发酵法生产辅酶Q10的含量分析及工艺优化
产辅酶Q_(10)菌株选育及发酵过程优化研究
产辅酶Q_(10)菌株选育及发酵过程优化研究辅酶Q10(CoQ10)作为细胞有氧呼吸链中的一个重要递氢体,广泛应用于医药和食品行业。
近年来,CoQ1o作为一种辅助药物,在治疗心脏衰竭方面,使用比例逐年增加,因此对CoQ1o的需求也不断增长。
对产CoQ1o微生物的开发利用也愈发重要。
本文以类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)为出发菌,研究了该菌的诱变选育、培养基优化和补料分批发酵工艺。
1.对比皂化法、超声波破碎法、反复冻融法、酸热法和酸热辅助超声法对CoQ1o提取效果的影响,确定了酸热辅助超声破胞方法的可行性。
并通过单因素实验、正交法实验确定其最佳提取工艺条件。
酸热辅助超声法提取类球红细菌中CoQ1o最优的提取条件是加入300μL的盐酸、80 ℃、400w超声处理20min。
此时,CoQ1o得率为3.738mg/g。
2.以自然筛选获得的R.spl-11为出发菌株,经过紫外-LiCl、NTG结合VK3、NaN3和PHB 复合抗性诱变,获得一株遗传性状良好的CoQ1o高产菌株,其产量为71.23mg/L,比出发菌株提高了132.17%。
通过单因素实验对R.sp3-7菌株发酵条件进行优化,得到最优条件为：32℃、初始pH为7.0、接种量8%及装液量为40mL/250mL, CoQ10产量为82.70mg/L。
3.对R.sp3-7生产CoQ1o的发酵培养基进行优化,首先通过单因素筛选确定了培养基最佳碳源、氮源和需添加的金属离子。
通过Plackett-Burman设计对培养基中的9种成分进行筛选,获得影响发酵的3个重要成分：葡萄糖、玉米浆干粉和硫酸镁,再采用Box-Behnken响应面试验对上述三种成分进行优化,获得最佳浓度：葡萄糖36.9g/L、玉米浆干粉5.3g/L、MgSO4 14.4g/L。
优化后CoQ1o产量达到135.20mg/L,比优化前提高了68.62%。
4.在5L发酵罐中考察了pH、溶氧(DO)水平对CoQ1o合成的影响,结果发现CoQ1o合成的最适pH为6.8。
发酵液中辅酶Q10的分离纯化和定量分析
ｎ ｌｇ ， Ｎｉｇ ｏ Ｕｎｖ ｒｉｙ Ｎｉｇ ｏ３１ ２ １ Ｃｈｎ ） ｏｏ ｙ ｎ ｂ ｉｅｓｔ ， ｎ ｂ ５ １ ， ｉａ
Ａｂ ｔａ ｔ ｏ ｎ ｙ ｅＱ ｌ ｗａ ｎ ｉ ｐ ｒａ ｔｐ ａｍ ａ ｅ ｔｃｆ ｎ ｔ ｎ ｌｍａ ｅ ｉ１ ｓｒ ｃ ：Ｃ ｅ ｚ ｍ ０ ｓａ ｏ ｔ ｎ ｈ ｒ ｃ ｕ ｉ ｕ ｃ ｉ ａ ｍ ｏ ｔｒａ ．Ｔｈ ｕ ｉｙｏ ｈ ｒｐ — ｅｐ ｒｔ ｆｔ ｅｐ ｅ ａ ｒ ｔ ｎ ｆＣ Ｑ ｌ ｗａ ｅｅ ｍ ｉ ｅ ｙ ＴＬＣ， ＵＶ ｎ ｉ ｈ ｐ ｒｏ ｍ ａ ｃ ｉｕ ｄ ｃ ｒ ｍａｏ ｒ ｐ ｙ ｏ ｈ ａｉ ｓｏ ｏ ０ ｏ ｓｄ ｔｒ ｎ ｄ ｂ ａ ｄ ｈ ｇ ｅ ｆ ｒ ｎ ｅ ｌ ｉ ｈ ｏ ｔ ｇ ａ ｈ ｎ ｔ ｅ ｑ
维普资讯
第 ２ １卷 第 ４期 ２０ ０ ２年 ７月
无 锡 轻 工 大 学 学 报
Ｊｏ ｒ ｌｏ ｕ ｉ ｒ ｉｙ ｏｆＬｉ ｈｔＩ ｕ ｎａ ｆ Ｗ ｘｉＵｎ ｖｅ ｓｔ ｇ ｎｄｕ ｔ ｙ ｓｒ
