第二十三章 基因治1
第六章：常用分子生物学技术——RNA干扰技术
识别并切割(qiēgē)与siRNA反义链互补的靶mRNA
（5）dsRNA的再生成
第十ānrǎo)
第十七页，共四十页。
RNA干扰(gānrǎo)
（RNA interference, RNAi）
siRNA（小干扰RNA）：21-23nt，由dsRNA裂 解而成的小片段，可诱导mRNA降解。siRNA主要
药学 分子生物 (yào xué)
学
第一页，共四十页。
生物芯片 （biochip） (shēnɡ wù xīn piàn)
以生物、电子、机械和信息技术为基础，在 固相支持物表面建立集成、连续、微型分析系 统(xìtǒng)，形成芯片，实现对生物大分子的准确、 快速、高通量、自动化检测。
第二页，共四十页。
第三十一页，共四十页。
REGγ基因敲除鼠（下图）出现脊椎(jǐ zhuī)弯曲等早衰现象
第三十二页，共四十页。
Gab1基因(jīyīn)敲除导致小鼠缺血性血管新生、侧枝循环建立出现 缺陷（图示上半部分），主要是由于血管内皮细胞管状结构形成的 信号调控通路出现障碍而引起的（图示下半部分）。
第三十三页，共四十页。
2、 RNA干扰技术缺点
“脱靶效应”（off-target effects）
第二十四页，共四十页。
RNA干扰技术(jìshù)的应用
1、基因功能研究（功能失活策略） “基因敲减（knockdown）”
2、基因治疗（基因(jīyīn)失活性治疗） （1）病毒感染性疾病
通过RNAi抑制 RNA病毒(bìngdú)复制 （2）基因过表达引起的疾病（如肿瘤）
特定功能基因的部分片段被同源的外源DNA片 段替代，从而使靶基因失活。
(双语)第二十三章 免疫学防治
Artificial passive immunization
The preparations contain specific antibodies or cytokines are injected to treat infection or prevent infection in emergency.
减毒活疫苗
用减毒或无毒力的活病原微生物制成。 优点：一般只需接种一次；免疫效果良好、 持久；诱导产生细胞免疫和体液免疫。 缺点：存在回复突变的危险（罕见）。 脊髓灰质病毒、卡介苗、麻疹病毒疫苗是 常用的减毒活疫苗。
类毒素
概念：用细菌的外毒素经0.3%-
0.4%甲醛处理制成。因其已失去外
合成肽疫苗：根据有效免疫原的氨基酸序列，设 计和合成的免疫原性多肽，以期用最小的免疫原 性肽来激发有效的特异性免疫应答。 基因工程疫苗：使用DNA重组生物技术，将病原 的保护性抗原编码的基因片段克隆入表达载体, 定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之 充分表达，经纯化后而制得的疫苗。
重组抗原疫苗 重组载体疫苗 DNA疫苗 转基因植物疫苗
Modulate immunological function artificially based on immunology theory and direct against disease mechanism to achieve the goals of treatment.
