男性不育实验诊断检测项目基本内容及意义
男性不育实验诊断的现状及意义
男性不育实验诊断的现状及意义暨南大学医学院附属深圳市人民医院（518020，深圳）刘瑜何林世界卫生组织(WHO)对男性不育的定义是：夫妇同居一年以上，未用任何避孕措施，由于男性方面的原因造成女方不孕者。
来自WHO的统计数据表明，世界范围内,男性不育症发生率约占育龄夫妇的15%，这一结果存在明显的地区差异。
有报道显示近年来我国男性不育的发病率呈上升趋势，约占育龄夫妇的10~12%左右。
随着环境污染和性传播疾病等一系列致病因素的存在和加强，不育症发病率将继续递增。
一、男性不育症实验诊断现状男性不育是一个较为复杂的临床综合症。
长期以来人类对男性生殖活动的研究进展缓慢，最近二十年来男性不育症病因诊断技术才真正获得突飞猛进，目前已深入至分子水平。
鉴于男性不育诊断的复杂性，为了提高诊断准确性、改善治疗效果、降低诊治费用，WHO于1978年成立了不育诊断与治疗专题组，制定不育（孕）夫妇检查的标准程序。
先后有25个国家、33个中心参加了研究。
通过对9000多对夫妇的诊治体会，于1993年总结出版了《不育夫妇标准检查与诊断手册》。
2000年又出版了《WHO不育男性检查诊断和处理标准手册》，进一步阐述和规范了男科临床、辅助生殖与实验诊断在男性不育诊断、治疗中的关系与作用。
在不孕不育病因诊断过程中，实验室检查是必要的组成部分，虽然体外受精与配子移植治疗不育已广为应用，但是这些方法都离不开实验室技术。
WHO于1980年出版了《人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》，至1999年共出版了四版。
该手册引入了可用于男科实验诊断的最新研究成果，并对各项检测指标方法学进行了规范。
男性不育症结束了过去长期停留在病史、体检和精液常规检查等较低水平的诊断方式，随着精液计算机辅助分析、精子功能检测、精液免疫生化检验、细胞遗传学检查及分子生物学等诊断技术的完善和新技术的问世，男性不育症病因、发病机理得以更全面更深入地认识。
上述诊断技术中尤以精液免疫生化检验发展得最快最成熟，具有十分重要的诊断价值。
男性不育实验诊断方法及临床应用
灰度CASA的特点
精子识别: 根据成像灰度识别精子,易将精液杂质误 识别为精子,需要人工干预帮助识别。
荧光CASA的特点
识别原理：
荧光色素与活精子（双链DNA）结合 后出现绿色荧光反应，而与死精子（单链 DNA）结合时则呈橙色荧光。除精子和极 少数非精子细胞外，精液中的其他细胞和 颗粒碎片均不发荧光。
临床意义:
精浆柠檬酸来自前列腺，其作用是 络合钙离子，通过与钙离子结合，而调 节精浆钙离子浓度，并影响射精后精液 液化过程的功能。
前列腺分泌功能指标:精浆酸性磷酸酶
临床意义：
前列腺炎患者精浆酸性磷酸酶含量降低, 前列腺肥大或早期前列腺恶性肿瘤者其含量 增高。
前列腺分泌功能指标:精浆锌
临床意义:
① 锌缺乏可引起性腺发育不良或性腺功能 减退。 ② 锌可调节雄激素代谢，锌含量降低时可 促进睾酮转变为双氢睾酮。
精子形态学分类标准(Kruger & menkfeld)
精子形态学计算举例
计数的精子数： 200 正常精子数： 78 正常精子百分比：（78/200×100%） 39% 缺陷精子数：（200-78） 122（61%） 头部缺陷精子数： 110（55%） 中段缺陷精子数： 18（9%） 尾部缺陷精子数： 16（8%） 缺陷总数：（110+18+16） 144 畸形精子指数(TZI) = (缺陷总数/ 缺陷精子数) =1.18 精子畸形指数(SDI) = (缺陷总数/所数精子总数) =0.72