Ｖ Ｏ ． Ｎ Ｏ． １ ２１ ４
产 辅 酶 Ｑ１的 分 离 和 测 定 提 供 了一 种 较 有 效 的 方 法 ． ０
关键 词 ：辅 酶 Ｑ１；定 量 分 析 ；鉴 定 ０ 中 图分 类 号 ：Ｑ ５ ５２ 文献标识码 ： Ａ
Ｓ ｕ ｉｓｏ ｈ ｒｆｃ ｔｏ ｎｄ Ｑｕ ｎｔｔ ｔｖ ａｙ ｉ ｆ ｔ ｄ ｅ ｎ ｔ ｅ Ｐｕ ｉｉａ ｉｎ ａ ａ ｉａ ｉｅ Ａｎ ｌｓｓｏ Ｃｏ ｎ ｙ ０ ｎ Ｃｕ ｔ ｒ ｅ ｚ ｍｅＱ１ ｌｕ ｅ ｉ
ｂａ ｅ ｏｆｓ ｌｃ ｅ ｅ ｒ ａ ｍ ｅ ｓｏｆｔ ｅ ｍ ｅ ａ ｉｎ ｃ ｌｕｒ ｉｈ ｐｒ ｅ ｇ ｎｉ ｏ ｖｅ ｘｔａ ｔｏ Ｔｈｅ ｓ ｅｅ ｔ ｄ ｐｒ ｔ ｅ ｔ ｎｔ ｈｅ ｆ ｒ ｎｔ ｔｏ ｕ ｔ ｅ ｗ ｔ ｏｐ ｒｏｒ ａ ｃ ｓ ｌ ｎｔｅ ｒ ｃ ｉｎ ｒ ｓ ｌｓｓ ｏｗ ｅ ｓｆ ｌｏ ｉ ｓ： ａ ｐｔｎｇ ａ ｅ ｏ ｏ ｕｔｏ ｔａ ｏ ｃ ｔ ｅ ｍ ｅ ｔ ｅ ｒ ｃ ｉ ｇ ｔｍ ｅ ５ ｈｏ ｒ ， ｅ ｕｔ ｈ ｄ ａ ｏ ｌ ｗ ｎｇ ｄｏ ｉ ｃ ｔ ｎｅ ｓ ｌ ｉ ｎ ｕｌｒ ｓ ｎｉ ｒ ａｔ ｎ ， ｘｔ ａ ｔｎ ｉ ｕ ｓ
辅酶Q10的生物合成途径及发酵工艺优化
·综述·辅酶!"#的生物合成途径及发酵工艺优化王普!，张晓军!，沈佳佳"，王浩!（浙江工业大学"$生物制药研究所，%$生物工程系，浙江杭州&"##&%）摘要：辅酶!"#作为生物体有氧呼吸链中不可缺少的电子递氢体，广泛应用于生物医药、化妆品和保健品等领域。
微生物发酵法生产辅酶!"#具有产物活性高、原料成本低等优点。
此文对辅酶!"#的生物合成途径和发酵工艺优化进行了综述。
关键词：辅酶!"#；生物合成；发酵；优化中图分类号：!’’%文献标识码：(文章编号："##’)"*+,（%##*）#&)#"+,)#-!"#$%&’()*"#’%’+,*"-,(&./&#)0(1#2"#,)3%*’&+*%1%0,*%&)&..#41#)*,*%&).(/012"，34(/05678)92:"，;4</=67)967%，.(/0478"（"!"#$%&%’%()*+&),-./0.1(’%&1.23#4&#((/，%!5(,./%0(#%)*+&)(#4&#((/，6-(7&.#48#&9(/$&%:)*;(1-#)2)4:，<.#4=-)’&"##&%，>-&#.）收稿日期：%##’)#>)"*；修回日期：%##’)"%)#’作者简介：王普（">*’)），女，河北石家庄人，博士，教授，主要从事生物转化及微生物制药研究，<)?76@：A7:BC2D E92F $GH2$I:。
辅酶q10生产工艺
辅酶q10生产工艺
辅酶Q10，也称作辅酶Q10，是一种脂溶性维生素样物质，在人体中起着重要的生物代谢调节作用。
辅酶Q10广泛存在于
许多生物体中，尤其是在人类和其他哺乳动物的线粒体中。
辅酶Q10的生产工艺主要包括以下几个步骤：
1. 原料准备：根据辅酶Q10的生产需求，准备适量的辅酶
Q10原料，主要为酵母和青霉菌等微生物的发酵产物。
2. 发酵工艺：将选定的微生物菌种接种于培养基中，通过调节培养基的化学成分和培养条件，使菌种发酵产生辅酶Q10。
