基因工程期末复习材料

名词解释

1.基因工程：通过基因操作，将目的基因或DNA片段与合适的载体连接转入目标生物细胞，

通过复制、转录、翻译外源目的基因以及蛋白质的活性表达，使转基因生物获得新的遗传性状的操作。

2.基因克隆：指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程，目的在于获得大量的基因拷贝

3.载体：将外源基因引入宿主细胞进行复制或表达的运载工具。

4.受体细胞：能摄取外源重组DNA并使其稳定维持和表达，或有待于实施遗传改良的细

胞。

5.限制性内切核酸酶：在细胞内能够识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并对DNA

分子进行切割的一种酶。

6.黏性末端:指DNA分子在限制酶的作用下形成的具有互补碱基的单链延伸形成的末端结

构。

7.平末端:限制性内切核酸酶在识别序列的对称轴上切割，形成的片段末端。

8.同裂酶：指来源不同但识别相同靶序列的限制性内切核酸酶。

9.同尾酶：指来源各异，识别的靶序列也各不相同，但切割后能产生相同黏性末端的限制

性内切核酸酶。

10.酶的星号活性：当条件改变时，许多限制酶的识别位点会改变，导致识别与切割序列的

非特异性的现象。

11.DNA连接酶：是一种能够催化双链DNA上彼此相邻的3’-OH和5’-P形成磷酸二酯键

的核酸酶。

12.DNA聚合酶：是指在引物和模板的存在下，将dNTP连续地加到双链DNA分子引物链的

3’-OH末端，催化核苷酸聚合作用的酶。

13.反转录酶：依赖RNA的DNA聚合酶(RNA指导的DNA聚合酶)

14.克隆载体：用于携带DNA片段进入宿主细胞进行复制或保存的载体。

15.表达载体：可携带DNA片段进入宿主细胞进行复制并进行转录、翻译的载体。

16.穿梭载体：可在原核细胞中复制，也可在真核细胞中扩增和表达的载体

17.质粒：是一种存在于细菌或真菌染色体外的小型环状双链DNA 分子，可自主复制和表

达。

18.质粒的拷贝数

19.质粒的不相容性：两个质粒在同一宿主中细胞不能共存的现象。

20.α-互补：lacZ基因产物分为α链和β链两部分，只有当两者都存在时，才会表现出

酶活性，该作用称之为α-互补作用。

21.插入失活：在一个基因位点中插入外源DNA片段，从而使该基因活性丧失的现象。

22.多克隆位点（MCS）：包含多个单一限制性酶切位点的一段很短的DNA序列。

23.琼脂糖凝胶电泳：以琼脂糖为支持物，在适当的条件下对带电生物大分子进行电泳的技

术，主要用于DNA分子的分离、纯化和鉴定。

24.Southern杂交：是先将分布在琼脂糖凝胶上大小不同的变性DNA片段转移到滤膜上，

之后通过碱基互补配对，将滤膜与探针杂交，显色鉴定。

25.探针：指能与特定靶分子发生特异性相互作用，并能被特殊方法所检测的分子。聚合酶

链式反应：是以DNA为模板，在引物指导下由DNA聚合酶催化的对特定基因片断进行的体外扩增反应。

26.引物：预扩增核酸片段两端的已知序列，决定特异性。

27.简并引物：由于一个氨基酸可对应一个到多个密码子，因此一段氨基酸序列可以有多个

可能的编码序列，称之为简并序列。相应合成这一段序列作PCR扩增体系的引物。28.目的基因：是基因工程中克隆的目标DNA分子，是一段特定序列的DNA片段，而并不一

定是具有基因完整功能区的分子。

29.基因文库：又称DNA文库，是指某个生物的基因组DNA或cDNA片段与适当的载体在体

外重组后，转化宿主细胞，并通过筛选获得大量的阳性菌落(或噬菌斑)，所有菌落或噬菌斑的集合即为该生物的基因文库。

30.基因组文库：是将某一生物基因组DNA片段化并全部克隆后所获得的重组子群体的总

称，包含了这一生物的全部遗传信息。

31.cDNA文库：是将生物特定的组织器官或发育时期的全部mRNA反转录成cDNA，并全部克

隆成重组子，在该重组子群集中包含了其全部表达基因的转录本。

32.衔接物：用化学方法合成的一段8-12nt的含有一个或数个特定限制酶识别位点序列的

平端双链。

33.转化：指以质粒为载体，将外源DNA导入处于感受态的E. coli等原核宿主细胞，并使

其获得新表型的过程。

34.感受态细胞：处于能吸收外源DNA分子生理状态的细胞

35.感染：将以λ噬菌体DNA为载体的DNA重组分子包装成病毒颗粒感染受体菌的过程；

由噬菌体和细胞病毒介导的遗传信息转移过程也称为转导(transduction)。

36.转染：即转化与感染相结合，以噬菌体为载体，但不经过蛋白包装成病毒颗粒，而是用

DNA连接酶使噬菌体DNA环化，再通过质粒转化方式导入受体菌。

37.重组子：含有重组DNA分子的转化子。

38.筛选：经过各种方法将外源DNA分子导入受体细胞后，获得所需阳性克隆子的过程称为

克隆子的筛选。

39.阅读框架：是基因的编码区，包含从起始密码子至终止密码子之间的cDNA序列。

40.启动子：是RNA聚合酶识别、结合并起始转录的一段DNA序列。

41.增强子：是远距离调节启动子并提高转录效率的一段DNA序列。

42.终止子：是为转录提供终止信号的一段DNA序列。

43.沉默子：是远距离调节启动子以降低转录速率的一段DNA序列。

44.操纵子：由数个功能相关的结构基因及其调控区 (操纵基因、启动子及其它有调控功能

的单位)组成。

45.复制子：是一段包含复制起始位点和反式因子作用区在内的DNA区段。

46.植物转化受体系统：指用于转化的外植体通过组织培养途径或其它途径，能高效、稳定

地再生无性系，并能接受外源DNA整合，对转化选择抗生素敏感的再生系统。

47.胚胎干细胞:是从早期胚胎内细胞团中分离出的未分化、具有正常二倍体和发育全能性

的细胞。

48.细胞核移植技术:是将一个体细胞核移植到另一个体的卵细胞中去，最终产生一个与供

体细胞个体遗传性状一致的动物个体的技术。 P223-224

49.基因治疗:是指向目的细胞引入正常功能的可表达的基因，从而修正由于基因缺陷所造

成的遗传性疾病。

50.分子标记：能反映生物个体或种群间基因组中某种差异特征的DNA片段，表

现为核苷酸序列的任何差异，哪怕是单个核苷酸的变异。

问答及填空：

1.基因工程的技术流程:

•目的基因克隆