Molecular therapy Cell therapy Biological response modifier and
Antitoxin Human immunoglobulin
外科学 第二十三章 乳房疾病 考点总结
外科学第二十三章乳房疾病重难点参考书目：《外科学》（第九版）人民卫生出版社；《外科学学习指导与习题集》（第4版）人民卫生出版社说明：划线部分为曾作为题目出处的知识点（人卫题库、医考帮）【解剖生理概要】1.腺叶数目：15~20个，每一腺叶有其单独的导管（乳管）乳管靠近开口的1/3膨大处为“壶腹部”，是乳管内乳头瘤的好发部位2.淋巴（1）淋巴液的输出途径①乳房大部分淋巴液流至腋窝淋巴结，部分乳房上部淋巴液可直接流向锁骨下淋巴结（肿瘤跳跃性转移的基础）②部分乳房内侧的淋巴液通过肋间淋巴管胸骨旁淋巴结③两侧乳房间皮下有交通淋巴管④乳房深部淋巴网可沿腹直肌鞘和肝镰状韧带流向肝（2）腋区淋巴结分组I组：胸小肌外侧腋窝淋巴结II组：胸小肌后方的腋静脉淋巴结和胸大小肌间淋巴结（Rotter淋巴结）III组：胸小肌内侧锁骨下淋巴结【乳房检查】1.体位：端坐/仰卧位，上肢外展、放松上肢2.扪诊：采用手指掌面而不是指尖，不要用手指捏乳房组织。
[顺序]先健侧后病侧，外上→外下→内下→内上。
[淋巴结检查]直立位：右手左腋窝，左手右腋窝。
3.影像学检查：（1）乳房X线摄影：筛查乳腺癌的重要手段（2）超声：进行血供情况观察，鉴别肿块是囊性还是实质性（3）MRI：对微小病灶、多中心、多病灶的发现及评价病变范围有优势（4）乳腺钼靶：乳腺癌的普查（5）乳腺癌骨转移：骨扫描4.常用的活检方法：（1）有肿块乳腺癌确诊：首选乳腺肿物切除活检（不是切取）；次选：乳腺空心针穿刺活检（针吸）（2）乳头有溢液确诊：首选溢液脱落细胞血检查，有肿块时切除活检（3）乳头糜烂确诊：乳头刮片细胞检查Part1.急性乳腺炎【好发人群】哺乳期产妇【病因】（1）乳汁淤积：①乳头发育不良②乳汁过多③乳管不通影响排乳（2）细菌入侵：[主要途径]细菌从破损乳头沿淋巴管入侵[主要病原菌]金黄色葡萄球菌【临床表现】（1）乳房：[典型炎性表现]红、肿、热、痛（2）全身症状：寒战、高热、脉搏加快，患侧淋巴结肿大、压痛，白细胞计数明显增高【治疗】原则：消除感染，排空乳汁[抗感染措施]1.早期：蜂窝织炎。
第23章血管紧张素抑制药
氯沙坦（losartan)
1、PO吸收，F为33%，14%可代谢为EXP3174，活性比
氯沙坦强10-40倍。
2、高度选择性阻断AT1受体，对肾血流影响同ACEI，
对高血压、糖尿病合并肾功不全者有保护作用；促进
尿酸排泄，对合用利尿药者有利；长期用能逆转左室
肥厚和血管增生。 3、可用于高血压、CHF。 4、不产生咳嗽，血管神经性水肿，无胰岛素增敏作用， 对血脂及血糖影响小。
3、可用于高血压、CHF、心肌梗死、糖尿病肾病（FDA批 准唯一用于此病的ACEI） 4、毒性小，耐受性好。
依那普利（enalapril):
1、 口服易吸收，不受食物影响。 2、 在体内需转化，起效慢（药后4-6h达峰值）， 维 持时间长（24h），作用强（ACE抑制作用是卡托 普利10倍)。 3、 可用于高血压、CHF 。 4、 毒性小，对血糖和脂质代谢影响小，因不含-SH， 味觉障碍、瘙痒性丘疹、白细胞缺乏等少见。
缬 沙 坦
• 缬沙坦对ATl受体的亲和力比其对AT2受体的亲和 力强24 000倍。原发性高血压口服缬沙坦80mg， 在给药后4～6 h获最大降压效果，降压作用可持 续24h。 • 缬沙坦也能逆转左室肥厚和血管壁增厚。 • 单独或与其他抗高血压药物合用治疗高血压。 • 不良反应发生率较低，主要有头痛、头晕、低钠 或血容量不足 • 缬沙坦有引起低血压的危险。用药期应慎用留钾 利尿药与补钾药。
