几类类天然产物的提取分离方法
提取和纯化海洋中的天然产物
提取和纯化海洋中的天然产物海洋是地球上最广阔的自然资源之一，其中包含着丰富多样的生物质。
这些生物在海洋中生长，具备了独特的适应能力，因此产生了许多珍贵的有机分子。
这些天然产物具有广泛的应用领域，包括药物开发、食品工业、化妆品等。
为了利用这些天然产物，需要进行提取和纯化的过程，以获取高纯度和高质量的活性成分。
本文将介绍提取和纯化海洋中的天然产物的方法和技术。
一、提取方法在提取天然产物的过程中，需要选择适当的提取方法，以保留生物活性成分并去除无关物质。
常用的提取方法包括溶剂提取、超声波辅助提取、酶解提取等。
1. 溶剂提取法溶剂提取法是最常用的提取方法之一。
它利用溶剂的选择性溶解性质，将目标物质从固体或液体基质中分离出来。
在海洋中的天然产物提取中，醇类、酯类等有机溶剂常被使用。
这些溶剂可以通过不同的萃取工艺，如浸提、渗漏等方式，将有机物质从海洋生物中萃取出来。
2. 超声波辅助提取法超声波辅助提取法是近年来发展起来的一种新型提取技术。
它利用超声波的机械作用和声化学效应，能够加速提取物质的转移和扩散过程。
在海洋天然产物的提取中，超声波能够破坏细胞壁，促进细胞内物质的释放，提高提取效率。
3. 酶解提取法酶解提取法是利用酶的生物催化作用，将生物材料中的有用组分释放出来。
在海洋天然产物的提取中，可以使用特定的酶来降解生物材料中的蛋白质、多糖等组分，以提取目标物质。
这种方法不仅具有高效率和高选择性，还能够保持天然产物的活性。
二、纯化技术提取出的海洋天然产物中常常包含着多种复杂的化合物，需要进行纯化才能得到纯净的化合物。
纯化技术主要包括色谱法、结晶法、膜分离法等。
1. 色谱法色谱法是一种基于物质在固相和液相之间的差异性分离原理的方法。
常用的色谱技术包括薄层色谱、柱层析、高效液相色谱等。
通过控制流动相和固定相的组成和条件，可以实现对海洋天然产物的分离和纯化。
2. 结晶法结晶法是通过溶剂的蒸发或降温，使溶解物质逐渐结晶出来。
分析天然产物的分离与鉴定方法
分析天然产物的分离与鉴定方法天然产物是指从动植物中提取的具有药用、保健或化妆品等用途的化合物。
由于天然产物的复杂性和多样性，分离和鉴定方法对于研究和应用具有重要意义。
本文将从分离和鉴定两个方面进行探讨。
一、分离方法1. 薄层色谱法（TLC）TLC是一种简单、快速且经济的分离方法，常用于初步筛选和纯化天然产物。
通过将待测样品溶解在合适的溶剂中，然后在薄层硅胶或薄层聚脂酰胺基质上涂布样品，再将其置于合适的溶剂系统中进行展开。
展开过程中，不同组分会在硅胶上以不同速度移动，从而实现分离。
之后，可以使用紫外灯或化学试剂对分离的斑点进行检测和定性分析。
2. 柱层析法柱层析法是一种常用的分离方法，根据化合物在固定相和流动相之间的相互作用力差异实现分离。
常见的柱层析方法包括正相层析和反相层析。
正相层析使用极性较大的固定相，适用于分离极性化合物；反相层析则使用非极性固定相，适用于分离非极性化合物。
柱层析法可以通过调整流动相的组成、流速和温度等参数来实现分离和纯化。
3. 液液萃取法液液萃取法是一种将目标化合物从混合物中转移到溶剂中的方法。
通常使用有机溶剂作为萃取剂，将其与待测样品混合，通过摇床或离心机等设备进行充分混合，然后分离出有机相。
有机相中含有目标化合物，可以通过蒸发或浓缩等方法进行纯化。
二、鉴定方法1. 紫外-可见光谱法（UV-Vis）紫外-可见光谱法是一种常用的分析方法，可用于确定天然产物的吸收峰和吸收强度，从而推测其结构和功能。
通过将样品溶解在适当的溶剂中，然后使用紫外-可见光谱仪测量样品在一定波长范围内的吸收情况。
根据吸收峰的位置和形状，可以初步判断天然产物的结构特征。
2. 质谱法（MS）质谱法是一种高灵敏度的分析方法，可用于确定天然产物的分子量和分子结构。
通过将样品转化为气态或溶液态，然后使用质谱仪对样品进行离子化和分析。
质谱仪可以根据离子的质荷比和相对丰度，推测化合物的分子式和结构。
3. 核磁共振波谱法（NMR）核磁共振波谱法是一种常用的分析方法，可用于确定天然产物的结构和功能。
提取和纯化海洋中的天然产物
