一个化学反应要产生化学发光现象
化学发光与电化学发光
动力学曲线（反应时间） 光谱 量子产率 化学发光强度
七、化学发光分析
h
—
dcA
dt
k[R][A]
使[R]过量
k[A]
CA(t) = CA0 e-kt Ic L(t) = cl = cl kCA(t) = cl k CA0 e-k t
缺点：样品中被测物质浓度未知，故唯以使反应物起始浓度相等。只可用多次测定法逐步得到准确值。
八、化学发光的探测
分立式进样化学发光仪
PMT
R1
R2
s
这类仪器适合于选择性好, 量子效率高或发光体寿命长的化学发光反应的监测。 不适用于快速化学发光反应(<15S)的重现性监测。
流动注射进样化学发光仪
样品sample
基态＋h
电子转移反应
e-
中性分子
自由基阴离子
氧化剂
+
+
受激分子
还原了的氧化剂
自由基阴离子与氧化剂之间的电子转移
自由基阳离子与还原剂之间的电子转移
h
五、化学发光反应
无机物的化学发光 一些无机物能够产生很弱的化学发光，例如： 硫酸氢盐被铬酸氧化 水被K、Na、Mg、汞齐分解 Al被空气中氧氧化 强酸被强碱中和 亚硫酸钠被空气氧化
二、典型的电致化学发光反应. 多环芳烃的ECL 按激发态分子或离子产生的历程可分为两类: 通过单重激发态途径的ECL(S-route ECL) R - e → R.+ 电极氧化 R + e → R. - 电极还原 R. + + R. - → R + 1R* 自由基湮灭 1R* → R + h ν 发光过程 9,10-二苯基蒽,将200Hz 左右的方波电位(1.3 -2.2V vs. SCE)加到电极 DPA - e → DPA. + 1.3 V DPA + e → DPA. - -2.2 V DPA. + + DPA. - → 1DPA* + DPA 1DPA* → DPA + h ν ( λ = 512nm)
化学发光_精品文档
化学发光引言化学发光是一种由化学反应产生的发光现象。
它在许多领域中得到广泛应用，包括生物医学研究、荧光标记、环境检测等。
本文将介绍许多常见的化学发光反应和应用。
化学发光的原理化学发光现象是由于某些物质在受到外界刺激后，经历一系列电子能级跃迁和氧化还原反应，从而产生光子。
这种光子的能量来自于反应中释放出的能量，通常表现为可见光的形式。
化学发光可以通过不同的反应途径实现，但原理大致相同。
常见的化学发光反应1. 芳香酮氧化反应芳香酮氧化反应是一种常见的化学发光反应。
在这种反应中，荧光染料被氧化剂氧化，荧光染料的分子结构发生变化，结果产生发光现象。
这种反应被广泛应用于生物医学研究中，例如免疫荧光染色。
2. 有机过氧化物分解反应有机过氧化物分解反应也是一种常见的化学发光反应。
在这种反应中，有机过氧化物与催化剂接触后分解，产生发光。
这种反应被用于生物检测、环境分析等领域。
3. 金属络合物降解反应金属络合物降解反应是一种利用金属离子与配体反应产生发光的化学反应。
在这种反应中，金属离子与配体形成络合物，随后被氧化剂降解，产生发光。
这种反应广泛应用于分析化学领域。
4. 化学电致发光化学电致发光是一种通过电流刺激产生发光的化学反应。
在这种反应中，电流通过化学发光体系，激发物质发光。
这种反应被广泛应用于电致发光显示器和发光二极管等领域。
化学发光的应用化学发光在许多领域中得到广泛应用。
1. 生物医学研究化学发光广泛应用于生物医学研究中，例如免疫荧光染色、基因检测等。
通过荧光标记分子，可以观察细胞内的分子运动和相互作用，从而了解生物过程的机制。
2. 环境检测化学发光被用于环境检测中，例如水质检测、大气污染监测等。
通过测量发光强度，可以快速准确地检测出环境中存在的污染物。
3. 电子器件化学发光被应用于电子器件中，例如发光二极管、电致发光显示器等。