3. 分离提取：将发酵液进行离心或过滤，将菌体和培养基分离，然后用有机溶剂进行提取，将辅酶Q10从提取液中分离。
4. 纯化和精制：通过进一步的分离、纯化和精炼工艺，去除杂质和其他不需要的物质，得到纯净的辅酶Q10。
5. 干燥和包装：将纯净的辅酶Q10溶液进行喷雾干燥或真空
干燥，得到辅酶Q10粉末。
然后根据需要，将辅酶Q10粉末
进行包装，以便于储存和销售。
辅酶Q10的生产工艺需要严密的控制各个环节，确保产品的
质量和纯度。
关键的环节包括菌种的选取和培养条件的控制、提取液的纯化和精炼等。
此外，还需加强质量控制和质量管理，确保产品符合相关的质量标准。
总之，辅酶Q10的生产工艺是一个复杂而精细的过程，需要在严密控制的环境下进行。
通过合理的原料准备、发酵工艺、提取和分离、纯化和精炼等步骤，可以获得高质量的辅酶Q10产品。
这样的工艺有助于满足市场需求，并推动辅酶Q10的广泛应用。
发酵法生产辅酶Q10研究进展及发酵设备的技术优化
发酵法生产辅酶Q io 研究进展及发酵设备的技术优化1概述辅酶Q io 是一种脂溶性的醌类化合物，化学名称为 2,3-二甲氧基-5-甲基-6- 癸异戊烯基-1,4-二苯醌，别名癸烯醌、泛醌，分子式为C 59H 90O 4,分子量为863.36, 在室温下呈橙黄色结晶，无臭无味。
其结构式见图 1图1辅腮Qm 结构武辅酶Q io 的生理功能与其两种生化作用密切相关：一是其具有的抗氧化能力， 二是其在电子传递链上的角色，传递电子与质子，促进生成 ATP 。
辅酶Q io 还原 态的、异戊二烯单体全为反式的结构比氧化态、 异戊二烯单体全为顺式结构具有 更高的活性和理化作用。
2辅酶Qio 的主要功能研究进展2.1辅酶Q io 在生物体细胞呼吸和能量代谢中的作用辅酶Q io 在生物体中能提供或移去氧，生物体中能量代谢主要在线粒体中进 行，其产生的能量占人体总能量的95%，而辅酶Q io 存在于线粒体内膜上，生物 氧化过程中电子传递必须与辅酶 Q io 反应，是线粒体呼吸链限速反应的关键性物 质，辅酶Q io 同时是线粒体氧化磷酸化反应中几种重要酶的辅助成分， 又能阻止 ATP 合成代谢所需物质的减少；辅酶Q io 是代谢激活剂，激活细胞呼吸，因此， 辅酶Q io 在细胞能量生成，增强生物体活力方面可作为一种潜在的功能性药物或 保健食品添加剂。
2.2辅酶Q io 在增强人体免疫力和抗肿瘤方面的研究进展2.2.1抗种瘤药物通过测定癌症及AIDS 病人体内辅酶Q io 浓度发现，与正常人相比其含量较 低，CHQ cunCH.CH 3(CH 2 — (JI C —i994年Lockood，等研究了各种各样癌症病人包括乳房癌、前列腺癌、胰癌和结肠癌等病人，对其体内辅酶 Q io缺乏发生率进行研究，对32位已转移至腋窝淋巴结的乳房癌病人，经服用辅酶Q io9Omg/a并结合服用一定剂量的抗氧化剂如Vc、V E、炉胡萝卜素、硒、co-3、co-6不饱和脂肪酸，经一年试验，病人均未发生肿瘤转移，其中 6 病例其肿瘤发生部分消退 .2.2.2增强免疫力1970年,首先报道了老鼠服用了辅酶 Q io能提高机体免疫细胞杀死细菌的活力，并提高抗体反应 ;辅酶 Q1O 能增加白细胞的数量，增加胸腺活力，激发免疫球蛋白和抗体数量增加.1985年Folkers,等研究了获得性免疫缺陷症(AIDS)病人，其血清中显示出较低的辅酶 Q10浓度，同时在临床上对8位成年病人经60mg/d 辅酶Q10治疗，一个月后，血清IgG含量明显提高•因此辅酶Q10作为机体非特异性免疫比强剂在抗肿瘤提高机体免疫力等方面可作为一种较好的治疗药物。