人类射出的精液中，活性氧类物质是由中段带 有多残留细胞质的异常或不成熟精子精子和白 细胞产生的。 精浆中有抗氧化物清除剂和酶，某些病人的这 些物质可能不足。
在制备辅助受孕的精子时去除精浆，有可能使 精子更易受到氧化损害。
【男科疾病】 男性不育2
早泄引起男性不育早泄是一种常见的男性疾病，也是男性性功能异常不育的原因之一，它可分为习惯性早泄，年老性早泄，年老性早泄，后两者在青年人中常出现，可以导致男性不育，严重影响着男性朋友的健康。
医学上对阴茎勃起在未进入阴道之前就射精或能进入阴道进行性交者，如果没有动几下就很快射精定义为早泄。
导致早泄的原因主要可以分为心理和生理两大部分，随着现在生活节奏的加快和工作压力的增加，早泄患者人数日趋增多。
从治疗角度来说，临床治疗早泄目前还很难实现，早泄患者的自我心理调节是最有效的早泄治疗方法。
但是对于目前部分器质性的早泄，是需要进行医学或者物理疗法的，仅仅依靠心理疗法是不能达到的。
预防早泄八要诀：l、建立美满、健康、和谐的家庭环境。
注意夫妻之间的相互体贴、配合，一旦出现不射精不可相互责备、埋怨，而应找出原因，共同配合治疗。
2、注意婚前性教育和性指导。
掌握一些性解剖及性生活知识，了解和掌握正常的性交方法和性反应过程，不宜过度节制性生活，因性生活次数太少，不利于雄激素的释放。
3、注意生活要有规律，加强体育锻炼，如打太极拳、散步、气功等均有益于自我心身健康和精神调节。
4、禁止手淫，节制房事，避免剧烈的性欲冲动，避免用重复性交的方式来延长第二次的性交时间，这样有损于健康，并不可取。
5、性交前的情绪对射精的快慢有很大的影响，应该避免忧虑，激动和紧张，要树立信心，配合治疗。
6、女方要体贴、安慰、不能责难、威胁，否则反而事与愿违，不利于疾病的康复。
7、不宜轻卒地滥服"壮阳药"。
8、射精时间的长短没有统一的标准，一般认为2~6分，但更短的时间内射精亦属正常范围，只要双方感到满足就是成功，不能以时间长短来作衡量的标准。
临床诊断一般来说，夫妻婚后同居2～3年，未采用任何避孕措施而不怀孕者称不孕。
不孕的原因中，男方占40%，女方占60%。
婚后一直同居未有小孩者，若妻子经检查没问题，男方应该及时去医院检查，以便查出原因，及早治疗。
精子DNA碎片率及顶体酶活性对男性不育的诊断价值
健康域公卫引言男性不育是高发于男性群体的生殖系统疾病，是指夫妻生活正常，且无避孕措施，因男性因素造成不育症状。
其致病因素与性病史、吸烟饮酒和环境污染有关,多需要通过精液质量检测诊断该病，而后开展针对性治疗[1]。
DFI （DNA 碎片指数）是精液质量的常用诊断指标，可以评估疾病程度。
顶体酶活性可以判断精子活性，其指数降低则精子具有较差的穿越力，进而降低精子质量。
现阶段，以上两项指标是男性不育的常规诊断指标，便于疾病的早期治疗。
为此，本研究选取1727例男性筛查者，分析以上两项指标的诊断效果。
1资料与方法1.1一般资料选择2016年6月~2021年12月入院诊断的1727例男性筛查者，其中男性不育患者481例。
根据DFI 分组，一组306例，不育时长为9个月~3年，平均（1.24±0.48）年。
二组113例，不育时长为10个月~3年，平均（1.30±0.44）年。
三组35例，不育时长为11个月~4年，平均（1.30±0.34）年。
四组27例，不育时长为8个月~4年，平均（1.51±0.33）年。
根据顶体酶活性分组，≤48.2U/106为27例，不育时长为8个月~3年，平均（1.17±0.66）年；＞48.2U/106为416例，不育时长为10个月~4年，平均（1.21±0.69）年。
经假设检验并无差异，＞0.05。
1.2方法根据精液检查与处理实验室手册对精液进行常规检测，用改良的牛鲍氏计数板测量精液密度，采取手工法计数。
