放线菌的形态结构观察
放线菌形态及结构的观察
放线菌形态及结构的观察姓名：贾晓霖学号：201000140032班级：生科10.1同组人员：李江湲程子修洪钧烨摘要：配制高氏I号培养基用来培养青色链霉菌和弗式链霉菌，本实验运用插片法观察放线菌的形态，初步地了解放线菌的基本结构和形态。
更直观的了解，基内菌丝、气生菌丝以及气生菌丝分化而成的孢子丝以及孢子。
关键词：青色链霉菌（Streptomyces glaucus）、弗氏链霉菌（Streptomyces microflavus）、高氏I号培养基、插片法前言：放线菌（actinomycetes）是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
广泛存在于自然界中，土壤中最多，主要以孢子繁殖，至今发现的共有五六十属，它与人类的关系极为密切，根据1978年的统计，在当时已发现的5128种抗生素中，有3165种为各种放线菌所产生，链霉菌属又占放线菌中的首位（占放线菌产生的抗生素中的87.5％）；有的放线菌还可用于生产维生素、酶制剂等；少数会引起人类、动物、植物的疾病。
链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其孢子丝的形态多样，而且性状较稳定，是对它们进行分类、鉴定的重要指示。
因此学习如何培养和观察它们不仅对科学研究有很大的意义，对实际生活应用也有很大的帮助。
本实验采用合成培养基进行培养，采用插片法取菌观察，不仅可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的放线菌形态，除此之外还可以采用玻璃纸法、印片法进行观察。
链霉菌属（Streptomyces）共约1，000多种，它们具有发育良好的菌丝体，也是实验中选取它们观察的重要原因。
一、实验目的1.1学会正确的配置高氏I号培养基1.2运用插片法观察放线菌的形态，初步地了解放线菌的基本结构和形态二、实验材料1、菌种：青色链霉菌(Streptomyces glaucus)，弗氏链霉菌(S. glaucus).2、试剂：高式I号培养基200ml、二甲苯、香柏油3、仪器和其他用具：三角烧瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，分析天平，牛角匙，高压蒸气灭菌锅，pH 试纸，棉塞，牛皮纸，记号笔，载玻片，盖玻片（3包 10个/包），培养皿（1包 10个/包），移液管，接种环，镊子2把三、实验方法一、高氏I号培养基的制备1、称量和溶解。
放线菌形态的观察(共10张PPT)
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5.观察时用镊子小心拔出一片，把有菌的一 面朝上，放在洁净的载玻片上，置显微镜下进行 观察。
6. 在另一片洁净的载玻片中央滴一小滴吕氏碱 性美蓝，将有菌的一面朝下，小心去除气泡，置于油 镜下观察。
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1ml的孢子悬液稀释液，无菌的高氏1好培养基平板上，均匀涂布； 用经火焰灭过菌的小镊子将灭菌盖玻片如图示插入平皿培养基上，置28℃培养，直至菌长好； 掌握观察放线菌形态的基本方法，并观察放线菌的形态特征。 在另一片洁净的载玻片中央滴一小滴吕氏碱性美蓝，将有菌的一面朝下，小心去除气泡，置于油镜下观察。 和细菌的单染色一样，放线菌也可用石炭酸复红或吕氏碱性美蓝等染料着色后，在显微镜下观察其形态。 