红细菌发酵辅酶Q10的研究
Ａｂｓｔｒａｃｔ
Ｃｏｅｎｚｙｍｅ ＱＩ Ｏ ｉｓ ａｌｌ ｎｅｃｅｓｓａｒｙ ｑｕｉｎｉｎｅ ｈｏｍｏｌｏｇ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｏｒｇａｎｓ，ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｌｏｃａｔｅｄ
ｃｙｔｏｄ咖ｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｆｌａｖｏｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ
ｂ，ｐｌａｙｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｃｈａｉｎ ｏｆ
１．１．２理化性质
ＣＨ３广－ｏ ＣＨ３＿一Ｏ
３
罕Ｈ’
、
ＣＨ２一ＣＨ＝Ｃ—ＣＨ２ ｊ ｎ
Ｏ
Ｉ啊咖蝴 州—啪—帕—Ｅ
图卜１辅酶Ｑ１０的化学结构式
辅酶ＱｌＯ为黄色或淡黄色结晶，不含结晶水，无臭无味，熔点４９℃，其纯度可达 ９９％以上。见光易分解成微红色物质，对温度和湿度较稳定，易溶于氯仿、二氯甲烷、 乙醚、石油醚、甲苯等溶剂，不溶于水。辅酶Ｑ１０的生化性质主要来自于其分子结构中 醌环的氧化还原性和侧链的疏水性，如类异戊烯基侧链使辅酶Ｑ１０具有高度的非极性， 可在线粒体内膜的磷脂双分子层的疏水区自由扩散。醌分子中虽然存在碳碳双键与碳氢 双键间的丌．氕共轭体系，但Ｘ射线分析证明，醌环不是芳香烃，不属于芳香族化合物， 它具有典型的烯烃和羰基化合物的反应性能，可以进行多种形式的加成反应和氧化还原 反应（王宗德等１９９９）。研究表明（杨学义等１９９４），细胞中的辅酶Ｑ１０有三种氧化还原 状态，即氧化型醌（Ｑ），还原型醌（ＱＨ２）和自由基半醌（ＱＨ），它的氧化还原电势量为 Ｏ．５４２Ｖ，氧化型较还原型稳定，还原态的辅酶Ｑ１０比氧化态的辅酶Ｑ１０具有更高的生 物活性和药理作用。辅酶Ｑ１０可参与氧化还原反应、乙酰化反应和磷酸化反应以及醌 醇的结构互变等。
以红细菌为原始菌株，经紫外线诱变处理，采用抗性筛选法，直接在平板上挑取抗 对羟基苯甲酸菌株，获得一株高产量的突变株，其辅酶Ｑ１０产量为４９．３３ｍｇ／Ｌ，较原始菌 株提高３０．３％。
提高微生物发酵辅酶Q10产量的研究进展[1]
图 (! 异戊烯基侧链的生物合成路线 :GK. ( N9FAO96 2H ?G2I6DFA3IGI 2H IGC3 EA9G4 2H GI2976@343 K82DB
(L (! 营养缺陷型突变株筛选! 由异戊烯基侧链及芳香环 的生物合成途径路线， 选育营养缺陷型突变株， 有利于提 ［-］ 高所需产物的浓度。 P@I24 和 MDC436 发现类胡萝卜素 与 12+(# 均以聚异戊二烯为前体进行合成代谢， 减少类胡 萝卜素的生成量可能会促进 12+(# 的生物合成。 Q2IAGC9
从表 ( 可以看出， 光合细菌菌体中 12+(# 的含量普遍较
! !
