第八章 实验一 寄生虫粪便检查法
寄生虫病学粪便检查(一)
虫卵
31.猪球虫卵囊
13.蛭形巨吻棘头虫 32.截形微口吸虫卵
32
卵
沉淀法
作业： 请列出各种粪检 法中查到的虫卵
直接涂片法
饱和盐 水浮卵
法
（六）作业： 按实验指导做
缺点：对比重较大的虫卵（如吸虫卵、 棘头虫卵）检出的效果很差。
（３）、饱和盐水的制备
将食盐加入正在沸腾的开水 中，边加入食盐边进行搅拌，一 直到不再溶解并生成沉淀为止 （１L水大约可溶解400g盐）。
将制备好的饱和盐水冷却后， 过滤备用。
（４）、粪检方法
Ａ、取粪样（５－１０g)置于 容器内--加少量的饱和盐水--搅 拌成糊状--再加盐水（约１０ －２０倍）搅拌均匀--过滤--静 置（３０－４０分钟）用铁丝 圈沾取粪液上浮膜--镜检。
肝片吸虫卵发育史
阔 盘 吸 虫 卵 模 式 图 血吸虫卵
双腔吸虫卵
３、绦虫卵的一般特征：
（１）、假叶目：壳厚，一端有盖，近似 于吸虫卵．
（２）、圆叶目：
近似于圆形，无卵盖，卵壳与胚层之间 是透明的胶质体，卵壳多数在排出体外前 已经脱落，因此，我们常见到的“卵壳”， 实际上是胚套。虫卵的中央有一个椭圆形 的，并且具有三对胚钩的六钩蚴。六钩蚴 的外面由一层膜包裹着，胚套与膜之间含 有液体和颗粒状的内容物。有的虫卵的内 膜带有突起，称为梨形体。
（３）、镜检时，所看的视野要有一 定顺序地移动，以免漏检视野,造成诊 断失误。
（４）、注意爱护公物，特别是显微 镜、玻璃器皿，对沾在上面盐水要及 时查去，以免损坏显微镜；各组所使 用用具和桌子要清洗干净后才能离开 实验室。
（５）、每次实验课结束后，必须留 下值日生打扫实验室的卫生。
线虫卵的一般特征
寄生虫病学粪便检查
线虫卵
21.复阴后圆线虫卵
7.猪毛首吸虫卵
线虫卵
24.姜片吸虫卵
9.成熟的圆形似蛔 25.肝片吸虫卵
线虫卵
26.长膜壳绦虫卵
10.六翼泡首线虫卵 27.小袋虫滋养体
11.新鲜的食道口线 28.小袋虫包囊
虫卵
29.猪球虫卵囊
12.已发育食道口线 30.猪球虫卵囊
A 前端 B 尾端 18.小型艾美球虫卵囊
猪体内的寄生虫卵
1.猪蛔虫卵
14.新鲜球首线虫卵
2.猪蛔虫卵表面观 15.已发育的球首线
3.蛋白质膜脱落的 虫卵
猪蛔虫卵
16.红色猪圆线虫卵
4.未受精猪蛔虫卵 17.鲍杰线虫卵
5.新鲜的刚刺颚口 18.新鲜猪肾虫卵
线虫卵
19. 已发育猪肾虫卵
6.已发育刚刺颚口 20. 野猪后圆线虫卵
肝片吸虫卵 1.20以上 姜片吸虫卵 1.20以上 华枝睾虫卵 1.20以上 复腔吸虫卵 1.20以上
硫代硫酸钠 饱和硫酸镁 饱和硝酸钠 甘油
漂浮液的比重 1000ml所加的试剂（G） 比重
380
1.17－1.19
330
1.14
85
1.05
440
1.25
1750 920 1000
1.37－1.39 1.26 1.2－1.49 1.226
家禽体内的寄生虫卵
1.鸡蛔虫卵 2.鸡异刺线虫卵 3.类圆线虫卵 4.孟氏眼线虫卵 5.旋华首线虫卵 6.四棱线虫卵 7.鹅裂口线虫卵 8.毛细线虫卵 9.鸭束首线虫卵 10.比翼线虫卵 11.卷棘口吸虫卵 12.嗜眼吸虫卵 13.前殖吸虫卵 14.次睾吸虫卵 15.背孔吸虫卵 16.毛毕吸虫卵 17.楔形变带绦虫卵 18.有轮瑞利绦虫卵 19.鸭单睾绦虫卵 20.膜壳绦虫卵 21.矛形剑带绦虫卵 22.片形皱褶绦虫卵 23.鸭多型棘头虫卵