一、化学结构与分类（了解） ⒈ ACEI的化学结构和构效关系 ACEI与ACE的Zn2+结合，抑制其活性。 现有药物与Zn2+ 结合的基团有三类： ⑴ 巯基（－SH）结合：如卡托普利 ⑵ 羧基（－COOH）结合：如依那普利等 ⑶ 磷酸基（－POO）结合：如福辛普利 ▲ 药物与Zn2+亲和力及“附加结合点”数目决定药物 作用强度和作用持续时间。 ▲ 含羧基的ACEI作用强、持久。
第二十三章 免疫学防治(医学免疫学,人民卫生出版社第7版)
4.新型疫苗
亚单位疫苗 结合疫苗 合成肽疫苗 基因工程疫苗
等等
亚单位疫苗
提取或合成天然微生物某些成分的亚单位（如外壳的 特殊蛋白结构）制成的疫苗。
如：乙肝疫苗、HPV（宫颈癌）疫苗；细菌荚膜多糖疫苗
1.免疫力获得的方式（自然免疫和人工免疫） ，人 工主动免疫和人工被 动免疫的概念和特点。 2.免疫预防：疫苗的基本要求；传统疫苗（灭活疫苗、减
毒活疫苗、类毒素）及其特点；新型疫苗（亚单位疫苗、 结合疫苗、合成肽疫苗、基因工程疫苗等）；疫苗的应用 (抗感染与儿童计划免疫，抗肿瘤等其它应用) 及影响接种 效果的因素
DNA疫苗的优缺点
优点：可同时诱导体液免疫应答和细胞免疫应答 制备工艺简单，生产成本低，适于大批量生产。 比传统疫苗安全。 性质稳定，易于保存、运输。 可生产多价疫苗，同时预防多种病原体感染。
缺点：是否整合至宿主基因组,诱导癌变？ 长期持续表达是否诱导免疫耐受？ 是否产生抗DNA抗体？
计划免疫
免疫预防
免疫预防（ Immunological prophylaxis ）， 指通过人工输入抗原性物质（如疫苗），刺激机 体产生免疫效应物质，或直接输入免疫效应物质 （如抗毒素），从而使机体获得特异性免疫，以 达到预防疾病的目的。
第一节 免疫预防 （Immunoprophylaxis）
How to get immunity to the diseases ?
二、人工被动免疫 （Artificial passive immunity）
指通过给机体注射含特异性抗体的免疫血清 （如抗毒素）或细胞因子等制剂，使机体迅速获 得适应性免疫。常用于感染性疾病的紧急预防或 治疗。
上海市人民政府办公厅关于支持生物医药产业全链条创新发展的若干意见
上海市人民政府办公厅关于支持生物医药产业全链条创新发展的若干意见文章属性•【制定机关】上海市人民政府办公厅•【公布日期】2024.07.15•【字号】沪府办规〔2024〕9号•【施行日期】2024.08.01•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】卫生医药、计划生育综合规定正文上海市人民政府办公厅关于支持生物医药产业全链条创新发展的若干意见沪府办规〔2024〕9号各区人民政府，市政府各委、办、局：发展生物医药产业是加快形成新质生产力的重要抓手。
为进一步打造新时代全球生物医药重大战略产业高地，支撑全市经济社会高质量发展，现就支持生物医药产业全链条创新发展提出若干意见如下：一、大力提升创新策源能力（一）加快基础理论创新和前沿技术突破。
发挥国家战略科技力量等创新平台作用，瞄准细胞与基因治疗、mRNA、合成生物、再生医学等基础前沿领域和新赛道，开展新靶点、新机制、新结构研究，布局前沿新技术和新型药物攻关。
加强高端医疗器械、先进制药装备及材料、现代中药研制。
（责任单位：市科委、市发展改革委）（二）支持人工智能技术赋能药物研发。
充分利用生成式人工智能、深度学习等技术，聚焦新药靶点挖掘与验证、药物发现与设计、新型药物筛选、用药安全分析等环节，加快模型、算法、专业软件等攻关突破和共性平台建设，开展智能化场景应用示范。
（责任单位：市科委、市经济信息化委、市发展改革委）（三）支持顶尖科学家与优秀青年人才项目。
支持拥有核心知识产权（IP）的全球顶尖科学家和大师级人物在沪开展颠覆性理论和技术突破，按照“一事一议”原则给予支持。
在基础研究先行区、各类人才计划等方面，对优秀青年人才倾斜支持。
（责任单位：市人才局、市科委、市经济信息化委）（四）加速科研成果向临床前研究转化。
