青麻叶大白菜根肿病人工接种方法及条件研究
大白菜根肿病发生特点与症状及综防措施
大白菜根肿病发生特点与症状及综防措施作者：孙海燕来源：《安徽农学通报》2013年第22期摘要：根肿病是大白菜种植常见的一种病害，是芸苔根肿菌通过水土传播危害植株根部所致。
由于此病传播速度快，持续时间长，如果不及时防控，不仅会影响植株的生长，还会造成大面积死亡，使种植者经济受损。
该文对大白菜根肿病发生特点和症状表现进行阐述分析，介绍了实行轮作、进行土墒整理与消毒杀菌、种苗选择与处理、田园管理与病株清理等综合防治措施。
关键词：大白菜；根肿病；发生特点；症状表现；综防措施中图分类号 S436.341 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）22-75-02大白菜是十字花科芸薹属叶用蔬菜，产量大，管理技术容易掌握，是我国广大农民重要的种植作物和经济来源。
根肿病作为大白菜种植常见的病害，是芸苔根肿菌通过水土传播感染危害植株根部所致，特别是在潮湿、板结、显酸性的土壤中容易发生，可在土壤中存活10a以上。
由于此病传播速度快，持续时间长，不仅会导致白菜生长速度缓慢、矮缩枯黄，还会造成植株大面积死亡，严重影响农民的经济收入。
种植者应了解此病菌的表现特征和发病特点，并从耕作方式、土壤地力、水文环境、品种类型、气候因素、肥水管理、病菌处理、病害防治、田园管理、病株清理等方面做好农业、物理、化学、生物等综合防治工作，以增强植株的抗病能力。
以下笔者根据多年的种植经验，对大白菜根肿病的发生特点以及防控措施进行介绍。
1 根肿病发生特点1.1 病原菌与传播根肿病的病原菌属鞭毛菌亚门、根肿菌目、根肿菌属、芸苔根肿菌（Plasmodiophora brassicae Woron.），孢子囊能在土壤中休眠越冬，休眠孢子囊抗逆性较强。
病原菌通过遗留在土壤中的根系、叶片、肥料、水份以及种植时使用的农用工具、运输工具等进行传播，从病菌潜伏于植株到发病大约需要10d左右，主要危害大白菜、青菜、芥菜等十字花科蔬菜。
1.2 发病规律大白菜根肿病菌在温度越高、土壤含水量越大、pH值越显酸性，病菌滋生和传播的速度就越快，适宜发病的湿度为60%～90%，温度为19～25℃，土壤pH值为5.4～6.5，夏秋季的发病率比春冬季较为严重。
大白菜根肿病的产生 因素与综合防治
大白菜根肿病的产生因素与综合防治大白菜根肿病的产生因素与综合防治大白菜根肿病是一种土传病害，在我国的大部分地区都有产生，而且有加速蔓延的趋势。
在大白菜幼苗和成株期均可产生，只为害根部，植株矮小，成长缓慢。
一、症状识别病株根部肿大呈现瘤状，主根上的肿瘤多依靠近上部，较大而数量少，球形或近球形，凹凸不平，表面粗糙，有时表皮开裂。
侧根和须根上的肿瘤较小而数量多，呈现圆筒形或手指形，多个连在一起呈现串球状。
发病初期病株成长缓慢，基部叶子常在中午凋萎下垂，早晚恢复，后期基部叶子变黄枯萎，产生轻的大白菜包心不紧，重病时不能包心，甚至整株枯死。
发病后期病部易被软腐细菌感染，组织腐烂，散发出臭味。
大白菜根肿病与大白菜根结线虫病部分体现出相同的症状，即菜株在烈日下呈现萎蔫状，而根部有不同形状的大小肿瘤。
重要不同在于：剖开根结（或肿瘤），根结线虫病能够见到在病部组织里有许多很小的乳白色雌线虫埋于其内部，而根肿病则没有虫体。
二、发病因素病原为芸薹根肿菌，病菌以休眠孢子囊在土壤中或黏附在种子上越冬，可在土壤中存活10年以上。
如果病株（包括病根）用来沤肥，未经高温腐熟处理，则粪肥也可带菌。
翌年田间常可经过土壤、种子、种苗或借助雨水、灌溉水、昆虫、肥料及农事操作等进行传播。
远距离还可经过带菌的种子和病苗调运传播。
