高中生物实验:班氏试剂的配制与鉴定结果

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斐林试剂和本尼迪特试剂检测效果对比

斐林试剂和本尼迪特试剂检测效果对比

斐林试剂和本尼迪特试剂检测效果对比高中生物学的“检测生物组织中的糖类”是一个经典且重要的实验。

2019版人教版教材中,所用检测试剂为斐林试剂。

2019版浙科版教材中则使用本尼迪特试剂(也称为班氏试剂)。

斐林试剂是由0.1 g/mL NaOH和0.05 g/mL CuSO4配制而成。

其中O.1 g/mL NaOH 溶液称为斐林试剂甲液,0.05 g/mL CuSO4称为斐林试剂乙液。

本尼迪特试剂的配制方法为l将4.3 g硫酸铜(CuS04·5H:0)溶解在50 mL水中,加热使之溶解,冷却后加水至40 mL;另将43 g柠檬酸钠和25 g无水碳酸钠溶解于150 mL水中,加热使之溶解。

冷却后将上述2份溶液混合,用水稀释至250 mL,当溶液不澄清时可过滤。

本尼迪特试剂常被认为是斐林试剂的改良试剂,避免了斐林试剂必须现配现用的缺点,可长期保存。

斐林试剂在储存上具有缺点,而人教版仍选择其作为检测试剂是否存在其他原因?斐林试剂在检测速度和灵敏度等是否具有优势?1、研究背景斐林试剂和本尼迪特试剂反应原理具有一定共性:都是利用Cu(OH)2,与还原性糖的醛基在加热条件下反应,生成砖红色的Cu2O 沉淀以检测还原性糖的存在。

但二者产生cu(OH)2的方式存在差别。

斐林试剂的甲液与乙液直接反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2再与还原性糖反应产生砖红色沉淀。

而本尼迪特试剂中Cu(OH)2的产生过程是:柠檬酸钠和碳酸钠均是强碱弱酸盐,在水中水解产生OH一,与CuSO4溶液混合时,生成的Cu(OH)2与还原性糖反应生成砖红色沉淀。

从原理分析,斐林试剂甲液与乙液强烈反应产生Cu(OH)2,(OH)2很容易沉淀,浓度相对较高。

因此,可推测其检测还原性糖的灵敏度较高。

而本尼迪特试剂利用柠檬酸钠和碳酸钠水解产生OH一,与CuSO4混合后产生的Cu(OH)2。

因为水解产生的OH一数量较少,产生的Cu(OH)2浓度也相对较低。

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法1、斐林试剂试剂甲:将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中,加0.5亳升硫酸,混合均匀。

试剂乙:将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。

(贮于带橡皮塞的瓶中)※临用时试剂甲与试剂乙等量混合※斐林试剂是由氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液配制而成的。

它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀因此,斐林试剂常用于检测可溶性的还原性糖的存在与否。

2、双缩脲试剂取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。

取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。

瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。

※双缩脲试剂使用时,先向蛋白质溶液中加入NaOH溶液(2mL),振荡摇匀,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,与蛋白质发生紫色反应,因此,双缩脲试剂常用于检测蛋白质的存在与否注意∶林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同:(1)溶液浓度不同斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲,其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05g/ml;双缩脲试剂中NaOH溶液(双缩脲试剂A)的浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01g/ml。

(2)使用原理不同斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。

用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂的配制、用途及用法1、斐林试剂——用于可溶性糖的鉴定配制:试剂甲:取10g氢氧化钠放入容量瓶(或有刻度的烧杯)中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂甲。

试剂乙:取5g硫酸铜放入容量瓶(或有刻度的烧杯)中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。

使用:用时临时配制,将4~5滴乙液滴入2mL甲液中,现配现用。

2、班氏试剂——用于可溶性糖的鉴定配制:称取86.5g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠溶于400 mL水中。

另称8.65g 硫酸铜溶于50mL热水中。

将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠——碳酸钠溶液中,边加边搅拌,搅匀后补足水量至500mL。

如有沉淀可过滤, 此混合液可长期使用。

3、双缩脲试剂——用于蛋白质的鉴定配制:A液:取10g氢氧化钠放入容量瓶(或有刻度的烧杯)中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。

