抗疲劳实验方法
桑椹抗疲劳作用的实验研究

2 结 果
2 0 ,此 为 中剂 量 组 ;最 后 取 中剂 量组 溶 液 10 , 0 ml 0 ml
以蒸馏水定容至 2 0 l 0 m ,此 为低 剂量组 。所 有试验 动 物
2 1 负重 游 泳试 验 :桑 椹粉 对 小 鼠负 重 游 泳 时 间 的 .
关键 词 桑 椹 抗 疲 劳 实验 研 究
桑椹 为双子 叶植 物桑 树结 的果实 。桑 椹 人药 ,始
载 于 唐 朝 的 《 本 草 》 桑 椹 味 甘 性 寒 , 人 心 肝 、 肾 唐 。
法 ” 中 负 重 游 泳 试 验 、血 清 尿 素 测 定 ( 乙 酰 一 法 ) 二 肟 、
步 开发桑 椹的保健 功 能 ,笔者 进行 了桑椹 抗疲 劳 作
用 的 实 验 研 究 ,现 报 道 如 下 。
1 材 料 与 方 法
9 ri,休 息 6 mi ,摘 眼球 采血 0 5 0 n a 0 n后 . ml( 加 抗凝 不
剂) 。置 4 冰 箱 约 3 , 待 血 液 凝 固 后 , 20 pn mi ℃ h 0 0 r/ n
肝 糖原 测 定 ( 酮 法 )和 乳 酸测 定 的规 定 方 法 执行 。 蒽
灌 胃容 量 2 mlK B 0 / g w,每 天 1 ,连 续 3 次 0天 。 1 4 1 负 重 游 泳 试 验 :末 次 给 予 受 试 物 3 mi . . 0 n后 , 置 小 鼠 在 游 泳 箱 中 游 泳 , 水 深 3 c ,水 温 2 ℃ ± 5m 5
11 样品 :桑椹 粉 由杭 州 承 文堂 医药 生 物 有 限 公 司 . 提 供 ,人 体 推 荐 摄 人 量 为 1 4 / / ,相 当 于 0 0 3 .g 人 天 . 2 gk B / ( 体 重量 以 6k /g w d 人 O g计 ) 受 试 样 品 以 蒸 馏 。 水 配 制 成 试 验 所 需 的浓 度 。 1 2 动 物 及 分 组 :雄 性 昆 明 种 小 鼠 10只 ,体 重 1 ~ . 6 8
东革阿里提取物抗疲劳作用的实验研究

东革阿里提取物抗疲劳作用的实验研究程贝;柳琴【期刊名称】《药学与临床研究》【年(卷),期】2015(000)004【摘要】目的:探讨东革阿里提取物对小鼠的抗疲劳作用。
方法:选取60只小鼠随机等分为5组,分别为:东革阿里高、中、低剂量组,分别灌胃1×103、2×103、6×103 mg·kg-1提取液;阳性对照组灌胃0.6×103 mg·kg-1红景天提取物;阴性对照组灌胃同等体积生理盐水。
给予连续灌胃28 d后对小鼠进行力竭游泳时间测定,同时测定运动小鼠血液中血红蛋白、乳酸、肝糖原含量及乳酸脱氢酶的活性。
结果:与阴性对照组比较,东革阿里提取物高、中剂量组能使小鼠游泳时间显著延长,血红蛋白浓度、乳酸脱氢酶活性显著提高,血液中乳酸含量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);东革阿里提取物的3种剂量组都能够显著提高肝糖原的含量(P<0.05)。
结论:东革阿里提取物对小鼠具有良好的抗疲劳功效,其中高剂量组效果最好。
%Objective: To discuss the anti-fatigue function of Eurycoma longifolia extracts in mice. Methods: Sixty mice were randomly divided into the Eurycoma longifolia extract high, medium and low dose groups (the mice were filled with 6×103 mg·kg-1, 2×103 mg·kg-1 and 1×103 mg·kg-1 of extract liquid, respectively), the positive control group (mice were filled with rhodiola rosea