食用菌液体菌种生产方法
食用菌液体菌种的制作食用菌
食用菌液体菌种的制作食用菌
在无菌的条件下把菌种投放到培养基里。
安装通气管后用输氧机给培养基输入氧气。
把培养基放置在摇床机上进行振荡培养。
食用菌液体菌种具有生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、发酵快、适宜于工厂化生产等优点。
食用菌液体菌种的生产方式一般可分为电磁搅拌法、摇瓶机法、简易深层发酵（吹氧）法、发酵罐法。
据省农科院食用菌站工作人员介绍，摇瓶机法不仅接种简单，管理方便，而且生产量根据机器的设定而不同，投资2000~3000元即可。
配制液体培养基先把马铃薯煮到熟而不烂时提取上清液，然后配制3%葡萄糖、1%玉米粉、0.05%硫酸镁、0.1%磷酸二氢钾，最后将马铃薯上清液和上述溶液及水混合即可。
液体培养基适用于多种食用菌菌种的培养。
摇瓶振荡培养液体培养基配制好后，装入容量为500毫升的三角烧瓶中，每瓶装入100毫升，并加入1～15粒小玻璃珠，瓶口用棉塞、牛皮纸密封，在1.5千克/平方厘米压强下灭菌30分钟。
然后投入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养24小时。
待菌丝萌发时再放置在往复式摇床上振荡培养，振荡频率为每分钟80～100次，振幅为6～10厘米。
摇床室的温度控制在24℃～25℃，培养时间因菌类不同而异，一般是5天左右。
将振荡好的培养基倒入大容器里，经过扩容后，在无菌条件下安装通气管，用输氧机通入适量氧气后培养48小时。
培养结束的标准：培养液清澈透明，其中悬浮着大量小菌丝球，并伴有******菇类特有的香味。
培养好的液体菌种应放入培养箱中保存。
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液体菌种制作
素才能决定。
6.酸碱度
不同种类的食用菌都有一个最适酸碱度，例如，黑木耳的
ห้องสมุดไป่ตู้
最适pH为6.0-6.5、金针菇为6.3、香菇为4.5-6.5。
7.罐压 在发酵过程中罐压通常为0.2-0.7Kg/cm。 8.泡沫控制 在发酵过程中泡沫过多不利于发酵，目前大多数是加入
0.006%的泡敌做消泡剂消除泡沫。
9.发酵特点
发酵终点是否准确，应参考产物浓度、过滤浓度、氨基酸
六、液体菌种制作的主要参数
1.菌龄 菌龄与种子的活力密切相关。通常，摇瓶种子菌龄控制在 4-10d，一级种子和二级种子菌龄为48-96H。 2.接种量 一般地，食用菌深层发酵时的接种量为10-20%。 3.温度 通常在22-30℃生长最快，得率最高。
4.通气量 食用菌深层发酵的通气量以0.2-1.5通气体积/培养液体积 /min为宜。 5.搅拌速度 食用菌深层发酵的搅拌速度一般是180-500r/min。
体的，不受季节性限制。
三、液体菌种制作的用途
1.生产液体菌种 食用菌经深层发酵2-7d的幼嫩菌丝体，可以用来作为食用 菌栽培用的原种和栽培种。
2.制备药物或提取生化制品 许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药 物成分或生化制品的材料。
3.制作食品或畜禽饲料
四、液体菌种制作的主要设备 1.摇床
第三节
液体菌种制作技术
一、液体菌种制作的原理
食用菌液体菌种制作是在发酵罐中，采用液
体培养基通入无菌空气并加以搅拌，增加培 养基中溶氧含量，提供食用菌菌体呼吸代谢
所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，获
得大量的菌丝体或代谢产物。
食用菌液体菌种生产方法(发酵罐法)
食用菌液体菌种生产方法（发酵罐法）传统菌种生产工艺，一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。
液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点，接种到培养料内有流动性好、萌发点多，发菌迅速等特种点。
应用于生产与固体菌种相比有以下优点：1．菌种生产周期短。
固体种一般需25—40天，而液体种仅需3—7天。
2．接种后，萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。
接种24小时菌丝布满料面，3—15天长满菌袋，一般品种10天左右可出菇。
3．接种方便、成本低。
用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分，每人每小时可接800袋以上，提高效益4—5倍。
4．适宜工厂化生产。
可直接用于栽培料进行出菇，大批量生产菌袋。
为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。