提取和纯化海洋中的天然产物海洋中蕴藏着丰富的天然产物资源，包括各种有益的化合物和生物活性分子。
提取和纯化这些海洋天然产物对于深入研究其性质、开发应用具有重要意义。
本文将介绍提取和纯化海洋中的天然产物的方法与技术，并探讨其在不同领域的应用。
一、提取方法提取海洋中的天然产物是研究其性质的关键步骤。
常用的提取方法包括溶剂提取、超声波提取和微波辅助提取等。
溶剂提取是一种常用的海洋产物提取方法。
该方法利用溶剂的溶解性质，将待提取物质从海洋样品中转移到溶剂中，然后通过蒸发或其他方法将溶剂去除，得到纯净的提取产物。
超声波提取是利用超声波的机械振动作用促进提取过程的一种方法。
超声波的高频振动能够提高提取效率，加速活性成分的释放和溶剂的渗透，从而提高提取产物的纯度和得率。
微波辅助提取是应用微波加热原理进行提取的方法。
微波通过分子的振动和摩擦发热，从而使溶剂迅速沸腾并穿透样品，从而实现快速提取的目的。
二、纯化方法提取获得天然产物后，为了更好地研究和应用，需要对其进行纯化。
常用的纯化方法包括色谱技术、结晶技术和萃取技术等。
色谱技术是一种常用的天然产物纯化方法。
其中包括柱色谱、薄层色谱和高效液相色谱等。
色谱技术通过溶液在不同材料上的吸附与解吸作用来分离和纯化目标化合物，具有高效、灵敏度高的特点。
结晶技术是利用物质在饱和溶液中的溶解度随温度、浓度的变化而发生结晶的现象进行纯化的方法。
通过调整溶剂的温度和浓度等条件，使目标化合物结晶出来，得到纯净的产物。
萃取技术是一种通过溶剂选择性地提取物质的方法。
常用的萃取方法有固相萃取、液液萃取等。
这些方法通过溶剂与目标化合物之间的亲和性来实现分离和纯化。
三、应用领域提取和纯化海洋中的天然产物在多个领域具有广泛的应用。
以下列举几个主要的应用领域：1. 药物研发：海洋中的天然产物具有丰富的生物活性物质，可作为开发新药物的重要来源。
通过提取和纯化海洋中的天然产物，研究其抗菌、抗肿瘤、抗炎等活性，为药物的研发提供了重要的基础。
化学中的天然产物提取技术
化学中的天然产物提取技术自然界中存在着大量的天然产物，这些产物往往被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域中。
然而，天然产物的提取并不是一件容易的事情，需要运用到化学中的各种技术才能达到良好的提取效果。
本文将介绍化学中的天然产物提取技术，并探讨其在实践中的应用。
一、溶剂提取法溶剂提取法是一种常见的提取技术。
该技术运用了物质的相溶性差异，将天然产物从原材料中提取出来。
在溶剂提取法中，先将天然产物与一定量的溶剂混合，待产物与溶剂达到一定平衡后，再将二者分离。
通过重复这一步骤，最终可以得到较纯的天然产物。
溶剂提取法可以用于提取植物中的活性成分、动物中的脂肪、花中的芳香物质等。
例如，提取茶叶中的茶多酚时，可以用70%的乙醇作为溶剂，将茶叶浸泡数小时后，再进行过滤。
通过这样的操作，可以得到纯净的茶多酚。
二、蒸馏法蒸馏法是一种将产物从原料中提取出来的常见技术。
蒸馏法运用了物质沸点不同的原理。
将原料混合物加热并将其蒸发，蒸发的产物汽化后在冷凝器中凝结并收集。
收集后的产物常常比原混合物中的产品更为纯净。
蒸馏法可以用于提取许多天然产物，包括水、酒精、醋酸、乙醚、植物精油等。
例如，将薄荷叶放入蒸馏器中加热，将会得到纯净的薄荷精油。
三、固相萃取法固相萃取法是一种提取天然产物的分离技术。
该技术常被用于处理大量的样品，例如环境样品、食品样品等。
固相萃取法可以将产物从样品中分离出来，获得较为纯净的提取物质。
固相萃取法需要用到特定的固定相材料，这些材料可以和特定的溶剂相互作用，使得目标成分与其他成分的相互作用力不同，从而可以实现分离。
使用固相萃取法进行提取时，产物先和固定相材料接触一段时间，待产物经过分配吸附在固定相上后，再用溶剂洗涤固定相材料，洗涤液中的产物即为所需提取物。
固相萃取法可以用于提取茶叶、花卉等天然产物。
例如，可以用固相萃取法提取茶叶中的儿茶素，利用特定的固相材料与乙醇相互作用，可以得到高纯度的儿茶素。