p.e.) and the negative control group (mice were filled with physiological saline at the same volume). The swimming exhaustion times of these mice were tested after 28 days of filling, and the contents of hemoglobin, lactic acid and hepatic glycogen inthe blood and the activities of lactic dehydrogenase were detected. Results: Compared with the negative control group, the swimming exhaustion time of the high and medium dose Eurycoma longifolia groups of mice had been significantly prolonged, the concentration of hemoglobin and the activity of lactate dehydrogenase increased significantly, the level of blood lactate decreased significantly, the difference be-tween them had statistical significance (P<0.05); Compared with the positive control group, the difference between them had no statistical significance (P>0.05). All groups of Eurycoma longifolia extract can signifi-cantly improve the content of hepatic glycogen (P<0.05). Conclusion: Eurycoma longifolia extract has sig-nificant anti-fatigue effect, and the high dose group has the best effect.【总页数】3页(P358-360)【作者】程贝;柳琴【作者单位】湖北省新华医院药剂科,武汉 430015;武汉市普仁医院药剂科,武汉 430081【正文语种】中文【中图分类】R965.1【相关文献】1.超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法快速分析东革阿里化学成分 [J], 陈秀明; 周璟明; 林斌; 郑孝贤; 王海龙; 陈楠楠; 詹清; 方东升2.东革阿里在海南的初期物候观察和生长规律研究 [J], 杨胜莲;董晓娜;陈培;陈显臻3.东革阿里致急性肾损伤一例 [J], 杨崇猛;赵艳红;公春艳;卢永新;孙阳;童宗武;高兴连4.东革阿里致急性肾损伤一例 [J], 杨崇猛;赵艳红;公春艳;卢永新;孙阳;童宗武;高兴连5.东革阿里不定根提取物的抑菌活性研究 [J], 范明智;安晓丽;李学峰;吴晓晗;朴炫春因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
电线抗疲劳试验

文件编号
Page 1 of 1
工 作 指
引
名称: 电线抗疲劳试验
1 应用范围
1.1 适用于所有产品的电线的抗疲劳测试
2 参考文件
2.1 PS
3 定义
无
4 职责
4.1 品质部主管:负责对该指引施行情况及施行效果的审核
4.2 品质工程师:负责监督和指导该指引的实行
4.3 实验室测试员:负责该指引在日常工作中的实施
5 资历及培训
进行可靠性测试的人员(试验员)需经过提前的培训,或有认可经验