因此，适宜我国国情的液体菌种设备的出现，必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。
液体菌种具有固体（颗粒）菌种无可比拟的优势，但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的，因此很多人对此很陌生。
在这里我们对此进行简单介绍一、液体菌种设备基本原理任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。
在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。
液体菌种发酵设备（包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。
二、液体菌种生产的关键技术1、溶氧量液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。
因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。
2、空气过滤技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。
液体菌种培训教材(四)液体菌种的制作过程及方法
液体菌种培训教材(节选四)2010年4月10日三、液体菌种的制作过程及方法（一）试管种的生产：液体菌种对试管的纯度要求很高。
所以要自己会做试管种。
试管种的制作其实很简单，在我们要用种的前三个月，到市场上去看哪个菇符合要求，就买回来（也可以用自己保存的试管种均可）。
在接种箱内进行常规气雾（最好是高锰酸钾和甲醛）消毒，30分钟后，开始分离。
分离时先将用具消毒，然后用手把菇体分开，用镊子夹一小块菇肉（不同的菇取种位置不同），放到试管里。
塞上棉塞就行了。
这样的成功率一般在80%以上。
在菌丝生长阶段，要经常观察菌丝的生长情况。
对菌丝生长不整齐的，有污染的，全部淘汰。
只留下没什么问题的，长满试管后，再取特定部位进行转管（见实操）。
菌丝长到**cm时，从菌丝生长的尖端提取一小块，一般地认为，取****大小就可以了，不过从试验上看，提得**效果越好。
平菇一般提二次就可以了，提到五次，基本上与脱毒菌种效果差不多。
别的品种要多些，最多不超过五次，都可以达到提纯的目的。
（二）三角瓶专用母种生产：专用母种分固体和液体两种。
从生产技术上看，液体专用母种要难一些，是用电磁搅拌器或摇瓶机进行生产。
整个过程要4-7天时间，生产的液体种稍经加工就可以直接使用。
液体菌种专用母种的配方就是用PDA加富配方去掉琼脂。
用三角瓶盛装，在高压锅里121℃保持30分钟就行了。
待三角瓶的温度降到30℃以下时，在超净工作台或接种箱内进行接种。
马上就可以进行搅拌或摇瓶了。
固体种生产时间要长些，保存的时间也长，而且方便运输。
固体专用母种一般污染要严重一些，有的人污染率要达到20-30左右。
固体专用母种我们现在一般不用，污染率太高，而且不好发现，最糟糕的是容易堵枪。
配方是把木屑过20-40目的筛，用去掉琼脂的PDA配方拌料，在121℃高压下灭菌2小时，待温度下降到30度以下时，在超净工作台或接种箱内进行常规接种。
一般20多天可以长好。
具有运输和贮存方便等特点。
菌种繁育—液体菌种生产技术(食用菌生产技术课件)
液体菌种生产技术
食用菌液体菌种的优势：
5. 发菌速度
液体菌种接种后栽培袋的发菌速度明显快于固体菌种，而且生长整齐。产量上和固体菌种没有明显区别，甚至优 于固体菌种。
7. 风险分析
液体菌种具有一定的风险，如果染菌的发酵罐接入到栽培袋中，损失巨大， 特别是现在国内开始大量使用700升的发酵罐，一次可接24吨干料制作的菌 袋。
空气压缩 → 过滤 ↓
配料 → 装罐 → 灭菌 → 冷却 → 接种 → 培养 → 液体种 ↑
试管斜面种 → 三角瓶颗粒种
（二）接种
灭菌结束后用冷水冷却至培养温度，在 无菌条件下接种，每瓶接入1.5-2cm2的 斜面菌种一块，让其悬浮于液体培养基 表面且使菌丝朝上，在适温下静置48小 时，待菌丝长至液体培养基中时，置摇 床上进行振荡培养。
采用液体菌种，栽培袋养菌时间仅为15天左右。 采用液体菌种，菌龄短，出菇整齐，比采用固体菌种的上市早。
液体菌种生产技术
目录
一、液体菌种设备原理 二、液体菌种生产技术
液体菌种生产技术
食用菌液体菌种的优势：
1. 生产成本
固体菌种生产成本高于液体菌种。
2. 生产时间
液体菌种生长时间比固体菌种快。
3. 设备要求
液体菌种对硬件设备要求较高，需要一定的投资。
4. 技术要求
液体菌种需要一定的食用菌以及微生物专业知识，固体菌种技术要求较低， 一般菇农都易掌握。
液体菌种生产的关键技术：
① 空气过滤
④ 培养液
② 接种