"##$ % #& % ’# 收稿日期： （ ()*" ） ， 作者简介： 张千 男， 硕士研究生， 主要从事微生物发酵研究。
$0
[)I. 0%1 Z). & 第 0% 卷第 & 期 生 物 学 杂 志 1 1 ;BK ， 0++, 年 0 月 WX9YZ8T X; >NXTXS# 0++, !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
［(］
高， 因此是产 12+(# 菌种的理想选择之一。但野生型菌株产 12+(# 能力不能满足生产需要， 这就需要利用常规诱变及基
［’］ 因工程技术对其进行遗传改造。MDC436 于 ()0$ 年在关于 12+(# 的国际会议上， 提出了 12+(# 的微生物合成途二烯基侧链的生物合成路线 ， 图 "） 根据这两种生物合成途径再结合细菌的代谢调节机 制， 我们就可以有目的的对产 12+(# 菌株进行筛选。
辅酶q10生产菌株
辅酶Q10生产菌株1. 简介辅酶Q10，也被称为辅酶Q，是一种存在于细胞膜中的脂溶性物质，具有抗氧化和能量传递的功能。
它在许多生物体中广泛存在，包括人类、动物和微生物。
辅酶Q10对维持细胞健康和机体的正常功能非常重要，因此具有广泛的应用潜力。
辅酶Q10的生产主要依赖于菌株，这些菌株能够通过发酵过程合成辅酶Q10。
本文将详细介绍辅酶Q10生产菌株的选取、发酵过程的优化以及产物提取和纯化的方法。
2. 菌株的选取辅酶Q10生产菌株的选取是生产过程中的关键步骤。
合适的菌株应具有以下特点：•高产量：菌株应具有较高的辅酶Q10产量，以提高生产效率。
•耐受性：菌株应具有较高的耐受性，能够适应较高的辅酶Q10浓度和发酵条件。
•稳定性：菌株应具有较高的遗传稳定性，以确保长期稳定的产量。
常用的辅酶Q10生产菌株包括酵母菌、细菌和真菌等。
其中，酵母菌属于常见的菌株，如Saccharomyces cerevisiae和Candida utilis等，具有较高的辅酶Q10产量和较好的发酵性能。
细菌菌株如Escherichia coli和Agrobacterium tumefaciens等也被广泛应用于辅酶Q10的生产。
在菌株选取过程中，需要进行菌株的筛选和优化，以获得较高产量和稳定性的菌株。
这可以通过菌株的培养和筛选实验来实现。
3. 发酵过程的优化发酵过程是辅酶Q10生产的核心环节。
通过优化发酵条件，可以提高辅酶Q10的产量和纯度。
3.1 培养基的选择培养基的选择对发酵过程至关重要。
合适的培养基应提供菌株所需的营养物质，并具有适当的pH值和温度。
常用的培养基包括复合培养基和简单培养基。
复合培养基包含多种有机和无机物质，能够提供菌株所需的各种营养物质。
简单培养基则只包含少数必需的营养物质，适用于某些菌株的特定需求。
3.2 发酵条件的调控发酵条件的调控对辅酶Q10的产量和质量具有重要影响。
常见的调控参数包括温度、pH值、氧气供应和搅拌速度等。
辅酶Q10的高产菌种筛选及发酵工艺优化
展潜 力 的 ＣｏＱ。。生 产 方 法 。 目前 ，日本 在 发 酵 生 产 ＣｏＱ，。研究 中处于领 先 地 位 ，国 内发 酵 高 产 ＣｏＱ。。 的研 究 尚未见 有 报道 。 本 文主 要从 筛选 高产 ＣｏＱ。。 生 产 菌种 出发 ，确定 实验 菌种 ，进 一步对 发酵 工艺 进 行 优化 。
辅 酶 Ｑ。。系醌 类 化 合 物 ，广 泛 存 在 于 动 物 、植 物 、微生 物 等 细 胞 体 内。辅 酶 Ｑ。。在 电 子 传 递 链 中 处 于 重要 地位 ，人体 一旦 缺乏 ，极 易导 致线 粒体 功能 性 障碍 。故 临 床上辅 酶 Ｑ。。被 视 为 细 胞 代谢 及 呼 吸 的激活 剂 ，广 泛 用 于治 疗 心 脑 血 管疾 病 ，具 有 降压 、