这些器件利用化学发光的原理，实现了高亮度、高能效、长寿命的发光效果。
4. 安全标识化学发光被用于安全标识中，例如逃生标识、防火标识等。
化学发光的原理
化学发光的原理化学发光，是指物质在不受外界光源激发的情况下，自发地发出可见光的现象。
这种现象在自然界和人工合成的物质中都有所发现，比如某些生物体内会产生发光现象，同时在荧光材料、荧光染料和化学发光剂中也能观察到这一现象。
那么，化学发光的原理是什么呢？首先，我们需要了解发光的基本原理。
化学发光的原理主要包括两种，一种是化学发光，即物质在发生化学反应时产生的发光现象；另一种是电化学发光，即利用电化学方法产生发光现象。
这两种原理都是通过激发物质内部的电子或分子来实现的。
在化学发光中，最常见的原理是通过化学反应产生激发态的分子，然后这些激发态的分子会通过放出光子的方式回到基态，从而产生可见光。
这种化学反应的典型例子就是荧光分子的发光原理。
荧光分子在受到激发后，电子跃迁到激发态，然后在短暂的时间内再次跃迁到基态，并释放出光子。
这种发光过程是一个非常快速的过程，通常持续时间很短，因此我们能够观察到的是瞬间的亮光。
而在电化学发光中，电化学方法通过在电极上施加电压，使得物质发生氧化还原反应，从而产生发光现象。
这种原理被广泛应用于发光二极管（LED）和有机电致发光器件（OLED）等光电器件中。
通过控制电场和电流，可以实现对发光颜色和亮度的调节，因此在显示技术和照明领域有着广泛的应用。
总的来说，化学发光的原理是通过激发物质内部的电子或分子，使其处于激发态，然后再回到基态释放出光子，从而产生可见光。
这种发光现象在生物体内和人工合成的材料中都有所发现，并且在生物成像、荧光标记、光电器件等领域有着重要的应用。
随着科学技术的不断发展，我们相信化学发光的原理将会有更加广泛的应用和深入的研究。
化学反应的发光实验了解反应释放的光能
化学反应的发光实验了解反应释放的光能化学反应的发光实验：了解反应释放的光能引言化学反应是一种能够引发物质变化的过程，而其中一些反应还会释放出光能。
发光现象在日常生活中随处可见，光能的释放源于化学反应中的电子能级变化。
本文将介绍一些常见的化学反应发光实验，并解释其中释放的光能是如何发生的。
一、化学荧光实验化学荧光实验通过激发某些物质的电子，使其处于高能态，当电子从高能态返回基态时，会发射光子。
光子的能量与光的颜色密切相关，因此变换激发物质可以观察到不同颜色的荧光。
1. 用笔记本荧光笔展示荧光效应实验材料：- 笔记本荧光笔- 紫外线灯实验步骤：1. 打开紫外线灯，将其对准笔记本荧光笔。
2. 观察笔尖的反应。
实验结果：笔记本荧光笔的笔尖在紫外线照射下发出荧光，其颜色通常是亮绿色。
这是因为笔记本荧光笔中的某些荧光物质能够吸收紫外线的能量，将电子激发到高能态，当电子返回基态时释放出绿色光。
2. 制作荧光铜硫化物实验实验材料：- 硫化氢溶液- 氯化铜溶液- 试管实验步骤：1. 取一试管，加入适量的硫化氢溶液。
2. 再向试管中加入氯化铜溶液。
3. 观察实验结果。
实验结果：在两种溶液混合后的试管中，会观察到荧光绿光的发生。
这是因为硫化氢和氯化铜在反应中生成了荧光铜硫化物。
荧光铜硫化物能够吸收能量，激发电子并发出绿色光。
二、化学发光实验化学发光实验是另一种通过化学反应释放光能的实验。
在这些实验中，化学反应中特殊的反应物会释放出光能，产生发光效应。
1. 用氢氧化钾和氯化锶展示发光实验实验材料：- 氢氧化钾溶液- 氯化锶溶液- 试管实验步骤：1. 取一试管，加入适量的氢氧化钾溶液。
2. 再向试管中加入氯化锶溶液。
3. 观察实验结果。
实验结果：当氢氧化钾溶液和氯化锶溶液混合后，会发生化学反应，产生发光现象。
这是因为在反应中形成了稳定的氯化钠和氢氧化锶的复合物。
