猪带绦虫研究进展
猪囊尾蚴重组抗原和基因工程疫苗的研究进展
［ 中图分 类 号 ］ ￥５ ．３ ［ ８２７ ２ 文献标 识 码 ］ Ａ ［ 章编 号 ］ １０ －７４ ２ １ ）２０ ３ －４ 文 ０ ４６ ０ （０ ２ ０ －０５ ０ Ｒｅ ｅ ｒ ｈ Ｐｒ ｇ ｅ ｓｆ ｒ Ｒｅ ｏ ｂ ｎ ｎ ｓ ａ ｃ ｏ ｒ ｓ ｏ ｃ ｍ ｉ ａ ｔＡｎｔｇ ｎ ｉｅ
限 ， 验 中假 阳性可能性大 。各种 纯化方 法所得 抗原 试
从分 析结果看 特性 各不相 同 ， 其诊 断结果 受纯 化过 但
程 影响 ， 缺乏统 一的评价标 准 ， 且纯 化过程 繁琐 ， 不能
苗 均取 得 了 良好 的预 防效 果 ， 使 免 疫 动 物 获 得 抗 可
虫 卵攻 击感 染 的抵抗 力 ， 数动 物能 得 到完全 保护 。 多
细 胞抗 原等 用 于免 疫 保 护 性 试 验 ， 些 抗 原 作 为 疫 这
ｎｓｒｅｔｓ ，ＬＳ 的敏感 性 较 高 ， 特异 性 较低 。 ｏｏｂｎａｓ Ｅ ＩＡ） ｙ 但 单 克隆抗体 纯化 的抗 原用 于 免疫 诊 断能 区分 囊尾 蚴 病 人 和 其 它寄 生 虫 病人 ， 由于其 抗 原 决 定簇 较 局 但
囊 尾 蚴 （ ｙｔ ｅｃｓｃｌ ｌ ａ ） 是 一 种 由猪 Ｃ ｓｃｒｕ ｅｌ ｏ ｅ 病 ｉ ｕｓ 带 绦 虫 （ ａｎａｓｌ ｍ） Ｔｅｉ ｏｕ 的幼虫 引起 严重 的人 畜共 患 ｉ 寄 生虫 病 。囊 尾蚴 病 的免 疫 预 防 研 究 开 展 较早 ， 有 全 囊虫 匀浆 抗 原 、 钩 蚴抗 原 、 六 六钩 蚴排 泄一 分泌 抗 原 、 尾蚴 体外 培 养 的 分 泌代 谢 抗 原 和组 织 培 养 的 囊
ａ ｄ Ｇｅ ｅ ｉ ｇｎ ｅ ｉ ｇ Ｖａ ｃｎ ｆＣｙ ｔｃ ｒ ｏ ｉ ｎ ｎ ｔ Ｅｎ ｉ ｅ ｒｎ ｃ ｉ ｅ ｏ ｓｉｅ ｃ ｓｓ ｃ
猪带绦虫
囊虫病是由猪带绦虫幼虫猪囊尾蚴引起的一种严重危害畜牧业生产和人类健康的人兽共患寄生虫病,是目前世界范围内公认的社会、政治和经济病。
该病呈世界性分布,以发展中国家多个省(市、区)存在囊虫病感染病例,以东北、华北、西北和西南地区发病率较高,猪囊尾蚴可寄生于人体皮下、肌肉、内脏、脑、眼等不同部位,其中脑囊虫病致残率、致死率均较高。
我国屠宰场检出囊虫病猪多时可达10%,给我国的养猪业造成了重大的经济损失。
随着现代社会的发展和流动人口的增多,该病的流行呈现城市患者增多和儿童患者比例增高的新特点。
该病防治存在化学药物的残留和抗药性问题,因此有必要研究更有效的防治措施。
绦虫的成虫寄生在人的小肠内，随粪便排出妊娠节虫和虫卵被猪和牛吞食后，卵壳在其二脂肠内消化，六钩虫蚴脱出，钻过肠壁进入肠系膜，小静脉及淋巴循环运往全身，以横纹肌为主要寄生部位发育成囊尾蚴，称囊虫。
绦虫病是猪肉绦虫和牛肉绦虫寄生于人体小肠引起的疾病。
猪肉绦虫由于生食或半生食含有囊虫的猪肉而患病，人为终宿主，并且还可由于吞食其虫卵成为其中间宿主而患米虫病。
