草芽孢杆菌的液体发酵和产物中糖化酶的实验

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草芽孢杆菌的液体发酵及其产物中糖化酶的实验

草芽孢杆菌的液体发酵及其产物中糖化酶的实验
4、枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类,在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用;
5、能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素,提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性。
1.3应用范围
枯草芽孢杆菌不仅在饲料中应该比较广泛,在污水处理及生物肥发酵或发酵床制作中应用也相当广泛,是一种多功能的微生物.
3.发酵培养基的灭菌每组配制13L牛肉膏蛋白胨液体培养基(pH7.4),另再加0.1%的酵母膏,用乳胶管小心地加入发酵罐中,然后旋紧塞子,安装好防护罩(见图7),按下面的方法灭菌:
(1)检查水、电、气以及发酵罐的密封性是否正常。如正常即可灭菌。
(2)打开进水阀,调节水压使水压表指针指示在0.2~0.4之间,使水充满加热器,防止烧坏加热器。(出水阀近关闭情况下,达到0.4,此时出水阀虽然关闭,但进水阀打开,此外水压也满足要求,所以水能充满加热器不至于烧坏,当灭菌结束降温时,热水会走另一条旁路(非出水阀的另一条出口)泄压。)
本科学生综合性实验报告
学号
学院专业、班级
实验课程名称枯草芽孢杆菌的液体发酵及其产物中糖
化酶的活性测定
教师及职称
开课学期2013至2014学年下学期
云南师范大学教务处编印
一.实验设计方案
实验序号
实验三
实验名称
枯草芽孢杆菌的液体发酵及其产物中糖化酶的活性测定
实验时间
2013.4.7-2013.4.14
实验室
总之,本次实验的学习,让我们深刻体会到了合作学习的重要性,以及严谨的科学态度的重要性。在今后的学习中我们会更加珍惜这样的学习机会,并尽力做到最好的。
教师评语及评分:
签名: 年 月 日
4、使用固体原料,在发酵过程中,糖化和发酵过程同时进行,简化操作工序,节约能耗。

利用枯草芽孢杆菌发酵生产糖化酶的上游工艺研究

利用枯草芽孢杆菌发酵生产糖化酶的上游工艺研究

利用枯草芽孢杆菌发酵生产糖化酶的上游工艺研究山西生物应用职业技术学院 闫 君[摘 要]糖化酶—Α-1,4-葡萄糖水解酶(Α-1,4-Glucan glucohydro lace ),又称葡萄糖淀粉酶[Glucoam ylase ,(EC .3.2.1.3.)],此酶作用于淀粉分子的非还原性末端,以葡萄糖为单位,依次作用于淀粉分子中的Α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖。

此酶作用于支链淀粉后的产物有葡萄糖和带有Α-1,6-糖苷键的寡糖;作用于直链淀粉后的产物几乎全部是葡萄糖。

本产品广泛用于生产白酒、黄酒、酒精、啤酒;用于以葡萄糖作发酵培养基的各种抗生素、有机酸、氨基酸、维生素的发酵;本品还大量用于生产各种规格的葡萄糖。

总之,凡对淀粉、糊精必需进行酶水解的工业上,都可适用。

糖化酶产生菌主要是黑曲霉(左美曲霉、泡盛曲霉)、根霉(雪白根酶、德氏根霉)、拟内孢霉、红曲霉等经深层发酵提炼而成,本文介绍的是利用枯草芽孢菌杆发酵来生产糖化酶的基本上游工艺过程。

[关键词]枯草芽孢杆菌 发酵 糖化酶 上游工艺1、上游工艺流程 2、材料与设备菌种:枯草芽孢杆菌(中科院微生物菌种保藏中心购买,编号1.15)设备:生物发酵罐(镇江东方生物工程设备技术公司GU JS -50-500C 型)3、发酵过程3.1菌种活化与扩培制作斜面培养基(蛋白胨1%、牛肉膏0.3%、氯化钠015%、琼脂粉2%、PH 7.0、蒸馏水配制),并灭菌(灭菌时间30分钟,温度121℃)。

再进行接种:在灭菌过的超净工作台中,用浸过75%酒精的脱脂棉檫净安瓿瓶,用火焰加热其端顶,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或镊子敲下已破裂的安瓿瓶顶端。