复合物的电子能级发生变化，从而释放出可见光。
2. 用过氧化氢和荧光素展示发光实验实验材料：- 过氧化氢溶液- 荧光素溶液- 试管实验步骤：1. 取一试管，加入适量的过氧化氢溶液。
化学发光的原理及其应用
化学发光的原理及其应用1. 原理介绍化学发光是一种由化学反应产生的发光现象。
它基于分子发生激发态到基态的跃迁，释放出能量的过程。
在发光的反应中，化学物质通过吸收能量，激发到高能激发态，随后返回到稳定的基态，释放出能量并产生光。
2. 发光机理化学发光的发光机理可以分为化学发光和生物发光两种类型。
2.1 化学发光化学发光是利用化学反应产生的化学能转化为光能而发出亮光的一种现象。
化学发光反应通常包含发光物质、触发剂和基质三个组成部分。
当触发剂和发光物质在适当的反应条件下混合时，触发剂将被激活并释放能量，激发发光物质的电子跃迁。
通过电子的跃迁和复合，化学反应产生的能量转化为光能，从而产生发光现象。
2.2 生物发光生物发光指的是许多生物体能够通过化学反应产生光的能力。
生物发光主要由生物发光物质、生物催化剂及其他辅助物质组成。
生物发光通常发生在生物体的特定器官或细胞中，通过生物体代谢产生的反应，激活发光物质并产生光。
生物发光在生物学研究和医学诊断中具有重要的应用价值。
3. 化学发光的应用3.1 生物医学领域化学发光在生物医学领域具有广泛的应用。
例如，在免疫分析中，通过标记抗体或抗原与化学发光物质结合，可以实现对疾病标记物的高灵敏度检测。
化学发光技术还可以应用于基因检测、蛋白质表达研究、细胞成像等方面，为生物医学研究提供了有力的工具。
3.2 环境监测化学发光技术在环境监测中也有应用。
例如，通过化学发光分析技术可以检测水体中的重金属离子、有机物等有害物质。
化学发光还可以应用于空气质量监测和土壤污染监测等方面，提供了一种高灵敏度、高选择性的检测手段。
3.3 安全领域化学发光技术在安全领域具有重要的应用。
例如，荧光标记剂和荧光染料的应用可以增加产品的溯源性和反伪造性，保护消费者的利益。
化学发光技术还可以应用于火灾自动报警系统、防伪标签等安全设备的制造中，提高了安全性和可靠性。
3.4 光电子器件化学发光技术在光电子器件领域也有应用。
化学发光原理的应用
化学发光原理的应用概述化学发光是一种通过化学反应产生光的现象。
化学发光原理已经被广泛应用于多个领域，包括生物医学、材料科学和环境监测等。
本文将探讨化学发光的基本原理以及其在各个领域的应用。
化学发光的基本原理化学发光的基本原理是通过某些化学反应在分子的激发态产生能量，然后通过发射光子的方式释放出这些能量，从而产生可见光。
具体的机制包括：1.荧光：物质通过吸收电子能量而处于激发态，当电子回到基态时，释放出光能的过程称为荧光。
荧光可发生在刺激结束后，持续时间较短。
2.磷光：物质在激发态停留时间较长时，会通过热化学反应将能量转化为光能，这种现象称为磷光。
磷光持续时间较长，可以延长观察窗口。
3.化学发光反应：一些特殊的化学反应可以直接产生发光。
其中最经典的例子是氧化还原反应中的氧化反应产生的化学发光。
生物医学应用化学发光在生物医学领域得到了广泛应用。
以下是一些常见的应用：•免疫分析：化学发光被应用于免疫分析中的荧光标记。
通过将目标分子与荧光物质结合，可以通过荧光信号来检测目标分子的存在。
•基因测序：化学发光可以用于基因测序中的荧光标记。
通过荧光标记的核苷酸可以在测序过程中发出荧光信号，从而帮助确定基因序列。
•光学显微镜：化学发光可以用于光学显微镜的荧光标记。
通过标记细胞或组织样本中的特定分子，可以通过荧光显微镜观察它们的分布和相互作用。
材料科学应用化学发光在材料科学领域也有广泛的应用。
以下是一些常见的应用：•发光材料：化学发光被应用于发光材料的制备。
