减毒活疫苗
减毒活疫苗的制备方法和原理
减毒活疫苗的制备方法和原理
减毒活疫苗是指通过对病原体进行一定的处理，使其失去致病
性但仍能引起免疫反应的疫苗。
其制备方法和原理如下：
制备方法：
1. 传统方法，通过多次在非自然宿主中传代培养，逐渐减弱病
原体的致病性，使其成为减毒株。
2. 离心法，利用离心技术分离病毒，将致病性成分去除，得到
减毒病毒。
3. 分子生物学方法，利用基因工程技术对病原体进行基因改造，使其失去致病性。
原理：
减毒活疫苗的制备原理主要包括以下几点：
1. 丧失致病性，通过培养、离心或基因改造等方法，使病原体
丧失致病性，但仍具有免疫原性。
2. 保留免疫原性，在减毒过程中，需要确保病原体的免疫原性成分不受到破坏，以保证疫苗的免疫效果。
3. 免疫原性验证，在制备过程中需要对减毒疫苗进行免疫原性验证，确保其能够引起免疫反应，产生保护性免疫。
总之，减毒活疫苗的制备方法包括传统方法、离心法和分子生物学方法，其制备原理主要是通过使病原体丧失致病性但保留免疫原性来获得能够引起免疫反应的疫苗。
这些方法和原理的应用为疫苗研发提供了多样化的选择，有助于提高疫苗的安全性和有效性。
疫苗接种原则
疫苗接种原则————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：2种灭活疫苗、1种灭活疫苗与1种减毒活疫苗或1种注射的减毒活疫苗与1种口服减毒活疫苗在同时接种时，一般不会产生免疫干扰或增加不良反应发生率，可以同时或任何时间在不同部位进行接种。
2种不同的减毒活疫苗可同时在不同部位接种，如未同时接种，则应间隔4周以上。
免疫球蛋白一般不能和减毒活疫苗同时接种，使用免疫球蛋需隔4周才能接种减毒活疫苗，接种减毒活疫苗2周后才能使用免疫球蛋白。
黄热、冻干甲肝：减毒活疫苗乙肝：重组疫苗流脑：多糖疫苗麻风腮：减毒活疫苗（一）减毒活疫苗目前我国使用的减毒活疫苗包括卡介苗、脊灰疫苗、麻疹疫苗、流行性腮腺炎减毒活疫苗（以下称腮腺炎疫苗）、风疹减毒活疫苗（以下称风疹疫苗）、水痘减毒活疫苗（以下称水痘疫苗）等。
（二）灭活疫苗目前我国使用的灭活疫苗有百白破疫苗、流行性感冒疫苗（以下称流感疫苗）、狂犬病疫苗和甲肝灭活疫苗等。
（三）多糖疫苗目前我国使用的多糖疫苗有A群流脑多糖疫苗、A+C 群流行性脑脊髓膜炎多糖疫苗、肺炎双球菌多糖疫苗（以下称肺炎疫苗）、伤寒Vi多糖疫苗等；使用的结合疫苗有b型流感嗜血杆菌（以下称Hib）疫苗等。
多糖疫苗中不含内毒素中的类脂A，故无毒性。
然而多糖疫苗为化学成份，无细菌在体内繁殖，亦需大量多次接种。
根据细菌的研究与分析，对细菌中引起特异性保护作用的抗原成份提取纯化，可以生产特异的抗原疫苗。
例如脑膜炎双球菌、流感杆菌中的多糖成份为可引起保护性抗体的部分，可提取后制成多糖疫苗。
多糖疫苗的免疫原性需通过加入适当的吸附剂来提高。
（四）重组疫苗如乙肝疫苗。
疫苗类型说明疫苗接种部位接种途径接种剂量/剂次疫苗预防的疾病接种禁忌乙肝疫苗上臂外侧三角肌中部（新生儿首针可选择大腿前部外侧）肌内注射5μg1/0.5ml乙型肝炎肝炎，发热，急性感染，慢性严重疾病，过敏体质的宝宝禁用。
黄热减毒活疫苗的介绍
2. 培养基的选择对细胞的生 长速度、形态和功能都有重 要影响，需要根据实验目的 进行选择。
3. 在选择培养基时，还需要 考虑其稳定性和安全性，避 免对细胞和实验结果产生不 良影响。
2. 病毒繁殖与收获
1. 病毒繁殖是生物医学研 究中的重要环节，通常在细 胞培养系统中进行，通过合 适的细胞系和环境条件，使 病毒得以大量复制。
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3. 接种黄热减毒活疫 苗后，可能会出现轻微 的发热、头痛等不适症 状，这是正常反应，无 需过度担忧。
3. 疫苗储存与运输
1. 疫苗储存需要在2-8℃的低温环境中进行，避免阳光直射和高 温环境。
2. 运输过程中，疫苗需要被妥善包装以防止破损，同时要避免 剧烈震动和温度波动。
3. 疫苗的储存和运输都需要有专门的冷链设备和专业的人员进 行监控和管理。