⑤ 环境
③
溶氧量
二、液体菌种生产技术
液体菌种工艺流程：
空气压缩 → 过滤 ↓
配料 → 装罐 → 灭菌 → 冷却 → 接种 → 培养 → 液体种 ↑
如何利用高效摇瓶进行食用菌液体菌种的培养？
如何利用高效摇瓶进行食用菌液体菌种的
培养？
液体菌种的培养方式主要有振荡培养和发酵罐培养两类。
振荡培养又称为高效摇瓶培养，是利用机械振荡，使培养液振动而达到通气的目的，是将斜面试管菌种接种到培养液中，置摇床上振荡培养。
高效摇瓶培养的工艺流程为：制备培养基一分装一灭菌一冷却一接种一摇床培养一一级液体菌种一二级液体菌种。
经高效摇瓶培养的菌丝体一般呈球状、絮状等多种形态，培养液呈黏稠状或清液状，有或无清香味及其他异味。
菌液中因有菌体发酵产生的次生代谢产物，可呈不同的颜色。
采用高效摇瓶培养液体菌种时，可采用往复式摇床或者旋转式摇床。
往复式摇床的往复频率一般在80～140r/min，冲程一般为5～14cm，在频率过快、冲程过大或瓶内液体过多时，振荡使液体容易溅到瓶口纱布上而造成污染。
旋转式摇床的偏心距一般为3～6cm，旋转次数为60～300r/min，它的结构比较复杂，加工安装要求比往复式摇床高，造价也较贵，但是氧的传递好、功率消耗低，培养基一般不会溅到棉塞上。
因此，要根据实际需要选择合适的摇床及振荡速度。
以上是利用高效摇瓶进行食用菌液体菌种培养的要点，高效摇瓶除了用于食用菌液体菌种的培养外，还可用于全时悬浮细胞培养，培养基制备或储存。
- 1 -。
水桶自制液体菌种的方法
水桶自制液体菌种的方法
制作液体菌种有几种方法，以下是其中一种常用的方法：
材料：
1. 容器：可以使用玻璃瓶、腐蚀性物质不会反应的塑料瓶等。
2. 培养基：可以购买已配好的培养基，也可以自制。
3. 菌种：可以使用已购买的菌种，也可以使用自己提取的菌种。
步骤：
1. 准备好容器，清洗消毒后晾干。
2. 配制培养基，如果自己配制，可选择适当的基质（如蔗糖、琼脂等）和必需的营养物质（如氮源、磷源等），按照比例加入适量的水中，搅拌均匀。
3. 把配制好的培养基倒入容器中，留下一定的空间给菌种生长。
4. 添加菌种：如果有已购买的菌种，按照说明书上的指导添加适量的菌种到培养基中；如果使用自己提取的菌种，可以从分离出的单一菌落中取一小块放入培养基中。
5. 盖紧容器盖，避免外界的污染。
6. 将培养基置于适宜的温度和光照条件下，有利于菌种生长（不同的菌种有不同的适宜生长条件）。
7. 定期观察培养基中的菌落生长情况，如果生长良好，可以继续培养；如果发现污染或者其他异常，需要进行相应的处理（如重新进行培养）。
8. 根据需要，可以用培养基菌种进行插播或者扩大规模培养。
需要注意的是，制作液体菌种需要一定的实验室技术和sterile(无菌)操作。
不熟悉实验室操作的人士最好在专业人士的指导下进行。
152.4液体菌种制作
谢谢观看！
酸二氢钾0.5 g/L，硫酸镁0.25 g/L。
二、液体菌种制种工艺
4.液体培养基的制作方法 （1）投料和定容
二、液体菌种制种工艺
4.液体培养基的制作方法 （2）液体培养基灭菌
主管接空气过滤器出气阀
二、液体菌种制种工艺
5.摇瓶菌种生产
二、液体菌种制种工艺
6.接种
火焰圈灼烧接种口
菌种接入罐体
二、液体菌种制种工艺
概述
液体菌种具有成本低、制作时间短、萌发快、生长快、纯度高、菌龄短、 出菇齐、产量高等优点，在生产应用中有其明显的优势。
一、生产环境和生产设施设备
1.液体菌种生产场所
液体菌种生产车间
液体菌种接种车间
液体菌种培养器剖面图
一、生产环境和生产设施设备
2.液体菌种生产设施：配料间、发菌间、冷却间、接种间、培养室、检测室。
7.培养 罐体压力表压力在0.02 MPa～0.03 MPa，温度控制在20±1 ℃、通
气量为1:0.8条件下进行液体菌种培养。
二、液体菌种制种工艺
8.放罐接种 将待接种的固体种袋（瓶）或栽培袋放置在输送带上，输入至无菌接
种区。在接种区用接种器将液体菌种注（喷）入。
固体种袋（瓶）放置在输送带上
无菌接种区
接种间Biblioteka 培养室二、液体菌种制种工艺
1.液体菌种制种工艺
二、液体菌种制种工艺
2.液体菌种培养器进行维护和检查 3.液体菌种培养基配方 ➢ 黄豆粉 10 g/L、蔗糖3.0 g/L、KH2P04 1 g/L、MgS04 0.5 g/L。 ➢ 玉米粉6 g/L、黄豆粉4.5 g/L。 ➢ 玉米粉1.0 g/L，黄豆粉1.5 g/L，葡萄糖7.5 g/L，酵母膏1.5 g/L，磷
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食用菌液体菌种生产方法-标准化文件发布号：（9556-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII
食用菌液体菌种的生产方法（发酵罐法)