通过控制化学反应条件和材料组分，可以制备出具有特定发光特性的材料，如荧光染料和荧光粉。
•光电子器件：化学发光可以应用于光电子器件中，如液晶显示器和有机发光二极管（OLED）。
通过控制化学反应和材料的能带结构，可以实现光电转换和发光功能。
•光敏材料：化学发光可以用于制备光敏材料。
光敏材料在受到光照后会产生化学反应，从而实现能量转换和存储。
环境监测应用化学发光在环境监测领域也有一些应用。
化学发光试剂及其应用
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例如，在上述化学发光反应中，如果物质B保持恒定，而物质A变化 且为一级或假一及反应，则
I CL I CL (t )dt CL [dA(t ) / dt ]dt CLC A
此式表明化学发光强度与A的浓度成正比。
化学发光强度
时间
化学发光分析测定的物质对象可分为三类：第一类物质是化 学发光反应中的的反应物；第二类物质是化学发光反应中的催 化剂，增敏剂或抑制剂;第三类是偶合反应中反应物，催化剂， 增敏剂等。这三类物质还可以通过标记方式来测定人们感兴区 的其他物质。这就夸大了化学发光分析的应用范围。
过氧草酸盐（peroxalate）（酯）包括一大类物质，他们自身并不发 光，其化学发光均为敏化华学范广，化学发光反应是芳香草酸值得过氧 化氢氧化作用，芳香草酸盐和H2O2芳香草酸盐和H2O2反应形成高能量 的中间物。 与鲁米诺相比，过氧草酸盐化学反应的发光效率更高，可达到27%，且 在较宽的酸度范围内(PH4~10)都能发光。 过草酸发光体西可用于测定的物质有：（1）待测物质本身是荧光剂， 可作为能量接受体和发光体;(2)待测物质曹禺某一反应可产生H2O2等氧 化剂而间接被测定；（3）待测物质可被淹声称荧光物质。可见，过氧草 酸盐类化学发光法英的分析应用还赖于新荧光衍生剂的开发。
化学发光的特点
1。灵敏度高，如用荧光素酶和磷酸三腺苷（ATP） 的发光反应，可测定2*10-17mol/L的ATP，即可检 测一个细胞中的ATP含量。 2．分析方法简单快捷，不需要复杂的仪器，不需 要光源和色散装置，业没有光学分析方法中常见的 散射光和杂散光等引起的背景值。 化学发光分析法的测量仪器比较简单，主要包括样 品室、光检测器、放大器和信号输出装置。化学发 光反应在样品室中进行，反应发出的光直接照射在 检测器上，目前常用
化学发光原理
化学发光原理化学发光是一种令人着迷的现象，它在日常生活中被广泛应用，比如荧光笔、夜光表、发光贴纸等。
那么，化学发光的原理是什么呢？本文将深入探讨化学发光的原理，带你了解这一神奇的现象。
化学发光是指某些物质在一定条件下，通过化学反应产生的发光现象。
这种发光现象主要是由于化学反应释放出的能量激发了物质的电子，使其跃迁到高能级，然后再返回到低能级时释放出光子而产生的。
在化学发光的过程中，通常会使用发光剂。
发光剂是一种特殊的化学物质，它能够在化学反应中产生发光。
发光剂通常由激发剂和基质组成。
激发剂是能够激发发光剂产生发光的物质，而基质则是提供化学反应所需条件的物质。
当激发剂受到外部激发能量激发后，它会传递能量给发光剂，激发发光剂产生发光。
化学发光的原理可以用一个简单的模型来解释。
在这个模型中，发光剂可以看作是一个能级结构，当激发剂传递能量给发光剂时，发光剂的电子会跃迁到高能级。
在电子返回到低能级的过程中，释放出的能量以光子的形式发出，产生发光现象。
化学发光的原理还可以通过化学方程式来描述。
以氧化铝磷和氯乙烷为例，当氧化铝磷和氯乙烷发生化学反应时，产生的化合物会处于激发态，随后电子返回到基态时释放出光子，产生发光现象。
化学方程式可以清晰地展现化学发光的原理，帮助我们更好地理解这一现象。
