两种石斛植株再生体系构建及形态发生的研究
铁皮石斛茎尖诱导原球茎再生体系的研究
铁皮石斛茎尖诱导原球茎再生体系的研究作者：王波崔翠顾颖慧来源：《南方农业·下旬》2015年第06期摘要以铁皮石斛茎尖为外植体进行高效再生体系建立实验，采用单因素实验研究不同基础培养基、激素浓度的配比、天然添加物对原球茎诱导、增殖、分化的影响，筛选出适合各培养阶段的培养体系配方，建立铁皮石斛组织培养快速繁殖体系关键词铁皮石斛；原球茎诱导；快繁体系中图分类号：S682.31 文献标志码：B 文章编号：1673-890X（2015）18-00-03铁皮石斛（Dendrobium candidum），又称黑节草，云南铁皮，兰科多年生附生草本植物，道家养生经典著作《道臧》誉其为“中华九大仙草之首” [1]。
由于人们对野生铁皮石斛的过度采挖，使得其野生资源已濒临灭绝，而铁皮石斛的种子极小且无胚乳，自然条件下萌发率极低，实生苗人工栽培相对比较困难；并且传统的分株、扦插等繁殖方式生长周期长，繁殖率低，远不能满足生产上的需要[2]。
为此，开展铁皮石斛的组织培养研究成为必然。
目前，有关铁皮石斛组织培养成功的报道很多[3]。
在铁皮石斛再生体系技术研究中，原球茎诱导是整个再生的体系中开始的环节，其诱导率的高低直接影响瓶苗的出苗率、生产成本。
本研究以铁皮石斛无菌苗作为外植体，对茎尖诱导原球茎的增殖和分化进行系统研究，以基础培养基、激素的浓度配比和天然添加物为因子，采用正交试验筛选出最优的培养基配方，以期缩短组培苗生长周期、提高组培苗质量和移栽成活率，为人工规模化繁殖和栽培提供技术依据。
1 材料与方法1.1 实验材料选用潍坊工程职业学院花卉研究所培育的铁皮石斛无菌苗作为组织培养的外植体材料1.2 实验方法选取健壮无污染的组培苗，在解剖镜下仔细剥离茎尖，逐层剥去外围组织，用解剖刀切取0.1～0.2 mm的茎尖，分别接种到诱导培养基中，经过一段时间的诱导，外植体膨大产生原球茎。
将产生的原球茎转入增殖培养基和分化培养基，经原球茎的增殖和分化形成新的植株。
铁皮石斛再生体系的建立
铁皮石斛再生体系的建立宋丽娟;冯玉杰;王爱英;胡鸢雷;祝建波【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2015(034)009【摘要】目的:采用一年生的铁皮石斛组培苗茎段为外植体,以茎段→原球茎诱导→原球茎增殖分化→幼苗壮苗生根为途径,对铁皮石斛组织培养进行系统研究,以期建立稳定的铁皮石斛再生体系.方法:主要以植物组织培养的方法,研究培养基中不同激素配比对铁皮石斛原球茎诱导、原球茎增殖分化、幼苗壮苗生根等方面的影响.结果:铁皮石斛原球茎诱导最佳培养基为MS+活性炭1.0 g/L+NAA 1.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率达31.33％;原球茎增殖最佳培养基为1/2 MS+香蕉100g/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 1.5 mg/L,此条件下培养的原球茎质地紧密,颜色墨绿,不易分化;原球茎分化最佳培养基为MS+香蕉100 g/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L;壮苗生根最佳培养基为MS+香蕉100 g/L+NAA 1.0 mg/L,生根率达75.00％.结论:在西北地区,有效建立铁皮石斛再生体系,对保护濒危植物和扩大铁皮石斛种植区域具有重要意义,同时,为大规模生产提供相关数据参考.【总页数】5页(P36-40)【作者】宋丽娟;冯玉杰;王爱英;胡鸢雷;祝建波【作者单位】石河子大学生命科学学院,农业生物技术重点实验室, 新疆石河子832000;石河子大学生命科学学院,农业生物技术重点实验室, 新疆石河子832000;石河子大学生命科学学院,农业生物技术重点实验室, 新疆石河子832000;北京大学生命科学学院, 北京100871;石河子大学生命科学学院,农业生物技术重点实验室, 新疆石河子832000【正文语种】中文【中图分类】S567.23【相关文献】1.铁皮石斛茎尖诱导原球茎再生体系的研究 [J], 王波;崔翠;顾颖慧2.铁皮石斛高效再生体系研究与应用 [J], 徐雪荣;姚全胜;雷新涛;罗冠勇;王树昌3.西藏野生金钗石斛高效植株再生体系的建立 [J], 袁芳;蔡熙彤;宋凯杰;兰小中;;4.霍山石斛"九仙尊1号"一步法再生体系的建立 [J], 戴亚峰; 王诗文; 张恩亮; 李诚5.大晶帽石斛再生体系建立研究 [J], 吴佩珂; 林蔚; 李菁; 王雪妮; 范正阳; 孙文忠; 何碧珠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
