几种常见的高效液相色谱法
高效液相色谱法中流动相脱气的几种方法
1.吹氦脱气法：
利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性，在0.1MPa 压力下，以约60mL/min 流速通入流动相储液容器中10～15min，可以很有效地从
采用一个高效分布式喷射流装置，一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。
这意味着1L氦气通过1L流动相就可完成排气这个工作。
这种脱气方法虽然好，但我们国内氦气价格较高，很少有实验室采用此方法。
2.加热回流法：
此法的脱气效果较好。
在操作时要注意冷凝塔的冷却效率，否则溶剂会丢失，混合流动相的比例会有变化。
3.抽真空脱气法：
此法可使用真空泵，降压至0.05～0.07MPa 即可除去溶解的气体。
但是由于高效液相色谱仪真空脱气会使混合溶剂组成发生变化，从而影响到实验的重现性，因此多用于单溶剂体系的简单分析。
4.超声波脱气法：
将欲脱气的流动相置于超声波清洗器中，用超声波震荡10～20min。
5.在线脱气法：
现在商品的HPLC 仪器，均可配在线脱气机。
在线脱气使用简单，低故障，有效。
建议购买仪器时一定要购买，有的公司是作为选购件，所以与仪器公司谈配置时应与公司确认。
20-高效液相色谱
5. 离子色谱
其分离原理与离子交换色谱原理一样， 电导检测器检测。 问题：由于流动相都是强电解质，其电导率比 待测离子约高 2 个数量级，这种强背景电导会完
全掩盖待测离子信号。
1975年Small提出，在离子交换柱之后，再串结一根
抑制柱。该柱装填与分离柱电荷完全相反的离子交 换树脂。通过分离柱后的样品再经过抑制柱，使具 有高背景电导的流动相转变为低背景电导的流动相， 从而可用电导检测器检测各种离子的含量。
在反相色谱法中，通过调节流动相的pH，抑制样品组 分的解离，增加它在固定相中的溶解度，以达到分离 有机弱酸、弱碱的目的，称为离子抑制色谱法（ISC）
（1）适用范围 弱酸 3.0≤pKa≤ 7.0 弱碱 7.0≤pKa≤ 8.0
（2）抑制剂 弱酸（乙酸）、弱碱（氨水）或缓冲盐 （3）影响k的因素 a．与流动相的极性有关（同反相色谱） b．与流动相pH有关：弱酸 pH≤pKa k↑， tR↑ 弱碱 反之
由苯乙烯与二乙烯苯交联而成
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20.4.2 化学键合相
化学键合固定相: 目前应用最广、性能最佳的固定相； 一般的键合相用硅胶为载体： a. 硅氧碳键型： ≡Si—O—C b. 硅氧硅碳键型：≡Si—O—Si — C (ODS）
1. 非极性键合相 键合相表面基团为非极性烃基， 如C18 、C8、 C1 和苯基等。一般用于反相色谱
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选择流动相时应注意的几个问题
（1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累 积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。 （2）使用前需要用微孔滤膜过滤，除去固体颗粒。
（3）流动相使用前最好脱气。
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20.6 高效液相色谱仪
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记录系统
输液系统
戊二醛浓度监测方法
戊二醛浓度监测方法戊二醛是一种常见的有机污染物，存在于室内空气中，对人体健康造成潜在风险。
因此，准确监测戊二醛的浓度是非常重要的。
在以下的回答中，我们将介绍几种常用的戊二醛浓度监测方法。
1.高效液相色谱法（HPLC）：HPLC是一种常用的分析技术，可以用于测量戊二醛的浓度。
该方法的原理是将样品中的戊二醛分离并定量。
首先，将含有戊二醛的样品通过色谱柱进行分离。
然后，使用紫外检测器测量戊二醛在某特定波长下的吸光度，从而计算出戊二醛的浓度。
2.气相色谱法（GC）：GC是一种可以高效分离和定量挥发性有机化合物的方法。
在戊二醛浓度监测中，首先需要将空气中的戊二醛吸附到固相吸附剂中。
然后，通过加热来释放吸附的戊二醛，将其引导到色谱柱中分离。
最后，使用检测器测量戊二醛的峰面积或峰高，并与标准曲线进行对比，从而得出戊二醛的浓度。
3.紫外光谱法：戊二醛在紫外光谱中有一定的吸收峰。
通过使用特定波长下的紫外灯辐射样品，并使用光谱仪测量样品吸光度，可以间接测量戊二醛的浓度。
这种方法简单易行，但准确性相对较低。
4.光学传感技术：光学传感技术是一种基于化学反应和光学信号转换的戊二醛浓度监测方法。
