医学细胞生物学复习

显微镜类型 分辨本领 光源 透镜
成像原理
光学显微镜 200nm 可见光 玻璃透镜 利用样本对光的吸收形成 明暗反差和颜色变化
电子显微镜 0.2nm 电子束 电磁透镜 利用样品对电子的散射和 投射形成明暗反差
超薄切片：
电子束穿透力很弱，须将标本制成40-50nm（小于100nm）的超薄切片。 方法： 透射电镜观察的组织细胞样本在超薄切片之前常用戊二醛和四氧化锇 双重固定；丙酮逐渐脱水；环氧树脂包埋；切片；采用柠檬酸铅和醋 酸双氧铀等进行染色。
细胞重要生命活动： 细胞增殖及其调控 细胞分化与肿瘤细胞 细胞凋亡
第一章 绪 论
细胞生物学概念:
细胞生物学是以细胞为研究对象, 从显微水平、亚显微水平、分子水平 等三个层次，以动态的观点, 研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的 起源与进化和各种生命活动规律的学科。
细胞学说的内容:
一切生物体都是由细胞组成的； 细胞是生命的基本组成单位； 一切细胞只能来自原来的细胞(的分裂)
料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光。 细胞操作中用作固定液的是：
醇类： 甲醇，乙醇 醛类：甲醛，戊二醛等
二、细胞组分的分析方法：
离心分离方法： 利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有：差速离 心法、密度梯度离心法。
1. 差速离心： 利用不同离心速度所产生的不同离心力，将亚细 胞组分和各种颗粒进行分开的方法。
progressively higher speeds will fractionate homogenates of cells into their components. In general, the 20000g,20min smaller the subcellular component, the greater is the centrifugal force required to sediment it. Typical values for the various centrifugation 80000g,1h steps referred to in the figure are low speed: 1,000 times gravity for 10 minutes medium speed: 20,000 times gravity for 20 minutes high 150000g,3h speed: 80,000 times gravity for 1 hour very high speed: 150,000 times gravity for 3 hours.
velocity
数值孔径(又叫镜口率) 是物镜和聚光镜聚光能力的主要技术参数，是 判断两者(尤其对物镜而言)性能高低的重要标志。 数值孔径越大，进入物镜的光越多；介质的折射率越大，则数值孔径 越大，这些都可以使分辨率提高。
放大率：最终成像的大小与原物体大小的比值。 对显微镜来说，最重要的性能参数是分辨率，而不是放大倍数。
自然界中最小最简单的生命体是病毒。
原核细胞和真核细胞比较：
(原核细胞主要为无丝分裂)
第二章 细胞生物学研究方法
一、显微成像技术：
普通光学显微镜以可见光为光源，荧光显微镜的光源是以紫外 线为光源，而电子显微镜是以电子束为光源。
电子显微镜按工作原理和用途的不同可分为透射电镜和扫描电 镜。扫描电镜：观察样品表面的结构特征； 透射电镜：观察 样品的内部精细结构。
透射电镜的样品制备包括固定、脱水、包埋、切片、染色五py/荧光显微镜
荧光显微镜是以紫外线为光源， 用以照射被检物体，使 之发出荧光。利用一定波长的光激发标本发射荧光，然 后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置，或对发光
物质进行定性和定量研究。
1. 直接发光物质：如GFP荧光蛋白； 2. 另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
主要内容
细胞结构与功能： 细胞核、染色体 生物膜与细胞器的研究 细胞质膜、内膜系统、线粒体等 细胞骨架体系的研究 微丝、微管、中间纤维、Septin 细胞连接与细胞外基质
2. 密度梯度离心：利用各组分在介质中的沉降系数不同，使各组 分形成区带。介质溶液是具有密度梯度、高溶解性和化学惰性 的溶液。分为速度沉降和等密度沉降两种，前者主要用于分离 密度相近而大小不一的组分，后者用于分离不同密度的细胞成 分。
差速离心
Cell fractionation by centrifugation. 1000g,10min Repeated centrifugation at
R = 0.61 λ/n Sinα= 0.61 λ/NA
分辨率: 指能分辨出的相邻两个质点间最小距离的能力，这种距离称为分辨距 离，它受到光衍射性质的限制。分辨率由光源的波长、物镜的镜口角、 介质折射率三种因素决定。 λ=照明光源的波长。 n=聚光镜和物镜之间介质的折射率，空气为1，油为1.5。 α=样品对物镜角孔径的半角， sinα的最大值为1。
细胞生物学要点
一、名词解释： 4分/题 X 5题 = 25分
二、填空题： 1分/空 X 30空= 30分
三、选择题： 1分/题 X 20题= 20分
四、问答题： 10分/题 X 3题= 30分
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
提出者：德国的动物学家施莱登/Schleiden、植物学家施旺/Schwann 病理学家/魏尔肖Rudolf Virchow进行补充。
第一个利用显微镜观察细胞的人：英国人胡克/Robert Hooke 第一个利用显微镜观察到活细胞的人：荷兰学者列文虎克 /Leeuwenhoek
支原体是最小最简单的细胞，直径只有0.1-0.3μm。它具有的唯 一细胞器是核糖体。