放线菌是由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。 观察时用镊子小心拔出一片，把有菌的一面朝上，放在洁净的载玻片上，置显微镜下进行观察。 将灭菌后的高氏1号培养基倒入培养皿，每皿倒15ml左右，凝固后备用； 在另一片洁净的载玻片中央滴一小滴吕氏碱性美蓝，将有菌的一面朝下，小心去除气泡，置于油镜下观察。 在另一片洁净的载玻片中央滴一小滴吕氏碱性美蓝，将有菌的一面朝下，小心去除气泡，置于油镜下观察。 显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃棒，镊子等。 放线菌是由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。 用经火焰灭过菌的小镊子将灭菌盖玻片如图示插入平皿培养基上，置28℃培养，直至菌长好； 放线菌是由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。 观察时用镊子小心拔出一片，把有菌的一面朝上，放在洁净的载玻片上，置显微镜下进行观察。 将灭菌后的高氏1号培养基倒入培养皿，每皿倒15ml左右，凝固后备用；
放线菌的形态观察实验报告
放线菌的形态观察实验报告放线菌的形态观察实验报告放线菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，具有丰富的多样性和重要的生物学功能。
本次实验旨在通过对放线菌的形态进行观察，了解其基本特征和生长习性。
以下是实验过程和观察结果的详细描述。
实验材料和方法：1. 实验材料：放线菌培养基、无菌培养皿、无菌匙、显微镜、石英片。
2. 实验方法：a. 取一块无菌培养皿，将放线菌培养基倒入培养皿中，待其凝固。
b. 使用无菌匙，将待观察的放线菌菌落划入培养基表面，尽量避免交叉污染。
c. 将培养皿盖好，放置在恒温箱中，温度设定为28摄氏度。
d. 每隔一段时间，取出培养皿进行观察，使用显微镜观察放线菌的形态特征，并用石英片进行取样。
实验观察结果：1. 放线菌的形态特征：a. 放线菌呈现为长而细的菌丝状，类似于细长的线状结构。
b. 放线菌的菌丝通常呈现分枝状，形成复杂的网络结构。
c. 放线菌的菌丝颜色多样，包括白色、黄色、红色等，具有一定的色彩变异性。
d. 放线菌的菌丝表面常常有颗粒状物质附着，形成颗粒状结构。
2. 放线菌的生长习性：a. 放线菌生长缓慢，通常需要较长时间才能形成可见的菌落。
b. 放线菌的菌落呈现不规则形状，边缘模糊不清，有时会形成分支状的菌落。
c. 放线菌的菌落表面通常光滑而湿润，有时会有微小的颗粒状结构。
d. 放线菌在培养基上生长的过程中，会逐渐扩散并形成新的菌落。
3. 放线菌的细胞结构：a. 放线菌的菌丝由一系列细胞组成，细胞间通过连接点相互连接。
b. 放线菌的细胞内含有细胞质和细胞核，细胞核通常位于细胞中央。
c. 放线菌的细胞质内含有丰富的有机物质和细胞器，包括线粒体、内质网等。
实验讨论和结论：通过对放线菌的形态进行观察，我们可以发现放线菌具有独特的细胞结构和生长习性。
放线菌的菌丝状结构和分枝状特征使其能够在土壤中广泛分布，并与其他微生物相互作用。
放线菌的色彩变异性可能与其生长环境和代谢产物有关，这也为进一步研究放线菌的生态功能提供了线索。
4.2放线菌形态观察技术
回忆一下
细菌细胞有哪些特点？
6
DNA
1
鞭毛
2 3
5
细胞膜
保护
细胞质
运动
4细胞壁荚膜 Nhomakorabea概 念