用快速染色法（Diff-Quik ）测定精子形态学特点，正常形态4%为参考值的具体下限。
所有操作人员经过系统化培训以后上岗，具备熟练的操作能力。
顶体酶活性检测采取顶体酶试剂盒，根据改良后的Kennedy 法实施检测，将精液标本混匀以后进行计数操作，使每个反应管内部的精子个数大概是7.5×106个，对各个标本设置对照以及反应管，然后添加反应液以及抑制剂。
染色体异常男性不育实验诊断分析
查 。重 点 检查 双 侧睾 丸位 置 、 积 和质 地 、 体 附睾 、 输
断价值 。染 色体 核型分 析 是诊 断 由于染色体 畸变 引
起 不育 症 的一种 比较 常用 的检查 方法 。国内 的临床
精管和精索静脉的情况 。其 中睾丸体积测量 ：５ ５名 患者 临床 检查 均采 用 Ｐａｅ睾丸模 型 比拟 法测 定 睾 ｒｄｒ
丸体 积 。
资 料显示 ， 有染 色体 检查 指征 的个体 中 ， 常核 型 具 异 的检 出率 为 ２ ２ ．７～１ ．％Ｉ 。国外 资 料显 示 【 ： ５５ １ Ｊ 正 Ｊ 常群 体 的染 色 体 异 常 检 出率 为 ０ ５ 而 在 男 性 不 ． ％， 育 患者 中 ， 约 ６ 大 ％的 不 育 男 性 发 现存 在 染 色 体 核 型异常 ， 精 子 症 患 者 异 常 核 型 发 生 率 为 １ 无 ０—
苏 木素 一 红 （ Ｅ 染色 ， 伊 Ｈ ） 油镜镜 检 （ ０ ）观察 Ｓ ×１ ０ ， ０
一
性不育 ５ 例患者 ， ５ 做染色体异常男性不育实验诊断 分 析 ， 道如 下 。 报
１ 资料 与方法
１０个生 精细 胞和 ／ ０ 或支 持 细胞进行 分 析 。
． ， ・ ０
③遗传学检查 ： 取外周血细胞常规培养制备染 色体 ， 通光 学显 微 镜 下 行 染 色体 核 型 分 析 。做遗 普
１２１ 病 史 采 集 ．．
通 过 《 性 不 育病 史 询 问 表》 男 详
细采 集病 史 ， 括结 婚 时间 、 成熟 、 生活状 况 、 包 性 性 避
孕措 施 、 既往 生育 或 受 孕情 况 、 既往 病 、 尿 系感 染 泌 史 、 伤 、 族 和遗 传 病 史 ， 外 家 以及 以往 药 物史 和 手 术 史等 。
检验科常见生殖系统功能检测方法与解读
检验科常见生殖系统功能检测方法与解读生殖系统是人体中负责生殖功能的重要部分，其功能的检测与解读对于性健康的评估和问题的筛查具有重要意义。
本文将介绍一些常见的生殖系统功能检测方法，并对其解读进行相应的阐述。
一、男性生殖系统功能检测方法与解读1. 精液分析精液分析是评估男性生育能力的常用方法。
通过检测精液的容量、浓度、活动力、形态等指标，可以判断男性的精子数量和活力是否正常。
正常的精液指标包括：精液容量大于1.5毫升，精子浓度超过15×10^6/ml，精子活动力超过40%等。
结合临床病史，可以对男性生育能力进行大致的评估。
2. 睾酮水平检测睾酮是男性主要的性激素之一，与男性性欲、精子生成等有密切关系。
通过测定血液中睾酮的水平，可以判断睾丸功能是否正常。
正常成年男性的睾酮水平一般在10-35nmol/L范围内。
3. 前列腺特异抗原（PSA）检测PSA是一种由前列腺细胞分泌的蛋白质，其水平的变化可作为前列腺癌的标志物。
通过测定血液中的PSA水平，可以辅助诊断前列腺癌以及判断前列腺疾病的进展情况。
一般来说，PSA水平在4ng/mL 以下为正常。
二、女性生殖系统功能检测方法与解读1. 子宫输卵管通畅性检测子宫输卵管通畅性对于女性的生育能力至关重要。
常用的检测方法包括超声造影和经阴道输卵管通液造影等。
正常情况下，输卵管应该是通畅的，能够让卵子和精子在子宫腔内相遇结合。
2. 卵泡发育监测卵泡发育监测通过超声检查来评估女性卵巢的功能和排卵情况。