例如，可使用分子蓝、二甲基胺、硫代巴比妥醇等物质作为戊二醛的选择性传感器。
这些传感器与戊二醛发生特异性的反应，产生光学信号。
通过测量信号的强度或变化，可以确定戊二醛的浓度。
5.袋式监测法：袋式监测法是一种简单易行的戊二醛浓度监测方法。
该方法使用带有活性剂的吸附袋，将袋置于监测环境中。
戊二醛会与活性剂反应并被吸附到袋子中。
然后，可以将袋子送回实验室，并使用适当的分析方法提取戊二醛，并计算出浓度。
综上所述，戊二醛浓度监测可以使用多种方法进行。
选择适当的监测方法需要考虑其准确性、灵敏度、操作简便性以及实际应用场景等因素。
不同的方法具有不同的优缺点，可以根据具体需求进行选择和组合使用，以获得更准确的戊二醛浓度数据。
仪器分析 高效液相色谱法
第17章HPLC法17.1 内容提要17.1.1 基本概念高效液相色谱法──在经典液相色谱法的基础上，引入了气相色谱(GC)的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，使之发展成为高分离速率、高分离效率、高检测灵敏度的高效液相色谱法，易称为现代液相色谱法。
高效液相色谱仪──采用了高压输液泵、高效固定相和高灵敏度检测器等装置的液相色谱仪称为高效液相色谱仪。
梯度洗脱──用两种(或多种)不同极性的溶剂，在分离过程中按一定程序连续的改变流动相的浓度、配比和极性，使样品中各组分能在最佳的分配比下出峰的操作技术。
也称为梯度淋洗。
低压梯度──又称外梯度，特点是先混合后加压。
它是采用在常压下预先按一定的程序将溶剂混合后再用泵输入色谱柱系统，易称为泵前混合。
高压梯度──又称内梯度，特点是先加压后混合。
它有两台高压输液泵、梯度程序器(或计算机及接口板控制)、混合器等部件组成。
两台泵分别将两种极性不同的溶剂输入混合器，经充分混合后进入色谱柱系统，是一种泵后高压混合形式。
柱外效应──由色谱柱以外的因素引起的色谱峰形扩展的效应。
柱外因素常指从进样口到检测器之间，除色谱柱以外的所有死时间，如进样器、连接管、检测器等的死体积，都会导致色谱峰形加宽、柱效下降。
液固吸附色谱法──以固体吸附剂为固定相，吸附剂表面的活性中心具有吸附能力，样品分子被流动相带入柱内，它将与流动相溶剂分子在吸附剂表面发生竞争吸附性。
K值大的强极性组分易被吸附，K值小的弱极性组分难被吸附，样品组分因此被分离。
液液分配色谱法──根据物质在两种互不相溶(或部分互溶)的液体中溶解度的不同，有不同的分配，从而实现分离的方法。
分配系数较大的组分保留值也较大。
正相分配色谱法──流动相极性低而固定相极性高的称为正相分配色谱法。
反相分配色谱法──流动相极性高而固定相极性低的称为反相分配色谱法。
化学键合相──利用化学反应将有机分子键合到载体表面上，形成均一、牢固的单分子薄层而形成的各种性能的固定相。
淀粉液相色谱方法有哪些
淀粉液相色谱方法有哪些
淀粉液相色谱方法有以下几种：
1、高效液相色谱法（HPLC）：这是一种广泛应用于淀粉及其衍生物分析的方法。
例如，可以使用碱液作为提取溶剂，通过超声提取和过滤后，利用C18反相色谱柱进行分离，并使用PDA检测器进行检测，以测定淀粉中的丁二酸含量。
此外，还有基于HPLC的方法用于测定淀粉中顺丁烯二酸及顺丁烯二酸酐的含量。
2、凝胶渗透色谱法（GPC）：这种方法主要用于测定淀粉的分子量分布，通过分析不同分子量的聚合物在凝胶介质中的迁移速率来实现。
虽然文献中没有直接提到GPC用于淀粉的分析，但考虑到其在聚合物分析中的应用，可以推断GPC 也是分析淀粉的一种方法。
3、酶-比色法：这是一种适用于食品中淀粉测定的方法，基于淀粉葡萄糖苷酶催化下淀粉的水解反应，通过比色法来定量分析淀粉的含量。
高效液相色谱分析法 HPLC
§2-3 各类高效液相色谱法简介
一、液固吸附色谱法（LSC） (liquid-solid adsorption chromatography)
二、液液分配色谱法（LLC） (liquid-liquid partition chromatography, chemical bonded phase chromatography
2．流动相差别的区别 GC：流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用
力，只与固定相有相互作用。 HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用
力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起 正向作用。且流动相种类较多，选择余地广，改 变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用，当 选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相 也可以增大分离选择性。 3．操作条件差别 GC：加温操作 HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小）
