高效液相色谱基础理论测试题(答卷)

戴安公司高效液相色谱基础理论测试题

（答卷）

一．填空题

1. 高效液相色谱是一种以液体作流动相和固体微粒作固定相，待测组分在柱内

的两相之间进行高速分配和高效分离的柱液体色谱方法。

2. 在一定的色谱条件下，组分最大浓度点的洗脱时间（柱保留时间）是一定的，

可作为色谱法组分定性的依据。组分的洗脱浓度正比于色谱峰的峰高或峰面积，

这是色谱法定量分析的依据。3．正常色谱峰为对称形的正态分布曲线，不对称色谱峰有两种：前延峰和拖尾峰

4． 液相色谱中的相平衡参数为：分配系数（K ）；容量因子（k ）；

选择性因子（α）

二．名词解释及常用公式：

1. 保留时间 ：色谱流出峰浓度最大点的时间。

2．基线噪音： 基线起伏的最大波幅

3．基线漂移： 基线在一定时间内的变化幅度

4．检测限（敏感度）D （写出计算公式）：基线噪音的二倍 D=2·N/S

5． 理论塔板数（并写出计算公式）：组分在塔板之间瞬间达到分配平衡时其分配等温线与溶液浓度关联的热力学公式为：

6．色谱峰的对称因子（并写出计算公式）：

7. 容量因子(K ’)计算公式

k= tR-t0／t0

8. 分离度(R) 计算公式:

三． 判断题：

a. 确基线噪音和漂移是检测器稳定性的主要技术指标（ √ ）

b. 灵敏度是检测器的主要性能指标（√）

c. 检出限与噪音无关（×）

d. 要提高柱的分离效能，必须：增加柱长L（增加n），增加选择性α，

调节流动相的组成，控制容量因子k（√）

e. 溶解于流动相中的气体在色谱分离的过程中不会影响流动相的流速

和检测器的稳定性（×）

f. 分析一个k′值范围很宽的复杂混合物，恒溶剂洗脱是不能令人满意的。

可在分离的过程中连续改变流动相的组成，即所谓梯度洗脱( √)

注：（正确-----√；错误----×）

四．选择题：

i.反相色谱柱，如C18键合相的功能团是：（ c ）

a.极性的

b. 中极性的

c.非极性的

2．两相邻组分要达到完全分离，其分离度R s 必须：（c）

a. R s<< 1.0

b. R s =1.0

c. R s >1.0

3．紫外-可见光检测器是：（b）

a.通用型检测器

b. 选择性检测器

4．反相色谱方法开发过程中流动相的洗脱强度（有机相在溶剂中的比例）：

a. 洗脱强度从大逐渐变小（有机相在溶剂中的比例从多逐渐变少）

b. 洗脱强度从小逐渐变大（有机相在溶剂中的比例从少逐渐变多）

五．简答题：

1．液相色谱柱子所用的化学键合相填料主要有哪些类型？

答：㈠极性键合相（正相色谱）

㈡非极性键合相（反相色谱）

㈢键合离子交换剂（离子交换色谱）

2．反相色谱应用最广泛的流动相和固定相是哪些种类？

：

答：流动相：H2O（高极性纯水）→n-C6(正己烷) 最常用乙腈，甲醇和水固定相：C2→C18烷烃（R）键合相（疏水性）最常用C18柱

3．什么类型的样品需要采用梯度洗脱方法？

答：分析一个k′值范围很宽（即分析时间很长）的复杂混合物

4．用过缓冲盐流动相后，系统应作如何清洗？

答：先用5%甲醇的水溶液冲洗20倍柱体积（15cm柱子60ml，25cm柱子80ml）再用100%甲醇冲洗30mim（参照清洗程序）