通常在月经周期的不同阶段进行检查，包括卵泡初长期、卵泡成熟期和排卵期等。
通过观察卵泡的生长情况和卵泡破裂释放卵子的时间，可以判断女性的排卵功能是否正常。
3. 子宫内膜厚度检测子宫内膜厚度是女性生殖系统功能的一个重要指标，对于成功嵌入受精卵和维持妊娠至关重要。
通过超声检查可以测量子宫内膜的厚度，正常情况下在周期的不同阶段有相应的变化。
三、不孕不育症的综合检测与解读对于不孕不育症的评估，常常需要进行一系列的生殖系统功能检测。
男性不育患者精子密度和活动率及畸形率的检测分析
男性不育患者精子密度和活动率及畸形率的检测分析山东医学高等专科学校（济南校区）临床护理教研室276000摘要：男性不育症是指由于男性因素引起的不育，一般把婚后同居1年以上未采取任何避孕措施而女方未怀孕，称为不育症，发生率为10%左右。
根据临床表现，男性不育症可分为相对不育及绝对不育两种。
导致男性不孕的主要因素是精子的异常，精子数量的减少，以及精子活动力低，质量差，精子形态异常畸形；其次生殖器官疾病与性功能障碍等因素也可导致男性不育症的发生。
故精液分析和精子的检查是男性不育症诊断与治疗的重要检查项目。
关键词：男性不育；精子密度；活动率；畸形率；检测引言男性生精能力是影响精液质量的重要因素。
相关研究显示，下丘脑-垂体-睾丸轴可对精子的生成与发育起到有效的调控作用。
下丘脑脉冲性释放的促性腺激素释放激素（GnRH）可直接作用于脑垂体，从而促进男性卵泡刺激素（FSH）的合成与分泌；FSH通过作用于曲细精管与睾丸支持细胞，可以有效地促进各级精母细胞的发育，达到精子的成熟。
1男性不育患者精子密度和活动率及畸形率分析依据目前国内临床研究显示，在精子生成与发育的过程中，FSH与InhB具有重要的调控作用。
成年男性的机体中，塞尔托利氏细胞(Sertoli cells)细胞与生精细胞的相互作用，促使抑制素B（InhB）表达水平升高，对FSH产生负反馈调节效果。
若支持细胞—曲细精管复合体受损，将会导致InhB分泌量的减少，由于负反馈调节作用，FSH水平反而增高。
据文献报道，FSH表达的升高会对曲精小管产生危害。
基于上述论述，若要明确性腺调控轴的变化对精液质量的影响，则应对血清FSH与InhB水平进行准确的检测。
精液质量检测是诊断不育症的重要分析手段，但其无法全面的预判男性生殖力。
精子形态可预测辅助生殖结局，据文献报道，卵母细胞受精与精子异常形态呈负相关，因此精子的形态学检查尤为重要，精子形态的异常包括头部缺陷、尾部缺陷、体部缺陷以及混合缺陷，其中，头部缺陷的比例显著高于其他缺陷。
男性学实验室检查与质控模板
④ ⑤
5％CO2、37℃孵箱内静置1h。
收集上游精子，备用
密度梯度离心法
目的：利用不同成熟阶段的精子和各种细胞成分各自的
密度，差异使之在不同浓度的溶液中，在离心力作用下 停留在不同密度面的界面上，达到较好的分离。适用于 精液粘稠、严重少精 弱精症。 *标准二层Puresperm法(80%、40%)
①
方法
在锥形离心管底依次加入1.5－2ml 80％、40％ Puresperm液。 将2ml精液加到40％ Puresperm液界面上，离心 300g×20” 弃上层液体、留沉淀物、加5ml Puresperm wash、离心 500g×10’同法洗涤2次 留沉淀物，加0.5ml SpermAssist制成精子悬液备用。
② ③ ④
上游法
目的：
利用活动精子具有主动游过液体界面进入不同培养液 的能力，而达到自行与死精，凝集精子，畸形精子和 细胞杂质分离。 适用于正常精液\液化不良精液。
方法：
① ② ③
液化精液1：3加入培养液，离心200g×8’，洗涤2次。
留沉淀加入0.5ml培养液，制成精子悬液。
取另一支试管加入1ml培养液，将0.5ml精子悬液慢慢 加入试管底部，形成上下二个两面。