实验一蠕虫学粪便检查法(一)
实验一蠕虫学粪便检查法（一）一、内容1.直接涂片法；2.饱和盐水漂浮法；3.各种蠕虫卵的特征。
二、参考资料蠕虫学粪便检查是蠕虫病生前诊断的重要方法。
因为大多数的寄生性蠕虫是寄生在家畜、家禽的消化道及其相连的器官（如肝脏、胰脏），有的寄生在呼吸器官和生殖器官（家禽），如后圆线虫、前殖吸虫。
寄生在这些部位的寄生虫，它们的虫卵、幼虫或节片都随着宿主的粪便排除体外，因此，通过粪便检查可以获得生前诊断。
除蠕虫以外，还有一些原生动物的寄生虫，如结肠小袋纤毛虫及球虫，它们的包囊或卵囊亦随着宿主的粪便排除体外，依靠粪便检查也可以建立生前诊断。
根据蠕虫学粪便检查的目的可分为：（一）蠕虫虫体检查法：是从粪便中检查虫体或节片，如莫尼茨绦虫，一般以肉眼直接检查；（二）蠕虫虫卵检查法：是从粪便中检查虫卵，如大多数的吸虫、绦虫和线虫；（三）蠕虫幼虫检查法：是从粪便中检查幼虫，如牛、羊的网尾线虫等，随粪便排出的不是虫卵而是幼虫。
下面主要分述虫卵和幼虫检查法。
1.蠕虫虫卵检查法（之一）：（1）直接涂片法：取一片洁净的载玻片，在玻片中央滴加1-2滴50％甘油生理盐水，然后用镊子或牙签挑取少量粪便，与甘油生理盐水混匀，并将粗粪渣推向一边，涂布均匀，作成涂片，涂片的厚薄以放到书上隐约可见下面的字迹为宜，加上盖玻片，置显微镜下检查，检查时先在低倍镜下顺序查找，如发现虫卵，再换高倍镜仔细观察。
如无甘油生理盐水时可以用常水代替，加甘油可使标本清晰，易于观察，并可防止涂膜很快变干燥。
但是检查原虫的滋养体，必须以生理盐水进行稀释，不应加甘油，否则会影响其运动而妨碍观察。
本法操作简单，能检查各种蠕虫卵，但检出率不高，特别是轻度感染时，往往得不到可靠结果，因此，本法只能为辅助的诊断方法，并且每次检查要重复观察8-10片，才能收到确实的效果。
（2）饱和盐水漂浮法：本法基本原理是采用比重比虫卵大的溶液，使虫卵浮集于液体的表面，形成一层虫卵液膜，然后蘸取此液膜，进行镜检。
反刍动物寄生虫粪便检查技术
载玻片、盖玻片、镊子、烧杯、胶冒吸管、玻璃棒、粪筛、虫卵计数板、光学显微镜等。
01
饱和食盐水、自来水、羊新鲜粪便等。
02
三、实验器材
四、实验方法、步骤
PART ONE
取50%甘油水溶液或普通水1-2滴放于载玻片上 镊取黄豆大小的被检粪块与之混匀 剔除粗粪渣，加上盖玻片镜检虫卵 此法最为简便，但检出率不高。 直接涂片法（Direct Smear ）
二、饱和盐水浮卵法（Fecal Flotation）
三、沉淀法（Fecal Sedimentation）
1
将被检家畜粪便定量（5g），用定量粪便3～5倍体积的水调成羹。
2
用铜筛网沉淀20min，弃上清夜，再加水沉淀，重复三次。D.弃适量上清液，用量筒对该沉淀液定量（Y ml）。
11
直接涂片法 饱和盐水浮卵法 沉淀法 作业： 请列出各种粪检 法中查到的虫卵
4
充分摇匀沉淀液后，迅速将部分沉淀液移至“计数器”的两计数室内。
5
在显微镜下，观察计数器两计数室内的寄生虫虫卵，并计数。
牛体内的寄生虫卵
羊体内的寄生虫卵
粪检中镜下常见杂质 1.植物导管：梯纹、网纹、 孔纹 2.螺纹和环纹 3.管胞 4.植物纤维 5.小麦的颖毛 6.真菌的孢子 7.谷壳的一些部分 8.稻米胚乳 9.植物的薄皮细胞 10.植物的薄皮细胞 11.淀粉粒 12.花粉粒 13. 植物线虫的一些虫卵 14.螨的卵（未发育） 15.螨的卵（已发育）