在适宜的条件下，休眠孢子囊萌发，产生游动孢子，从大白菜的幼根或根毛穿透表皮侵入寄主细胞内，以后病菌经过一系列的演变和扩展，由根部皮层进入形成层，激发寄主薄壁细胞分裂和膨大，而在根部形成不同形状、大小不一的肿瘤。
最后，在肿瘤内的病菌又形成许多休眠孢子囊，根肿瘤腐烂之后孢子囊又落入土中越冬。
芸薹根肿病菌成长温度范围广，9-30摄氏度都可发病，但发病适宜的温度为19-25摄氏度。
适宜的相对湿度为50％-98％。
土壤含水量达70％-90％时，最利于休眠孢子囊的萌发和游动孢子活动及侵入寄主。
如果土壤含水量在45％以下时，则很少发病。
白菜根肿病如何防治和治疗
•引言•白菜根肿病识别与诊断•农业防治措施•化学药剂防治方法目•生物防治技术应用•白菜根肿病综合治理策略录引言病害症状发病初期，白菜根部出现大小不一的肿瘤，表面光滑；随着病情加重，肿瘤逐渐变大、连片，导致根部腐烂，地上部分枯萎死亡。
病害定义白菜根肿病是一种由真菌引起的土传病害，主要危害白菜根部，导致根部肿大、变形、腐烂。
病害原因白菜根肿病的发生与土壤环境、气候条件、种植方式等多种因素有关。
其中，酸性土壤、高湿度、连作等条件下发病较重。
白菜根肿病简介白菜是我国重要的蔬菜作物之一，具有广阔的种植面积和市场需求。
防治和治疗白菜根肿病对于保障白菜产量和品质具有重要意义，有助于维护市场稳定和农民收益。
经济价值白菜根肿病的发生不仅影响白菜产量和品质，还可能对土壤生态环境造成破坏。
通过有效的防治和治疗措施，可以降低病害发生对生态环境的影响，促进农业可持续发展。
生态环境防治与治疗重要性白菜根肿病识别与诊断受害白菜根部会出现大小不一的肿瘤，初期表面光滑，后期常发生龟裂，并且粗糙。
观察根部发病初期地上部分症状不明显，随着病情加重，白菜会出现生长缓慢、矮化、叶片发黄等现象。
观察地上部分症状识别通过显微镜观察病原菌形态，白菜根肿病菌为鞭毛菌亚门真菌，其休眠孢子囊球形或近球形，无色或淡黄色，壁较厚。
采用PCR技术对病原菌进行分子鉴定，通过与已知病原菌序列比对，确定其种类和亲缘关系。
病原菌鉴定分子生物学鉴定镜检观察发生规律分析白菜根肿病的发生与土壤温度、湿度、酸碱度等因素有关。
一般酸性土壤、排水不良、连作地等条件下发病较重。
传播途径病原菌主要通过病土、病残体、种子和灌溉水等传播。
其中，病土是主要的侵染来源，可在土壤中存活多年。
农业防治措施轮作换茬与非十字花科作物进行3-5年轮作，减少土壤中病原菌数量。
间作套种与抗病性强的作物进行间作或套种，降低病害发生风险。
合理轮作与间作整地做畦合理密植科学施肥排水防涝加强田间管理01020304深耕细耙，提高土壤通透性，利于根系发育。
按照发病规律防治和治疗大白菜根肿病
不同品种的大白菜对根肿病的抗性存在明显差异，一些品种具有较高的抗病性， 而另一些品种则容易感染病害。
品种选择与防治策略
在种植大白菜时，选择抗病性强的品种是降低根肿病发生风险的关键。同时，结 合其他防治措施，如轮作、土壤改良等，可进一步提高防治效果。
环境因素与发病的关系
温度：温度是影响大白菜根肿病发病的重要因素 之一。适宜的温度范围有利于病菌的繁殖和侵染 ，加重病害发生程度。
影响和危害
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产量减少
大白菜根肿病严重影响大 白菜的生长，导致产量大 幅度降低。
品质下降
受病害影响，大白菜叶片 发黄，质地粗糙，商品价 值降低。
经济效益受损
由于产量减少和品质下降 ，农民的经济收入受到严 重影响。
发病的原因和条件
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病原菌的存在：大白菜 根肿病的病原菌在土壤 中可存活多年，一旦条 件适宜，即可侵染大白 菜。