精子活力分级:a，快速直线前向运动；b，慢或缓慢的前向运动； C，非前向运动；d，不活动精子。
意义: 能够提供精子寿命和存活情况. 前向运动的精子可排除宫颈因素作为不育原因的可能性。
简化的玻片试验
将一滴宫颈粘液置于载玻片上，用盖玻片铺平。 载玻片两侧各滴1滴精液，使其与盖玻片边缘接触，借助于毛 细作用使精液移向盖玻片下，在宫颈粘液与精液之间形成一 个清晰的接触界面。 该载玻片置于湿润的温箱内，37孵育30分钟
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男性不育实验诊断检测项目基本内容及意义暨南大学医学院附属深圳市人民医院（518020，深圳）刘瑜何林随着基础研究的深入，与男性不育相关实验检测项目愈来愈多，内容涉及形态学、免疫学、生物化学及分子生物学等多学科领域。
在这些繁冗的检测项目中究竟哪些最具诊断价值以及如何正确运用这些检测项目来进行不育症的病因学诊断，是长期困扰男性不育实验诊断临床应用的技术难题。
现将当今较为成熟、有良好应用价值并获得国际专家学者广泛认可的实验检测指标介绍如下：一、静止性生殖道感染检测指标精液中的泌尿生殖道上皮细胞、前列腺细胞、生精细胞和白细胞形态在湿片状态下是无法区分开的，它们统称为圆细胞（Round cells）。
只有通过特殊检查才能将白细胞与其他类型圆细胞区别开，从而达到判断感染是否存在的目的。
精液白细胞过氧化物酶(Leukocyte Peroxidase)染色、精液白细胞群(Leukocyte subpopulations)定量和精浆弹性蛋白酶(Elastase)定量是目前用于精液感染性检测的常用指标。
其中前二者是WHO推荐指标，后者是近几年被国内外学者广泛研究认可的检测指标。
精液白细胞过氧化物酶染色、精液白细胞群定量主要用于判断白细胞精子症，精液白细胞数大于1×106/ml即可确诊。
但二者在诊断准确性上是有差别的。
过氧化物酶染色只能检测到精液中分泌过氧化物酶的中性粒细胞，不能检出精液中所有白细胞，故假阴性率高。
而白细胞群定量是迄今为止最准确可靠的白细胞精子症检测方法，可检测出精液中所有类型白细胞。
精浆弹性蛋白酶定量检测的是白细胞抗炎效应复合物。
精液中弹性蛋白酶浓度与白细胞量不一定总是成正比。
有研究表明，精液弹性蛋白酶浓度与精液中白细胞（过氧化物酶法检测）呈良好相关性。
精液白细胞浓度>1×106/ml时，精浆弹性蛋白酶浓度均>1000ng/ml。
但当精液白细胞浓度<1×106/ml时，亦有一些标本精浆弹性蛋白酶浓度>1000ng/ml[1]。
最新研究表明，通过ROC(receiver operating characteristic)曲线分析，精浆弹性蛋白酶判定感染的临界值定为290ng/ml，其灵敏度为79.5%，特异性达74.4%[2]。
二、免疫性不育检测指标目前血清抗精子抗体检测已在临床广泛开展。
对于男性不育患者而言，以血清抗精子抗体作为免疫性不育辅助诊断指标并无多大临床意义，原因如下：（1）由于男性血-睾屏障的存在，血清内精子抗体的存在无法真实反映当前生殖道内精子是否存在抗体；（2）血清抗精子抗体诊断试剂盒特异性较差。
目前国内外所用血清抗精子抗体诊断抗原多直接从精子内获得，它同时包含精子膜抗原和大量精子膜内抗原物质。
迄今为止已发现的人类精子特有抗原物质多达几十种（但尚不清楚引发免疫性不育最具特异性的抗原成份），这些提取抗原可与正常人血清存在明显的交叉反应。
尽管在制作工艺上可使试剂盒最大限度地减少这种假阳性结果，但其特异性仍存在较大疑问；（3）该项目试剂盒检测方法多采用ELISA间接法，易造成假阳性。