建立以药物临床试验批件获得数量、成果本地转化数量等为考核目标的贴息支持机制，推动合同研发机构（CRO）为高校科研院所提供新药临床前研究服务，按照规定给予每个项目年度贴息金额最高1000万元支持。
临床分子生物学检验考试总结
临床分子生物学检验标志物一、名词解释生物标志物：可客观的测量和评价，作为正常的生理过程、疾病过程或药物对治疗干预的反应指标分子生物标志物：可反映机体生理、病理状态的核酸、蛋白质、代谢产物等生物分子基因组：一个细胞或一种生物体的整套遗传物质，包括基因和非编码DNA质粒：细菌细胞染色体以外，能独立复制并稳定遗传的共价闭合环状分子多基因家族：某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因动态突变：三核苷酸的重复次数可随世代交替的传递而呈现逐代递增的累加突变效应单核苷酸多态性：在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列的多态性表观遗传：DNA序列不发生改变，基因功能出现可逆的、可遗传的变化DNA甲基化：生物体在DNA甲基转移酶的催化下，以S-腺苷甲硫氨酸为甲基供体，将甲基转移到特定的碱基上的过程微小RNA：一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小约20～25个核苷酸，在细胞内主要发挥基因转录水平调控作用蛋白质组：一种基因组所表达的全套蛋白质，即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质似然比：反映真实性的一种指标，属于同时反映灵敏度和特异度的复合指标二、简答题5.简述人类基因组的DNA多态性的形式6.简述临床分子生物标志物应具备的特征1、该标志物在临床上是否有可行的检测方法2、该分子生物标志物是否增加新的信息3、判断生物标志物是否有有助于医生对患者的处理7.简述生物标志物的发现与评价“五阶段”方法。
1、临床前的探索性研究。
筛选的标志物要具有诊断、预后或治疗（预测性的）价值，具有潜在的临床应用价值。
2、建立可在临床应用的检测方法，这些检测方法应具有良好的重复性3、针对临床上还未能进行检测的疾病进行试验，对生物标志物的灵敏度和特异性进行评价，用于检测已经在临床上发现的疾病。
4、要在前瞻性队列研究中评估分子生物标志物的灵敏度和特异性。
5、在筛选的人群中对新的诊断方法进行效益/风险评估第三章临床标本处理与分离纯化技术2简述临床标本处理的一般原则。
心脑血管药理学(第3版)(缪朝玉主编)PPT模板
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第三章肾上腺素受体与β肾上腺素受体阻断剂
第三章肾上腺素受体与β肾上腺素受体阻断剂
第一节肾上腺素受体的分型第二节肾上腺素受体结构与信号转导第三节心血管系统肾上腺素受体亚型及其生理意义第四节肾上腺素受体与高血压和心力衰竭第五节β肾上腺素受体阻断剂的作用机制、药理学特性和临床应用
第三节内皮素受体结构、分布和功能
第四节内皮素和内皮素受体的生物学效应
第五节内皮素受体激动剂和拮抗剂的临床应用
第六节内皮素药物的临床应用和展望
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第八章5－羟色胺的心脑血管药理
第一节5－羟色胺的生物化学第二节5－羟色胺受体第三节5－羟色胺的心脑血管功能第四节5－羟色胺与心脑血管疾病第五节5－羟色胺受体激动剂和拮抗剂
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第二十章抗休克药
第二十章抗休克药
第五节休克的代谢治疗
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第四节休克的激素治疗