“米猪肉”又叫“豆猪肉”是一种称为猪绦虫的幼虫———囊尾蚴寄生在猪的肌肉内造成的，在有囊尾蚴寄生的猪瘦肉上，可见黄豆大小白色半透明的囊状物，囊内充满液体，并有米粒大小的头节，其上有小钩和吸盘，囊尾蚴在猪体的寄生部位以腿、腰、肩、心、舌、颈处的肌肉为多见，人吃了生的或未熟的米猪肉后，囊尾蚴的头节受消化道内胆汁的刺激而翻出，借助头节的小钩固着于小肠壁上，经2~3个月后发育为成虫称猪带绦虫，由其引起的疾病称猪绦虫病。
猪肉绦虫又称猪带绦虫，或钩绦虫，扁形动物门，绦虫纲，带形科动物。
虫体白色带状，全2—4m，宽7—8mm。
虫体分头节、颈部和节片三部分。
（厌氧生物.但是其幼虫和虫蚴都是在有氧环境下长大）头节圆球形、直径1mm。
头节前中央为顶突，其上有大小相间或内外两圈小钩，顶突下面有四个吸盘，靠小钩和吸盘钩挂和吸附在寄主的小肠壁上，通过体表吸收人体小肠内已消化的养料。
猪带绦虫谷胱甘肽转移酶GST的原核表达及免疫学研究
ห้องสมุดไป่ตู้
中 国 人 兽 共 患 病 学 报
Ｃｈｉ ｅ ｅ Ｊ ｒ ａｌｏｆＺｏｏ ｏｓ ｓ ｎ ｓ ｏｕ ｎ ｎ ｅ １ ７ ０
文 章编 号 ： ０ ２ ６ ４ ２ １ ） ２ １ ７ ４ １ ０ —２ ９ （ ０ ０ ０ —０ ０ 一Ｏ
猪 带绦 虫 谷胱 甘肽 转 移 酶 ＧＳ Ｔ的 原 核 表 达 及 免 疫学 研 究 ＊
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Ｈ ｉ— ｉ ｐｒ ｅｎ Ｍ ｅ ｎｗｈｉｅ，ｔ ｍ ｍ ｕ ｏｒ ａ ｔｖｉｙ ｏｆｔ ｅ ｐｕ ｉｉｄ ｐ ｏ ｅｎ ｗａ ａ ｙ ｅ ｅ ｔ ｒ ｏｔａ ｓ ｙ． Ｉ ｈｅ ｅ ｗａｙ ｓＮ ｏｔ ｉ． ａ ｌ ｈｅｉ ｎ ｅ ｃ ｉ ｔ ｈ ｒｆｅ ｒ ｔ ｉ ｓａｎ ｌ ｚ ｄ ｂｙＷ ｓ ｅ ｎ ｂｌ ｓ ａ ｎｔ ｓ ｓ，
戴佳琳 ， 黄 江 ， 兴 江 ， 廖 江 楠 ， 王 宇 ， 刘玉 江
多头带绦虫Tm18基因的克隆与原核表达的开题报告
多头带绦虫Tm18基因的克隆与原核表达的开题报告
一、研究背景和意义
绦虫是寄生在动物肠道内的一类典型寄生虫。
多头带绦虫是绦虫的一种，其寄生在猪等动物的小肠内，具有很高的传染性和破坏性。
绦虫为典型的吸收营养的寄生虫，因此克隆和研究其相关基因对于阐明其寄生和致病机制具有重要意义。
多头带绦虫Tm18基因编码的蛋白质是一种膜结合型蛋白，其在绦虫寄生过程中发挥着重要的作用。
研究发现，Tm18基因在绦虫肠道的吸收和消化过程中起重要作用。
因此，本研究旨在通过克隆和原核表达多头带绦虫Tm18基因，为进一步探究绦虫的
寄生和致病机制提供基础研究支持。
二、研究内容和方法
1. 克隆多头带绦虫Tm18基因
采用PCR方法，利用多头带绦虫的cDNA作为模板，扩增Tm18基因的全长序列。
将扩增的Tm18基因连接到原核表达载体pET-28a(+)中。
利用序列分析检测确认克隆结果，进一步进行原核表达。
2. 原核表达Tm18蛋白质
将克隆的pET-28a(+)-Tm18质粒转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中，并利用IPTG