精子膜表面抗体(Spermatozoan surface antibody)（亦称精子包被抗体, Antibody-coating of spermatozoa）是WHO推荐的用于免疫性不育的诊断指标。
其优点在于：（1）检测标本为活力精子，更有临床意义；（2）可以对精子表面抗体产生部位进行定位；（3）检测过程中能保持被检测精子膜的完整性，膜内抗原不对外释放，检测更具特异性；（4）操作简单快捷。
临床上许多血清抗精子抗体检测结果呈阳性的男性，其精子包被抗体检测却并无异常。
三、前列腺分泌功能检测指标1．精浆锌(Zinc)WHO推荐指标。
锌直接参与精子生成、成熟、激活和获能；能延缓精子膜的脂质氧化，维持胞膜结构的完整性和稳定性，从而使精子保持良好的活动力；锌是前列腺功能指标之一，与抗细菌感染有关。
病原微生物感染对前列腺分泌功能有影响，可使精浆锌降低。
2．精浆柠檬酸(Citric acid)WHO推荐指标。
精浆柠檬酸来自前列腺，其作用是通过与钙离子结合，影响射精后精液液化过程。
前列腺炎可导致精浆柠檬酸降低。
3．精浆酸性磷酸酶(Acid phosphatase)WHO推荐指标。
前列腺炎可引起精浆酸性磷酸酶降低，前列腺肥大或早期前列腺恶性肿瘤者其含量增高。
四、精囊分泌功能检测指标精浆果糖(Fructose)是WHO推荐的精囊分泌功能评价指标。
精囊分泌的果糖是精子能量的主要来源。
精囊炎时其含量降低；不完全射精或射精过频，果糖含量亦降低；精囊缺如果糖测定为阴性。
常用于梗阻性无精症患者梗阻发生部位的定位诊断。
五、附囊分泌功能检测指标精浆中性α-葡糖苷酶(Neutral alpha-glucosidase )是WHO推荐的附囊分泌功能评价指标。
中性α-葡糖苷酶较左旋肉毒碱和甘油磷酸胆碱对附睾更特异更灵敏。
结合激素和睾丸其他指标，对远端输精管阻塞有较好的诊断价值。
六、精子功能评价指标1．去透明带仓鼠卵母细胞试验(Zone-free hamster oocyte test)WHO推荐检测指标。
用于精子-卵母细胞融合能力的体外评价。
其不足之处在于：（1）该方法不如生理过程有效，而且可能涉及不同机制，常出现假阴性结果（病人的精子在仓鼠卵母细胞试验中失败，但在体内或体外可使人的卵母细胞受精）；（2）试验操作复杂，可变因素较多；（3）试验中难以实施有效的质量控制，试验误差较大，且仓鼠卵母细胞来源困难，普通实验室难以开展临床检测工作。
2．诱发顶体反应（Induced acrosome reaction, IAR）WHO推荐研究指标。
通过对引发顶体反应后的顶体状态进行评价，达到鉴定顶体反应障碍的目的。
去透明带仓鼠卵母细胞试验中也包含有诱发顶体反应的过程，IAR作为一个独立的检测项目，主要用于男性不育病因分析及辅助生殖技术（ART）助孕方式的选择[3]。
3．精子顶体酶(acrosin)顶体酶是受精过程中重要的蛋白水解酶，当精子头部进入卵透明带时，顶体酶原被活化为顶体酶水解卵透明带，使精子穿过卵透明带最终与卵子融合。
精子顶体酶是目前被国内外学者广泛研究和认可的评价指标。
虽然顶体酶的作用机制现在尚未完全明了且存在一定争议，精子顶体酶活性检测也暂未列入《WHO人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》，但其在辅助生殖中的意义已得到多数学者的承认，将其作为ART助孕方式选择的评价指标之一已获得良好的应用效果[3]。
4．人透明带结合试验（Human zona pellucida binding test）WHO推荐研究指标。
精子与透明带结合的过程启动顶体反应，释放可溶性顶体内容物，精子穿透透明带基质。
当体外受精失败或成功率低时，评价与透明带结合的精子数可能具有临床价值。
很少或没有精子结合在透有带上，通常提示精子有缺陷。
