学主要参数
7、实验讨论
以上计算是基于散点图的形状拟估计的二室模型拟合方程及药代动力学参数，为验证
室模型的正确性，下面通过统计学方法，对一室模型和二室模型作一比较。
对血药浓度进行单指数拟合，得一室模型拟合方程:
= 89.61c -1.7441
通过拟合方程分别计算一室模型、二室模型下的统计学指标，加权残差平方和Sw,拟
2
合优度：及AIC （表3）。
表一室、二室模型下的统计学指标
由以上计算结可知，一室和二室模型比较后发现Sw值、AIC值以一室为小，而拟合优
2
度.以二室为大，彼此矛盾。
作F值检测得出，F i2=0.53，小于界值，P值〉0.05，故实
际上，这组数据作一室模型和二室模型拟合没有显著性差异。
以一室模型拟合方程计算
得到的药动学参数如下（表4）。
参数单位数值
t l/2h0.397362
Ke1/h 1.744
Vd L/Kg 3.349
AUC mg/h172.018
CL L/(Kg?i) 5.841
表4. 一室模型药动学参数。