然后用无菌吸管吸取0.3-0.5m l 灭菌好的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻震荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状,吸取全部菌体悬浮液,移植于斜面培养基上。

将接种好的斜面放入培养箱中,于28℃培养48小时。

培养过程中,要注意观察菌种情况,及时做好记录。

芽孢杆菌糖酵解实验现象

芽孢杆菌糖酵解实验现象

芽孢杆菌糖酵解实验现象
芽孢杆菌产酶酵解葡萄糖为乳酸和乙酸的实验是一种经典的微生物学实验,该实验的
主要过程包括菌种接种、培养基制备、培养、振荡、取样等步骤。

其主要目的是了解芽孢
杆菌的生长特性、代谢途径和代谢产物,以及不同物质对其生长和代谢的影响。

在该实验中,首先将芽孢杆菌接种在含有葡萄糖的液体培养基中,经过一定时间的培养,芽孢杆菌开始进行糖酵解代谢,将葡萄糖分解为乳酸和乙酸。

此时,培养液的pH下降,并伴随着乳酸和乙酸等有机酸的产生,导致培养基呈现酸性反应。

接着,通过荧光显微镜观察芽孢杆菌的生长情况,可以发现芽孢杆菌呈现长杆状、不
具有明显的鞭毛和纤毛结构。

随着培养时间的延长,芽孢杆菌的生长速度逐渐加快,产生
的代谢产物也逐渐增加。

此外,通过对不同浓度的葡萄糖、不同时间、不同pH条件下菌群生长和糖酵解代谢的影响进行探究,可以进一步了解芽孢杆菌的生长特性和代谢途径。

例如,当葡萄糖浓度较
高时,菌群的生长速度明显加快,产生的代谢产物也相应增加,而当pH值过低或过高时,菌群的生长和代谢都会受到影响。

总之,芽孢杆菌糖酵解实验是一种常用的微生物实验,通过该实验可以深入了解微生
物的生长特性、代谢途径和代谢产物,为探究微生物的生命活动提供了实验基础。

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的分离纯化

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的分离纯化

武汉工商学院酶工程技术实训论文学院:环境与生物工程学院专业:生物工程年级:2014级学生:学号: 指导教师:职称:题目:枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的分离纯化2017年6月18日目录摘要 (1)关键词 (1)Abstract (1)Keywords (1)1 中性蛋白酶 (2)1.1 中性蛋白酶的来源 (2)1.2 中性蛋白酶的意义 (2)1.3 枯草芽孢杆菌 (2)1.4 枯草芽孢杆菌的产酶特征 (2)1.5 枯草芽胞杆菌的形态特征 (3)1.6 研究目的 (3)2 实验材料与方法 (3)2.1 仪器设备和耗材 (3)2.1.1 仪器 (3)2.1.2 耗材 (3)2.2 枯草芽孢杆菌的筛选 (4)2.3 粗酶液的制备 (4)2.4 酶的分离纯化 (4)2.4.1 硫酸铵饱和度的选择 (4)2.4.2 蛋白酶活力测定 (5)2.4.3 透析及层析 (5)2.4.4 蛋白酶性质的测定 (5)3 结果与分析 (6)3.1 蛋白酶活力测定 (6)3.2 透析除盐 (7)3.3 柱层析分析 (7)3.4 酶作用的最适 pH (8)3.5 金属离子对酶活的影响 (9)3.6 化学试剂对酶活的影响 (9)4 结论与讨论 (10)参考文献 (11)枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的分离纯化摘要中性蛋白酶作为一种生物催化剂已广泛用于食品、酿造、医药、纺织、制革等行业,本文对枯草芽孢杆菌的发酵产酶的提取质量条件进行了研究。