总的来说，化学发光的原理是通过化学反应释放能量，激发物质的电子，使其跃迁到高能级，然后再返回到低能级时释放出光子而产生的。
化学发光的原理不仅仅是一种现象，更是一种深奥的化学反应过程。
通过对化学发光原理的深入了解，我们可以更好地应用化学发光技术，为生活和科学研究提供更多可能性。
化学发光现象及其应用
化学发光现象及其应用化学发光现象是一种非常神奇和有趣的化学反应，也是当今科学研究领域中备受关注的一个主题。
当有些化学物质与其他物质发生反应时，会产生能量释放的现象，从而产生光。
这种发光现象在自然界和实验室中都有广泛的应用，例如在生物学、药物学、化学分析、环境监测等领域中。
发光的原理化学发光反应的原理是根据发光分子吸收能量后产生激发态并经过激发态释放能量而发光。
具体而言，某些分子经过化学反应后，其能量水平变得非常高，从而导致分子的电子跃迁到一个高能量态，称为激发态（excited state）。
在激发态，这些分子如果遭遇其他的分子，则有可能被它们碰撞并使其回到低能量态，Thus 返还释放出能量（Emission）进而发光。
常见的化学发光反应常见的化学发光现象包括：化学发光、磷光、荧光和化学发光。
其中，化学发光又被称为化学发光。
在化学发光中，产生的光是由短时间内，一种化学反应的能量释放激发的分子发出的。
磷光是当一种物质吸收电磁辐射（如紫外光）时，再辐射出去形成光谱的现象。
荧光是遗传工程和分子探针广泛应用的技术中，把一些荧光蛋白做成报告带来的光。
那些荧光蛋白其实就是一种特殊的蛋白质，他跟在分子的表面上并具有一定的荧光性，当这些荧光蛋白与其他的化学物质发生反应时，便可产生鲜艳的颜色，从而有荧光的效果。
应用化学发光的应用广泛，主要应用于生物响应探测、药物研究、环境监测、诊断和图像技术等领域。
生物响应探测化学发光荧光素的强发光性和微生物颗粒标记能力，使生物响应探测成为一个蓬勃发展的领域。
生物响应探测利用生物大分子（如蛋白质和DNA）结合特异性标记，实时监测生物过程中的数量和位置变化。
通常，这样的探测方法需要一个或多个荧光素，配合一些生物导入器或反应条件，以扩大化学发光响应的动态范围。
药物研究化学发光的生物学检测法为新药发现和药物研究，提供了强有效的工具。
化学发光可以跟踪先导化合物优选过程中的活性物质，并可以用于评估新药分子的正反映，评估药效动力学和毒性。
化学发光的原理与应用
化学发光的原理与应用化学发光是指一种物质在化学反应中产生的光，也称为化学发光现象。
这种现象在自然界和人类活动中都十分常见，如萤火虫、海藻等生物产生的光，以及现代生物医学和食品工业中的应用等。
本文将介绍化学发光的原理和应用。
一、化学发光的原理化学发光主要是通过化学反应过程中的能量释放而产生。
化学反应中的能量可以以光子的形式释放出来，这种光子属于电磁波谱中可见光的范畴，其能量范围从400纳米（紫外线）到700纳米（红外线）。
如果化学反应释放的能量容易被肉眼观察到，那么我们就可以称之为化学发光现象。
化学发光的反应机制非常复杂，但是可以归纳为以下几点：1.化学反应中的电子在从高能级到低能级的过程中释放了能量。
2.激发态分子从一个激发能级到另一个激发能级时会释放出光子，这个光子跟所释放的能量的大小有关。
3.某些金属离子和有机物质在反应过程中，发生了电子转移，释放了电子激发能，这些能量转化成一定波长的电磁波就称为化学发光现象。
二、化学发光的应用1、生物医学领域化学发光的应用在生物医学领域十分广泛，最常用的是放射性同位素发光单元（PMT），此类技术被广泛用于基因测序、免疫检测、酶促反应和分子诊断等。
通过将荧光素固定到药物或抗体上，可以将药物或抗体标记为目标生物分子，可对它们进行非常高度灵敏的检测。
这些荧光分子在接触到目标生物分子时会发出光，这种光会在相机或显微镜上被监测到。