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第一节概述
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第二节休克的液体复苏
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第三节血管活性药物
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第六节其他抗休克药物
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第二十一章调血脂药与抗动脉粥样硬化药
第二十一章调血脂药与抗动脉粥样硬化药
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第二十二章抗血栓药
第二十二章抗血栓药
第七节血管扩张药第八节抗高血压药应用中需注意的问题
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第十五章抗心律失常药
第十五章抗心律失常药
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第十六章抗心肌缺血药
第一节心肌缺血的病理生理特点第二节抗心肌缺血药第三节心肌缺血的合理用药及联合用药第四节心肌缺血再灌注的病理生理特点第五节抗心肌缺血再灌注损伤药
《生物化学与分子生物学》教学大纲
《生物化学与分子生物学》教学大纲课程编号：120601B3课程名称：生物化学与分子生物学（Biochemistry and Molecular Biology）学分：8.5学分总学时：153理论学时：93实验（见习）学时：60先修课程要求：有机化学、组织胚胎学、细胞生物学。
适应专业：临床医学五年制、麻醉学五年制、口腔医学五年制、影像学五年制、预防医学、精神卫生五年制。
参考教材：1、王镜岩《生物化学》高等教育出版社第三版20022、査锡良《生物化学与分子生物学》人民卫生出版社第八版2013.33、 David L.Nelson and Michael M.Cox 《Lehninger Principles of Biochemistry》6th: Freeman, W. H. & Company.2012.一、课程在培养方案中的地位、目的和任务生物化学是研究生物体内化学分子与化学反应的基础生命学科，从分子水平探讨生命现象的本质。
分子生物学是研究生物大分子的结构、功能及基因结构、表达与调控的学科，是生物化学的的重要组成部分。
生物化学与分子生物学是现代生物科学的理论和技术基础，是医学专业的重要基础课程，是联系基础医学和临床医学的桥梁，是医学主干课程。
通过本课程的学习，要求学生较全面了解生物体的基本化学组成，理解其主要组成物质的结构、性质及这些物质在体内的合成、降解和相互转化等的代谢规律，深入了解这些代谢活动与各种重要生命现象之间的联系，学会综合运用所学的基本知识和技术来解决一些实际问题，并为学习后续课程打下坚实的基础。
二、课程基本要求：（一）课程理论与基本知识：1、生物分子的结构与功能（1）掌握核酸、蛋白质、聚糖等重要生物大分子的结构、性质和功能；（2）掌握酶的催化特性、作用机理以及辅基、辅酶与维生素的关系及其在酶催化过程中的作用和酶的动力学特点。
2、物质代谢及其调节（1）掌握糖、脂质、氨基酸、核苷酸代谢的主要途径及其特点；（2）掌握生物氧化的概念与电子传递、氧化磷酸化的运行规律和机制；（3）熟悉非营养物质代谢特点；（4）熟悉体内主要物质代谢的相互关系及代谢的调节机制。
全新第八版生物化学重点总结和期末复习试题