是一类介于细菌和真菌之间的单细胞生物。因其菌落中的菌丝常从 一个中心向四周辐射状生长，因此称为放线菌。 细胞构造和细胞壁的化学组成与细菌相似，与细菌同属原核生物， 革兰氏染色呈阳性； 形态上具有分枝状菌丝，以孢子进行繁殖，菌落形态与霉菌相似。
4.2 诺卡氏菌属
属 名 主要特征 用 途
好氧，腐生；菌丝体发 产 生 利 达，基丝纤细，生长一段时 福霉素、间 间后形成横膈断裂，从而复 型霉素、瑞 诺 卡 氏 制形成新的菌丝体，少数形 斯托菌素等。 成孢子丝，多数无气生菌丝。 石油脱蜡、 菌属 菌落较小，表面多皱、干 烃类发酵； 燥、致密，一触即碎或如面 分解腈化物， 团，或平滑突出，成奶油状。 污水处理。
4.3 小单孢菌属
属 名 主要特征 用 途 好氧； 营养菌丝侵入培养基，分 支多、细，无膈、不断裂； 产生庆大 一般无气生菌丝； 霉素、利 孢子单生，着生在基丝伸 福霉素等， 出的短柄上。 分解纤维 素。 菌落较小，产色素； 表面覆盖一薄层孢子堆； 菌落与培养基结合在一起。
小单孢 菌属
PART 05
课后作业
1. 根据今天学到的知识,你能解释细菌几乎无处不在的原因吗? 2.放线菌的结构特点是什么？
1.3 孢子丝及孢子
孢子丝：
指当气生菌丝生长发育到一定阶段， 其上分化出的可形成孢子的繁殖菌丝。
特点：
形态多样，有直形、波曲、钩状、 螺旋状、一级轮生和二级轮生等多种， 是放线菌定种的重要标志之一。
1.3 孢子丝及孢子
放线菌的形态观察
4、观察：在载玻片中央滴一滴染液，小心用镊 子将盖玻片抽出，带菌面朝下，覆盖于染色 液上，浸泡2min后，用吸水纸将多余染色液 吸干，镜检。低-高-油
五、实验结果
菌名
培养法
菌丝形态 形态特征
六、思考题 用插片法制备放线菌标本的优点
基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三类。
基内菌丝：伸入培养基内的菌丝，具有吸收 营养的功能
该种菌丝无隔，直径较细，有的无色，有的 产生色素，呈现不同的颜色
气生菌丝：基内菌丝向空间生长的菌丝。直径较 基内菌丝粗，呈直形或弯曲形。产生的色素较深
孢子丝：气生菌丝发育到 一定阶段，其顶端可分化 形成孢子。这种形成孢子 的菌丝称孢子丝。孢子成 熟后，可从孢子丝中逸出 飞散
孢子丝的形状、着生方式， 螺旋方向（左旋还是右 旋）、数目、疏密程度以 及形态特征是鉴定放线菌 的重要依据
放线菌孢子丝形态
孢子 --孢子是孢子丝成熟后，分化产生出的繁殖 细胞
孢子的形状多样，球、椭圆、杆状等；
表面结构不一样，光滑、疣刺、毛发状等；
孢子常有色素，单个无色透明，聚集表现；
孢子抗干燥能力强，抗热性不及芽孢，强于营养细 胞。
三、实验材料 菌种：链霉菌 染色液：0.1%美兰 培养基：马铃薯培养基 器皿：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、
酒精灯、镊子等
四、方法与步骤
1、倒平板：将马铃薯培养基
2、插片：用无菌镊子取无菌盖玻片，插在平板 培养基上（40°-50°插入）
实验四 放线菌的形态观察
一、实验目的 1、学会用插片培养法培养放线菌的制片方法 2、观察放线菌的菌落特征、个体形态特征
二、实验原理
实验5-放线菌形态观察
实验六放线菌的形态观察；霉菌子实体、分生孢子及菌落形态观察Ⅰ放线菌的形态观察一、目的要求1、学习并掌握观察放线菌的操作方法。
2、巩固掌握放线菌的形态特征。
二、实验原理放线菌是单细胞原核微生物。
菌丝无隔、分枝、纤细，分为生长于培养基内或匍匐于培养基表面的、从培养基吸取营养物质的基内菌丝，以及伸出培养基表面的气生菌丝。