2、食品工业在食品工业中，化学发光技术可以检测到食品中的致病菌和毒素。
通过检测裸眼难以观察的微生物或毒素，可对食品安全进行高效快捷的检测，这使得成千上万的食品公司能够对食品加工过程进行质量控制。
这种检测技术也被广泛用于污染检测和其他环境问题。
3、安防领域化学发光技术在安全检测领域也有应用。
利用红外线探测技术与化学发光技术结合，可以实现高精度生物成像技术，例如在半透明的墙上便可以看到隐蔽的物品或活动。
4、环保领域近年来，化学发光技术也开始在环境保护领域得到广泛应用。
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电化学发光免疫分析返回总目录
前 言
• 化学发光免疫技术是将具有高灵敏度的化学发光 测定技术与高特异性的抗原抗体反应相结合，用 于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸 、维生素和药物等的检测分析技术。该技术具有 特异性高、灵敏度高、分离简便、 快速、试剂无 毒、安全稳定、可自动化分析等特点，在免疫学 检验中应用广泛。
鲁米诺增强发光反应原理
（2）AMPPD
〔3-(2‘-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3“-磷酰氧基)苯1,2-二氧杂环丁烷〕〕
3．电化学发光剂
电化学发光剂是指通过在电极表面进行电化学反应而发 光的物质。如化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+和 电子供体三丙胺（TPA）在阳性电极表面可同时失去 一个电子而发生氧化反应。
双抗原夹心法
固相抗原竞争法
三、技术要点
抗原抗体结合反应
结合物与游离物的分离 (磁颗粒分离技术)
化学发光反应
第三节 化学发光酶免疫分析 一、 检测原理
化学发光酶免疫分析（CLEIA）是用参与催化某一化学 发光反应的酶如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸 酶(ALP)来标记抗原或抗体，在与待测标本中相应的 抗体(抗原)发生免疫反应后，经洗涤将结合物与游离 的酶标物分离后，加入底物(发光剂)，酶催化和分解 底物发光，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光 信号转变为电信号并加以放大，再把它们传送至计算 机数据处理系统，计算出测定物的浓度。
3.化学发光
某些物质(发光剂)在化学反应时，吸收了反应 过程中所产生的化学能，使反应的产物分子 或中间态分子中的电子跃迁到激发态，当电 子从激发态回复到基态时，以发射光子的形 式释放出能量，这一现象称为化学发光。
一个化学反应要产生化学发光现象，必须满足以下条件：
①该反应必须提供足够的激发能, 并由某一步骤单 独提供, 因为前一步反应释放的能量将因振动弛豫 消失在溶液中而不能发光
化学发光免疫分析双抗体夹心法原理示意图
二、方法类型
1.分离方法 常用磁颗粒分离技术，即用抗原或抗体包被磁颗粒 ，与标本中相应抗体或抗原及吖啶酯标记的抗体或 抗原通过一定模式的免疫学反应后,最终通过在磁场 中冲洗将结合到免疫复合物中的标记物和游离标记物 进行分离的技术。
2.常用的免疫学反应模式
双抗体夹心法
作为化学发光免疫技术的化学发光剂应符合以下几个条 件：
发光的量子产率高
物理-化学特性要与被标记或测定的物质相匹配 能与抗原或抗体形成稳定的偶联结合物
其化学发光常是氧化反应的结果 在所使用的浓度范围内对生物体没有毒性
常用的化学发光剂或发光底物有 1.直接化学发光剂 2.酶促反应的发光底物 3.电化学发光剂
1.直接化学发光剂