6 程序
6.1 静拉力测试
6.1.1 将电线一头固定,在电线另一头施加40N 的砝码;
6.1.2 保持吊拉10秒,之后放开;
6.1.3 判定
电线本身应无破损、拉断分离和功能不良现象,如有,则判不合格。
6.2 冲击测试
6.2.1 将电线一头固定,另一头在距离固定处25cm 的电线处拴住0.26kg 的砝码;
6.2.2 砝码从电线固定处自由落下,即经0.64J 能量的冲击,如此连续3次;
6.2.3 判定
电线应无明显损伤和功能不良现象,如有,则判不合格。
舒缓水解肽抗疲劳功能实验研究

1 f l td H s i lo h n o g U ies y o C S a d n r vn e Jn n 2 0 1 , hn ; . a d n c d my o . f i e o pt f a d n n v ri f M, h n o g P o ic , i a 5 0 4 C ia 2 S n o g A a e f A ia a S t T h
u to c wi c n mie s mmig a t cd a d u e i o e n u n e n ,lci a i n ra nt g n if e c .Re u t:Thsp o u ti ih o d n wi c r l s ls i r d c n weg tla ig s mmig t o n i t me r ss aiu e th d o vo sa t-aiu f c.Ob e e h n u n e o h sp o u to o y weg t b iu l,ti e itft e ts a b iu ni ft e e e t g g s r d t e i e c fti rd c n b d ih,o vo sy h s v l f p o u ti o 1 a sc u d ma e weg tg i ,b tn inf a tdfee c fe 0 d y . lc g n tssfu d t a rd c n 5 t 0 d y o l k ih an u osg ic n i r n e atr 1 a s On gy o e e t o n h t i f
不同咖啡对小鼠抗疲劳实验结论

不同咖啡对小鼠抗疲劳实验结论
小鼠抗疲劳实验是一种常用的研究方法,用于评估不同咖啡因含量的咖啡对小鼠体力和耐力的影响。
以下是一些可能的结论:
低咖啡因咖啡可能具有一定的抗疲劳作用。
这是因为低咖啡因咖啡中的咖啡因含量较低,可能会减少小鼠的焦虑和疲劳感。
高咖啡因咖啡可能会导致小鼠的疲劳感增加。
这是因为高咖啡因咖啡中的咖啡因含量较高,可能会刺激小鼠的中枢神经系统,导致其产生疲劳感。
不同咖啡因含量的咖啡可能会对小鼠的代谢和心血管系统产生不同的影响。
例如,高剂量的咖啡因可能会导致小鼠的心率加快、血压升高等反应,从而影响其身体的健康状况。
需要注意的是,以上结论仅为可能的情况,具体结果还需要根据实验设计和数据分析进行进一步验证。
此外,不同种类的小鼠也可能会对咖啡因的反应产生差异,因此需要在实验中控制其他因素的影响。
抗疲劳实验方法范文

抗疲劳实验方法范文实验目的:评估和比较不同物质和措施对人体抗疲劳的效果。
实验材料与设备:1.实验室环境:安静、明亮、通风良好的实验室。
2.测试设备:-计时器或时钟-疲劳评估表或问卷-生物反馈仪器(如心率检测仪、皮肤电阻计等)-实验材料:例如抗疲劳药物、能量饮料、运动设备等实验步骤:1.主题招募:招募一些健康且无特殊疾病的志愿者参与实验。
提供足够的信息,确保他们清楚实验的目的和过程,并签署知情同意书。
确保参与者符合包括年龄、性别和生理健康等方面的试验要求。
2.前期准备:-随机分组:将参与者随机分成不同的组,例如药物组、运动组和对照组。
-调整状态:让参与者进行适当的休息,保证他们在实验开始时处于相对放松和无疲劳状态。
3.实验操作:-记录基本信息:测量参与者的基本生理参数,如心率、血压等。