诱导，进行Tm18蛋白质的大规模表达。
通过净化和Western blotting检测，验证
Tm18蛋白质的表达和纯化情况。
三、预期成果和意义
1. 成功克隆多头带绦虫Tm18基因，并进行了原核表达。
2. 成功获得高纯度的Tm18蛋白质，为其进一步研究提供了基础支持。
3. 为探究绦虫的寄生和致病机制提供基础研究支持。
猪带绦虫病的流行特点及防治措施
732023.52.1.3 青贮杂交构树对奶山羊乳汁成分的影响 羊奶中最重要的组成成分是乳脂，通常情况下，乳脂率与产奶量呈负相关，乳脂随产奶量提高而有所降低。
研究者发现，青贮杂交构树饲喂的奶山羊，在提高产奶量的同时可以保证乳成分相对稳定。
青贮杂交构树组的日粮中酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维显著高于对照组，其采食量增加，造成乳成分的变化。
饲料中中性洗涤纤维水平的提高有利于瘤胃合成乙酸，乙酸为合成乳脂前体物质，从而提高了乳脂率。
此外，奶山羊采食量的增加促进了乳糖含量升高，进而有利于提高奶山羊的乳品质。
2.2 复合有机微量元素对奶山羊泌乳性能的影响2.2.1 复合有机微量元素对奶山羊采食量和泌乳性能的影响 有研究显示，与无微量元素的日粮相比，含有复合有机微量元素的日粮对动物生产性能的影响存在差异。
含有有机微量元素的日粮组，可以降低反刍动物的产奶量与乳脂产量；但是50%复合有机微量元素组的产奶量与无机微量元素组产奶量相同。
用有机钴、铁、锌、锰、硒、铬、铜替代无机微量元素，在采食量、产奶量或总表观消化率不变的情况下，提高了乳脂与脂肪校正产奶量。
为不同泌乳时期奶山羊饲喂低水平有机微量元素，对其采食量、产乳量、乳成分含量未发生改变，泌乳前期乳脂产量降低。
导致差异的原因为微量元素有效含量、有机微量元素的替代比例和奶山羊的泌乳阶段等因素有关。
2.2.2 复合有机微量元素对奶山羊机体微量状态的影响 通过检测血清中微量元素含量能够反映奶山羊体内的微量元素状态。
通常情况下，健康的反刍动物血液中的微量元素含量会在一定范围内产生波动。
当机体对微量元素的需求小于摄取微量元素时，微量元素便以金属蛋白的形式保存于机体的微量元素“库”中，并结合机体需求产生动态改变，体现在组织器官或血液中微量元素含量的改变。
研究显示，在奶山羊的日粮中增加酵母硒能够显著提升乳汁中硒含量。
充足的硒、锌、铜等微量元素可以保证乳腺健康，尤其是硒元素同奶山羊乳腺氧化应激状况密切相关。
猪绦虫病的诊断与防治
饲料管理
保证饲料的新鲜和清洁，避免饲料被 污染和发霉，减少病原体进入猪体内 的机会。
饲养管理
提高猪的抵抗力，合理搭配饲料，保 证猪的营养需求，增强猪的抗病能力 。
治疗措施
药物治疗
使用抗绦虫药物，如吡喹酮、阿苯达唑等，对猪进行驱虫 治疗。根据病情和体重，按照药物说明书进行使用。
对症治疗
对于绦虫病引起的并发症，如脑炎、肺炎等，需要进行对 症治疗，如解痉、抗炎、镇痛等。
传播途径
消化道传播
猪绦虫卵随粪便排出体外，污染外界环境，被人或猪吞食后 感染。