但试验受到人卵母细胞来源的限制，且卵母细胞存在个体差异。
七、精子发生评价指标1．血清抑制素B（Inhibin B）以传统血激素指标FSH反映睾丸生精功能状态时，存在一定的误差。
有时一些精子发生障碍的患者，其血清FSH水平的改变却不太明显。
抑制素B可以反映Sertoli细胞的功能状态，也可以作为评判睾丸生精功能的指标。
精子生成障碍越严重，抑制素B值越低。
由于抑制素B为睾丸支持细胞直接产生，其分泌是由前一阶段精子发生刺激引起的，更能反映睾丸内精子发生的情况，而FSH受多因素影响。
因此有人认为血清抑制素B是诊断精子发生障碍更直接、更有价值的指标。
若将血清抑制素B和血清FSH检测结合起来，则将大大提高对睾丸生精功能了解的准确性[4]。
此外血清抑制素B还可用于非阻塞性无精症病人睾丸精子抽取的预测、青春期性腺功能的评估以及辅助生殖过程中卵巢储备功能的评价。
血清抑制素B对精子发生的评价功效，已得到WHO的认可[5]。
2．精液中凋亡生殖细胞检查（Apoptosis of spermatogenic cells）非WHO推荐指标。
细胞凋亡系统可能参与男性生殖细胞生成过程中的质量调控机制，而且与精子细胞和精母细胞阶段的生精阻滞有关。
精子发生过程中，如遇到性激素降低、辐射、温度升高或毒物接触等情况，凋亡细胞尤其是调亡的原始精母细胞数目将增多。
特别是精液中脱落生殖细胞增多且精子数量或质量明显下降时，精液中生殖细胞凋亡检查更具临床意义。
检测生殖细胞的凋亡对于男性不育症的临床诊疗、生殖系肿瘤的治疗与预后以及男性避孕药物的研究与开发具有重要意义。
3．遗传学检测指标(1) 染色体核型分析精子发生障碍常规检测项目，具有重要临床意义。
(2) 精子发生候选基因迄今为止，除Y染色体无精子因子（Azoospermia factor, AZF）区域微小缺失外，其他与精子发生有关的染色体区域尚未被确定。
大量不育症病例研究表明，不育症可能是一多基因决定疾病。
AZF基因缺失可导致无精子症和严重的少精症。
目前临床通常只能选取AZFa、AZFb、AZFc基因中的几个位点进行检测。
4．精子核蛋白组型转换（Spermatozoan Nucleoprotein Transition）非WHO推荐指标。
在正常睾丸精子发生过程中，精子核蛋白中与DNA结合的组蛋白逐渐被鱼精蛋白所取代，这个过程称为精子核蛋白组型转换。
受精前精子基因在鱼精蛋白特殊保护下紧密浓集，抑制了精子基因表达，使遗传物质保持稳定。
核蛋白组型转换缺陷或异常直接影响精子受精能力和受精后原核的形成及胚胎的发育，可引起不育或胚胎早期夭折流产。
八、其他评价指标1．精子形态学（Sperm morphology）WHO推荐检测指标。
是了解精子质量状况最基本的检测指标，用于不育查因及ART助孕方式的选择。
WHO新的技术规范不仅要求区分精子形态正常与异常百分率，同时对畸形精子分类进行了细化，即计算多重精子缺陷指数，增加了畸形精子指数(Teratozoospermia index, TZI)和精子畸形指数(Sperm deformity index, SDI)两个新指标。
有研究表明，TZI>1.6与未经治疗不育夫妇的低生育率有关，而且SDI 1.6是体外受精失败的阈值[6]。
2．精子低渗膨胀试验（Sperm hypo-osmotic test, HOS）WHO推荐检测指标。
WHO不主张将HOS作为精子功能试验予以应用，认为它是一种可供选择的检查精子存活力的补充试验方法。
而部分学者认为HOS可作为精子膜功能指标之一使用。
有研究结果表明：HOS与去透明带仓鼠卵母细胞试验之间有较好的符合率，对继发性不育者更有价值。
目前国内外学者将HOS作为ART助孕方式选择的一个评价指标加以应用[3]。