-记录基准数据:评估参与者在正常状态下的疲劳水平,使用标准化的疲劳评估工具,如疲劳问卷调查或生物反馈仪器。
-操作组:对于药物组,在适当的剂量下给参与者服用抗疲劳药物。
对于运动组,在恰当的环境和设备下进行适度的运动,如跑步或骑自行车。
对于对照组,不给予任何干预。
-反复测试:在实验运行的一段时间后,适时重新评估疲劳水平。
可以使用同样的疲劳评估工具,例如重复疲劳问卷调查或记录生物反馈指标。
-停止实验:在实验计划的结束时间到达或参与者表示无法坚持时,停止实验。
4.数据分析:-比较组间差异:分析不同组之间在疲劳水平和恢复能力方面的差异,可以使用统计学方法,如方差分析或t检验。
-检查干预效果:对于操作组,比较实验前后的疲劳水平差异,以评估干预的效果。
-结果解读:根据数据分析结果,评估不同物质和措施对人体抗疲劳的影响,并得出结论。
5.结果呈现:将实验结果整理成实验报告或学术论文的形式,并分享给相关的研究机构、医学界或其他相关领域的专业人士。
以上是一个基本的抗疲劳实验方法的例子,但具体的实验方法可能因实验目的、对象和条件的不同而有所变化。
功能饮料抗疲劳作用的实验研究

表 3 功能饮料对小鼠血乳酸的影响( X珚± SD)
组别
剂量
血乳酸( mmol / L)
( mL / kg ·bw)
动物数 ( 只)
游泳前
游泳后 0min
游泳后 30min
对照组 0 低剂量组 12.5 中剂量组 25 高剂量组 75
10 5.4 ± 0.7 9.7 ± 0.6 8.1 ± 0.7 10 5.7 ± 0.8 9.1 ± 1.0 7.3 ± 0.6** 10 5.4 ± 1.2 8.8 ± 0.6** 6.4 ± 1.1** 10 5.5 ± 0.6 8.4 ± 0.9** 5.8 ± 1.1**
糖原的系数。
1.3 数据处理
用 SPSS10.0 for windows 进行数据统计分析。
2 结果与分析
2.1 功能饮料对小鼠体重的影响
由表 1 所示,小鼠服用功能饮料 30d 后,小鼠体重
与对照组比较无显著差异( p > 0.05)。功能饮料不会
引起体重过快增长,也不会抑制小鼠的正常发育。
168
3000r / min 离心 15min。小心倒掉上清液并使试管倒
立放置 10min。用 2mL 蒸馏水溶解糖原。试剂空白
管:吸 2mL 蒸馏水到干净离心管标准管:吸 0.5mL 葡
萄糖标准液(100mg / dL) 和 1.5mL 蒸馏水放入同样的
管子。将 10mL 蒽酮试剂加入各管,煮沸 15min,然后
nitrogen(p < 0.05 or p < 0.01).75mL / (kg·bw)functional drink could decrease the consumption of hepatic glycogen
content compared with that in control group (p < 0.01).Conclusion:Functional drink had an anti-fatigue effect.
山楂多糖抗疲劳作用实验研究

山楂多糖抗疲劳作用实验研究作者:唐礼可来源:《云南中医药杂志》2008年第02期摘要:目的:观察山楂多糖对小鼠的抗疲劳作用。
方法:通过对小鼠负重游泳试验、小鼠常压耐缺氧试验及小鼠非负重游泳后血清尿素氮、肝糖原、血乳酸的含量测定,观察山楂多糖的抗疲劳作用。
结果:山楂多糖能增加小鼠负重游泳时间,增加小鼠缺氧耐力,降低小鼠血清尿素氮、血乳酸的含量,提高肝糖原含量。
结论:山楂多糖对小鼠具有显著抗疲劳作用。
关键词:山楂多糖;抗疲劳;实验研究中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1007-2349(2008)02-0032-02山楂为蔷薇科山楂属植物(Rosaceae Crataegus)的果实,在中国有悠久的食用和药用历史,具有健脾、开胃、消食等多方面药理作用。
常加工成具有抗疲劳、降血脂、健脾开胃等功能的保健食品。