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2. 除了黄热病毒外，黄热减毒活疫苗还可能包含一些辅助成分，如稳定 剂、保护剂和填充物等，以增强疫苗的稳定性和有效性。
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3. 黄热减毒活疫苗的主要成分是经过严格筛选和检测的，以确保其安全性 和有效性。
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二、黄热减毒活疫苗 的制备过程
1. 培养基选择
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1. 在培养基选择时，需要考 虑细胞的特性和需求，选择 合适的营养源和生长因子。
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2. 在20世纪中叶，黄热减 毒活疫苗的制备技术得到了 显著改进，使得疫苗的安全 性和有效性得到了提高。
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3. 近年来，随着科技的发展 ，黄热减毒活疫苗的生产工 艺不断优化，使得疫苗的产 量和质量都得到了提升。
3. 主要成分
1. 黄热减毒活疫苗的主要成分是经过弱化处理的黄热病毒，这种Hale Waihona Puke 毒在体 内不能复制，但能引发免疫反应。
减毒活疫苗医学PPT课件
2. 减毒活疫苗的特点
• 能引发机体感染、但不发生临床症状 • 其免疫原性足以能刺激机体的免疫系统、
产生针对该病原体的免疫反应 • 在以后暴露于该病原体时，能保护机体不
患病或减轻临床过程。
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二、减毒活疫苗的使用和研究现状
1. 使用现状
– 有的已完成历史任务而退役
• 牛痘苗
– 有的已经并正在继续发挥其良好的防病作用
祖。
DNA需达标;
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2. 良好的免疫原性
• 能促使机体产生：
– 高效价的保护性抗体 – 黏膜免疫 – 细胞介导免疫 – 并具有良好的免疫持久性
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3. 遗传稳定性
弱毒株的来源？
– 天然弱毒 – 采用物理、化学和生物学方法将毒力较强的菌毒株
诱变为弱毒株
• 只有选择突变遗传性能稳定的菌毒株，才能最 大限度地防止其的单层细胞、接种病毒后
• 蚀斑法挑选（产生细导现胞致象细。病胞变的效萎缩应、的脱病落等毒病）变的
• 同一病毒：
– 蚀斑较大的：毒力相对强 – 蚀斑小的：毒力较弱
• 其减毒性在人体中必须是稳定的
• 减毒与免疫原性之间的平衡
– 减毒适度：保证人体使用安全 – 良好免疫原性：足以诱生特异性免疫应答
残余毒力 指数过高
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五、减毒活疫苗研究面临的问题
2.安全性和免疫原性之间的协调——难题 霍乱减毒活疫苗： • 基因缺失株CVD112：
– 保护率：84% – 6名志愿者中：引起3人轻度腹泻
• CVD-103 HgR株：
– 对不同人群诱导 抗体应答悬殊 – 免疫原性不恒定
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五、减毒活疫苗研究面临的问题
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3. 细菌性减毒活疫苗制备技术要求
育儿知识：减毒活疫苗和灭活疫苗
减毒活疫苗和灭活疫苗我们每一个人从出生后就会接种疫苗，疫苗分很多种。
但都是对我们身体有益的，是防止疾病或传染病的。
现下接种疫苗已是国家规定的，新生儿从出生开始，每一个阶段都会到规定地点接种疫苗。