第一章蛋白质的结构与功能1.20种基本氨基酸中,除甘氨酸外,其余都是L-α-氨基酸.2.支链氨基酸(人体不能合成:从食物中摄取):缬氨酸亮氨酸异亮氨酸3.两个特殊的氨基酸：脯氨酸：唯一一个亚氨基酸甘氨酸：分子量最小，α-C原子不是手性C原子，无旋光性.4.色氨酸：分子量最大5.酸性氨基酸：天冬氨酸和谷氨酸碱性氨基酸：赖氨酸、精氨酸和组氨酸6.侧链基团含有苯环：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸7.含有—OH的氨基酸：丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸8.含有—S的氨基酸：蛋氨酸和半胱氨酸9.在近紫外区（220—300mm）有吸收光能力的氨基酸：酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸10.肽键是由一个氨基酸的α—羧基与另一个氨基酸的α—氨基脱水缩合形成的酰胺键11.肽键平面：肽键的特点是N原子上的孤对电子与碳基具有明显的共轭作用。
使肽键中的C-N键具有部分双键性质，不能自由旋转，因此。
将C、H、O、N原子与两个相邻的α-C 原子固定在同一平面上，这一平面称为肽键平面12.合成蛋白质的20种氨基酸的结构上的共同特点：氨基都接在与羧基相邻的α—原子上13.是天然氨基酸组成的是：羟脯氨酸、羟赖氨酸，但两者都不是编码氨基酸14.蛋白质二级结构的主要形式：①α—螺旋②β—折叠片层③β—转角④无规卷曲。
α—螺旋特点：以肽键平面为单位，α—C为转轴，形成右手螺旋，每3.6个氨基酸残基螺旋上升一圈，螺径为0.54nm，维持α-螺旋的主要作用力是氢键15.举例说明蛋白质结构与功能的关系①蛋白质的一级结构决定它的高级结构②以血红蛋白为例说明蛋白质结构与功能的关系：镰状红细胞性贫血患者血红蛋白中有一个氨基酸残基发生了改变。
可见一个氨基酸的变异（一级结构的改变），能引起空间结构改变，进而影响血红蛋白的正常功能。
但一级结构的改变并不一定引起功能的改变。
③以蛋白质的别构效应和变性作用为例说明蛋白质结构与功能的关系：a.别构效应，某物质与蛋白质结合，引起蛋白质构象改变，导致功能改变。
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第二十三章基因治疗（一）选择题A型题1. 全世界第一例基因治疗成功的疾病是A. β地中海贫血B. 血友病C. 重症联合免疫缺陷症D. 高胆固醇血症E. 糖尿病2. 理论上讲，基因治疗最理想的策略是A. 基因置换B. 基因替代C. 基因失活D. 免疫调节E. 导入“自杀基因”3. 目前基因治疗所采用的方法中，最常用的是A. 基因置换B. 基因替代C. 基因失活D. 免疫调节E. 导入“自杀基因”4. 利用反义核酸阻断基因异常表达的基因治疗方法是A. 基因置换B. 基因替代C. 基因矫正D. 基因失活E. 免疫调节5. 将白细胞介素-2基因导入肿瘤病人体内，提高病人IL-2的表达水平，进行抗肿瘤辅助治疗。
这种基因治疗方法是A. 基因置换B. 基因替代C. 基因矫正D. 基因失活E. 免疫调节6. 下列哪种方法不．是目前基因治疗所采用的方法A. 基因缺失B. 基因置换C. 基因替代D. 基因失活E. 免疫调节7. 基因治疗的基本程序中不．包括A. 选择治疗基因B. 选择载体C. 选择靶细胞D. 将载体直接注射体内E. 将治疗基因导入靶细胞8. 下列哪种方法不．属于非病毒介导基因转移的物理方法A. 电穿孔法B. 脂质体法C. DNA直接注射法D. 显微注射法E. 基因枪技术9. 下列哪种方法属于非病毒介导基因转移的化学方法A. 电穿孔法B. 基因枪技术C. DNA直接注射法D. 显微注射E. DEAE-葡聚糖法10. 将外源治疗性基因导入哺乳动物细胞的方法不．包括A. 显微注射法B. 电穿孔法C. 脂质体法D. CaCl法2E. 病毒介导的基因转移11. 目前在基因治疗的临床实施中，最常使用的载体是A. 逆转录病毒载体B. pBR322C. λ噬菌体D. pUC18E. YAC12. 逆转录病毒载体的特点中不．包括A. 容量约10kbB. 