山楂中多糖是一类重要的活性物质,研究报道较少。
本文对山楂多糖的抗疲劳作用进行了初步研究。
1、实验材料1、1动物雄性ICR小鼠,清洁级,体重18~22g,浙江省实验动物中心提供(许可证号:SCXK(浙)2003-0001),饲养于浙江大学实验动物中心。
1、2药品与试剂山楂多糖按照文献方法:鲜山楂→切块→称质量→加水浸提→过滤→滤液→浓缩→95%乙醇沉淀→离心→沉淀复溶于水中→95%乙醇沉淀→离心→沉淀用无水乙醇、丙酮反复洗涤→水浴加热干燥→多糖粗品。
血清尿素氮测定试剂盒、肝糖原测定试剂盒、血乳酸测定试剂盒,南京建成生物工程研究所生产,批号为20051116。
其它所用试剂为分析纯。
2、实验方法2、1小鼠游泳试验小鼠随机分为对照组、高剂量组(300mg/kg)、中剂量组(100mg/kg)、低剂量组(30mg/kg),每组10只;各组按0.2ml/10g体积灌胃给药(或生理盐水),每天1次,连续15d。
于末次给药30min后,小鼠进行游泳试验,水深30cm,水温(30±1)℃,鼠尾根部负荷5%体重的铅块,记录小鼠自游泳开始至沉入水下10s不能浮出水面的时间。
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抗疲劳作用检验方法1 负重游泳试验1.1 原理运动耐力的提高是抗疲劳能力加强最有力的宏观表现,游泳时间的长短可以反应动物运动疲劳的程度。
1.2 仪器游泳箱(大小约50cmi X 50cm^ 40cm),电子天平、铅皮。
1.3 实验方法1.3.1 实验动物成年雄性小鼠,体重18-22g,推荐使用BALB/c小鼠。
1.3.2 剂量设置共设高、中、低、对照四个组,根据推荐的人体每公斤体重日摄入量, 扩大10倍作为其中一个剂量组,根据受试物的具体情况另设两个剂量组。
经口给样。
原则上连续给样30d,也可根据试验需要自行设定给样期限。
1.3.3 实验步骤末次给予受试物30min后,置小鼠在游泳箱中游泳,水深不少于30cm水温25°C± 0.5 °C , 鼠尾根部负荷 5%体重的铅皮。
记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,作为小鼠游泳时间(min)。
1.4 数据处理及结果判定游泳时间为计量资料,可以用方差分析。
若受试物组游泳时间明显长于对照组游泳时间,且差异有显著性(p V 0.05),可以判定该实验阳性。
1.5 注意事项1.5.1 每一游泳箱一次放入的小鼠不宜太多,否则互相挤靠,影响实验结果。
1.5.2 水温对小鼠的游泳时间有明显的影响,因此要求各组水温控制一致,以25C为宜,如果过低可能引起小鼠痉挛,影响实验结果。
1.5.3 铅皮缠绕松紧应适宜。
1.5.4 观察者应在整个实验过程中使每只小鼠四肢保持运动。
如果小鼠漂浮在水面四肢不动,可用木棒在其附近搅动。
1.5.5 不同批的小鼠因饲养环境、季节等原因的变化体质上会出现差异。
因此受试物组和对照组应采用同一批动物同时进行。
2 爬杆试验2.1 原理运动耐力的提高是抗疲劳能力加强最有力的宏观表现,爬杆时间的长短可以反应动物静用力时疲劳的程度。
2.2 材料爬杆架。
直径0.8 — 1cm长约25cm的有机玻璃圆棒(经120目砂纸打磨),上端固定于木板上,下端悬空,距地面约 20cm结构见示意图。
(图略)2.3 实验方法2.3.1 实验动物雄性成年小鼠,体重18— 22g。
推荐使用BALB/C2.3.2 剂量设置同 1.3.2 。
2.3.3 实验步骤实验时,将爬杆架置于水温15C、深约10cm的水盆中。
末次给予受试物 30min后开始实验,将小鼠放在有机玻璃棒上,使肌肉处于静力紧张状态,记录小鼠由于肌肉疲劳从有机玻璃棒上跌落下来的时间,第三次落水时终止实验,累计三次的时间作为爬杆时间。
2.4 数据处理及结果判定爬杆时间为计量资料,可以用方差分析。
若受试物组爬杆时间明显长于对照组爬杆时间,且差异有显著性(p v 0.05),可以判定该实验阳性。