接触传播
猪绦虫病猪的粪便中含有活虫卵，污染猪舍、运动场等环境 ，经皮肤感染。
染后症状较重。
人
也可感染，但症状较轻，多表现为胃肠不适。
02
临床症状和病理变化
临床症状
食欲不振
感染绦虫病的猪可能会出现食欲不振的现象 ，导致其营养不良，生长发育受阻。
营养不良
由于食欲不振和腹泻等症状，感染 绦虫病的猪可能会出现营养不良的 情况，导致其生长发育受阻。
03
诊断方法
临床诊断
观察临床症状
观察猪是否出现消瘦、食欲不振、腹泻、肛门瘙痒等症状，以及猪绦虫在猪体内的寄生部位和程度。
询问病史
询问猪的饲养史、健康状况和防疫情况，了解是否有接触过病猪或病源的可能性。
防治措施
对全场猪进行驱虫处理，采用阿苯达唑、吡喹酮等药物进行口服或注射。对猪舍进行彻底清扫和消毒，加强饲养 管理，提高饲料营养水平，增强猪的抵抗力。
案例二：某农村散养户的诊断与治疗
诊断
该农村散养户的猪出现消瘦、食欲不振、腹 泻等症状，猪粪中发现了绦虫节片。经实验 室诊断，确诊为猪绦虫感染。
带绦虫虫种分子分类遗传标记的研究进展
整 个 线粒 体 基 因 组 长 度 约 为 １ ０ ｐ ｏｌ基 因 ４００ｂ 。ｃｘ 为１６０ｂ ， 两 种 带 绦 虫 的 ｃｘ ２ ｐ 这 ｏｌ部 分 片 段 （６ ２０ ｂ， ｐ 核苷 酸 序 列从 ９６～１１８ｂ ） １ ４ ｐ 的序 列 差 异 率 为
２％ ～３％ Ｅ］ ２
由其实 际 的 ｃｘ 全 部基 因序列 来 计算 ｏｌ 两者 的基 因 差 异 率 为 ４ ５ Ｅ ４， 示 部 分 基 因 序 ．％ ３ ］提 －
是 牛 带绦 虫 的亚种 存 在 争 议 ， 因此 寻找 牛带 绦 虫 和 亚 洲 牛带 绦虫 基 因的差 异性 对亚 洲 牛带 绦虫 虫种 定 位 有 着重 要意 义 。不 同 的遗 传标 记 有着 不 同 的种 间 或 种 内差 异性 ， 用于 不 同的虫 种分类 需 要 ， 适 带绦 虫
本 的虫种 鉴定 ； 绘制 完 整 地 系 统发 育 树 状 图 ， ② 得 出准 确 的分子 水平 差 异 ， 以便 最 终 为 亚 洲 牛 带 绦 虫 虫种 的定 位提 供依 据 。现 以带 绦虫 虫种 分 子分类 的 遗 传 标记 和它 们研 究 的最 新进 展进 行综 述 。
１ 线粒体 遗传 标 记
（ Ｆ４ ７８ Ｎ －０８６） 牛 带 绦 虫 线 粒 体 基 因组 ： Ａ ４ ５９ ； Ｃ０ ４２ ；
长度 １ ７ ｐ Ｇ 含 量 ２ ％ ， ｅ ｅ ａｋ登 记 号 ３６ ０ ｂ ， Ｃ ８ Ｇ ｎＢｎ
猪带 绦虫 、 带 绦 虫 以 及 亚 洲 牛带 绦虫 是 引 起 牛 人体 带 绦虫病 的主要虫 种 。带 绦虫 虫种 的鉴别对 流 行 病 学研 究和 疾 病 的控 制 有 着 重要 作 用 。此 外 ， 亚
安徽 医科大 学学报 Ａ ｔ ｎｖｒｔｔ ｄｃ ａｉＡ ｈ ｉ ０ ２Ｏ ｔ４ （０ ｃ Ｕ ｉ ｓ ａ ｓ ｉｎ ｌ ｎ ｕ ａ ｅ ｉ ｉ Ｍｅ ｉ ｓ ２ １ ｃ；７ １ ）
猪带绦虫重组抗原研究进展
猪带绦虫重组抗原研究进展
周必英