气生菌丝的上部分化出孢子丝，呈螺旋状、波纹状，或分枝状等，孢子丝的着生方式因种而。
放线菌多可产生色素，菌丝呈各种颜色，有的放线菌能产生水溶性色素分泌至培养基中使培养基变色。
孢子丝长出各种形态的孢子，孢子有不同的颜色。
放线菌的菌落在培养基上着生牢固，与基质结合紧密，难以用接种针挑起。
而且由于有大量孢子存在，因而表面呈干粉状，使得易于与其他类型的微生物相区别。
放线菌的形态特征是其菌种鉴定与分类的重要依据。
三、实验器材1、菌种未鉴定放线菌菌株；2、仪器显微镜；3、材料玻璃纸、载玻片、盖玻片，镊子、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯。
4、染料石炭酸复红染色液。
四、操作步骤1、观察自然生长状态的放线菌用镊子小心取出用插片法培养的放线菌培养皿中的一张盖玻片，将其背面附着的菌丝体擦净。
然后将长有菌的一面向上放在洁净的载玻片上，用低倍镜、高倍镜观察。
找出3类菌丝及其分生孢子，并绘图。
注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。
2、水封片观察取石炭酸复红染色液一滴滴于载玻片中央，从培养皿中取出插片法培养放线菌的盖玻片，将无菌或菌较少的一面以擦镜纸擦净，并将有菌面朝下，放在载玻片上，浸在染色液中，制成水封片，用高倍镜观察其单个分生孢子及其基内菌丝，并绘图。
五、注意事项1、培养放线菌中要注意，放线菌的生长速度较慢，培养期较长，在操作中应特别注意无菌操作，严防杂菌污染。
并控制培养时间。
2、在镜检观察时，要仔细观察放线菌的营养菌丝、气生菌丝和孢子丝等。
六、实验报告1、绘图绘出观察的放线菌基内菌丝、气生菌丝和孢子丝的形态。
放线菌结构形态观察
（2）印片法
（3）插片法
片时不能错动， 以免影响孢子 丝的自然排列 状态。
五、实验报告
1、绘图：金色链霉菌和灰色链霉菌的气生菌
丝、孢子丝及孢子的形状。
2、放线菌与细菌菌落最显著的差异是什么？
实
验
四
放线菌结构形态观察
一、实验目的
1、学习放线菌形态结构的观察方法。
2、观察放线菌的菌落特征、个体形态及其繁殖 方式。
二、实验原理
1、放线菌形态结构特征：
基内菌丝（营养菌丝） 气生菌丝 2、放线菌菌落特征： 孢子丝（繁殖菌丝）
放线菌菌落特征：干燥、不透明、表面呈致密的丝 3、放线菌个体形态及繁殖方式 绒状，上有一薄层彩色的“干粉”；菌落和培养基 放线菌个体形态：丝状体 的连接紧密，难以挑取；菌落正反面颜色不一致， 放线菌繁殖方式：孢子 菌丝片段 菌落边缘的琼脂平面有变形的现象。
三、实验材料
1、菌种：金色ogenes ）和灰色链霉菌 （Streptomyces griseus）培养物。 2、其他物品：载片及盖片、0.1%美蓝染液。
四、实验步骤
1、放线菌菌落特征观察： 2、个体形态观察： （1）直接观察法
注意事项：印 选择菌丝和孢子生长较薄的部位直接置于低倍和 高倍显微镜下观察。
实验三 放线菌、霉菌的形态结构观察1
插片法
6、取出， 轻放于载 玻片上直 接观察
湿室培养方法
实验材料
1、细黄链霉菌5406平板、插片培养材料。 2、黑曲霉、黑根霉平板培养材料 3、青霉湿室培养材料。
4、装片
5406链霉菌——典型的放线菌
呈分枝丝状 菌丝无隔膜，单细 胞 菌丝直径与细菌相 似，1微米左右
菌丝有分化
实验内容与要求
1、细黄链霉菌的观察——插片法 2、青霉湿室培养材料—观察菌丝有无横隔、分生孢子 梗和帚状结构 3、黑根霉平板材料：
简易制片法——观察菌丝有无横隔、孢囊和孢囊孢 子、假根、囊托和囊轴