土壤类型与质地：土壤类型和质地对大白菜根肿 病的发病也有一定影响。某些土壤类型和质地较 有利于病菌的存活和繁殖，增加了病害发生的风 险。
湿度：高湿环境有利于病菌的存活和传播，加重 根肿病的发病程度。土壤湿度过高或过低都可能 对病害发生起到促进作用。
针对以上发病规律，我们可以采取相应的防治和 治疗措施，如合理选择抗病品种、调整播种时期 、控制土壤湿度、改善土壤环境等，以降低大白 菜根肿病的发生和危害。
病原菌生物学特性研究
深入研究病原菌的生物学特性，为寻找新的 防治方法提供依据。
药剂研发与筛选
加大投入，研发新型高效、低毒的药剂，提 高防治效果。
对农民的建议和注意事项
实行轮作
如何防治和治疗白菜根肿病
及时清除病残体，加强田间排水，增加磷钾肥的施用，可提高白菜的抗病能力。
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防治白菜根肿病的实践建议
加强病情监测
定期巡查
在白菜生长过程中，应定期进行田间巡 查，注意观察白菜的生长状况，发现异 常情况及时采取措施。
VS
病情上报
一旦发现白菜根肿病疫情，应立即上报相 关部门，以便及时采取防治措施。
做好田间管理
01Biblioteka 0203合理轮作
避免与十字花科蔬菜连作 ，最好与非十字花科蔬菜 轮作。
精耕细作
保持田间土壤松软，排水 良好，减少病菌滋生。
合理施肥
适当增施有机肥和磷钾肥 ，提高白菜的抗病能力。
合理使用农药
选择高效低毒农药
选用针对根肿病的农药， 如氟啶胺、氰霜唑等，注 意使用方法和剂量。
轮换使用农药
如何防治和治疗白菜根肿病
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目录
• 白菜根肿病的基本认识 • 预防措施 • 治疗措施 • 防治白菜根肿病的实践建议
01
白菜根肿病的基本认识
定义和症状
定义
白菜根肿病是一种由芸苔根肿菌 引起的真菌性病害。
症状
根部肿大，地上部分植株矮小， 叶片发黄，严重时全株枯死。
病原和传播途径
病原
芸苔根肿菌。
避免长期使用同一种农药 ，以免病菌产生抗药性。
安全间隔期
在收获前一段时间内禁止 使用农药，确保农产品安 全。
提高农民防治技术
培训农民
加强技术指导
组织农民参加防治技术培训，提高他 们的防治意识和技能。
农业技术人员应深入田间地头，指导 农民正确防治白菜根肿病。
宣传普及防治技术
通过各种渠道宣传普及白菜根肿病的 防治技术，让农民更好地掌握防治方 法。
大白菜根肿病的防治技术
大白菜根肿病的防治技术
大白菜根肿病为真菌病害，此病不仅危害大白菜，还对青菜、萝卜、菜花、油菜等十字花科类都有不同程度的危害，根肿病主要危害大白菜根部，苗期即可受害，严重时幼苗枯死，团棵后受害，初期时地上部分不明显，但生长缓慢、矮小，重者表现为缺水状态，基部叶片在中午时萎蔫，早晚可恢复；到后期则叶片发黄，枯萎至全株死亡。
该病菌在土壤越冬或越夏时，在作物主要病根的膨大细胞内含有大量休眠孢子囊，病组织腐烂分解后菌孢散落在土中，一般可存活6－7年。
大白菜跟肿病的发病条件
土壤温湿度。
病菌在6－30摄氏度内、田间持水量50％－98％的范围内均可发病；
土壤酸碱度。
该菌适于酸性土壤环境；
土地过多施用酸性肥料。
大白菜的跟肿病的防治方法
土壤消毒采用75％的敌克松可溶性粉剂加50％多菌灵可湿性粉剂500－1000倍液进行苗床喷雾或泼浇消毒，大田酸性土壤采用增施草木灰和碱性有机肥等措施改造酸性土壤，缓解跟肿病的发生。
种子处理晒种后50％的多菌灵可湿性粉剂加58％瑞毒霉锰锌400倍液浸种。
起苗前7天用50％多菌灵可湿性粉剂加75％的百菌清可湿性粉剂600倍液喷雾，杜绝病菌带入大田。