【期刊名称】《中国人兽共患病学报》
【年(卷),期】2014(030)004
【摘要】猪囊尾蚴病(Cysticercosis cellulosae)俗称囊虫病(Cysticercosis)是由猪带绦虫(Taenia solium,Ts)中绦期幼虫猪囊尾蚴(cysticercus cellulosae)引起的一
种严重的人兽共患寄生虫病.该病呈全球性分布,主要流行于中非、南非、拉丁美洲、东亚和南亚等地区.我国主要流行于黑龙江、吉林、河南、河北、山东、广西、云南、四川和贵州等31个省市自治区.采用分子生物学技术对Ts生活史不同阶段的
抗原基因进行克隆、表达及生物学功能研究是当前研究的热点.本文就Ts六钩蚴、囊尾蚴、成虫阶段重要重组抗原的研究进展作一介绍.
【总页数】5页(P418-422)
【作者】周必英
【作者单位】遵义医学院寄生虫学教研室,遵义563003
【正文语种】中文
【中图分类】R383.3
【相关文献】
1.人-猪囊虫、猪带绦虫动物模型替代性研究进展 [J], 景志忠;王佩雅;窦永喜;才学
鹏
2.猪带绦虫基因组学研究进展 [J], 庞歌;刘长春;石团员
3.猪囊虫和猪带绦虫病实验动物模型的研究进展 [J], 张艳;景志忠;刘振勇;乔军;才学鹏
4.以包涵体形式表达的猪带绦虫六钩蚴重组抗原的复性与纯化 [J], 唐雨德;顾志香;雷永红;翟春生;刘玉;郁兴明
5.猪带绦虫囊尾蚴病特异性抗原筛选的研究进展 [J], 庞建达;王海英;杜立银;孙树民
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特异性抗原
• Mr 8 000抗原家族 • GP50抗原 • 钙结合蛋白 • Mr 10 000抗原 • 热激蛋白 • 合成肽抗原 • 噬菌体肽库模拟表位
猪囊尾蚴病免疫学诊断方法的 研究进展
（一） 酶联免疫吸附试验（ELISA）
（二）斑点酶联免疫吸附试验（Dot-ELISA）
（三） 生物素-亲和素酶联免疫吸附法（BAS-ELISA）
怎么办呀？？？？
防治
1.消灭传染源 2.阻断传播途径 3.保护易感人群
防治
一、治疗患者
• 1、槟榔、南瓜子合剂 • 2、吡喹酮、阿苯达唑（眼囊虫病患者禁用 ） • 3、皮下囊尾蚴病-手术后摘除囊尾蚴 • 4、眼囊虫病患者-手术摘除虫体（唯一） • 5、脑囊虫病-住院治疗
治疗药物
二、管理厕所、猪圈
免疫学诊断
一、猪囊尾蚴病特异性抗原诊断 二、猪带绦虫病免疫学诊断
一、猪囊尾蚴病特异性抗原诊断
研究猪囊尾蚴特异性和保护性抗原对猪囊尾蚴病的免 疫和诊断具有重要意义。
传统的诊断和疫苗用抗原有全虫抗原(成虫或幼虫)、 排泄/分泌(E/S)抗原、异源抗原以及六钩蚴抗原。这些抗 原在猪带绦虫病、猪囊尾蚴病的诊断中具有一定价值,对 猪囊尾蚴病的预防也有一定作用。但上述天然抗原来源十 分有限,限制了其应用。随着与抗原研究和疫苗开发相关 学科的技术进步,用免疫化学分析方法鉴定种特异性抗原 和保护性抗原,再用重组DNA技术生产诊断制剂和疫苗已 成为可能。
吸虫Biblioteka 蠕虫 绦虫原虫线线虫虫 棘头虫