铁皮石斛与霍山石斛杂交后代性状分析
铁皮石斛与霍山石斛杂交后代性状分析作者：***来源：《热带作物学报》2020年第08期摘要：为选择杂交后代优良株系，对铁皮石斛（Dendrobium officinale）、霍山石斛（Dendrobium huoshanense）及其杂交F1代株系的组培苗及栽培苗生长量、表型性状及多糖含量进行测定和分析。
结果表明：各株系的组培生长量差异显著，变幅为0.15～0.69 g，超亲株系占75.00%，移栽生长量变幅为0.03～0.44 g，超亲株系占75.00%;组培苗8个表型性状表现为超亲，占总考察性状的88.89%;栽培苗4个表型性状表现为超親，占总考察性状的44.44%，各株系多糖含量与亲本差异显著，7个株系的多糖含量表现为超亲，占总考察株系的87.50%。
可见，利用铁皮石斛与霍山石斛杂交是改良石斛产量与品质的有效途径之一。
关键词：铁皮石斛;霍山石斛;杂交;表型性状;多糖中图分类号：S567 文献标识码：AAbstract： To select the best hybrid lines， the growth， phenotypic traits and polysaccharide content of Dendrobium officinale， Dendrobium huoshanense and their F1 hybrid lines were determined and analyzed. The growth of tissue culture was significantly different in each line， in the range 0.15-0.69 g， superior to their parental strains accounting for 75.00%. The growth of the transplanting seedlings was ranged for 0.03-0.44 g， superior to their parental strains， accounting for 75.00%. Eight phenotypic traits of the tissue culture seedlings showed superior to their parents，accounting for 88.89% of the total investigation. In the transplanting seedlings， four phenotypic traits of the cultivated seedlings showed superior to their parents， accounting for 44.44% of the total investigation. The content of polysaccharides in each line was significantly different from that of their parents. The content of polysaccharides in seven lines was superior to their parents， accounting for 87.50% of the total lines studied. In summary， interspecific hybridization is one of the effective ways to improve the output and quality of Dendrobium.Keywords： Dendrobium officinale; Dendrobium huoshanense; hybridization; phenotypic character; polysaccharideDOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2020.08.010中药石斛为石斛属多种药用植物的总称，为我国传统名贵中药，具有滋阴清热、益胃生津、润肺止咳及清音明目等功效。