利用硫酸铵分级盐析,葡聚糖层析纯化后蛋白酶总活力为38694U,蛋白酶比活力为4960.8U/mg。

该酶的活力受到EDTA、异丙醇、乙醇抑制。

钙离子、镁离子对该酶有较好的保护作用关键词:枯草芽孢杆菌;中性蛋白酶;葡聚糖层析;分级盐析Extraction quality analysis of producing neutralprotease from Bacillus subtilisAbstractNeutral protease as a biological catalyst has widely for food, and brewing, and medicine, and textile, and leather, industry, will enzyme technology application to seafood condiment, hydrolyzed of production in the, can formed enzyme method processing of unique advantages, makes fermentation products production cycle greatly shortened, and improve protein using, for, I on Bacillus subtilis spore Bacillus (Bacillus Substilis) of fermentation produced enzyme of extraction quality conditions for has research.Keywords:Bacillus subtilis; neutral protease; Dextran chromatography;fractionation; salting out1中性蛋白酶1.1中性蛋白酶的来源蛋白酶是一类催化蛋白质肽键,生成蛋白胨、蛋白肽及氨基酸等产物的水解酶,其广泛分布于自然界的植物、动物和微生物中。

芽孢杆菌液体发酵产脂肪酶实验报告

芽孢杆菌液体发酵产脂肪酶实验报告

芽孢杆菌液体发酵产脂肪酶实验报告一、引言脂肪酶(lipase)是一种能催化脂肪水解的酶,广泛存在于微生物中。

而芽孢杆菌(Bacillus)是一种常见的细菌,具有良好的产酶性能和酶稳定性。

本实验旨在通过芽孢杆菌的液体发酵过程,获得高效产脂肪酶的条件,并对其产酶能力进行评价。

二、材料与方法2.1 发酵菌种的培养与保存1.预先培养芽孢杆菌菌株。

2.将菌株保存在琼脂斜面培养基中,并置于4℃冰箱保存。

2.2 液体发酵过程1.准备适宜的发酵培养基。

2.将预培养菌株接种到发酵培养基中,初始菌液浓度为OD600=0.2。

3.在适宜的温度(如30℃)下进行培养,并设定一定的培养时间(如48小时)。

4.定时取样,测定菌液中脂肪酶的活性,并监测菌液的各项指标变化。

2.3 脂肪酶活性测定1.取培养液中适量的样品。

2.根据脂肪酶活性检测试剂盒的说明书进行实验操作。

3.记录结果并计算菌液中脂肪酶的活性。

三、结果与讨论3.1 菌液中脂肪酶的活性变化以下为菌液中脂肪酶活性的测定结果:培养时间(小时)脂肪酶活性(U/mL)12 5024 10036 15048 200通过对菌液中脂肪酶活性的监测,可以看出随着培养时间的延长,脂肪酶活性呈现逐渐增加的趋势。

在培养48小时时,菌液中脂肪酶活性达到最高峰,为200 U/mL。

3.2 脂肪酶产量的评价为评价菌株的产酶能力,计算菌液中单位体积的产酶能力,即单位体积菌液中的脂肪酶活性。

在本实验中,采用菌液中脂肪酶活性最高的时间点(48小时)进行单位体积产酶能力的计算。

假设培养液的体积为V mL,计算单位体积的脂肪酶活性为:200U/mL。

由此可见,在本实验中,芽孢杆菌液体发酵过程中,脂肪酶的产量为200 U/mL。

四、结论本实验通过芽孢杆菌的液体发酵过程,成功获得了高效产脂肪酶的菌株。

通过测定菌液中的脂肪酶活性,发现菌液中脂肪酶活性随着培养时间的延长呈逐渐增加的趋势,在培养48小时时达到最高峰。

从枯草杆菌发酵液中提取a淀粉酶的流程

从枯草杆菌发酵液中提取a淀粉酶的流程

从枯草杆菌发酵液中提取a淀粉酶的流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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枯草芽孢杆菌L1发酵产中性蛋白酶活性的研究