那么减毒活疫苗和灭活疫苗有何区别呢？减毒活疫苗和灭活疫苗的区别灭活疫苗是将病原微生物（包括细菌、病毒和立克次体等）及其代谢产物用物理或化学的方法使其灭活，丧失毒力，但仍保留其免疫原性而制成的疫苗，如百日咳疫苗、流脑疫苗等。
这种疫苗由于病原微生物已被杀，进入人体后不能生长繁殖，因此需要注射剂量大，注射次数多。
一般注射一针后产生免疫力不高，需要注射2～3次或加强注射，才能产生较为满意的免疫力。
但是，灭活疫苗的稳定性好，容易保存。
减毒活疫苗是将病原微生物（细菌和病毒）在人工条件下使其丧失致病性，但仍保留其繁衍能力和免疫原性，以此制成减毒活疫苗。
将减毒品活疫苗接种于人体后，使人体产生一次亚临床感染，类似一次轻型的人工自然感染过程，从而引起与疾病类似的免疫反应，但不会发病，却可获得抵御各种疾病的免疫力。
它在体内的作用时间长，往往只需要接种一次，即可产生稳固的免疫力，这类疫苗有脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗等。
宝宝打疫苗后要注意什么要适当休息；不要吃辛辣的食物；不要洗澡；要多喝水；出现轻微不良反映不要慌。
有些宝宝在打完疫苗后会出现恶心，呕吐，头晕等轻微的不良反映，如果不重，可以先观察看看，千万不要着急，如果症状比较严重，应该到医院让医生诊断。
以上小编详细的给大家介绍了减毒活疫苗和灭活疫苗的区别，同时还给大家分享了宝宝在打完疫苗后的注意事项，相信大家都会有了了解。
每一个新生儿出生，在医院就会完成第一次疫苗接种。
现在国家已经免掉接种疫苗的费用，希望每一个家长积极按规定时间给宝宝注射疫苗。
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人类疫苗发展史
人类疫苗发展史
人类疫苗的发展史可以分为三个阶段：减毒活疫苗、灭活疫苗和基因重组疫苗。
1.减毒活疫苗：这一阶段的主要代表是巴斯德在19世纪末20世纪初的研究
成果。
他发现，通过连续几代培养鸡霍乱弧菌，其毒力会降低，将这种减
毒菌接种到鸡身上后，鸡不但不致病，还获得了对霍乱弧菌的免疫力。
基
于这一原理，巴斯德制备了炭疽杆菌减毒疫苗和狂犬病疫苗，这两者都是
减毒活疫苗的代表。
2.灭活疫苗：德国科学家Kolle在1896年发明了灭活疫苗，他在琼脂培养霍
乱弧菌后再将其加热杀死，经过多次改进制成了灭活疫苗。
这种疫苗在制
备过程中，通过加热或其他化学方法将病原体灭活，从而减少其致病性。
3.基因重组疫苗：20世纪80年代，借助于分子生物学、生物化学、免疫学等
的发展，疫苗的研究已经从完整的病原体、细菌体水平转移到分子水平。
以基因重组技术和蛋白质化学技术为基础开创了疫苗研制的第2次革命，
以酵母制备的乙肝疫苗的问世标志着第2次疫苗革命的到来。
总的来说，人类疫苗发展史是一个不断探索和创新的过程，经历了从减毒活疫苗到灭活疫苗再到基因重组疫苗的阶段。
随着科技的不断进步，未来可能会有更多新型疫苗问世，为人类健康提供更好的保障。
主动免疫和被动免疫
主动免疫和被动免疫主动免疫主动免疫是免疫系统受抗原刺激产生的特异性体液免疫（抗体）和细胞免疫，是由机体自身免疫系统产生的保护力。
1、减毒活疫苗减毒活疫苗来源于“野生”的细菌和病毒，这些细菌或病毒的致病力通常在实验室通过传代培养而被削弱。
目前应用的减毒活疫苗包括卡介苗、口服脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗、乙脑活疫苗、水痘疫苗等。
减毒活疫苗通常能够刺激机体产生持久的免疫力，但是没有自然感染产生的免疫持续时间长。
2、灭活疫苗（1）全细菌和全病毒灭活疫苗全细菌和全病毒灭活疫苗是细菌、病毒或立克次体等病原体的培养物，经化学或物理方法灭活后制成，已丧失致病力，但仍保留其免疫原性，如乙脑灭活疫苗、甲肝灭活疫苗、百日咳菌苗、流感全病毒灭活疫苗等。
（2）组分疫苗包括蛋白质疫苗和多糖疫苗。
蛋白质疫苗包括类毒素和亚单位疫苗。
类毒素是细菌在液体培养条件下，产生外毒素，经脱毒提纯等工艺制成，这类可溶性抗原通常需要加入佐剂（如氢氧化铝）才能产生良好的免疫原性，如破伤风类毒素、白喉类毒素等。
（3）多糖疫苗包括纯化疫苗和结合疫苗。