B液:取1g硫酸铜放入容量瓶(或有刻度的烧杯)中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01g/mL的硫酸铜溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。

使用:用时先加A液2mL摇匀后,再滴入3~4滴B液,摇匀观察。

4、苏丹Ⅲ试剂——用于脂肪的鉴定配制:将0.1g苏丹Ⅲ干粉溶于100mL体积分数为95%的酒精中,加热使其充分溶解,成为饱和乙醇溶液,过滤后倒进试剂瓶密封保存备用,可保存数月。

5、苏丹Ⅳ试剂——用于脂肪的鉴定配制:将0.1g苏丹Ⅳ干粉溶于50mL丙酮中,再加入体积分数为70%的酒精50mL,充分混合后即可使用。

6、二苯胺试剂——用于DNA的鉴定A液:将1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸,用棕色瓶保存。

1.2实验2--检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质

1.2实验2--检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质

检测生物组织中的化合物
(1)还原糖的检测和观察(葡萄糖、果糖、麦芽糖) 常用材料:苹果和梨
试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/ml的NaOH 乙液:0.05g/ml的CuSO4) 注意事项:
①还原糖有 葡萄糖,果糖,麦芽糖 ② 甲乙液必须等量混合均匀后再加
入样液中,现配现用
③必须 用水浴加热
颜色变化:
察鉴定,但可溶性还原糖鉴定要水浴加热,脂肪鉴定要洗去 浮色后制片再用显微镜观察,蛋白质鉴定要先加双缩脲试剂A 液(质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液),后加B液(质量浓 度为0.01g/ml的CuSO4溶液)。
(2)脂肪的鉴定 常用材料:花生子叶或向日葵种子 试剂:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液 注意事项:
①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰 有的地方模糊。
②酒精的作用是:洗去浮色 ③需使用显微镜观察 ④ 使用不同的染色剂染色时间不同 颜色变化: 橘黄色(用苏丹Ⅲ染色)或红色(用苏丹Ⅳ染色)
(3)蛋白质的鉴定 常用材料: 鸡蛋清,黄豆组织样液,牛奶 试剂: 双缩脲试剂( A液:0.1g/ml的NaOH
B液: 0.01g/ml的CuSO4 )
注意事项: ①先加 A液1ml ,再加 B液4滴 ② 鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比
颜色变化:变成紫色
(4)淀粉的检测和观察 常用材料:马铃薯 试剂:碘液 颜色变化:变蓝
思考:斐林试剂与双缩脲试剂在使用方法的区别
①斐林试剂需要等量混合、现配现用,同 时需要水浴加热
实验2 检测生物组织中的还原糖、
脂肪和蛋白质
蛋白质 脂肪
还原糖 淀粉
试剂
成分
实验现象
常用材料
双缩脲 苏丹Ⅲ
A: 0.1g/mL NaOH B: 0.01g/mL CuSO4

高中生物实验所有染色剂与其性质详解(完整版)

高中生物实验所有染色剂与其性质详解(完整版)