四、超临界流体萃取法超临界流体萃取法是一种新兴的提取技术，它采用特殊的溶剂，用高压和高温的条件将该溶剂处理为一种既具有液体的流动性又具有气体的扩散性的物质，从而可以利用它快速提取目标物质。
第三章天然产物的提取分离方法
超临界流体萃取法
1. 任何一种物质都存在三种相态-气相、液相、固相。当温度和压 力达到一定值时，物质就会出现超临界状态,即气态与液态共存 的一种边缘状态。在此状态中，液体的密度与其饱和蒸汽的密度 相同，因此界面消失。
2. 液、气两相成平衡状态的点叫临界点。临界温度Tc临界压力Pc。 不同的物质其临界点所要求的压力和温度各不相同。
游离型/分子态 B
HA 脂溶性
H+ OH-
OH-
H+
解离型/离子态 BH+
A水溶性
溶解度差异
（3）.调节PH
A．酸/碱法（酸提取碱沉淀法）： 生物碱的提取、纯化
B．碱/酸法（碱提取酸沉淀法）： 黄酮、蒽醌等酚性成分的提取、纯化
C. 调节PH至等电点，沉淀蛋白
超临界流体萃取法
应用
SFE对非极性和中等极性成分的萃取，可克服传统的萃取方法 中因回收溶剂而致样品损失和对环境的污染，尤其适用于对温热不 稳定的挥发性化合物提取；对于极性偏大的化合物，可采用加入极
性的夹带剂如乙醇、甲醇等，改变其萃取范围提高抽提率。
泌指的沉香树
第一节 天然产物有效成分的提取
水蒸汽蒸馏法：挥发性 超临界流体萃取法: 升华法：升华性 压榨法: 溶剂提取法：最常用
水蒸汽蒸馏法
水蒸气蒸馏法是将水蒸气通入不溶或难溶 于水但有一定挥发性的有机物质中，使该有机 物在低于100℃ 的温度下，随着水蒸气一起蒸 馏出来。
超临界流体萃取法
。
二氧化碳超临界流体的P－T性质
超临界流体萃取法 CO2技术特点
无毒、常温、不易燃、无污染等特点， 可确保原有的色、香、味不因受热破坏； 萃取过程中可同时对萃取物进行分离纯化。 该技术适宜于萃取高价值的油脂（包括天然功能性 油脂）、精油、内酯等极性较低的天然产物有效成 分。
几类类天然产物的提取分离方法
几类类天然产物的提取分离方法本人总结了一些分离方法，以抛砖引玉！总述1)提取前文献查阅综述和药材生药鉴定2)提取方法①粉碎成粗粉②有机溶剂法和水提法③水蒸气蒸馏法④升华法3)分离纯化法①根据物质溶解度的不同进行分离a.温度不同,溶解度不同b.改变溶液的极性去杂c.酸碱法d.沉淀法②根据物质分配比不同极性分离a.液-液萃取法b.反流分布法c.液滴逆流层析法d.高速逆流层析法e.GC法f.LC法:LC分配层析载体主要有---硅胶,硅藻土,纤维素等;有正反相之分;压力有低、中、高之分;载量有分析、制备之分。
③根据物质吸附性不同极性分离a.※极性吸附剂（如SiO2,Al2O3...)极性强，吸附力大※非极性吸附剂 (如活性炭－对非极性化合物的吸附力强(洗脱时洗脱力随洗脱剂的极性降低而增大)。
b.化合物的极性大小依化合物的官能团的极性大小而定;溶剂的极性大小可按其介电常数大小排列（极性渐大 > ） :己烷苯无水乙醚 CHCl3 AcOEt 乙醇甲醇水 e 1.88 2.29 4.47 5.206.11 26.0 31.2 81.0c.氢键力吸附聚酰胺吸附层析--洗脱剂的洗脱力由小到大为:水 > 甲醇 > 丙酮 > NaOH液 > 甲酰胺 > 尿素水液④根据物质分子的大小进行分离如葡萄糖凝胶(Sephadex G and LH-20...)过泸法等⑤根据物质解离程度不同的分离法离子交换法：强酸： -SO3H强碱： -N+(CH3)3Cl-弱酸： -CO2H弱碱： -NH2(NH,N)一、糖及苷类的提取和分离1 溶剂处理法2 铅盐沉淀法3 大孔树脂处理法4 柱色谱分离法二醌类化合物的提取和分离一提取方法:一般选用甲醇或乙醇为溶剂，可同时将游离态和成苷的蒽醌类化合物从药材中提取出来，浓缩后再依次用有机溶剂提取（多用索氏提取法），可根据极性大小不同进行初步分离（如将苷和苷元分开）。
天然产物的传统提取分离方法及其原理
天然产物的传统提取分离方法及其原理一、概述天然产物是指由生物体产生的具有特定育胎亲庖、化学结构和生理活性的有机物质。
这些天然产物常常具有重要的药用、保健和化妆品等功能。
为了从天然产物中提取有效成分，人们发展了多种提取分离方法，其中包括传统提取分离方法。