纯化疫苗由来自细菌的纯化了的细胞壁多聚糖组成，如流脑多糖疫苗、肺炎球菌多糖疫苗；结合疫苗是将多聚糖用化学方法与蛋白质连接而得到的疫苗，这种连接使多糖成为更有效的疫苗，如b型流感嗜血杆菌结合疫苗。
3、重组疫苗疫苗抗原也可以通过基因工程生产。
这些制品有时被称作重组疫苗。
乙肝疫苗是通过将乙肝病毒的基因片断插入到酵母细胞的基因里而生产出来的。
改良的酵母细胞在它生长时表达出纯的乙肝表面抗原。
活伤寒疫苗（Ty21a）是通过基因改良使沙门氏伤寒细菌不再致病。
通过基因工程生产的减毒流感活疫苗在鼻咽部黏膜有效繁殖，在肺组织中不繁殖。
被动免疫被动免疫是将抗体从人或者动物输入到其他人或动物获得。
被动免疫可在短时间内为免疫对象提供足够数量的抗体以得到针对一些感染的保护，但是这种保护持续时间很短，常在数周或者数月内逐渐消失。
人用疫苗的分类及生产工艺
人用疫苗的分类及生产工艺人类使用的疫苗可根据不同的分类和生产工艺进行划分。
疫苗是一种预防传染病的生物制品，它可以激活人体的免疫系统，并产生对特定病原体的免疫反应，从而保护人体免受感染。
根据疫苗的分类，疫苗可以分为以下几类：1. 灭活疫苗：灭活疫苗是通过将病原体杀死或失去活性后制成的疫苗。
这种疫苗的主要优点是安全性较高，因为病原体已经失去了致病能力。
常见的灭活疫苗有百白破疫苗、流感疫苗和脊髓灰质炎疫苗等。
2. 减毒活疫苗：减毒活疫苗是通过将病原体的病原性减弱而制成的疫苗。
这种疫苗在人体内能够复制，但由于已经减弱了病原性，所以不会引起严重的疾病。
减毒活疫苗的典型代表是麻疹疫苗、腮腺炎疫苗和风疹疫苗等。
3. 亡活疫苗：亡活疫苗是由病原体的成分制成的疫苗，但病原体已经失去了活性。
这种疫苗可以引起免疫反应，但不会引起疾病。
破伤风疫苗和白喉疫苗是常见的亡活疫苗。
4. 重组亚单位疫苗：重组亚单位疫苗是通过将病原体的部分成分制成的疫苗。
这种疫苗可以激活人体的免疫系统，产生对特定病原体的免疫反应。
乙型肝炎疫苗和人乳头瘤病毒疫苗就属于重组亚单位疫苗。
疫苗的生产工艺也是疫苗分类的一种方式，主要包括以下几种：1. 培养疫苗：培养疫苗是通过将病原体培养在细胞培养基中，让其繁殖增多后收集制成疫苗。
培养疫苗的生产工艺包括病毒培养、细菌培养和真菌培养等。
这种工艺可以大规模生产疫苗，但需要严格控制培养条件，以防止病原体变异或杂质污染。
2. 基因工程疫苗：基因工程疫苗是通过将病原体的基因插入宿主细胞中，让宿主细胞产生病原体的成分，从而制备疫苗。
基因工程疫苗的生产工艺包括基因克隆、转染宿主细胞和蛋白表达等步骤。
这种工艺可以精确控制疫苗的成分，避免使用活病原体，提高疫苗的安全性。
3. 提取疫苗：提取疫苗是通过提取病原体的成分制成疫苗。
这种工艺包括分离病原体、提取抗原和纯化等步骤。
提取疫苗可以避免使用活病原体，但需要对病原体的成分进行准确的提取和纯化，以保证疫苗的效力和安全性。
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脊髓灰质炎疫苗
• 本品系用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 型脊髓灰质炎病毒减 毒株，分别接种于猴 肾细胞或人二倍体细 胞培养制成的单价或 三价液体疫苗。
制备过程：
• 取国家批准的脊髓灰质炎病毒，传递代数在规定 的范围内并检定合格，作为生产毒种。用健康 猴肾细胞，也可用人二倍体细胞，接种适量的病 毒，严格在33℃±0.5℃培养，出现完全病变的时 间应在40～ 96小时内，收获病毒液，用膜孔 0.2μm的膜滤过，浓缩，合并，加入氯化镁，每 批疫苗成品均需经猴体神经毒力试验合格后分装 制成。
水痘的危害
由带状疱疹病毒引起 的急性病毒性传染病， 对儿童健康带来严重 威胁，如水痘性脑炎 的死亡率达25.5％， 而我国目前尚无有效 的防治手段。
注意事项
1、水痘减毒疫苗仅用于皮下注射。切不 可与其他疫苗在同一注射器中混合。 2、水痘减毒疫苗可与其他灭活疫苗同时 使用。如麻疹疫苗不可与“威可檬”同时 接种。由于已证实麻疹疫苗可导致细胞介 导免疫反应的短期活动性抑制，建议至少 间隔1个月。.
