新人教版高中生物选修3《基因工程》专题复习PPT课件

3、导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、 单细胞、遗传物质少
②方法： 用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细 胞吸收DNA分子
四、目的基因的检测与鉴定 ①导入检测：目的基因是否导入受体细胞 方法—— DNA分子杂交 分 检测 转录检测——分子杂交 子 检 ②表达检测 测 翻译检测——抗原抗体杂 法 交 抗虫鉴定 鉴定 抗病鉴定 个体水平的鉴定
2.利用PCR扩增目的基因
① 概念：PCR全称为聚合酶链式反应 _______________，是一项 体外复制特定 DNA片段 的核酸合成技术 在生物____ ___________ DNA双链复制 ②原理：__________ 四种脱氧核苷酸 模板 DNA ③条件：___________、_______________、 DNA引物 热稳定DNA聚合酶 . ___________ 、 ___________
7.天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原 料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者 从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得 的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列 问题： 限制酶 ⑴将淀粉酶基因切割下来所用的工具是____________ ， DNA连接酶 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子， 用___________ 导入酵母菌 ，以完成工程菌的构建。 下一步将该DNA分子___________ ⑵若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检 DNA分子杂交 ；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成 测方法是____________ 淀粉酶，可采用___________________ 检测。 抗原一抗体杂交
a、使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给子代 b、同时使目的基因能表达和发挥作用
思考：作为基因工程表达载体，只需含有目的基因
就可以完成任务吗？
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3.基因表达载体的组成：
a、目的基因
b、启动子 c、终止子 位于基因的首端,是 mRNA结合位点 位于基因的末端,终 止转录
d、标记基因 检测目的基因是否导入受体细胞
它们有什么作用？
三、将目的基因导入受体细胞
• 常用的受体细胞： 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、 酵母菌和动植物细胞等。 • 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。
1、将目的基因导入植物细胞
①农杆菌转化法 ②基因枪法 ③花粉管通道法
2、将目的基因导入动物细胞
显微注射技术：将基因表达载体提纯，用显微仪 注射到受精卵中
1、从基因文库中获取目的基因
（1）基因文库
将含有某种生物不同基因的许多DNA片断， 导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有 这种生物的不同基因，称为基因文库.
基因文库
基因组文库 部分基因文库 （如:cDNA文库）
⑵基因文库的构建方法
①直接分离法
②反转录法：
(鸟枪法) 基因组DNA文库的构建
cDNA文库的构建
3．多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的 技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模 板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合） →72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列 有关PCR过程的叙述中不正确的是（ C ） A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也 可利用解旋酶实现 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配 对原则完成 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
4. 在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核 苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460 个），放入DNA扩增 仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷 酸的个数是 C A．540 个 B．7560个 C．8100 个 D．17280 个
6.2003年在中国大地上最惨烈的事件就是“非典”侵袭、 肆虐着人体的健康，夺取了许多人宝贵的生命。医院人 满为患，“非典”与“发热”、“疑似”混杂在一起，让医 难以区分。我国科学工作者日夜奋战，利用基因工程迅 速研制出“非典”诊断盒。其作用机理是 ） B（ A．治疗“非典”利用的是抗原—抗体反应 B．诊断“非典”利用的是DNA分子杂交原理 C．诊断“非典”利用的是抗原—抗体反应 D．治疗“非典”利用的是DNA分子杂交原理
活性鉴定等
1．下列有关基因工程技术的正确叙述是（ C ） A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体 B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 2.科学家运用基因工程技术将人胰岛素基因与大肠杆菌的 质粒DNA分子重组，并且在大肠杆菌体内获得成功表达。 图示a处为胰岛素基因与大肠杆菌质粒DNA结合的位置，它 们彼此能结合的依据是 （ D ） A．基因自由组合定律 B．半保留复制原则 C．基因分离定律 D． 碱基互补配对原则
基因工程专题复习
基因工程的基本操作程序
基因工程的基本操作程序主要包括 四个基本步骤： 1）目的基因的获取 2）基因表达载体的构建 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测与鉴定
一、目的基因的获取
编码蛋白质的结构基因 (一)目的基因主要是______________________ （二）获取目的基因的常用方法有哪些? 1、从基因文库中获取 2、利用PCR技术扩增 3、人工合成
3.人工合成
——根据已知的氨基酸序列合成DNA
蛋白质的氨基酸序列 推测 mRNA的核苷酸序列 推测 结构基因的核苷酸序列 化学合成 目的基因
二、基因表达载体的构建——核心
1.过程
一个切口 两个黏性末端 两个切口 获得目的基因
质粒
同一种
目的基因 限制酶处理
表 DNA连接酶 达 载 体
2、基因表达载体的作用
④过程 a、DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板 氢键 断裂，形成___________ 单链DNA 在热作用下，_____ b、退火（复性55℃-60℃）：系统温度降低，引 双链 物与DNA模板结合，形成局部________ 。 c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下， DNA链 。 合成与模板互补的________