2.5 注意事项2.5.1 实验前小鼠经筛选,训练数次仍不肯爬杆者,废弃。
2.5.2 杆的质地和光滑程度明显影响小鼠的爬杆时间,要求杆的质地坚硬,光滑程度一致,以免小鼠爪子将杆表面刮损,影响光滑程度。
3 血清尿素氮测定二乙酰—肟法3.1 原理样品中尿素在氯化高铁—磷酸溶液中与二乙酰—肟和硫氨脲共煮,形成一种红色的化合物,其颜色的深浅与尿素含量成正比,与同样处理的尿素标准管比较,可求出其含量。
3.2 仪器与试剂721分光光度计,10mL带塞试管,1mL(或 1.5mL)塑料离心管,电炉,锅,灌胃针头。
试剂盒;若无试剂盒,可自行配制试剂1g/L 二乙酰—肟溶液:取二乙酰—肟 1.0g ,氨基硫脲(thiosemicarbazide)0.2g ,氯化钠 4.5g ,溶于蒸馏水并加至 1000mL。
33g/L三氯化铁溶液:取三氯化铁1.0g溶于浓磷酸20mL中,加蒸馏水10mL摇匀。
酸溶液:取蒸馏水800mL慢慢加入浓硫酸50mL边加边摇;再加入85%磷酸50mL摇匀。
加入33g/L 三氯化铁溶液 1.5mL 加水至 1L。
10mmol/L尿素标准液(尿素氮28.01mg/dL):精确称取尿素(AR)150.3mg溶于16mmo1/L 苯甲酸溶液并加至 250mL。
16mmol/L苯甲酸液:取苯甲酸 2.0g溶于蒸馏水1000mL中,加浓硫酸0.8mL。
3.3 实验方法3.3.1 实验动物雄性成年小鼠或大鼠,小鼠体重18-22g,大鼠体重160-200g。
推荐使用BALB/C小、鼠,Wistar或SD大鼠,3.3.2 剂量分组、给样途径及期限大鼠以人体推荐量的 5倍为基本剂量。
其余同1.3.23.3.3 实验步骤3.3.3.1 末次给受试物30min后,在温度为30C的水中游泳90min,米血测定。
3.3.3.2 样本准备大鼠米尾血,小鼠拔眼球米血 0.5mL。
草酸盐、肝素或EDTA抗凝的血浆或血。
血清中的尿素在室温下可稳定 24h,在4 — 6C可稳定7d以上。
清3.3.3.3 操作步骤3.3.3.3试剂盒按照说明书操作.13.3.3.3自行配制试剂按下表操作.2(表略)充分混匀,置沸水浴准确15min,立即用自来水冷却。
用波长520nm以空白管调零,读取各管吸光度(A值)。
3.3.4 尿素氮含量计算A “ ■山粉3. 3.社」试別盒方法尿索札E ig/dL )=—--------- —— X 20.0 ( BB/dL )A “ - A *3.3.4.2 自配试剂尿素(m mo1/L) = Au X 10/As尿素氮(mg/dL) = Au X 28.01/As式中Au—测定管吸光度As—标准管吸光度3.4.2 结果判定统计方法可用方差分析。
若受试物组高于对照组,且差异有显著性(p V 0.05),可判定为该受试物有减少疲劳小鼠尿素氮产生的作用。
3.5 注意事项3.5.1 为避免色度转移,应在标本加入后 30min内读出吸光度值。
3.5.3 煮沸时间应准确。
4 肝糖原测定蒽酮法4.1 原理蒽酮可与游离糖或多糖起反应,反应后溶液呈蓝绿色,于620nm处有最大吸收。
测定其光密度,可以确定糖原的含量。
4.2 仪器与试剂4.2.1 仪器721 型分光光度计,离心机,扭力天平,匀浆器,振荡器,沸水浴,灌胃针头,手术器械,玻璃漏斗,加样器,2mL 5mL 10mL吸量管,20mL带塞刻度试管,10mL带塞离心管。
4.2.2 试剂5%三氯醋酸 ( 用蒸馏水配 )(TCA)葡萄糖标准液浓硫酸 (AR)蒽酮试剂:溶液中含0.05%的蒽酮,1%勺硫脲,用72%勺HSQ配制。
①72%2SQ配制:烧杯中加入280mL蒸馏水,再加入高纯度的浓硫酸 720mL比重1.84)②蒽酮试剂配法:当"SQ温度降至80- 90C时放入500mg纯的蒽酮,10g高纯度的硫脲, 适当摇动烧杯混匀。
冷却后存放于冰箱中,可保存两周。
4.3 实验方法4.3.1 实验动物同 3.3.1 。
4.3.2 剂量设置、给样途径及给样期限大鼠剂量以人体推荐食用量扩大 5 倍作为基本剂量,其余同 1.3.2 。