有潜在危险性C. 基因转移效率较高D. 只感染分裂状态的细胞E. 感染细胞后产生高滴度病毒13. 腺病毒载体的特点中不．包括A. 所获病毒滴度高B. 外源基因可瞬时高表达C. 外源基因长期稳定表达D. 基因组结构复杂E. 能感染分裂或非分裂状态的细胞14. 腺相关病毒载体的特点中不．包括A. 容量相对小B. 优先整合于宿主染色体19q位点上C. 外源基因稳定表达D. 安全性好E. 只感染分裂状态的细胞15. 单纯疱疹病毒载体的特点中不．包括A. 容量小于10kbB. 可感染神经细胞C. 外源基因不能长期表达D. 载体的毒副作用大E. 基因组结构复杂16. 在基因治疗时，目前哪一种细胞不．能作为靶细胞A. 淋巴细胞B. 肿瘤细胞C. 生殖细胞D. 肝细胞E. 造血细胞17. HIV感染的靶细胞是A. 红细胞B. B淋巴细胞C. CD4+T细胞D. CD8+T细胞E. 神经细胞18. 恶性肿瘤的基因治疗方案中，目的基因导入体内最常用的给药途径是A. 瘤内注射B. 静脉注射C. 皮下注射D. 肌肉注射E. 骨髓移植19. 目前临床基因治疗方案中，针对的疾病最多的是A. 癌症B. 单基因遗传病C. 心血管疾病D. 糖尿病E. 艾滋病20. 目前下列哪类疾病基因治疗效果最确切A. 单基因遗传病B. 多基因遗传病C. 恶性肿瘤D. 感染性疾病E. 心血管疾病B型题A. 遗传病B. 肿瘤C. 心血管疾病D. 传染病E. 高血压21. 病原体侵入人体主要引起哪种疾病22. 内源基因结构突变发生在生殖细胞所引起的疾病是A. 基因矫正B. 基因替代C. 基因置换D. 反义核酸技术E. 基因敲除23. 对致病基因的异常碱基进行纠正，保留正常部分的技术方法是24. 目前基因治疗中最常用的方式是25. 用正常的基因原位替换病变细胞内的致病基因的技术方法是A. 质粒B. 逆转录病毒C. 腺病毒D. 腺相关病毒E. 单纯疱疹病毒26. 目前基因治疗最常用的载体27. 基因工程中最常用载体A. 苯丙氨酸羟化酶基因B. 次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因C. 腺苷脱氨酶基因D. 酪氨酸酶基因E. 1-磷酸半乳糖尿苷转移酶基因28. 苯丙酮尿症的治疗性基因可以是29. 半乳糖血症的治疗性基因可以是30. 重症联合免疫缺陷症的治疗性基因可以是X型题31. 基因治疗采用的策略包括A. 基因置换B. 基因替代C. 基因失活D. 基因敲除E. 免疫调节32. 目前基因治疗常使用的病毒载体有A. 逆转录病毒B. 腺病毒C. 腺相关病毒D. 流感病毒E. 肝炎病毒33. 在基因治疗过程中，将外源基因导入哺乳动物细胞的化学方法有A. 磷酸钙沉淀法B. DEAE-葡聚糖法C. 脂质体转染法D. 氯化钙法E. 电穿孔法34. 在基因治疗过程中，将外源基因导入哺乳动物细胞的物理方法有A. 显微注射B. 电穿孔C. DNA直接注射D. 基因枪技术E. 氯化钙法35. 逆转录病毒载体的特点包括A. 宿主细胞类型广泛B. 能随机整合到宿主染色体中，有可能造成插入突变C. 只能转染和整合分裂状态的靶细胞D. 外源基因插入容量约10 kbE. 重组病毒滴度最高36. 腺病毒载体的特点包括A. 既可感染分裂细胞也可感染非分裂细胞B. 不能整合到宿主染色体中，所以安全性较好C. 外源基因插入容量约7-8 kbD. 外源基因可得到瞬时高表达E. 重组病毒滴度非常高37. 用于基因治疗的靶细胞必须满足的条件A. 体细胞B. 取材方便C. 含量比较丰富D. 易于在体外人工培养E. 可长期在体外培养传代38. 下列细胞可作为基因治疗的靶细胞有A. 造血细胞B. 肝细胞C. 生殖细胞D. 肌细胞E. 肿瘤细胞39. 基因失活的技术包括A. 反义RNAB. 核酶C. RNA干扰D. 肽核酸E. 细胞内抗体40. 基因治疗可用于A. 遗传病B. 免疫缺陷C. 恶性肿瘤D. 心血管疾病E. AIDS（二）名词解释1. 