在发光免疫分析过程中不需酶的催化作用，直 接参与发光反应，它们在化学结构上有产生 发光的特有基团，可直接标记抗原或抗体。 如常用的吖啶酯（acridinium，AE） 。
吖啶酯在碱性条件下被H2O2氧化时,发出波长 为470nm的光，具有很高的发光效率，其激发 态产物N-甲基吖啶酮是该发光反应体系的发光体。
标记免疫技术
放 射 免 疫 技 术
酶 免 疫 技 术
荧 光 免 疫 技 术
金 免 疫 技 术
化 学 发 光 免 疫 技 术
第一节 基本知识
一、发光
发光是指分子或原子中的电子吸收能量后，由低能级 的基态跃迁到高能级的激发态，然后再返回到基态， 释放出的能量表现为光的发射。根据形成激发态的激 发能不同可将发光分为光照发光、生物发光和化学发 光。
碱性磷酸酶化学发光酶免疫分析双抗体夹心法原理示意图
二、方法类型
1.根据标记酶不同分类 可分为辣根过氧化物 酶标记的化学发光酶免疫分析和碱性磷酸 酶标记的化学发光酶免疫分析。前者常以 鲁米诺或其衍生物作为发光底物，后者常 以AMPPD作为发光底物。 2. 根据免疫学反应模式分类 同化学发光 免疫分析，主要有双抗体夹心法、双抗原 夹心法和固相抗原竞争法等主要模式，所 不同只是相应抗原或抗体上标记的是酶而 不是直接标记发光剂。
第二节 化学发光免疫分析
一、 检测原理
用化学发光剂（如吖啶酯）直接标记抗体(抗原)，与 待测标本中相应的抗原(抗体)和磁颗粒性的抗体 （抗原）发生免疫反应后，通过磁场把结合状态 （沉淀部分）和游离状态的化学发光剂标记物分离 开来，这时只需加入氧化剂（H2O2）和NaOH使成碱 性环境，吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、发 光。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内 所产生的光子能，可从标准曲线上计算出待测抗原 (抗体)的含量
2.酶促反应的发光底物
是利用标记酶的催化作用，使发光剂（底物）发光。
目前化学发光酶免疫技术中常用的酶有辣根过氧
化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（ALP）。HRP的常用 的发光底物为鲁米诺或其衍生物，ALP的发光底物 为金刚烷（AMPPD）
（1）鲁米诺或其衍生物
鲁米诺在碱性条件下可被一些氧化剂氧化，发生化 学发光反应，辐射出最大发射波长为425nm的光。
第九章 化 学 发 光 免 疫 技 术
本章要点
1. 化学发光剂的概念及常用的化学发光剂。 2. 化学发光免疫分析的基本原理及其技术类 型。 3. 化学发光酶免疫分析基本原理及其分离技 术。 4. 电化学发光免疫分析基本原理。 5. 化学发光免疫技术的临床应用。
4
目
1 2 3 4 5
录
基本知识 化学发光免疫分析 化学发光酶免疫分析
②要有有利的反应过程, 使化学反应的能量至少能被 一种物质所接受并生成激发态
③激发态分子必须具有一定的化学发光量子效率释放 出光子, 或者能够转移它的能量给另一个分子使之进 入激发态并释放出光子
二.化学发光剂
在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形 式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。
1.光照发光（photoluminescence）
发光剂（荧光素）经短波长入射光照射后 进入激发态，当回复至基态时发出较长 波长的可见光。
2.生物发光（bioluminescence）
发生在生物体内的发光现象，如萤火虫的发光，反应底 物为萤火虫荧光素，在荧光素酶的催化下，利用ATP产 能，生成激发态氧化型荧光素，它在回复基态时多余 的能量以光子的形式释放出来。