本文将介绍天然产物的传统提取分离方法及其原理。
二、传统提取分离方法1. 水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法是一种古老的提取分离方法，通常用于提取植物中的挥发油。
其原理是利用水蒸气将植物中的挥发性成分带出，再通过冷凝后形成液态，最终分离得到目标物质。
这种方法简单易行，对于一些挥发性成分含量较高的植物很有效。
2. 浸提法浸提法是通过将天然产物与溶剂浸泡一定时间后，再通过过滤或蒸发得到目标成分的方法。
浸提法主要适用于提取植物中的高分子化合物、脂溶性成分和生物碱等。
3. 化学提取法化学提取法是利用化学反应将天然产物中的目标成分转化为易提取的化合物，再通过溶剂提取或结晶蒸发等方法分离得到目标成分。
这种方法通常用于提取生物碱、色素等。
4. 蒸馏法蒸馏法是通过将含有目标成分的液体加热至沸点后，将产生的蒸汽冷凝后收集得到目标成分的方法。
蒸馏法主要适用于提取易挥发的天然产物成分。
5. 萃取法萃取法是将天然产物与合适的溶剂混合，通过溶解和分配平衡来实现目标成分的分离。
这种方法适用于提取天然产物中的脂溶性成分、生物碱等。
三、传统提取分离方法的原理1. 水蒸气蒸馏法的原理水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气的温度和湿度来使植物中的挥发性成分转化为蒸气，再通过冷凝形成液态。
这种方法利用了水蒸气的特性和挥发性成分的物理性质，实现了提取分离的过程。
2. 浸提法的原理浸提法的原理是利用溶剂与植物中的目标成分发生物理或化学作用，使目标成分溶解到溶剂中，最终通过过滤或蒸发分离得到目标成分。
这种方法利用了溶剂的溶解性和植物成分的亲和性。
3. 化学提取法的原理化学提取法的原理是通过化学反应将目标成分转化为易提取的化合物，再通过溶剂提取或结晶蒸发等方法分离得到目标成分。
天然产物化学的提取分离
3. 煎煮法
操作方法 将天然物原料 粗粉加水加热煮 沸，使其成分提 取出来的方法。 特点 此法简便，原料中大部 分成分被不同程度地提出， 但含挥发性成分及有效成 分遇热易破坏的原料不宜 用此法，对含有多糖类原 料，煎煮后，溶液比较粘 稠，过滤比较困难
4. 回流提取
操作方法和特点 装置图
操作方法：用易挥发 的有机溶剂加热回流提取。
操作技术——显色
观察方法：日光、荧光、显色 通常可先在日光下观察，标出色斑并确定 其位置，然后在紫外光下观察和标记，必 要时再选择显色剂显色观察 若薄层板为硬板，采用喷雾法将显色剂直 接喷洒；软板可选用碘蒸气法、压板法 三用紫外灯
显色喷雾瓶
操作技术——计算比移值
0.2-0.8
Rf值越大，化合物的极性？
二、 水蒸气蒸馏法
适用范围
装置图
具有挥发
性，能随水蒸气蒸出而 不被破坏与水不发生反
应；难容或不溶于水
三、升华法
适用范围 某些固体物质（如水杨酸、 苯甲酸、樟脑等）受热后， 在低于其熔点的温度下， 不经过熔化就可以直接转 化为蒸汽，蒸汽遇冷又凝 结为固体称为升华 装置图
四、超临界流体萃取
原理
物质在不同温度和压力的条件下，可以以不同 的形态存在，如固体，液体，气体，超临界流体等。 在超临界流体中，不同的物质有不同的溶解度，溶 解度大的物质溶解在超临界流体中，与不溶解或者 溶解度小的物质分开。然后，通过升高温度，降低 压力或者吸附的方法，使萃取物与超临界流体分离， 而得到所需的物质。 在临界区附近，压力和温度的微小变化，会引起 流体密度的大幅度变化，从而影响其溶解能力。
吸附薄层色谱
分类
分配薄层色谱
常用的吸附剂——硅胶
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
几类类天然产物的提取分离方法本人总结了一些分离方法，以抛砖引玉！总述1)提取前文献查阅综述和药材生药鉴定2)提取方法①粉碎成粗粉②有机溶剂法和水提法③水蒸气蒸馏法④升华法3)分离纯化法①根据物质溶解度的不同进行分离a.温度不同,溶解度不同b.改变溶液的极性去杂c.酸碱法d.沉淀法②根据物质分配比不同极性分离a.液-液萃取法b.反流分布法c.液滴逆流层析法d.高速逆流层析法e.GC法f.LC法:LC分配层析载体主要有---硅胶,硅藻土,纤维素等;有正反相之分;压力有低、中、高之分;载量有分析、制备之分。