4.3.3 实验步骤433.1 样本制备末次给样后30min,在温度为30C的水箱中游泳90min,立即处死,取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干,精确称取肝脏200mg加入4mLTCA每管匀浆1min,将匀浆液倒入离心管,以3000转/min 离心15min,将上清液转移至另一试管内。
在沉淀中再加入4mL TCA匀浆1mi n,再次离心15mi n,取上清液,并与第一次离心的上清液合并,充分混匀。
取1mL上清液放入10mL离心管中(每样品可做两平行管以保证获得可靠结果),每管加入95%勺乙醇4mL充分混匀至两种液体间不留有界面。
用干净塞子塞上,室温下竖立放置过夜(也可选用将试管放在37- 40E水浴3h)。
沉淀完全后,将试管于3000转/min离心15min。
小心倒掉上清液并使试管倒立放置 10mi n。
用2mL蒸馏水溶解糖原,加水时将管壁的糖原洗下。
如管底的糖原不立即溶解,振荡管子直到完全溶解。
制作试剂空白和标准管:试剂空白:吸2mL蒸馏水到干净离心管标准管:吸0.5mL葡萄糖标准液(含100mg/dL葡萄糖)和1.5mL蒸馏水放入同样的管子。
4.3.3.2 测定样品糖原含量此时将10mL蒽酮试剂用力加入各管,液流(蒽酮试剂)直接进入管子中央,保证充分混合好。
从管子中注入蒽酮试剂时起,将管子放在冷水龙头下冲凉。
在所有管子都达到凉水温度后,将其浸于沸水浴(水浴深度略高于管子液面)15min,然后移到冷水浴,冷却到室温。
将管内液体移入比色管,在620nm波长,用试剂空白管调零后测定吸光度。
并根据标准曲线计算出糖原含量,根据所称取的肝脏重量换算成肝糖原含量(以mg/g肝表示),并进行统计学处理。
4.3.3.3 糖原含量计算:每100克肝姐织叩第麻IW丸救• —X 0. 5 x --- x 100 x 0, 9D6 肝爼秋克敢DU样品管吸光度DS:标准管吸光度0.5 :为 0.5mL 葡萄糖标准液液中的葡萄糖含量。
0.9 :为将葡萄糖换算成糖原的系数。
4.4 数据处理及结果判定所得数据为计量资料,可用方差分析或t 检验。
若受试物组肝糖原含量明显高于对照组,且差异有显著性(P V 0.05),可判定该受试物有促进糖原储备或减少糖原消耗的作用。
4.5 注意事项4.5.1 测定的实验方法均为定量要求,因此所有取样加试剂均需准确。
4.5.2 糖原测定中冷却、加热时间与氧化还原作用有关,因此时间要控制准确。
4.5.3 蒽酮显色剂不稳定,以临用时配制为宜,注意避免采用绒布或被污染的糖类进入蒽酮反应。
5 乳酸测定5.1 原理在铜离子催化下,乳酸与浓硫酸在沸水中反应,乳酸转化为乙醛,乙醛与对羟基联苯反应产生紫色化合物,在波长560nm处有强烈的光吸收,故可进行定量测定。
5.2 仪器与试剂5.2.1 仪器微量吸管,恒温水浴锅,电热水箱,分光光度计。
5.2.2 试剂4%CuS4O浓硫酸 (AR)1%NaF溶液蛋白沉淀剂:按体积分别取一份 10%的钨酸钠,一份 1/3 mo1/L 硫酸,再与 28份蒸馏水混合即成沉淀剂—NaF混合液:按体积分别取3份沉淀剂,1份1% NaF混合即成1.5%对羟基联苯溶液:称取1.5g对羟基联苯溶于100mL热的0.5% NaOH中(可保存半年)乳酸标准储备液(1mg/mL):称取106.6mg乳酸锂或171mg乳酸钙,以10%勺三氯乙酸定容至100mL (室温下可保存半年)乳酸标准应用液(0.01mg/mL):准确吸取1.0mL乳酸标准储备液稀释定容至100mL此液要求现用现配5.3 实验方法5.3.1 实验动物同3.3.1 。
5.3.2 剂量设置、给样途径与期限大鼠以人体每日每公斤体重推荐量的 5倍为基本剂量,其余同1.3.2。
5.3.3 实验步骤5.3.3.1 游泳末次给样30min后负重2%体重)在温度25—30C的水中游泳60min后停止,安静15min后米血备用,大鼠米尾血,小鼠拔眼球米血。