加强田间管理排水沟渠一定要畅通，做到能灌能排，没有过多的积水，控制田间持水量不超过50％。
及时清除病株发现病株要及时清除，并及时烧毁，在病穴四周撒石灰，以防病菌蔓延。
大白菜跟肿病发病后及时用58％瑞毒霉锰锌加50％多菌灵可湿性粉剂加75％的敌克松可溶性粉剂600倍液灌根，每株0.5千克。
大白菜根肿病防治方法
大白菜根肿病防治方法近年来，很多种植白菜的农户都普遍的在反应一个问题，就是大白菜根肿病的发生逐年加重，这是什么原因造成的呢？今天小编带您了解下：大白菜根肿病发生症状根肿病在大白菜幼苗期和成株期均可发生，主要危害根部，造成主根或侧根出现大小不等，形似手指状、短棒状或球状的瘤。
主根上的瘤靠近地上部，发病初期瘤体表面光滑，后期表面粗糙、凹凸不平，明显龟裂，须根上的瘤多达20个，串生在一起。
病株根系的生理机能受阻，地上部明显矮小，叶片由下而上逐渐发黄，晴天中午前后植株萎蔫，似缺水或营养不良状。
发病初期病苗早晚可恢复，后期不能恢复正常，病部易被大白菜软腐病病菌和其他杂菌感染，造成组织腐烂，散发臭气，致整株死亡。
大白菜根肿病适宜条件大白菜根肿病属真菌性病害，病菌以休眠孢子囊残留在土壤中或黏附在种子上越冬，借雨水、灌溉水、害虫及农事操作等传播，可在土壤中存活10年以上。
在适宜条件下病菌休眠孢子囊萌发，从寄主的根毛侵入到表皮细胞内，经10天左右使根部形成肿瘤。
植株受侵染越早发病越重，损失越大，后期受侵染的植株根系已经长成，受害相对较轻。
根肿病病菌喜酸性土壤，适宜发病土壤pH值为5.4~6.5、土壤温度20~25℃、相对湿度60%~70%,低洼地、连作地、水改旱地发病重。
大白菜根肿病防治方法：大白菜根肿病可以通过土壤传播，生产上应采取综合措施防治。
一、大白菜根肿病农业防治措施1、是选用抗病品种。
各地可因地制宜地选用合适的抗病品种。
2、是轮作倒茬。
与非十字花科作物轮作3年以上，如与玉米、水稻、小麦等禾本科作物或菜豆、大豆等豆科作物轮作。
3、是翻晒土壤，深沟高畦种植，雨季低洼地及时排水。
4、是调整土壤酸碱度。
整地时每亩施石灰80~100公斤，将土壤调至微碱性。
五是选择无病地育苗，及时淘汰病苗，带出田外销毁，并在病穴四周撒石灰消毒。
二、大白菜根肿病化学防治方法1、是种子消毒。
按每100公斤种子用适乐时25克/升咯菌腈悬浮种衣剂500毫升加水2公斤拌匀。
大白菜根肿病防治方法
大白菜根肿病防治方法说实话大白菜根肿病防治这事儿，我一开始也是瞎摸索。
我种大白菜好多年了，这根肿病可把我折腾得够呛。
我最早的时候啊，就只知道看到病株就拔，以为这样就能解决问题，结果发现过不了多久又有新的植株染病了。
后来我想，这地是不是有问题呢。
我就把得病那些地方的土给换了，费了好大的劲，挖土、运土、填回去，累得我腰酸背痛。
可是呢，效果也不怎么好啊，还是有大白菜得病。
我就开始研究这根肿病到底是怎么回事，听说是土壤里的真菌作怪。
那我就想办法对付这真菌，我试过用石灰来处理土壤。
我就像给土地做面膜似的，把石灰均匀地撒在地里。
说真的，这个还真有点效果，能减少发病的概率，但也不能完全杜绝。
还有施肥这点也很重要呢。
我以前觉得肥料越多蔬菜肯定长得越好啊，就死命施肥。
后来发现这样反而让大白菜根肿病更严重了。
后来查了些资料才知道，要合理施肥，特别是要增加钾肥的使用，就好比人要营养均衡才能健康一样。
还有一个办法是轮作。
我听人说轮作能改善土壤环境，减少病菌积累。
我就试着种一茬大白菜之后，再种一茬其他的作物，像小麦之类的。
不过这中间的衔接要做好，土地得整理好。
我一开始轮作的时候没弄好，也没达到预期的效果。
现在慢慢摸索到经验了，土地空闲的时间、作物的选择和种植顺序都挺关键的。