反刍动物寄生虫粪便检查技术
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一、实验目的
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1、掌握羊粪便虫常见的寄生虫虫卵检查技术 2、在光学显微镜下区分虫卵和异物 3、认识不同蠕虫虫卵的特征。
寄生虫学实验诊断技术
寄生虫学实验诊断技术一、病原检查（一）粪便检查粪便检查是诊断寄生虫病常用的方法。
要取得准确的结果，粪便必须新鲜，送检时间一般不宜超过24小时。
如检查肠内原虫滋养体，最好立即检查。
盛粪便的容器要干净，并防止污染与干燥；粪便不可混杂尿液等，以免影响检查结果。
1．直接涂片法用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便，连续作3次涂片，可提高检出率。
⑴蠕虫卵检查：滴一滴生理盐水于洁净的载玻片，用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便块，在生理盐水中涂抹均匀；涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜。
一般在低倍镜下检查，如用高倍镜观察，需加盖片。
应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。
虫卵都具有一定形状和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵内含卵细胞或幼虫。
⑵原虫检查：1）活滋养体检查：涂片应较薄，方法同查蠕虫卵。
气温愈接近体温，滋养体的活动愈明显。
必要时可用保温台保持温度。
2）包囊的碘液染色检查：直接涂片方法同上，以一滴碘液代替生理盐水。
如碘液过多，可用吸水纸从盖片边缘吸去过多的液体。
若同时需检查活滋养体，可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液，取少许粪便在碘液中涂匀，再盖上盖片（图21－1）。
涂片染色的一半查包囊；末染色的一半查活滋养体。
图21－1 原虫包囊碘液染色操作方法碘液配方：碘化钾4g，碘2g，蒸馏水100ml。
3）隐孢子虫卵囊染色检查：目前较佳的方法为金胺酚改良抗酸染色法。
对于新鲜粪便或经10％福尔马林固定保存（4℃1个月内）的含卵囊粪便都可用此法染色。
染色过程是先用金胺－酚染色，再用改良抗酸染色法复染。
方法步骤如下：金胺－酚染色法：①染液配制：1g／L金胺－酚染色液（第一液）：金胺0.1g，石碳酸5.0g，蒸馏水100ml；3％盐酸酒精（第二液）：盐酸3ml，95％酒精100ml；5g／L高锰酸钾液（第三液）：高锰酸钾0.5g，蒸馏水100ml。
②染色步骤：滴加第一液于晾干的粪膜上，10～15分钟后水洗；滴加第二液，1分钟后水洗；滴加第三液，1分钟后水洗，待干；置荧光显微镜检查。
寄生虫粪便检查法
02
粪便样本采集与处理
采集时间与频率
采集时间
通常在早晨起床后或白天任意时间采 集，应避开饮食前后1小时内采集， 以免食物残渣影响检查结果。
采集频率
根据寄生虫种类和感染程度，遵医嘱 进行采集。一般轻度感染可每周采集1 次，重度感染可隔日或每日采集。