石斛兰茎段组织培养再生体系的初步建立
北方园艺2010(8):129～131・生物技术・第一作者简介:张彦妮(19742),女,博士,副教授,现主要从事园林花卉的教学及研究工作,研究方向为园林花卉的繁殖栽培及育种。
E 2mail :zhangyanni808@ 。
基金项目:黑龙江省博士后科研启动金资助项目(LBH 2Q08156)。
收稿日期:2009-12-15石斛兰茎段组织培养再生体系的初步建立张彦妮1,钱 灿1,陈立新2(1.东北林业大学,黑龙江哈尔滨150040;2.黑龙江省农科院园艺分院,黑龙江哈尔滨150069) 摘 要:以石斛兰无菌苗茎段为外植体,通过在MS 基本培养基中加入不同浓度的62BA 和NAA ,筛选最佳培养基配方,从而初步建立石斛兰茎节的组织培养再生体系。
结果表明:诱导茎节分化的最佳培养基是MS +62BA 0.5mg/L +NAA 0.1mg/L ,分化率为89.5%;最佳增殖培养基是MS +62BA 2mg/L +NAA 0.2mg/L ,增殖倍数为5.16;最佳生根培养基是1/2MS +62BA 0.5mg/L +NAA 0.1mg/L ,生根率为100%;移栽后成活率为97%。
关键词:石斛兰;茎节;组织培养中图分类号:S 682.310.4+3 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2010)08-0129-03 石斛属(Dendrobium )是兰科植物中最大的属之一,有1500～1600个原生种,主要分布于东亚、东南亚及澳大利亚等地区。
我国大约有60种石斛兰,北自秦岭、淮河以南,南至海南岛南部的崖县都有分布,大多数种类集中在北纬15°30′～25°21′之间,主要分布在云南、广西、贵州和台湾等省(区),大多为热带附生兰,在自然界多附生于树干和岩石上。
石斛兰(Demdrobium nobile )花姿优美,色彩鲜艳,盆栽摆放阳台、窗台或吊盆悬挂客室、书房,凌空泼洒,别具一格。
霍山石斛“九仙尊1号”一步法再生体系的建立
霍山石斛“九仙尊1号”一步法再生体系的建立霍山石斛是一种珍贵的中药材，具有滋补养颜、强身健体的作用。
由于其生长缓慢、生态环境需要严格控制等特殊因素，导致其种植难度较大，且数量有限。
为了解决这个问题，人们开展了一系列的研究与探索，最终确定了一种有效的石斛再生体系——九仙尊1号。
九仙尊1号是在营养基础上结合激素促进技术建立的一种霍山石斛再生体系。
采用的是植物组织培养技术，通过离体培养法，将霍山石斛茎段培养于含有各种营养物质的培养基中，通过添加适量的生长激素和调节剂，可以促进其生长和分化，最终形成新的幼苗和植株，实现石斛种植的快速繁殖和大量生产。
九仙尊1号的建立经过了一系列的实验和验证。
选择具有较高生长速度和较好的生命力的雄花蕊，进行无菌培养。
然后，通过培养基中添加不同浓度的生长激素和调节剂，寻找适宜的生长条件和激素浓度，促进芽体的分化和扩增。
接着，将培养好的幼芽进行扩繁，形成大量的幼苗。
将这些幼苗移植到适宜的土壤和温度条件下进行生长，获得健壮的石斛植株。
九仙尊1号的建立对于霍山石斛产业的发展具有积极的意义。
它可以解决石斛种植难度大、数量有限的问题，提高石斛的产量和质量。
九仙尊1号的建立为石斛的大规模生产提供了可行的技术支持，有利于提高石斛的市场供应能力和竞争力。
九仙尊1号的建立可以推动石斛的种植技术的进一步研究和发展，为其他珍贵中药材的种植提供经验和借鉴。
九仙尊1号的建立还面临一些挑战和问题。
需要进一步优化培养基的成分和激素浓度，以提高培养的成功率和幼苗的养殖速度。
要解决因培养条件不稳定而导致的幼苗的死亡率较高的问题。
还需要加强对九仙尊1号栽培技术的宣传和推广，提高种植者的认可度和接受度。
霍山石斛“九仙尊1号”一步法再生体系的建立
霍山石斛“九仙尊1号”一步法再生体系的建立霍山石斛（Dendrobium huoshanense）是一种具有药用价值的兰花植物，广泛栽培于我国南方地区。
由于过度采摘和破坏，野生霍山石斛资源急剧减少，且种子繁殖效率低，限制了其种质资源的保护和繁育利用。