过 程相 对简 单 ，不存 在手 性 问题 等 优点 ，成 为最 有发
西安 市皓 天生 物工 程有 限公 司 提供 。
辅酶Q_10_的生物合成途径及发酵工艺优化
醌核的前体对羟基苯甲酸在细菌和高等真核生物中分
收稿日期 : 2005209216 ; 修回日期 : 2005212205 作者简介 : 王普 (19652) ,女 ,河北石家庄人 ,博士 ,教授 ,主要从 事生物转化及微生物制药研究 ,E2mail :wangpu @zjut . edu. cn 。
180
中国生化药物杂志 Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 2006 年第 27 卷第 3 期
图 4 细菌体内侧链前体合成途径[11] Fig4 Pathway for biosynthesis of the polyprenyl tail precursors in bacteria
图 5 E. coli 和 S . cerevisiae 体内辅酶 Q10侧链的合成途径[7] Fig 5 Pathway for the biosynthesis of polyprenyl diphosphate in E. coli and S . cerevisiae 2 辅酶 Q10发酵工艺优化 2. 1 生产菌株
摘 要 :辅酶 Q10作为生物体有氧呼吸链中不可缺少的电子递氢体 ,广泛应用于生物医药 、化妆品和保健品等 领域 。微生物发酵法生产辅酶 Q10具有产物活性高 、原料成本低等优点 。此文对辅酶 Q10的生物合成途径和发酵工 艺优化进行了综述 。
关键词 : 辅酶Q10 ; 生物合成 ; 发酵 ; 优化 中图分类号 :Q552 文献标识码 :A 文章编号 :100521678 (2006) 0320178204
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
技 违 教
ＢＵＬＬＥＴＩＮ ＯＦ ＳＣＩＥＮＣＥ Ａ ＮＤ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧ Ｙ
维普资讯
卷第 期
２ ０ ０ ２年 ７月
发 酵 法 生 产 辅 酶 Ｑｌｏ的 含 量 分 析 及 工 艺 优 化
陈 瑜
（浙 江 省 药 品 检 验 所 ，浙 江 杭 州 ３１０００４）
摘 要 ：采 用 分 光 光 度 法 泓 定 辅 酶 Ｑ 。的 含 量 ，并 比 较 其 不 同 工 艺 条 件 下 的 含 量 ，得 到 了 较 佳 的 生
产 工 艺 条 件 ，提 高 了 辅 酶 Ｑｔｏ的 得 率 ．
关 键 词 ：辅 酶 Ｑ 含 量 分 析 ；工 艺 优 化
菌 体或 培 养 基 中 ，如 丙 酮 酸 、乙 酸 等 而 导 致 ｐＨ 下 降 ，影 响 某 些 酶 的 活 性 ，从 而 抑 制 了微 生 物 的
生 长 和 产 物 的合 成 ．所 以在 生 产 中 常 采 用 复 合 碳 源 代 替 葡 萄 糖 作 为 唯 一 碳 源 的 培 养 基 ，以促 进
中 图 分 类 号 ：ＴＱ４６０．７ ２
文 献 标 识 码 ：Ａ
文 章 编 号 ：１００１—７１１９（２００２）０４—０３３４—０３
０ 引 言
辅 酶 Ｑ 。（ＣｏＱ。。）在 动 物 、植 物 、微 生 物 等 细 胞 体 内与 线 粒 体 内膜 相 结 合 ，是 呼 吸链 中 的 重 要 递 氢 体 ，一 种 良好 的生 化 药 物 ，具 有 重 要 的 生 理 作 用 ，是 细 胞 自身 产 生 的天 然抗 氧 化 剂 ，细 胞 代 谢 的 激 活 剂 ． 同时 ，辅 酶 Ｑ 。亦 是 一 种 与 网状 内 皮 组 织 系统 有 关 的 醌类 化 合 物 ，能 够 提 高 机 体 免 疫 力 ．
１）．