采集方法与注意事项
采集方法
自然排便法、直肠拭子法、灌肠法等。自然排便法为首选，患者排便前应先清洁 肛门周围，将便盆放在适当位置，避免粪便污染。直肠拭子法和灌肠法适用于无 法自然排便的患者，应由专业医护人员操作。
样本处理
将粪便样本涂抹在载玻片上，用盖玻 片覆盖，轻轻压实，避免出现气泡。
显微镜观察
将制备好的样本置于显微镜下观察， 注意调整焦距和光源，以便清晰地观 察寄生虫的形态特征。
结果判定
根据观察到的寄生虫形态特征，结合 临床资料和实验室检查结果进行综合 判定。
05
结果解读与报告撰写技巧
结果解读原则和方法
详细描述检查结果
详细描述寄生虫种类、感 染程度等信息，以便临床 医生准确了解患者病情。
结论与建议明确
在报告中明确给出结论与 建议，如存在寄生虫感染 则给出治疗方案建议。
06
临床意义与应用价值评估
在肠道疾病诊断中作用
准确诊断
通过对粪便中寄生虫卵、幼虫或成虫的检测，可以准确诊断肠道 寄生虫感染，为临床治疗提供依据。
01
02
03
遵循标准操作流程
严格按照寄生虫粪便检查 法的标准操作流程进行解 读，确保结果准确可靠。
结合临床信息
充分了解患者临床信息， 如年龄、性别、症状等， 以便更准确地解读结果。
识别寄生虫种类
熟练掌握各种寄生虫的形 态特征和生活史，能够准 确识别寄生虫种类。
寄生虫病学粪便检查PPT课件
04
CATALOGUE
粪便检查的限制和改进方法
粪便检查的限制
01
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灵敏度不高
传统的粪便检查方法可能无法 检测到低感染量的寄生虫，导
致漏检。
特异性不足
由于粪便中存在大量杂质和干 扰物质，有时会导致假阳性结
果。
操作繁琐
粪便检查需要采集和处理粪便 样本，过程较为繁琐，且容易
污染。
患者依从性差
寄生虫病学粪便检 查PPT课件
目录
• 粪便检查在寄生虫病学中的重要性 • 粪便检查的基本原理和方法 • 常见的寄生虫感染及其粪便检查特点 • 粪便检查的限制和改进方法 • 粪便检查的临床应用和案例分析
01
CATALOGUE
粪便检查在寄生虫病学中的重要性
寄生虫感染的普遍性
全球范围内，寄生虫 感染是常见的公共卫 生问题。
疟疾的诊断主要依靠临床表现、流行病学资料和血液 检查，如血涂片或血清学检测。
血吸虫病
血吸虫病是由血吸虫引起的肠道感染，主要通过接触含有尾蚴的疫水传 播。
粪便检查中，血吸虫病患者粪便呈脓血便或黏液便，可直接观察到虫卵 。
血吸虫病诊断需要结合临床表现、粪便检查和流行病学资料进行综合判 断，同时需排除其他原因引起的类似疾病。
自动化检测设备
开发自动化检测设备，能够快 速、准确地检测粪便中的寄生 虫，提高工作效率和准确性。
05
CATALOGUE
粪便检查的临床应用和案例分析
临床应用
诊断肠道寄生虫感染
监测治疗效果
通过粪便检查可以检测出肠道中的寄生虫 ，如钩虫、蛔虫、鞭虫等，为临床提供诊 断依据。
对于已经确诊的肠道寄生虫感染患者，定 期进行粪便检查可以监测治疗效果，指导 后续治疗。
动医粪便检查法
寄生虫卵粪便检查法许多寄生虫的虫卵、卵囊或幼虫可随宿主的粪便排出体外.通过检查粪便,可以确定是否感染寄生虫及其种类和感染强度。
粪便检查在寄生虫病诊断、流行病学调查和驱虫效果评定上均具有重要意义。