1斐林试剂检测可溶性还原糖原理:还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热.应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎.2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪原理:苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察.应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪.3 双缩脲试剂检测蛋白质原理:蛋白质+双缩脲试剂→紫色注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温(不需要加热). 应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定.4 碘液检测淀粉原理:淀粉+碘液→蓝色注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘.应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉5 DNA的染色与鉴定染色原理:DNA+甲基绿→绿色应用:可以显示DNA在细胞中的分布.鉴定原理:DNA+二苯胺→蓝色应用:用于DNA粗提取实验的鉴定试剂.6 吡罗红使RNA呈现红色原理:RNA+吡罗红→红色应用:可以显示RNA在细胞中的分布.注意:在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色.7 台盼蓝使死细胞染成蓝色原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性.8 线粒体的染色原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色.应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在.9 酒精的检测原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色.应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶.10 CO2的检测原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况.11 染色体(或染色质)的染色原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色.应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂.12 吲哚酚试剂与维生素C溶液呈褪色反应原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维生素C具有还原性,能将其褪色.应用:可用于检测食品营养成分中是否含有维生素 C.13 亚硝酸盐的检测出现玫瑰红原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料.应用:将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量.14 脲酶的检测原理:细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红.应用:在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素.15 伊红美蓝检测大肠杆菌原理:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物(有机酸)与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色.应用:用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量.16 刚果红检测纤维素分解菌原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物.当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈.应用:筛选纤维素分解菌.补充(有部分重复):1、斐林试剂配制:1)甲液质量浓度为0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml 2)乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等.还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀.如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等.2、班氏尿糖定性试剂配制:称取17.4克无水硫酸铜(CuSO4)溶解于100毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150毫升.称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠(Na2CO3)100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升.把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂.用细口瓶贮存备用(为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠.柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐).使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用.3、双缩脲试剂配制:A液:质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml B液:质量浓度为0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml使用时,先加A液,后加B液作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应.也可用于鉴定多肽.4、苏丹Ⅲ配制:取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色).5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1). 作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来.能杀死细胞固定.6、质量浓度为0.01g/ml的或0.02g/ml龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)配制:是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成作用:使细胞核内的染色体着色,便于观察.7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用:观察成熟植物细胞质分离时用.经此处理细胞仍具活性.8、质量浓度为0.1mg/ml的亚甲基蓝溶液配制:将亚甲基蓝溶于蒸馏水中配制而成作用:(1)用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察;(2)用于检测水中细菌情况,根据亚甲基蓝褪色情况,判断水质被细菌污染情况. 是活体染色剂.9、丙酮是有机溶剂,在叶绿体中色素提取时,用于溶解叶绿体中的色素.可用酒精替代,不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热10、层析液配制:由20份石油醚(在60~900C下分馏出来的)、2份丙酮和1份苯混合而成.是一种脂溶性很强的有机溶剂,叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢.代用品:93号汽油、四氯化碳11、SiO2、CaCO3加入少许SiO2是为了研磨得充分;加入少许CaCO3是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏.12、碘液配制:取2gKI ,溶解在5ml蒸馏水中,再加1gI,待溶解后用蒸馏水稀释至300ml.溶液在光亮处容易变成紫色,必须保存在暗色玻璃瓶里.作用:用来测定淀粉,淀粉遇碘后,形成紫色的复合物.13、二苯胺配制:称取1.5g二苯胺,溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸,用棕色瓶保存.临用前,在10mL的上述溶液中再加入0.1mL体积分数为0.2%的乙醛溶液.作用:DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色.14、NaOH:用于吸收CO2(验证光合作用需要CO2)或改变溶液的pH,15、Ca(OH)2:鉴定CO2(验证呼吸作用产生CO2).16、NaHCO3:提供CO2等.。

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法1、斐林试剂 试剂A:将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中,加0.5亳升硫酸,混合均匀。

试剂B:将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。

(贮于带橡皮塞的瓶中)于带橡皮塞的瓶中) ※临用时试剂A与试剂B等量混合等量混合2、双缩脲试剂 试剂A:10%氢氧化钠 试剂硫酸铜试剂B:1%硫酸铜3、苏丹Ⅲ试剂 0.1克苏丹Ⅲ溶于20毫升95%酒精中,因脂肪可溶于酒精中,因此染色脂肪不分钟。

得超过10分钟。

4、二苯胺试剂: 将1克二苯胺溶液于100ML冰醋酸中,再加2.75毫升浓硫酸(置冰箱中可保个月,使用前在室温下摇匀)。

存根6个月,使用前在室温下摇匀)。

5、苔黑酚——乙醇溶液(用于RNA的鉴定)的鉴定) 溶解6克苔黑酚于是100毫升95%乙醇中,(可在冰箱中保存1个月)个月)6、班氏试剂: 溶85克柠檬酸钠及50克无水碳酸钠于400毫升水中。