③根据物质吸附性不同极性分离a.※极性吸附剂（如SiO2,Al2O3...)极性强，吸附力大※非极性吸附剂(如活性炭－对非极性化合物的吸附力强(洗脱时洗脱力随洗脱剂的极性降低而增大)。
b.化合物的极性大小依化合物的官能团的极性大小而定;溶剂的极性大小可按其介电常数大小排列（极性渐大> ）:己烷苯无水乙醚CHCl3 AcOEt 乙醇甲醇水e 1.88 2.29 4.47 5.20 6.11 26.0 31.2 81.0 c.氢键力吸附聚酰胺吸附层析--洗脱剂的洗脱力由小到大为:水> 甲醇> 丙酮> NaOH液> 甲酰胺> 尿素水液④根据物质分子的大小进行分离如葡萄糖凝胶(Sephadex G and LH-20...)过泸法等⑤根据物质解离程度不同的分离法离子交换法：强酸：-SO3H强碱：-N+(CH3)3Cl-弱酸：-CO2H弱碱：-NH2(NH,N)一、糖及苷类的提取和分离1 溶剂处理法2 铅盐沉淀法3 大孔树脂处理法4 柱色谱分离法二醌类化合物的提取和分离一提取方法:一般选用甲醇或乙醇为溶剂，可同时将游离态和成苷的蒽醌类化合物从药材中提取出来，浓缩后再依次用有机溶剂提取（多用索氏提取法），可根据极性大小不同进行初步分离（如将苷和苷元分开）。
对于多羟基蒽醌或具有羧基的蒽醌（如大黄酸），在植物体内多以盐的形式存在，难以被有机溶剂溶出，提取前应先酸化使之游离。
二分离方法：1 蒽醌苷类和游离蒽醌衍生物的分离：用分步提取法（如前述）2 游离蒽醌衍生物的分离：可选用分步结晶法、梯度pH萃取法或层析法进行。
梯度pH萃取法是分离游离蒽醌衍生物的经典方法：1.局限性2.原理性质相似，酸性差别不大的混合物不适用3 有些蒽酮虽然存在酚羟基，但在稀碱溶液中较相应的蒽醌难溶，如大黄酚蒽酮-9，故蒽醌衍生物的苯提取液用极稀的NaOH液萃取，可除去蒽醌而使蒽酮留在苯液中。
示例色谱法在蒽醌苷元分离中的应用：一般先用经典方法（如梯度pH萃取）对其进行初步分离，再结合柱色谱法或制备性TLC法作进一步的分离，多用硅胶吸附色谱，而氧化铝一般不用，也常用聚酰胺作为柱色谱的填料。
•三、黄酮类化合物的提取与分离（一）提取黄酮甙类以及极性稍大的甙元（如羟基黄酮等），一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取。
一些多糖甙类可用沸水提取。
在提取花青素类化合物时，可加入少量酸（0.1%盐酸，应当慎用，避免发生水解）。
大多数黄酮甙元宜用用氯仿、乙醚、醋酸乙酯等中极性溶剂提取，而对多甲氧基黄酮类游离甙元，甚至可用苯等低极性溶剂进行提取。
对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：（一）溶剂萃取法利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同，选用不同溶剂进行地萃取可达到精制纯化目的。
例如植物叶子的醇浸液，可用石油醚处理，以便除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。
而某些药料水溶液则可加入多倍量浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。
有时溶剂萃取过程也可以用逆流分配法连续进行。
常用的溶剂系统有：水-醋酸乙酯，正丁醇-石油醚等。
溶剂萃取过程在除去杂质的同时，往往还可以收到分离甙和甙元或极性甙元与非极性甙元的效果。
（二）碱提取酸沉淀法黄酮甙类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再于碱水提取液中加入酸，黄酮甙类即可沉淀析出。
此法简便易行，如芦丁、橙皮甙、黄芩甙的提取都应用了这个方法。
兹以从槐米中提取芦丁为例说明该法的操作过程。
槐米（槐树Sophora japonica L. 花蕾）加约6倍量水，煮沸，在搅拌下缓缓加入石灰乳至pH8~9，在此pH条件下微沸20~30分钟，趁热油滤，残渣同上再加4倍水煎1次，乘热抽滤。