2．进样装置 1）隔膜进样（高分子有机硅胶垫→进样室）
GC系统压力较小，可以 HPLC系统压力太大，必须停泵进样（早期） 2）阀进样：不必停泵，六通阀
液相色谱
3．色谱柱：直径4~6mm,柱长10~30cm 柱效评价：色谱系统适应性试验 R，n，fs（拖尾因子） 柱再生：维护、保养、柱子的冲洗
4．检测器 1）紫外检测器：适于吸收紫外光的物质 2）荧光检测器：只能分析自身发光的物质 灵敏度高 3）示差折光检测器：利用折光率的差别 灵敏度低，温度要求严格 4）电化学检测器 5）化学发光
注：调节溶剂极性，可以控制组分的保留时间 5．出柱顺序：强极性组分后出柱，弱极性组分先出柱 6．硅胶吸水量↑，LSC→LLC • 硅胶含水量较小 吸附色谱 硅胶极性较大 • 硅胶含水量>17% 分配色谱 硅胶失活→载体
乳品中抗生素的检测方法
乳品中抗生素的检测方法引言：抗生素是一种用于治疗和预防疾病的药物，但在食品中的残留量超标可能对人体健康造成负面影响。
乳制品是人们日常生活中常见的食品之一，因此对乳品中抗生素残留的检测方法至关重要。
本文将介绍几种常用的乳品中抗生素检测方法。
一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种常见的用于检测乳制品中抗生素残留的方法。
该方法能够在短时间内对多种抗生素进行分离和定量。
具体操作步骤如下：1.准备样品：将待测乳制品样品样品加入适量的提取剂中，经过摇晃和离心等操作，获得样品提取液。
2.样品的制备：将样品提取液进行蒸发浓缩，得到浓缩样品。
3.高效液相色谱分离：将浓缩样品溶解于适量的溶剂中，并通过高效液相色谱仪器进行分离，获得不同抗生素的峰。
4.定量分析：通过标准曲线法，根据峰的面积或高度进行定量分析，得出样品中抗生素的浓度。
优点：高效液相色谱法能够同时检测多种抗生素，具有较高的定量精度和分辨率。
二、酶联免疫吸附试验法（ELISA）酶联免疫吸附试验是一种利用抗生素与酶标记物结合来检测乳制品中抗生素残留的方法。
具体操作步骤如下：1.制备测定板：首先将具有抗生素特异性的抗体固定在微孔板上。
2.加样：将待测样品加入微孔板中，经过一定的反应时间，让样品中的抗生素与抗体结合。
3.洗涤：用洗涤缓冲液清洗微孔板，去除未结合的物质。
4.酶标记：加入酶标记抗体，使其与结合到微孔板上的抗生素形成复合物。
5.底物溶液：加入底物溶液，通过底物的催化反应，将其转变为有颜色的产物。
6.测定：通过酶标仪器测定样品中产生的颜色和强度，得出抗生素的浓度或者阳性相关性结果。
优点：酶联免疫吸附试验法具有操作简便、快捷、敏感性高等优点，能够检测到低浓度的抗生素残留。
三、质谱法（MS）质谱法是一种通过对乳品样品中的物质进行化学分析的方法，它能够精确地分析样品中的抗生素成分。
该方法结合了质谱仪和色谱仪的特点，具体步骤如下：1.样品制备：将待测乳制品样品加入适量的提取剂中，经过摇晃和离心等操作，获得样品提取液。
高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及其适用条件
高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及其适用条件高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及其适用条件高效液相色谱法（HPLC）是一种非常常见的化学分析技术，其在分析中的应用已经非常广泛。
其中之一的重要用途就是用于杂质检测。
本文将介绍高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及其适用条件。
1.逆相高效液相色谱法逆相HPLC主要用于检测极性杂质。
它使用疏水性的反相柱填充物，这种填充物可以和极性溶剂相互作用。
当混合物通过反相柱时，在柱中的组分会滞留一段时间，此时杂质就可以被分离出来。
因此，逆相HPLC对于分析高度溶解性的非极性杂质和极性杂质均有很好的效果。
适用条件：- 样品中至少有一个不溶于水的有机溶剂。
- 反相柱填充物和分离相应极性。
- 样品中杂质相对于目标物的极性越差，逆相越有效。
2.离子交换色谱法离子交换色谱法主要用于检测负离子杂质。
在这种类型的HPLC中，柱填充物上带有离子基团，当溶液中的离子物通过柱时，它们将与固定于柱上的离子基团相互作用。
由于离子交换标准不同，因此可以根据所使用的柱来选择离子。
离子交换色谱法主要用于检测具有电荷的杂质，如药物或食品添加剂中的离子。
适用条件：- 样品中必须有离子性组分。
- 选择正确的柱来吸附目标离子。
3.手性高效液相色谱法手性高效液相色谱法主要用于检测手性杂质。
由于某些化合物有不对称的结构，它们的镜像分子可能会展现不同的行为。