病菌的残留也很要命。
像那些染病的残株啊，可不能乱扔在地里，我开始就是图方便扔地里了，结果肯定是小病变成大病啊。
现在我都是把这些病株收集起来，拉到老远的地方去。
我也不确定这样能不能完全避免病菌传播，但是总比乱扔要强得多。
我觉得防治大白菜根肿病没有一个一下子就能成功的秘诀，就得多方面下手。
石灰处理土壤、合理施肥、轮作加上正确处理病株这些方法都结合起来，才能更有效果。
虽然到现在也不能说完全把根肿病解决了，但至少发病率比以前大大降低了。
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青麻叶大白菜根肿病人工接种方法及条件研究张红;张斌;王超楠;李梅;黄志银;刘俊峰【摘要】For the disease-resistant breeding of Qingmaye Chinese cabbage,five kinds of inoculation methods (Indigenous bacteria,Seal of indigenous bacteria,Dip method,Injection method,Seed soaking method),different soil pH,different inoculation concentration,illumination and root secretion were compared by use Qiulü 60 as mate-rial in this article.The results showed that the effect of soil inoculation was more excellent and stable.In contrast, seed-immersion method was the poorest.The acid soil pH was fit to clubroot break out and the disease index reached the maximum when pH value was 6.5.1 g soil inoculated0.050 g root was the most suitable inoculation concentra-tion.After light treatment,the disease index was increased,it showed that light had a promoting effect on diseases. Root secretion of tomato,resistant and susceptible hosts could promote the happening of disease.Therefore,in the artificial inoculation test of Qingmaye Chinese cabbage can be the above optimum inoculation method and conditions so as to improve the effect of inoculation.%为辅助青麻叶大白菜的抗病育种研究，以青麻叶大白菜秋绿60种子为试验材料，比较了5种接种方法（菌土法、密封菌土法、蘸根法、注射法、浸种法）不同土壤 pH 值、菌液浓度、光照及根系分泌物等接种条件对人工接种效果的影响。
结果发现，菌土法与其他接种方法相比效果更好、更稳定，浸种法效果最差。
在土壤 pH 值为酸性时更易发病，且 pH 值达到6．5时，病情指数最高；每g 土接种0．050 g 病根是最适宜的接种浓度；光照对病害的发生有促进作用；番茄和抗、感根肿病的白菜根系分泌物均能促进病害的发生。