合并滤液在60~70℃下，用浓盐酸调至pH为5，搅匀，静置24小时，抽滤。
沉淀物水洗至中性，60℃干燥得芦丁粗品，于水中重结晶，70~80℃干燥得芦丁纯品。
在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。
在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。
当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，宜用石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶液进行提取，以使上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。
这也有利于黄酮类化合物的纯化处理。
（三）碳粉吸附法主要适于甙类的精制工作。
通常，在植物的甲醇粗提取物中，分次加入活性炭，搅拌，静置，直至定性检查上清液无黄酮反应时为止。
过滤，收集吸甙炭末，依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇溶液进行洗脱，各部分洗脱液进行定性检查（或用PPC鉴定）。
通过对Baptisia lecontei 中黄酮类化合物的研究证明，大部分黄酮甙类可用7%酚/水洗下。
洗脱液经减压蒸发浓缩至小体积，再用乙醚振摇除去残留的酚，余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮甙类成分。
二、分离现将较常用的方法介绍如下：（一）柱层析法分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维素粉等。
此外，也有用氧化铝、氧化镁及硅藻土等。
1. 硅胶柱层析：此法应用范围最广，主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙酰化）的黄酮及黄酮醇类。
少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其甙类等。
2. 聚酰胺柱层析：对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为理想的吸附剂。
其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。
聚酰胺柱层析可用于分离各种类型的黄酮类化合物，包括甙及甙元、查耳酮与二氢黄酮等黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：（1）甙元相同，洗脱先后顺序一般是：参糖甙>双糖甙>单糖甙>甙元（2）母核上增加羟基，洗脱速度即相应减缓3）不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是：异黄酮>二氢黄酮醇>黄酮>黄酮醇（4）分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，故查耳酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。
上述规律也适用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。
3. 葡聚糖疑胶(Sephadex gel)柱层析：对于黄酮类化合物的分离，主要用两种型号的凝胶：Sephadex-G型及Sephadex-LH-20型。
葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：分离游离黄酮时，主要靠吸附作用。
凝胶对黄酮类化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目。
但分离黄酮甙时，则分子筛的属性起主导作用。