枯草芽孢杆菌L1发酵产中性蛋白酶活性的研究

食 品与 发 酵科 技
2018年第3期
菌 自身 可 合 成蛋 白酶 、淀 粉酶 、脂 肪 酶 、纤 维 素 酶 等 1.2-3 正 交 试 验 优化 枯 草 芽 孢 杆 菌 L1产 中性 蛋 白
多种 酶类 ,具 有很 强 的发 酵能 力 ,近年来 常 被用 于发 酶 活性 条 件
酵食 品工业 副产 物 以提 高其 利用 价值 ,如 发 酵花 生
即 豆粕 粉 浓度 为 2.o%,葡萄 糖 为 1.o% ,接 种 量 为 7% ,发 酵 温度 为 36℃ ,其 发 酵 液 的 中性 蛋 白酶 活力 可 达 68 菌 ;豆 粕 ;中性 蛋 白酶 ;酶 活
中 图 分 类 号 :TQ925+.2
文献 标 识 码 :A
文 章 编 号 :1674—506X(2018)03—0055—0005
Research on the Enzym e Activity of Neutral Protease from Bacillus subtilis L1 Strain Ferm enting the Soybean M eal
doi:10.3969 ̄.issn.1674—506X.2018.03—012
枯 草 芽 孢 杆 菌 (Bacillus subtilis),属 于 芽 孢 杆 菌 属 ,为 革 兰 氏 阳 性 、过 氧 化 氢 酶 阳性 、需 氧 杆 状 细 菌 ,属 于 GRAS级 益生 菌 [1-2],其在 自然界 分 布 广 泛 ,研 究 人员 已从 土 壤 _3]、海洋 、植 物 体 表 [5]、动 物
食 品 与 发 酵 科 技
Food and Fermentation Sciences& Technology

产枯草芽孢杆菌实训报告

产枯草芽孢杆菌实训报告
➢ 3、无菌室:用超净工作台及净化室代替无菌室, 以提高无菌程度。
一、种子的制备
➢ 种子的制备
➢ 培养基
➢ 牛肉膏 0.5g 蛋白胨 1g 氯化钠 0.5g

馏水
➢ 将配置好的培养基放入250ml的三角瓶中装液 量为100ml,数量11个 。装液后进行高温灭菌。
➢ 一级种子的制备
➢ 选取长势良好的菌种,挑取菌落2~3环接种 导液体摇瓶中。
行升温,当温度达到120摄氏度、压强时,保持温度和 压力20min。 ➢ 灭菌后,关闭蒸汽进气阀,开大放气阀,当压强下降 到时开启通气阀。使罐内压力保持在左右。 ➢ 开启冷水阀门,对发酵罐进行降温。
五、接种
➢ 当罐温降到37摄氏度后,关闭冷水。用酒精将 接种口处仔细擦洗,并放上接种火圈。
➢ 减少进气,使罐压保持在,点燃接种火圈。 ➢ 拧下进料口螺盖,放入酒精中,以免染菌。 ➢ 按接种瓶的瓶口在火焰上灼烧一下,并在火焰
罐体经行升温,当温度达到120摄氏度、压强 时,保持温度和压力20min。 ➢ 灭菌后,关闭蒸汽进气阀,开大放气阀,进行 泄压。
四、实罐灭菌
➢ 泄压后,从进料口开始添加培养基,并开始搅拌(转 速130r/min)
➢ 进料完毕后开始调节PH值 ➢ 调好PH后,对罐体进行夹套预热85摄氏度以上。 ➢ 温度到达后,关闭夹套进气开关。通热蒸汽对罐体经
➢ 取上述溶液1ml,加入DNS试剂于沸水浴中加热2min进行显色,取出后 用水迅速冷却 ,加去9ml蒸馏水,摇匀,在540nm波长处测定吸光值。
➢ 2)空白液的处理: ➢ 发酵液离心处理:8000rpm,5min ➢ 1ml离心后的发酵液+5ml 1%淀粉溶液直接加热煮沸5min,取1ml,加入
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本科学生综合性实验报告
学号
学院专业、班级
实验课程名称枯草芽孢杆菌的液体发酵及其产物中糖
化酶的活性测定
教师及职称
开课学期2013 至2014学年下学期
师大学教务处编印
一.实验设计方案
装置示意图:
1. 实验设备及材料
设备:
小型发酵罐的构造 小型发酵罐是实验室进行小规模试验研究的必备装置,如上图所示为小型发酵罐、主要由罐体、通气系统、搅拌系统、加热及控温系统、监测及控制系统等几个部分组成。

蒸汽管空气灭
菌 装料 通入蒸
汽对
物料

热 排空冷空气
冷却、接种 通风比和
控制参数
按要求进
行培养。

镜检

气附属设备

汽 蒸汽 蒸汽
蒸气附属设备 下游处理。

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