基因治疗（gene therapy）2. 基因置换（gene replacement）3. 基因矫正（gene correction）4. 基因增补（gene augmentation）5. 基因失活（gene inactivation）6. 免疫调节（immune adjustment）7. 反义核酸（antisense nucleic acid）8. RNA干扰（RNA interference）9. 直接体内疗法（in vivo）10. 间接体内疗法（ex vivo）（三）简答题1. 什么是基因治疗?2. 简述基因治疗的策略。
3. 简述基因治疗的基本程序。
4. 基因治疗选择靶细胞时应注意些什么？5. 简述目前恶性肿瘤的基因治疗策略。
（四）论述题1. 基因治疗中常用的病毒载体有哪几种？各有何优缺点？2. 试述如何设计某疾病的基因治疗方案。
3. 试述基因治疗目前的问题和解决途径。
参考答案与提示（二）名词解释1. 是指把基因导入人体的细胞，使其发挥生物学效应，从而达到治疗疾病目的的技术方法。
2. 指用正常的基因原位置换病变细胞内的致病基因，使细胞内的DNA完全恢复正常状态。
3. 指将致病基因的异常碱基进行纠正，而正常部分予以保留。
4. 即基因替代将正常基因转移到患者的宿主细胞，并不去除致病基因，正常基因异位替代致病基因在体内表达出功能正常的蛋白质。
5. 通过在DNA、mRNA、蛋白质等水平上干扰某些致病基因的转录、翻译等环节，从而封闭该基因的表达。
6. 将免疫相关基因（如抗体、抗原或细胞因子基因等）导入体内，提高患者机体免疫力，达到预防和治疗疾病的目的。
7. 是一种与靶DNA或RNA具有互补序列的核酸片段，通过与靶DNA或RNA结合而封闭它们的表达。
8. 指由短双链RNA介导的，在mRNA水平关闭同源序列的表达或使其沉默的过程。
RNA干扰是一种典型的转录后基因调控方式，又称为转录后基因沉默。
9. 将外源基因直接导入体内的组织或器官，使其进入相应的细胞并进行表达，从而达到治疗疾病的目的。
10. 在体外将外源基因导入靶细胞内，再将这种基因修饰过的细胞回输体内，使带有外源基因的细胞在体内表达相应产物以达到治疗疾病的目的。
（三）简答题1. 基因治疗（gene therapy）是指把基因导入人体的细胞，使其发挥生物学效应，从而达到治疗疾病目的的技术方法。
2. 基因治疗的策略包括基因矫正、基因置换、基因替代、基因失活、免疫调节等。
3. 基因治疗的一般程序包括(1) 选择治疗基因；(2) 选择基因治疗的靶细胞；(3) 将治疗性基因导入细胞；(4) 外源基因的筛检(5) 将外源基因导入体内。
4. 理论上讲，无论何种细胞均具有接受外源DNA的能力。
除了由于伦理问题，禁止将生殖细胞作为靶细胞外，其它的体细胞还必须满足下列条件才可能作为基因治疗的靶细胞(1) 取材方便；(2) 在人体内含量比较丰富；(3) 易于在体外人工培养；(4) 能够长期在体外培养传代。
5. 目前恶性肿瘤的基因治疗采用的策略主要包括(1) 抑制和杀伤肿瘤细胞。
(2) 肿瘤细胞的基因修饰。
(3) 调节和增强机体的免疫功能。
（四）论述题1. 答题要点见表1。
2.(1) 选择该病的致病基因或与该病发生密切相关的基因，作为治疗性基因。
(2) 根据治疗基因的特点选择合适的治疗方法。
(3) 选择理想的靶细胞。
(4) 选择高效、特异、安全的载体，将治疗基因导入靶细胞内。
(5) 外源基因的表达与检测。
(6) 疗效观察。
3. 现阶段基因治疗还存在许多理论和技术上的问题，有待进一步研究和解决，主要表现在(1) 需要更多的切实有效的治疗基因。
这有赖于人类基因组计划，尤其是功能基因组学的发展。
(2) 缺乏高效特异的基因导入系统。
解决这个问题的关键是载体构建。
(3) 治疗基因表达缺乏可调控性，实现可调控性表达的最理想方式是模拟人体内基因本身的调控形式，如采用特异的调控元件控制基因表达的时空性。