２ 结 果 与 讨 论
图１ 标准曲线
本 文 讨 论 了辅 酶 Ｑ。。生 产 中 的 几 种 不 同工 艺 条 件 ，比较 其 产 物 得 率 ，得 到 辅 酶 Ｑ 。产 出 的影 响
葡 萄 糖 是 碳 源 中最 早 被 利 用 的 ．几 乎 所 有 的 微 生 物 都 能利 用 葡 萄 糖 ，所 以葡 萄 糖 常 作 为 培
１ 材 料 与 方 法
１．１ 仪 器 和 主 要 试 剂 （１）７５１型 分光光 度 计 ；（２）氰 乙酸 乙酯 （分 析 纯 ）；（３）无 水 乙醇 （分 析纯 ）；（４）０．５ 氢 氧化 钾
乙醇溶 液 ：称取 １ ｇ氢 氧化钾 （分析 纯 ）溶 于 ２００ ｍＬ ９５％ 乙醇 中 ；（５）辅 酶 Ｑ 。对 照 品 （中检所 ）． １．２ 实 验 方 法
收 稿 日 期 ：２００１—１１一Ｏ８ 作 者 简 介 ；陈 瑜 ，女 ，１９７５年 生 ，浙 江 金 华 人 ，助 理 工 程 师 ／学 士
维普资讯
第 ４期
陈 瑜 ． 发 酵 法 生 产 辅 酶 Ｑ。。的 含 量 分 析 及 工 艺 优 化
３３５
标 准 曲线 测 定 含 量 ． （２）标 准 曲 线 准 确 配 制 １ ｍｇ／ｍＬ 辅 酶
Ｑ 。对 照 品 无 水 乙 醇 溶 液 ，精 密 吸 取 ０．１，０．２， 星 ０．２，０．４，０．５，０．６ ｍＬ 置 于 具 塞 试 管 中 ，按 （１） 所 述 实 验 方 法 测 定 吸 收 度 ，绘 制 标 准 曲 线 （图
养 基 的一 种 主 要 成 分 ，并 且 作 为 加 速 微 生 物 生 长 的一 种 有 效 的 糖 ．但 是 过 多 的葡 萄 糖 会 加 速 菌
体 的 呼 吸 ，以致 培 养 基 中 的溶 解 氧 不 能 满 足 需 要 ，使 一 些 中间 代 谢 产 物 不 能 完 全 氧 化 而 积 累在
产 物 的 合 成 ．
试 验 中在 葡 萄糖 培 养 基 中添 加 适 量 蔗 糖
表 １ 添 加 蔗 糖 对 辅 酶 Ｑ。。的 影 响
组 成 复 合 碳 源 ，并 将 其 与 以 葡 萄 糖 为 唯 一 碳
组 成
辅 酶 Ｑ１０含 量 ／（ｍｇ／Ｌ）
源 的 发 酵 结 果 进行 了 比较 ，结 果 见 表 １．可 以 看 出 ，添 加 ３．５ 蔗 糖 使 每 升 培 养 基 中 辅 酶
３．５％葡 萄 糖 ３．５％ 蔗 糖 ７ 葡 萄 糖
１Ｏ．３７ ９．０８
（１）精 密 吸取 辅 酶 Ｑ 。对 照 品 无 水 乙 醇 溶 液 （１ ｍｇ／ｍＬ）０．５ ｍＬ 于具 塞 试 管 中 ，加 入 无 水 乙 醇 ３．５ ｍＬ，再 加 入 氰 乙酸 乙酯 和 ０．５ 氢 氧 化 钾 乙醇 溶 液 各 １ ｍＬ，密 塞 ，摇 匀 ，于 ２０￣ ２６ Ｃ 室 温 置 暗 处 ３５ ｍｉｎ后 ，于 ６２０ ｎｍ 波 长 处 以 试 剂 为空 白测 定 吸 收 度 （ＯＤ），并 以此 吸 收 度 对 照
近 年 来 ，动 物 试 验 的 研 究 表 明 辅 酶 Ｑ 。有 抗 肿 瘤 作 用 ，临 床 上 用 于 医 治 晚 期 转 移 性 癌 症 患 者 有 一 定 疗 效 ．它 能 降低 血 压 ，用 于 充 血 性 心脏 病 的 治 疗 ．此 外 在 治 疗 坏 血 病 、十 二 指 肠 溃 疡 、 坏 死 性 牙 周 炎 、病 毒 性 肝 炎 以及 促 进 胰 腺 功 能 和 分 泌 也 有 显 著 效 果 ． 目前 ，辅 酶 Ｑ 。的 片 剂 已 有 效 地 用 于 治 疗 圆形 脱 发 症 和肺 气 肿 ，其 注 射 液 治疗 支 气 管 哮 喘 有 显 著 作 用 ，对 听 觉 障 碍 的 治 疗 有一 定 意 义 ，每 天 ３０ ｍｇ剂 量 用 于先 天 性 再 生 性 贫 血 ，可 明 显 增 加 红 细 胞 量 Ｌ１］．