4、黑曲霉平板材料： 简易制片法——观察菌丝有无横隔、分生孢子梗着生 位置、足细胞、顶囊、分生孢子着生位置、分生孢子
实验报告
• 绘图并标明各部分名称。
馒头的制作和甜酒的酿制
• 预习提示： • 与同学或家长讨论，甜酒的酿制过程， 思考每一步骤的原理。
根霉
产淀粉酶等，用 于甜酒的酿制 生产多种有机酸 转化甾体类物质 主要特征： 菌丝无隔 营养菌丝特化成假根 和匍匐菌丝 孢囊孢子繁殖
曲
霉
产蛋白酶、淀粉酶等， 用于酱油的酿制 生产多种有霉素 纤维素酶和有机酸等 果品腐烂 产生毒素
青霉菌菌丝与曲霉相似，但无足细胞。 分生孢子梗顶端不膨大，无顶囊。 分生孢子小梗多次分枝呈扫帚状。 分生孢子颜色为青绿色。
实验三、放线菌、霉菌形态结构的观察
实验目的：
学习丝状微生物制片和染色技术； 观察和掌握典型放线菌和重要霉菌的形
态结构特征
预习提问
放线菌制片方法主要有哪几种？
为什么要采用与细菌、酵母菌不同的制 片方法？
丝状微生物观察的难点
每一个体由微小的菌丝交织 而成，个体之间难以分清 ——一团乱麻，
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实验内容
(二)个体形态特征的观察
观察2种放线菌菌丝和孢子丝自然生长的 性状，其中包括气生菌丝（较粗），基 内菌丝（较细）和孢子丝的形状。
注意放线菌菌丝直径的大小，孢子丝的 形状。哪种菌的孢子丝呈螺旋状？
实验内容
(三)孢子形状的观察（印片染色法）
用盖片印片
载 片 上 滴 加 0.1 ％ 美 蓝 染 液
五、实验报告内容
(一)描述你所观察到的放线菌菌落特征。
微生物名称
灰色 链霉菌
淡紫灰 链霉菌
大小
表面形状
含水程度 菌落颜色
正面： 反面： 正面： 反面：
透明度
与培养基 结合程度
嗅味
(二)记录并绘制灰色链霉菌、淡紫灰链霉菌个体 形态及生殖方式图，标明气生菌丝、孢子丝及孢 子的形态。
微生物名称 制片法
(二)其他物品
0.1％美蓝染液、载片及盖片、显微镜、 接种环、接种针、酒精灯、蒸馏水等。
实验内容
(一)菌落形态的观察
观察2种放线菌菌落表面形状、大小、颜色、边 缘，以及有无色素分泌到培养基内等；
并用接种环挑取菌落，注意菌丝在培养基上着生 的紧密情况。
区别基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的着生部位。
实验二
放线菌的形态 结构观察
目的要求
1. 学习并掌握放线菌形态结构的观察方法。 2. 观察放线菌的菌落特征、个体形态及其繁殖方式。
放线菌的菌丝形态
链霉菌孢子丝形态
垂直
单轮 (无螺旋)
单轮 (有螺旋)
弯曲
丛生
松螺旋
紧螺旋
松环， 初级螺旋，
钩状
双轮 (无螺旋)
双轮 (有螺旋)
实验材料
(一)菌种
淡紫灰链霉菌、灰色链霉菌。
灰色 链霉菌
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
印片法或 直接观察法
淡紫灰 链霉菌
印片法、
直接观察法 或插片法
个体形态及生殖方式图
思考题
列表总结放线菌与细菌菌落的差异。
实验二
结
束
请交报告！
感谢下 载
感谢下 载
盖片印片一面朝下盖在载片上
镜检
高倍镜(400×)下观察灰色链霉菌和淡紫灰链霉 菌的孢子及孢子丝。
实验内容
(四)插片法观察放线菌形态 特征
➢ 插片染色法：28℃插片培养 4—6d，轻轻取出盖玻片，载 片上滴加0.1％美蓝染液，盖 片有菌一面朝下盖在载片上， 镜检。
➢ 观察淡紫灰链霉菌基内菌丝、 气生菌丝及孢子丝的卷曲状 况，及分生孢子的形状。