建立一种高效的再生体系对霍山石斛的种质资源保护和繁育利用具有重要意义。
近年来，植物再生体系的研究取得了显著进展，包括生物技术方法和激素处理等。
针对霍山石斛的再生体系研究还比较有限。
在本文中，我们将介绍一种基于单芽体再生的霍山石斛“九仙尊1号”一步法再生体系的建立过程和方法。
我们选择了健康的霍山石斛幼苗作为外植体材料。
幼苗茎段的鳞茎发育旺盛，含有大量的初级代谢物质和活性成分，适合用于再生体系的建立。
将外植体材料表面进行消毒处理，然后将其切割成10-15mm长的茎段，并进行无菌处理。
接下来，我们采用激素处理的方法促进茎段愈伤组织的诱导和分化。
前期实验表明，2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）对霍山石斛幼苗茎段的愈伤组织诱导效果较好。
我们初步确定了2,4-D的最佳浓度和处理时间。
对于霍山石斛“九仙尊1号”，最佳的2,4-D浓度为2.0 mg/L，处理时间为30天。
将茎段置于含有2,4-D的培养基中，进行激素处理。
经过培养一段时间后，我们观察到茎段愈伤组织开始出现，并且逐渐增多。
此时，我们将这些愈伤组织再次分离并转移到含有较低浓度2,4-D的培养基中，继续培养。
在第二次培养过程中，我们发现愈伤组织开始分化成小芽，并且逐渐形成根系。
这些小芽和根系可以作为小苗独立生长。
我们将这些小苗转移到含有较低浓度激素的培养基中进行进一步培养。
经过一段时间的培养，我们观察到这些小苗逐渐生长壮大，并且开始形成茎段和鳞茎。
这些茎段和鳞茎可以用于进一步的扩繁和种质资源的保护。
我们成功建立了基于单芽体再生的霍山石斛“九仙尊1号”一步法再生体系。
通过激素处理促进愈伤组织的诱导和分化，最终获得健壮的小苗，并成功培养出茎段和鳞茎。
秋石斛茎段离体再生体系的建立
秋石斛茎段离体再生体系的建立游云飞【摘要】以当年新生、长势饱满茎段为外植体,进行秋石斛植株再生体系研究.结果表明,0.1％升汞消毒10 min,消毒效果最佳;最佳芽增殖培养基为:MS+2 mg?L-16-BA+0.1 mg?L-1 NAA+80 g?L-1土豆泥+1 g?L-1蛋白胨+1.5 g?L-1活性炭,增殖系数达4.8,无褐化,芽苗生长健壮;最佳生根壮苗培养基为:MS+0.8 mg?L-1IBA+0.1 mg?L-1 NAA+80 g?L-1土豆泥+50 g?L-1活性炭,生根率可达95％,根系发达.【期刊名称】《亚热带农业研究》【年(卷),期】2018(014)004【总页数】5页(P271-275)【关键词】秋石斛;新生侧芽;中部茎段;再生体系;萌芽率【作者】游云飞【作者单位】福州植物园,福建福州350012【正文语种】中文【中图分类】Q962秋石斛(Dendrobiurn hybrida)为兰科石斛属植物，原产于东南亚和西太平洋岛屿，大多数生长于热带潮湿的地方，常附生于树上或岩石上，属附生兰[1-3]。
我国秋石斛主要分布在西南、华南、台湾等热带、亚热带地区[4-5]。
秋石斛花色鲜艳，花序着花多，花期长达1个月且耐储运，已成为新的兰科切花品种[6]。
目前秋石斛主要通过分株繁殖，繁殖速度慢且成活率较低[7]。
已有的秋石斛组培研究大多以茎尖、叶片、茎段及花梗等作为外植体诱导原球茎，但由于所采用的外植体较小，难以大量获取且褐化严重，导致诱导增殖比较困难，后代出现变异的概率较大[5-7]。
本试验以比较容易获取的秋石斛茎段为外植体，拟建立其茎段组培快繁体系。
1 材料与方法1.1 供试材料试材于2017年10月取自福州于山风景区兰圃，取其生长健壮、饱满、无病虫害的秋石斛当年新生侧芽中部茎段为外植体。
将外植体用湿纱布包裹，放入保鲜袋并存放于4 ℃冰箱内备用。
1.2 试验方法1.2.1 外植体处理将当年生健壮、饱满秋石斛植株茎节上的叶片去除，留约3 cm叶鞘，洗净；以节为单位切成段，留5 cm左右，上半段约留2 cm，下半段约留3 cm，用自来水清洗干净；加适量洗衣粉，自来水冲洗30 min，期间不断震荡。
铁皮石斛的脱分化与再分化研究