一、目的及要求1、掌握直接涂片法、漂浮法、沉淀法检查寄生虫卵。
2、在光学显微镜下区分虫卵、幼虫或虫体和异物.3、观察常见吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等寄生虫虫卵,掌握其一般特征。
二、实验内容（一)粪样采集及保存方法1.被检粪样应该是新鲜且未被污染，最好从直肠采取。
2.大动物按直肠检查的方法采集；小动物可将食指套上塑料指套，伸入直肠直接钩取粪便。
自然排出的粪便,要采取粪堆上部未被污染的部分。
3。
采取的粪便应装入清洁的容器内.采集用品最好一次性使用,如多次使用则每次都要清洗，相互不能污染.4.采取的粪便应尽快检查，否则，应放在冷暗处或冰箱冷藏箱中保存。
当地不能检查需送出或保存时间较长时，可将粪样浸入加温至50~60℃、5％～10％福尔马林中，使其中的虫卵失去活力，但仍保持固有形态，还可以防止微生物的繁殖.（二）直接涂片法（Examination of Direct Smears）在清洁的载玻片上滴1-2滴水或1滴甘油与水的等量混合液(加甘油的好处是能使标本清晰，并防止过快蒸发变干),其上加少量粪便,用火柴棍儿仔细混匀。
再用镊子去掉大的草棍儿和渣子等，之后加盖玻片，置光学显微镜下观察虫卵或幼虫。
注意涂片的厚薄以在载玻片的下面垫上有字的纸时，纸上的字迹隐约可见为宜。
直接涂片法的优点是简便易行、快速、适合于虫卵量大的粪便检查；缺点是对虫卵含量低的粪便检出率低。
因此在实际工作中，需多检几片，以提高检出率.检查虫卵时，先用低倍镜顺序查盖玻片下所有部分，发现疑似虫卵物时，再用高倍镜仔细观察。
因一般虫卵（特别是线虫卵）色彩较淡,镜检时视野宜稍暗一些（聚光器下移).图1-1-1 直接涂片法示意另一方法是直接涂片法的改良法叫回旋法。
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1.040-1.060 1.045 1.085－1.09 1.115－1.13 >1.200 >1.200 >1.200 >1.200 >1.200
饱和盐水 硫酸锌溶液 氯化钙溶液 氯化钙溶液 硫代硫酸钠 饱和硫酸镁 饱和硝酸钠 甘油 饱和蔗糖溶液
1.17－1.19 1.14 1.05 1.25 1.37－1.39 1.26 1.2－1.49 1.226
（三）沉淀法 原虫包囊和蠕虫卵的比重大可 沉集于水底，有助于提高检出率。但比重较 小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。
1、自然沉淀法 2、离心沉淀法 （四）漂浮-沉淀法 该法的原理是利用粪便中各种 虫卵及粪渣中其它成份比重的差别，将不同比重的 虫卵分别集中进行检查，即先按漂浮法检查比重较 小的虫卵，然后将管中上层液倒掉，取沉淀物检查 不能上浮而沉在下面的比重较大的卵，所以，该法 可用于检查比重大小各异的寄生虫卵。
通常的镜台测微尺是中央 部分刻有精确等分线的载 玻片，一般将lmm等分为 100格，每格长l0μm，是 专门用来校正目镜测微尺 的。
通常的目镜测微尺是一块 圆形玻片，在玻片中央把 5mm长度刻成50等分、把 10 mm长度刻成100等分或 将1mm长度刻成100等分。
测微尺的使用
三、试验内容
一）、实验用品
1.28
饱和盐水漂浮法操作示意图