另溶8.5克硫酸铜于500毫升热水中。

将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠——碳酸钠溶液中,边加边搅拌。

此混合液可长期使用。

如有沉淀可过滤, 此混合液可长期使用。

7、茜红染料 将0.1克茜红溶于100ML蒸馏水中蒸馏水中8、酵母亮甲酚蓝 将10ML水放入烧杯中,滴加足够的1%亮甲酚蓝水溶液亮甲酚蓝水溶液 至深蓝色为止。

将1/4茶匙干酵母溶于此水中。

搅拌并煮沸,用前冷却。

9、醋酸洋红染液 冰醋酸45ML+55ML蒸馏水+0.5克洋红克洋红 先将洋红溶于蒸馏水中,再加入冰醋酸充分摇匀后,加热煮沸10分钟,待冷却后,即可使用。

却后,即可使用。

10、有丝分裂细胞解离液 38%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成解离液。

的比例配成解离液。

11、有丝分裂细胞染液 医用紫药水和蒸馏水按1:16的比例混合配成染色液。

的比例混合 配成染色液。

的鉴定)12、吲哚酚试剂(用于VC的鉴定) 将0.1克吲哚酚粉未溶于是100ML水中。

水中。

(用于细胞有丝分裂根尖的固定)13、卡诺氏固定液(用于细胞有丝分裂根尖的固定) 酒精:冰醋酸=3:1(体积比)(体积比)14、20%肝脏研磨液 1份肝脏4份水。

高中生物-染色剂

高中生物-染色剂

高中生物染色剂1、斐林试剂配制:1)甲液质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml2)乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。

还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。

如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。

2、班氏尿糖定性试剂配制:称取17.4克无水硫酸铜(CuSO4)溶解于100毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150毫升。

称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠(Na2CO3)100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升。

把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。

用细口瓶贮存备用(为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠。

柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐)。

使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用。

3、双缩脲试剂配制:A液:质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100mlB液:质量浓度为0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml使用时,先加A液,后加B液作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应。

也可用于鉴定多肽。

4、苏丹Ⅲ :配制:取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。

5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1)作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来。

能杀死细胞固定。

6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)配制:是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成作用:使细胞核内的染色体着色,便于观察。

7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用:观察成熟植物细胞质分离时用。

高中生物常见试剂及变色反应汇总

高中生物常见试剂及变色反应汇总

高中生物常见试剂及变色反应汇总1、斐林试剂:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.05g/mlCuSO4(乙液)。

用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。

2、班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。

和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。

用于尿糖的测定。

3、双缩脲试剂:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.01g/mlCuSO4(乙液)。

用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。

如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。

4、苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。

用于检测脂肪。

可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅲ染成红色)。

5、二苯胺:用于鉴定DNA。

DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。

6、甲基绿:用于鉴定DNA。

DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。

吡罗红:检测RNA,呈红色7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。

8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。

9、95%的酒精溶液:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖,使细胞分离开来。

“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15%盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。

洗去卡诺氏液8%盐酸:(1)盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;(2)盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合11、龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色改良苯酚品红染液:检测染色体,红色健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。

(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

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高中生物实验:班氏试剂的配制与鉴定结果
透明蓝色无
加热时无变化,仅冷却后有少量沉淀微量,约0.5以下
加热1分钟后即出现少量黄绿色沉淀少量,约0.5-1
加热10-15秒后即出现土黄色沉淀中量,约1-2
班氏试剂与斐林试剂比较:
首先,两者的配方不一样。

斐林试剂主要由质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液和质量浓度为0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。

其中0.1g·mL-1的NaOH溶液称为斐林试剂甲,0.05g·mL-1的CuSO4溶液称为斐林试剂乙。

而班氏试剂的配方为:400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠;50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜,制成CuO4溶液;把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠?Na2CO3溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。

其次,两者在反应原理上略有差别。

利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。

而班氏试剂中Cu(OH)2的产生却是这样的:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐,在水中它们均可水解产生OH-,与柠檬酸钠?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时,Cu2+和OH-结合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。

两种试剂的保存方式不同。

斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反
应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2很容易沉淀析出,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠?Na2CO3为一对缓冲物质,产生的OH-数量有限,与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低,不易析出,因此该试剂可长期保存。

可溶性还原糖的鉴定:
生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。

葡萄糖、果糖和麦芽糖的分子内含有醛基,醛基具有还原性,可与弱氧化剂反应。

与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在。

利用斐林试剂:斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的Na0H溶液和质量浓度为0.05g/mLL的CuS04溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。