生物技术综合实验题目：铁皮石斛的脱分化与再分化研究Title：Dedifferentiation and re-differentiation of Dendrobium学院生命与环境科学学院年级专业2011级生物技术学生姓名丁铭学号110153322指导教师赵军完成日期 2014 年 5 月目录摘要关键词正文一、铁皮石斛的概述及其药用价值--------------------------------------4二、自然生长和繁殖条件----------------------------------------------4(一)、铁皮石斛的繁殖特性----------------------------------------4(二)、自然生殖条件----------------------------------------------4(三)、繁殖状况--------------------------------------------------5 三、实验操作-------------------------------------------------------5(一)、培养基的配制---------------------------------------------5（二）、铁皮石斛的脱分化与再分化---------------------------------6(三)、观察实验结果---------------------------------------------8四、结论-----------------------------------------------------------8 参考文献【摘要】铁皮石斛为石斛属珍稀濒危药用植物,药用部分是新鲜或干燥茎,具有益胃生津、滋阴清热的功效。
铁皮石斛的种子极小、无胚乳,自然条件下需与某些真菌共生才能萌发,很难用实生苗栽培,本文主要介绍通过铁皮石斛外植体的脱分化与再分化的研究来实现铁皮石斛的组织培养，从而应用到现实中来扩大铁皮石斛的生产，以便铁皮石斛的药用价值能够得到更好的利用。
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两种石斛植株再生体系构建及形态发生的研究
本文介绍了石斛的利用价值,综述了国内外在石斛离体培养和快速繁殖方面
的研究现状。
在此基础上,以大苞鞘石斛和美花石斛为材料,进行再生体系的构建和形态发生方面的研究与探讨,主要结论如下:①侧芽灭菌适宜的方法:75%的酒精浸泡30s,无菌水冲洗2-3次,再用0.1%的升汞(加两滴Tween20 )溶液消毒
8-10min,用无菌水冲洗4-5次。
②大苞鞘石斛种子萌发的适宜培养基为MS+6-BA(0.5-1.0)mg/L+NAA0.1
mg/L或者选用N6+6-BA (2.0-3.0mg/L)+NAA0.4mg/L。
适宜大苞鞘石斛不定芽诱导和增殖的培养基分别为:MS或N6+6-BA4.0mg/L+NAA0.5mg/L和1/2 MS+
6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L。
美花石斛芽诱导和增殖的适宜培养基分别为:MS或1/2MS+6-BA 3.0mg/L + NAA 0.3或0.4mg/L和MS + 6-BA 6.0mg/L+NAA0.2 mg/L。
③大苞鞘石斛适宜的拟原球茎诱导和增殖分化的培养基分别为MS+6-BA
1.0mg/L+NAA0.5mg/L+TDZ0.025mg/L+CH1g/L+CM10%(v/v)或MS+6-BA0.5
mg/L+NAA0.5mg/L+KT2.0mg/L+CH1g/L+CM10%(v/v)。
④大苞鞘石斛愈伤组织诱导的适宜培养基为1/2MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D
2.0mg/L,适宜美花石斛愈伤组织诱导的培养基为1/2MS+ 6-BA1.0mg/L + 2,4– D 0.5 mg/L.以大苞鞘石斛无菌苗进行愈伤组织诱导时发现,只有幼嫩组织才能诱
导出愈伤,对美花石斛愈伤组织的诱导也得到相似结果,成熟茎段及叶片很难脱
分化。
⑤石斛植株再生有两种途径:直接发生和间接发生。
本实验通过组织细胞学方法研究拟原球茎和愈伤组织发生过程的形态变化,发现诱导出的愈伤组织可分为两种,即胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织。
非胚性
愈伤组织边缘的细胞逐渐会向胚性愈伤组织状态转化,两种愈伤组织往往同时发生。
胚性愈伤组织上可直接形成体细胞胚,体细胞胚与胚性愈伤组织之间通过胚柄结合,体胚发育成原球茎后很容易从胚性愈伤组织上脱落下来。