在洗脱时，黄酮甙类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体，葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：(1) 碱性水溶液（如0.1mol/L NH4OH），含盐水溶液(0.5mol/L NaCl等)。
(2) 醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水（不同比例）、t-丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等。
(3) 其它溶剂：如含水丙酮、甲醇-氯仿等。
（二）梯度pH萃取法梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮甙元的分离。
根据黄酮类甙元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂（如乙醚）后，依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH及4%NaOH水溶液萃取，来达到分离的目的。
酸性：7，4¢-二OH > 7-或4¢-OH >（溶于）：5%NaHCO3液5%Na2CO3液一般OH > 5-OH0.2%NaOH液4%NaOH液）三）根据分子中某些特定官能团进行分离在黄酮类成分的混合物中，具有邻二酚羟基成分与无此结构的成分，可用铅盐法分离。
有邻二酚羟基的成分可被醋酸铅沉淀，不具有邻二酚羟基的成分可被碱式醋酸铅沉淀，达到分离的目的。
与黄酮类成分混存的其它杂质，如分子中有羧基（如树胶、粘液、果胶、有机酸、蛋白质、氨基酸等）或邻二酚羟基（如鞣质等）时，也可为醋酸铅沉淀达到去杂目的。
具黄酮类化合物与铅盐生成的沉淀，滤集后按常法悬在浮在乙醇中，通入H2S进行复分解，滤除硫化铅沉淀，滤液中可得到黄酮类化合物。
但初生态的PbS沉淀具有较高的吸附性，因此现多不主张用H2S脱铅，而用硫酸盐或磷酸盐，或用阳离子交换树脂脱铅。
有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。
在实际工作中，常将上述柱层析法与各种经典方法相互配合应用，以达到较好的分离效果五、萜类化合物的提取分离萜的苷亲水较强，苷元脂溶性较强。
1、溶剂提取法2、碱提取酸沉淀法3、活性炭吸附法4、大孔树脂吸附法一、挥发油的提取1、水蒸气馏法；2、油脂吸收法；3、溶剂萃取法用石油醚（30~60℃）等有机溶剂；4、二氧化碳超临界流体萃取法；5、冷压法二、挥发油成分的分离1、冷冻析晶；2、真空分馏法；3、化学方法：1）利用酸、碱性不同进行分离，2）利用官能团特性进行分离；4、层析分离法三萜皂苷元提取与分离方法：1、醇类溶剂提取后，提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯等溶剂进行分部提取，然后进一步分离；2、制备成衍生物再作分离；3、以皂苷形式存在的，水解后用氯仿等溶剂萃取，然后进行分离。
三萜皂苷提取与分离方法：用稀醇提取，提取液减压浓缩后，加适量水，必要时先用石油醚等萃取，去杂，后用正丁醇萃取，减压蒸干，通过大孔吸附树脂，水洗去糖等，后用30%~80%甲醇或乙醇梯度洗脱，洗脱液减压蒸干，得粗制总皂苷。
用重结晶、层析等方法分离纯化皂苷。
五、生物碱的提取和分离一)提取1)非极性有机溶剂提取法: 常用溶剂为氯仿,二氯甲烷,乙醚,苯等。
由于生物碱在植物体中往往与酸(咖啡酸,草酸等)生成盐,故一般在用有机溶剂提取前,先将生药粉末与少量碱水(如10%氨水或碳酸钠液或石灰水)搅匀放置(使生物碱转为游离状态)再用有机溶剂进行浸泡后用渗漉法等法进行提取。
提取的有机溶液部分用稀酸水提取多次(至基本上无生物碱反应为止)。
此后,含有生物碱的酸水部分,经过泸后用乙醚或氯仿等洗去脂溶性杂质(有些生物碱也能溶于氯仿中,故氯仿部分应进一步检查);酸水部分加10%氨水等进行碱处理后,分别用乙醚,氯仿等分别提取多次,提取液用水洗净后可进行干燥处理,并分别蒸干溶剂,可能得到不同的生物碱总碱。