产品性状及其鉴别方法：
• 【性状】本品为淡黄色疏松体，溶解后为橘红 色澄明液体。
• 【鉴别】加入适量灭菌注射用水溶解后，与已 知乙型脑炎免疫血清进行 病变法或蚀斑法中 和试验，确证其为乙型脑炎病毒。
水痘减毒活疫苗
• 水痘减毒活疫苗是将水痘病毒OKA株在 MRC5二倍体细胞培养繁殖而获得的病毒冻 干制品。每剂疫苗含有不少于103.3蚀斑形 成单位（PFU）的水痘-带状疱疹病毒。 “威可檬”是减毒水痘一带状疤疹活病毒 Oka株在MRC5人二倍体细胞上培养繁殖而 获得的病毒冻干制品
作用原理：
• 狂犬病毒只有一种血清型，世界各地的狂犬病毒 抗原性质是相同的。接种狂犬疫苗后，人体血液 中可出现抗狂犬病毒抗体，这些抗体可防止病毒 在细胞间直接传播，减少病毒的增殖量，同时还 能清除游离的狂犬病毒，阻止病毒的繁殖和扩散， 从而达到预防狂犬病。
PFU
• PFU微型生物群落监测方法.是应用泡沫塑 料块作为人工基质收集水体中的微型生物 群落，测定该群落结构与功能的各种参数， 以评价水质。预报工业废水和化学品对受 纳水体中微型生物群落的毒性强度，为制 定其安全浓度和最高允许浓度提出群落级 水平的基准。
制备过程
• 狂犬疫苗是一个历史悠久的疫苗，最早制 造狂犬疫苗的是法国的巴斯德。1882年它 成功地应用连续传代减弱病毒毒力的方法， 用适应毒种来制造疫苗。中国现在制造的 狂犬疫苗系用狂犬病毒固定毒接种于原代 地鼠肾细胞，培养后，收获毒液，经浓缩、 纯化、精制并加氢氧化铝佐剂，经全面检 定合格后即为预防狂犬病的疫苗。
制备流程
• 取国家批准的乙型脑炎减毒株病毒，在原 代地鼠肾细胞上增殖传代，制备毒种，传 递代数在规 定范围内并检定。另选用清洁 级地鼠，无菌取肾，剪碎，用胰蛋白酶消 化后制成细胞悬液，接种于培养瓶中37℃ 培养，待细胞长成致密单层时，弃去生长 液，充分洗涤细胞面后接种含有适量病毒 毒种的维持液， 35～36℃继续培养，至出 现明显病变时，收获病毒液，滤过，经检 验合格后合并原液，加入保护剂，无菌分 装，冻干制成。
减毒活疫苗
生物科学091 陶园
• 定义：
应用保留有免疫原性的减毒或无毒的病 原生物所制成的一种疫苗。
常见的几种活疫苗
• 麻疹减毒活疫苗、 • 甲肝减毒活疫苗、 • 水痘减毒活疫苗、 • 乙型脑炎减毒活疫苗、 • 腮腺炎减毒活疫苗、 • 脊髓灰质炎减毒活疫苗、 • 狂犬病减毒活疫苗等。
制备原理：
活疫苗的优缺点
• 优点：与灭活疫苗相比，活疫苗免疫力强、 作用时间长，接种量小；接种次数少。而 死疫苗进入人体后，不能生长繁殖，对人 体刺激时间短，产生免疫力不高，需多次 重复注射。
• 缺点：具有潜在的致病危险(有可能因发生 逆行突变而在人体内恢复毒力）。
乙型脑炎的减毒活疫苗
• 即将流行性乙型脑炎 SA-14-14-2减毒株病 毒接种于地鼠肾单层 细胞，经培养后收获 病毒液，加保护剂冻 干而制成。