因此，在青麻叶大白菜的人工接种试验中可采用以上最佳接种方法及条件提高接种效果。
【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】4页(P182-185)【关键词】根肿病;青麻叶大白菜;接种方法;接种条件【作者】张红;张斌;王超楠;李梅;黄志银;刘俊峰【作者单位】天津师范大学生命科学学院，天津 300387;天津科润蔬菜研究所，天津 300384;天津科润蔬菜研究所，天津 300384;天津科润蔬菜研究所，天津300384;天津科润蔬菜研究所，天津 300384;天津师范大学生命科学学院，天津300387【正文语种】中文【中图分类】S634.01根肿病是由芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae)引起的一种世界性土传病害[1],该病传染力强,传播途径广,危害损失较大,防治困难,主要为害大白菜等十字花科作物。
近年来,根肿病在云南、湖北、贵州、山东、辽宁等十字花科蔬菜种植区发生严重,并迅速蔓延,目前全国大部分省份均有发生,已成为制约十字花科蔬菜生产的主要因素之一。
至今我国根肿病的常年危害面积约320万~400万hm2,占十字花科作物栽培总面积的1/3以上,平均年产量损失达20%～30%,发病严重地块的年产量损失高达60%以上[2]。
目前防治根肿病的手段主要是进行抗性育种,而接种方法及条件的探索是进行相关研究的基础。
虽然,国内外已有学者对根肿病的接种方法及条件进行探索,但针对青麻叶大白菜的研究尚未见报道,且由于影响因素复杂,根肿菌又存在生理小种分化,至今尚未形成一套统一而稳定的接种体系[3]。
为此,本试验在前人的研究基础上[4-7],以青麻叶大白菜为接种对象,探讨5种常用接种方法的发病效果及不同pH值、菌液浓度、光照和其他根系分泌物等条件对人工接种效果的影响,以建立一套适合青麻叶大白菜的人工接种鉴定体系,为抗病育种提供参考依据。
1.1 试验材料供试品种为秋绿60青麻叶大白菜,由天津科润蔬菜研究所提供。
供试菌株为大白菜根肿病发病肿根,采自云南省昆明市嵩明县,取回后洗净,于-20 ℃冰箱保存备用。
1.2 试验方法1.2.1 休眠孢子液的制备制备休眠孢子液参考郭向华等[8]、杨文强[9]的方法,称10 g病根组织用榨汁机捣碎,然后经过3层纱布过滤,将滤液经1 020 r/min离心5 min,弃上清,用50 mL灭菌水重溶沉淀,再次离心5 min,弃去上清,向离心管中加5 mL 50%蔗糖溶液混匀,离心5 min,吸取上清至新离心管,再次离心10 min,弃上清,反复2次,最后将沉淀溶于5 mL灭菌水。
休眠孢子悬浮液用血球计数器计数,并在4 ℃条件下贮藏备用。
1.2.2 不同接种方法发病效果的比较试验菌土法：按比例将制备好的休眠孢子液和无菌土混合,使菌土孢子含量达到108个/g,将pH值调至6.5,含水量控制在60%左右,然后将配好的菌土置入装满灭菌营养土的育苗穴盘中,把种子播于菌土上,少量蛭石覆盖。
苗盘置于温室通风阴凉处,25 ℃条件下生长,避免阳光长时间直晒,苗盘下保持1 cm水层,30 d后调查发病情况。
密封菌土法：按比例将制备好的休眠孢子液和无菌土混合,使菌土孢子含量达到108个/g,将pH值调至6.5,含水量控制在60%左右,然后用塑料膜将配好的菌土密封48 h 后,再将菌土置入装满灭菌营养土的育苗穴盘中,把种子播于菌土上,少量蛭石覆盖。
苗期管理同上,30 d后调查发病情况。
蘸根法：选取培养10 d的健康幼苗,洗净根部,浸在孢子浓度为108个/mL的菌液中4 h,再把幼苗移植到装有灭菌土的育苗钵中。