传统菌种生产工艺，一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。
液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点，接种到培养料内有流动性好、萌发点多，发菌迅速等特种点。
应用于生产与固体菌种相比有以下优点：
1．菌种生产周期短。
固体种一般需25—40天，而液体种仅需3—7天。
2．接种后，萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。
接种24小时菌丝布满料面，3—15天长满菌袋，一般品种10天左右可出菇。
3．接种方便、成本低。
用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分，每人每小时可接800袋以上，提高效益4—5倍。
4．适宜工厂化生产。
可直接用于栽培料进行出菇，大批量生产菌袋。
为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。
因此，适宜我国国情的液体菌种设备的出现，必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。
液体菌种具有固体（颗粒）菌种无可比拟的优势，但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的，因此很多人对此很陌生。
在这里我们对此进行简单介绍
一、液体菌种设备基本原理
任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。
在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。
液体菌种发酵设备（包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。
二、液体菌种生产的关键技术
1、溶氧量
液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。
因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。
2、空气过滤
技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。
一般细菌直径在,酵母菌在1-10um，病毒一般在20-400mu，所以选择过滤膜时应综合考虑以上因素。
当然如果选的太小，成本将大幅度提高。
另外环境对于空气影响很大,在空气压缩机房、制种车间必须保持环境清洁。
3、培养液
培养液是菌丝生长发育的营养源，要求营养全面均衡。
不同的菌种对营养要求偏重不同。
配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。
配置培养液时，先将土豆片、麸皮一起煮熟，将汁液滤出，后加入其它辅料混匀即可。
4、接种
培养器上端有接种口，也是装料口，将母种并瓶后加入抑菌剂，而后必须在火焰圈的保护下倒入罐体内，要求动作快、操作准确。
5、环境
如前所述，环境对菌种生产影响很大，过滤器本身不可能把杂菌百分之百地滤掉，减少环境中的杂菌基数是非常重要的，液体菌种母种接入到经灭菌的培养液中只要能形成对杂菌的生长优势就可以抑制杂菌感染，也就是说，液体菌种培养不是建立在绝对无菌的前提下相反是建立在相对无菌的前提下。
就此意义上说，保持环境清洁，减少空气中杂菌基数，对于提高菌种培养成功率意义较大
三、液体菌种生产流程
工艺流程图：空气压缩→过滤
↓
配料→装罐→灭菌→冷却→接种→培养→液体种
↑
试管斜面种→ 三角瓶颗粒种
配料时先将土豆去皮切片，与麸皮混合后用不锈钢锅煮熟并取汁，在将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入，混匀后装入罐中加热，至℃并维持40分钟左右进行灭菌，灭菌结束后用冷水冷却至培养温度，而后将并瓶后的三角瓶种接上进行培养，培养时根据不同的菌种，设定适宜的温度。
培养期间应注意观察，并做好记录。
包括温度、压力、气流量、排出气体的气味等。
如遇到停电，排气阀自动关闭或人工关闭来保持罐中处于正压状态。
来电后重新启动，并打开排气阀继续培养。
培养过程中，可随时无菌操作采样分析，几天后待菌球密度合适（从视镜观察）即可接种。
四应用领域
1.液体菌种的科研、生产、制种和工厂化的大规模生产单位；
2.用于多种微生物的培养;
3.含食用菌活性成分的保健食品生产；
4.各种奶制品的活性因子生产;
5.生产菌丝体,提取生物活性成分来生产各种食品添加剂;
6.微生物发酵工程来制取农药、医药、激素等；
7.适用于科研单位、菌业公司、工业企业和从事食用菌栽培人员的菌类生产。