肢节动肢物动物
.链状带绦虫 .肥胖带绦虫 . 亚洲绦虫 .曼氏迭宫绦虫 .细粒棘球绦虫
猪带绦虫
猪带绦虫（1758）又称链状带绦虫、猪 肉绦虫、有钩绦虫。猪带绦虫病很早即 有记载，人体囊尾蚴感染早在1558年就 为Rumler所发现，以后又由 Kuchenmeister(1855)与 Leuckart(1856)分别一饲养方式证实了 猪囊尾蚴与成虫的关系。
猪带绦虫的分布
田东和三江株为猪带绦 虫；融水为牛带绦虫和 猪带绦虫混合流行区
• 猪带绦虫的分布广泛，除因为宗教教规而
禁食猪肉的国家和民族没有或少有本病感染外， 世界各地均有散在病例，而以发展中国家最多。 高度流行的地区如墨西哥城，因囊尾蚴病而致 死者占总死亡人数的1.9%，在3.5%的尸体剖 检中发现蚴囊尾蚴感染。我国也有普遍的分布， 而在云南洱海迤西及广西某地区有猪带绦虫病 的地方性流行，在东北、华北、西北即华东北 部猪带绦虫病也较牛带绦虫病多。
猪带绦虫
成虫结构
头节 scolex
颈节 neck
幼节immature proglottid
链 体
成节mature proglottid
孕节gravid proglottid
囊尾蚴(囊虫cysticercus)
皮下即肌肉囊尾蚴病
致病
囊尾蚴：猪囊尾蚴病 脑囊尾蚴病 （囊虫病）
眼囊尾蚴病
成虫：猪带绦虫病
血象中有时可见嗜酸性粒细胞轻度增高。粪便 或肛门拭子检查虫卵阳性率不高且无法区别虫种。 从粪便中排出的妊娠节片内的子宫分支形状和数 目有助于与牛带绦虫鉴别。酶联免疫吸附试验可 检出患者粪中抗原成分；聚合酶链反应(PCR)可扩 增粪便中虫卵或虫体的种特异性DNA，以检测人体 内猪带绦虫成虫，亦可帮助诊断。
三、注意个人卫生和饮食卫生
1、饭前便后洗手 2、勿食未煮熟猪肉 3、生熟刀、砧板分开
四、加强肉类检疫
疫苗研究进展（目前尚无 商用疫苗问世）
1 天然蛋白疫苗（六钩蚴抗原诱导） 2 基因工程重组抗原疫苗 3 多肽疫苗,（鉴定抗原蛋白的有效反应区域）,用 合成多肽替代全长蛋白也是目前疫苗发展的一个方 向。 4 核酸疫苗（又名基因疫苗或DNA疫苗,是将外 源基因插入真核表达载体,构建成重组质粒）
（四） 单克隆抗体-酶联免疫吸附试验（McAbELISA）
（五）酶联免疫电转移印记技术（EITB）
（六）胶体金免疫层析技术(GICA)
（七）斑点金免疫渗滤法（DIGFA）
（八）滴金免疫测定法(DIGFA)
二、猪带绦虫病免疫学诊断
在带绦虫感染 时,由于宿主粪便并不经常出现虫卵,以及 虫卵在光学显微镜下的形态极难区别,以致传统的诊断方法的 敏感性和特异性都很低。因此,更敏感的方法是用免疫学方法 检测粪抗原。Allan 等用抗猪带绦虫成虫抗原抗体和超免疫 兔血清进行ELISA检测宿主粪便中特异性抗原。其敏感性 为 100%,并且具有高特异性。与蛔虫、微小膜壳绦虫、钩虫和鞭 虫无交叉反应。此外,实验结果表明，用5% 福尔马林保存6个 月的感染宿主的粪便,并不影响抗原检测效果。
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