Cu(OH)2在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,醛基则被氧化为羧基。

可见用斐林试剂只能鉴定还原性糖,不能鉴定可溶性的非还原性糖。

用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。

利用班氏试剂:班氏试剂由A液(硫酸铜溶液),B液(柠檬酸钠和碳酸溶液)配制而成。

将A溶液倾注人B液中,边加边搅,如有沉淀可过滤。

实验原理与斐林试剂相似,所不同的是班氏试剂可长期使用。

利用银氨溶液:银氨溶液是在2%的AgNO3溶液中逐滴滴人2%的稀氨水,至最初产生的沉淀恰好溶解为止,这时得到的溶液就是银
氨溶液。

银氨溶液中含有Ag(NH3)20H(氢氧化二氨合银),这是一种弱氧化剂,能把醛基氧化成羧基,同时Ag+被还原成金属银。

还原生成的银附着在试管壁上,形成银镜。

可见,银镜反应也可用于鉴定可溶性还原糖。

鉴定的结果是出现银镜。

用班氏试剂鉴定可溶性还原糖,比用斐林试剂更简便。

步骤
在试管中加入1mL班氏试剂,加热到沸腾,如不变色,则可使用。

再在试管中滴人2滴新鲜澄清的尿液,摇匀。

加热上述混合液到沸腾,并持续2min~3min。

观察试管内混合液颜色是否发生变化,是否有沉淀物产生,并按表5提示作出判断记录。

混合液现象—记录符号含糖量
混合液呈蓝色或蓝灰色-0.02g/100mL
出现浅黄绿色沉淀+(0.1~0.5g)/100mL
注意事项:
班氏试剂和尿液混合液的体积比例应为10:1。

如是糖尿病人,检验前两三天最好停止服药。

实验中常用器材和药品的使用
NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH(马上点标题下“高中生物”关注可获得更多知识干货,每天更新哟!)
Ca(OH)2:鉴定CO2
CaCl2:提高细菌细胞壁的通透性
NaHCO3:提供CO2、作为酸碱缓冲剂
酸碱缓冲剂(Na2CO3/NaHCO3,Na2HPO4/NaH2PO4):用于调节溶液pH
NaCl:配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)
琼脂:激素或其他物质的载体或培养基,用于激素的转移或培养基
酒精:用于消毒(75%)、提纯DNA(95%)、叶片脱色、配制解离液(95%的冷酒精)及洗去浮色(50%)
蔗糖:配制蔗糖溶液,测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原
苔黑酚乙醇溶液:用于RNA的鉴定
斐林试剂(甲液0.1g/mL NaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏试剂:鉴定可溶性还原性糖(沸水浴,砖红色沉淀)
双缩脲试剂:用于蛋白质的鉴定(紫色)
碘液:用于鉴定淀粉(变蓝色)
龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色
改良苯酚品红染液:检测染色体,红色
健那绿B:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色
重铬酸钾溶液:检测酒精,呈灰绿色
吲哚酚试剂:用于维生素C的鉴定
伊红美蓝:鉴定有无大肠杆菌的存在
亚甲基蓝:用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌(细菌的氧化可使之褪色)
pH试纸:检验物质的酸碱性,如乳酸
卡诺氏固定液:用于细胞有丝分裂根尖的固定
解离液(5%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成):有丝分裂中根尖的分离与固定
93号汽油;
9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合;
汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。

20%新鲜肝脏研磨液:含有H2O2酶,可促进H2O2分解产生O2
无土营养液:用于植物无土栽培
结晶紫:用于自生固氮菌的分离
秋水仙素(C22H25O6N):用于单倍体育种,作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺缍体的形成,可导致细胞内染色体数目加倍。

是1937年发现的,是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。

它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶,有剧毒,使用时应特别注意。

看看网友们都有什么想法
网友1
是来鉴定还原糖的,硫酸铜和氢氧化钠的混合物,斐林试剂应
现配现用
网友2
1斐林试剂检测可溶性还原糖
原理:还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀
注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热。

应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。

2苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪
原理:苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色
注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察。

应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪。

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