苗期管理同上,30 d后调查发病情况。
注射法：将种子播于装有灭菌营养土的育苗穴盘中,播种后用移液器吸取孢子浓度108个/mL的菌液1 mL注射于种子下方。
苗期管理同上,30 d后调查发病情况。
浸种法：将种子浸在配制好的孢子浓度为108个/mL的菌液中4 h,然后将种子播于盛有灭菌营养土的育苗穴盘中,少量蛭石覆盖。
苗期管理同上,30 d后调查发病情况。
以上每个处理播种25穴,每穴留苗2株,3次重复。
1.2.3 不同土壤pH值对接种效果的影响将菌根加适量水,放入榨汁机中捣碎呈匀浆,按菌根和灭菌营养土1∶20(m/m)的比例配制菌土,采用密封菌土法进行接种后,用pH值分别为 5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5的水进行浇灌,使育苗盘下保持1 cm水层。
每处理25穴,每穴留苗2株,3次重复。
苗期管理同上,30 d后调查发病情况。
1.2.4 不同接种浓度对接种效果的影响采用密封菌土的方法接种,每g灭菌土接种菌根0.005,0.010,0.020,0.050,0.100,0.200 g,每处理25穴,每穴留苗2株,3次重复,苗期管理同上,30 d后调查发病情况。
1.2.5 光照对接种效果的影响按1∶20(m/m)的比例配制菌土,采用密封菌土法进行接种,播种2周后,对苗盘分别进行15 d日光处理和遮光处理,每个处理25穴,每穴留苗2株,3次重复。
苗期管理同上,播种30 d后调查统计结果。
1.2.6 植物根系分泌物对接种效果的影响选用番茄和抗、感根肿病白菜的种子经催芽后播在盛有Hoagland营养液的50 mL小烧杯里的纱布上,每杯各播10株,使根系生长后浸入营养液中,7 d后收集含根系分泌物的溶液。
按1∶20(m/m)的比例配制菌土,采用密封菌土法进行接种,然后在菌土中分别添加番茄、抗根肿病白菜、感根肿病白菜的根系分泌物溶液,以添加不含分泌物的Hoagland营养液为对照,每个处理25穴,每穴留苗2株,3次重复。
苗期管理同上,30 d后调查统计结果。
1.3 数据统计根肿病病情的分级参照2012年王彤彤等[10]的方法,分为7级。
0级:根系正常,无病害;1级:主根未发生病害,须根、侧根有个别细小根瘤;3级:主根出现病害症状但肿大不明显,须根、侧根较多根瘤或根瘤直径或长度超过0.5 cm;5级:主根肿大明显,肿大部分直径为茎基的2～3倍,大部分须根、侧根有肿瘤;7级;主根肿大明显,肿大部分直径为茎基的3倍以上。
病株率和病情指数计算公式如下:病株率=(发病株数/总株数)×100%;病情指数=∑(发病级代表值×各级病株数)×100/(调查总株数×最高级发病代表值)。
数据采用SPSS 17.0软件Duncan氏新复极差法进行差异显著性分析。
2.1 不同接种方法对接种效果的影响采用5种接种方法,以相同的接种浓度和土壤pH值对秋绿60进行根肿病接种。
由表1可知,菌土法的接种效果最好,发病率为100%,病情指数为77.14;其次是密封菌土法,发病率为93%,病情指数为56.12;再次是蘸根法和注射法,病情指数分别为51.42和48.74;浸种法的接种效果最差,发病率和病情指数都极显著低于其他4种方法。
2.2 不同土壤pH值对接种效果的影响由表2可知,利用密封菌土法接种,在其他条件一致的情况下,当土壤pH值为5.0～6.5时发病率和病情指数均较高,发病率都达到了65%以上,病情指数均接近或达到30以上,其中pH值为6.5时,发病率和病情指数最高,分别为70%和36.04,极显著高于其他处理。
但当pH>6.5时,发病率和病情指数均大幅下降。
由此可知酸性条件利于发病,且pH=6.5是最佳接种pH值,这也与根肿菌休眠孢子的萌发特性相符[11]。