1. 自粪便不同处挑取 如蚕豆大小的粪块， 置于盛有少量饱和盐 水的漂浮管中
2. 将粪便捣碎，与 盐水搅匀，再加饱 和盐水
3. 将满时，改 用滴管，加至 略高于管口但 不超出为止
4. 取洁净载玻片一张盖 在管口上，静止30分钟 左右
5. 如图垂直向上提 起载玻片
6. 敏捷地翻转， 覆以盖片镜检
（二）浮聚法
原理：利用比重较大的液体，使原虫包囊 或蠕虫卵上浮，集中于液体表面。常用的 方法有三种： 1、饱和盐水浮聚法 2、硫酸锌离心浮聚法 3、蔗糖离心浮聚法
虫卵比重与漂浮液比重
虫卵种类 比重 漂浮液的种类 比重
贾第虫包囊 猪蛔虫卵 钩虫卵 毛圆线虫卵 猪后圆线虫卵 肝片吸虫卵 姜片吸虫卵 华枝睾虫卵 复腔吸虫卵
二）实验安排1. 每2人操1份饱和盐水漂浮法─静置滤液 30分钟； 2. 直接涂片法（每2人操作1份）；
3. 离心沉淀法（每2人操作1份）；
4. 继续“1”未完的操作。
六、注意事项
1.高倍镜下观察必须加盖玻片 2.采用直接涂片法时，不要涂得太多，必须分散 开， 均匀 3.观察寄生虫卵前，需校对目镜每格的长度；先在 低倍镜下观察，发现后换为高倍镜 4.使用离心机前，需配平离心管
七、作业：绘制粪便样品镜检看到的虫卵
八、思考题：粪便中虫卵、卵囊的检查需要
注意那些问题？
漏斗架2个/组；漏筛6个/组；小烧杯（50ml）12个/ 组；500ml烧杯2个/组；100mL烧杯1个/组；青霉素 瓶6个/组；离心管6个/组；滴管1个/人；饱和盐水1 瓶/组；甘油水1瓶/组；100mL量筒1个/组；小方瓷 盘1个/组；擦镜纸1平皿/组；小棉块1份/组；载玻 片、盖玻片1份/组；离心机、小天平各1台；镊子2 个/组；显微镜；试管架1个/组；动物粪便1份/班； 50mL烧杯两个用于配平。
（五）拭子检查法
适用于在肛周、皮肤产卵（蛲虫），或常在 肛门附近发现虫卵（带绦虫）的虫卵检查法。 1、棉签拭子法 2、透明胶纸法
（六）粪便内蠕虫幼虫检查法
1、幼虫分离法：网尾线虫、类圆线虫 2、粪便内虫卵培养法：圆形线虫目 3、毛蚴孵化法：
漏斗幼虫分离法(贝尔曼法)。取粪便15-20g，放在漏斗内 的金属筛上，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一个小试管。 加入40℃到淹没粪球为止，静置1-3小时。此时大部分幼 虫游走于水中，并沉淀于试管底部。取试管底部沉渣制成 涂片镜检。 平皿法。取被检粪球3-4个，放于平皿中，加适量40℃温 水，浸泡10-15min后，除去粪球，留下的液体在低倍显微 镜下检查。
实验一
寄生虫粪便检查法
一、目的要求
掌握粪便中寄生虫虫卵检查的饱 和盐水漂浮法；
应用显微镜观察粪便中虫卵的形 态结构。
二、方法概述
（一）直接涂片法
用以检查蠕虫卵、原虫的包囊、滋养体和卵囊。方 法简便，连续作3次涂片，可提高检出率。 1、蠕虫卵检查： 2、原虫检查： 1）活滋养体检查 2）包囊的碘液染色检查 3）隐孢子虫卵囊染色检查：改良抗酸染色法
结肠小袋纤毛虫 Balantidium coli
球虫
隐孢子虫
十二指肠贾第虫 Giardia duodenalis
肝片形吸虫虫卵
日本血吸虫虫卵
蛭形巨吻棘头虫
膜壳绦虫虫卵
犬复孔绦虫卵 细粒棘球绦虫虫卵
猪带绦虫虫卵
莫尼茨绦虫虫卵
犬鞭虫卵
犬弓首蛔虫卵
鸽毛细线虫卵，球虫卵囊
钩虫卵
猪蛔虫卵
肉鸽蛔虫卵
测 微 尺 的 使 用