通过手性高效液相色谱法，可以区分两个镜像分子的不同响应，同时分离出目标分子并鉴定其中的杂质。
适用条件：- 样品中存在手性化合物。
- 使用手性柱、手性分离剂，并控制流速和温度。
4.滴定高效液相色谱法滴定高效液相色谱法主要用于检测酸碱度。
这种方法将杂质和目标物的pH值测量在混合物中的变化，通过测量酸碱度差异和滴定确定溶液的pH值差异。
当混合物的pH值不同时，将杂质许多样品成功地分离出来。
适用条件：- 样品中必须含有酸碱性固体或液体阴离子离子或阳离子。
- 液相分离柱具有与横向遇到的离子相关的电性。
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（3）化学键合固定相
化学键合固定相：应用最广、性能最佳的固定相； a. 硅氧碳键型： ≡Si—O—C b. 硅氧硅碳键型：≡Si—O—Si — C 稳定，耐水，耐光，耐有机溶剂，应用最广。 c. 硅碳键型： ≡Si—C d. 硅氮键型： ≡Si—N
化学键合固定相的特点：
（1）传质快，表面无深凹陷。 （2）寿命长，化学键合，无固定液流失，耐流动相冲击； 耐水，耐光，耐有机溶剂，稳定。 （4）选择性好，可键合不同官能团，提高选择性。 （5）有利于梯度洗脱。 存在着双重分离机制：(键合基团的覆盖率决定) 高覆盖率：分配为主； 低覆盖率：吸附为主。
保留值随KXY 和[Y-] 水相 的增大而延长，而KXY 取决于对 离子和有机相的性质，则控制流动相中加入的对离子特性 和浓度可以调整组分保留时间，达到提高色谱分离选择性 的目的。
固定相：凝胶(具有一定大小孔隙分布)。 原理：按分子大小分离。小分子 可以扩散到凝胶空隙中通过，出峰 最慢；中等分子只能通过部分凝胶 空隙，中速通过；而大分子被排斥 在外，出峰最快；溶剂分子小，故 在最后出峰。 全部在死体积前出峰。 相对分子质量在100～105范围内 的化合物按质量分离。
官能团的化合物和异构体有较高选择性。
基本原理：
流动相中的溶质分子（X）与溶剂分子（S）在固定相 吸附剂上的竞争吸附： Xm + nSa = Xa + nSm 下标m、a分别表示流动相和固定相，n是被吸附的溶剂分子 数。达到吸附平衡时，吸附平衡常数（K）可表示为：
[X a ][Sm ]n K [X m ][Sa ]n
14.4 离子对色谱 ion pair chromatography 将一种(或多种)与溶质离子电荷相反的离子(对离子
或反离子)，加到流动相中与溶质离子结合形成疏水性 离子对，能够在两相之间进行分配。 阴离子分离：对离子常用烷基铵类，如氢氧化十六 烷基三甲胺。 阳离子分离：对离子常用烷基磺酸(己烷磺酸钠)。 反相离子对色谱：非极性的疏水固定相(C18 柱)，含 有对离子Y+的甲醇-水或乙腈-水作为流动相，试样离子
4. 选择流动相时应注意的几个 问题
（1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累 积，损坏色谱柱和使检测器噪声增加。 （2）避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱 子。如使固定液溶解流失，酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。 （3）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并 在柱中沉积。 （4）流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测 器时，流动相不应有紫外吸收。
（1）软质凝胶 葡聚糖凝胶、琼脂凝胶等，多孔网状结构。 水为流动相，适用于常压排阻分离。 （2）半硬质凝胶 苯乙烯-二乙烯基苯交联共聚物，有机凝胶； 非极性有机溶剂为流动相，不能用丙酮、乙醇等极性溶剂 （3）硬质凝胶 多孔硅胶、多孔玻珠等； 化学稳定性、热稳定性好、机械强度大，流动相性质影响小， 可在较高流速下使用。 可控孔径玻璃微球，具有恒定孔径和窄粒度分布。
采用正相液-液分配分离时，首先选择中等极性溶剂， 若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。
也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使 保留时间缩短。 常用溶剂的极性顺序： 水(最大) > 甲酰胺> 乙腈> 甲醇> 乙醇> 丙醇> 丙酮>二氧六环> 四氢呋喃> 甲乙酮> 正丁醇> 乙酸乙酯> 乙醚> 异丙醚> 二氯甲烷>氯仿>溴乙烷>苯>四氯化碳>二硫 化碳>环己烷>己烷>煤油(最小)
常见的几种色谱方法
• 14.1 液-固吸附色谱
• • • • •
14.2 液-液分配色谱 14.3 离子交换色谱 14.4 离子对色谱 14.5 排阻色谱 14.6 亲和色谱
14.1 液-固吸附色谱
固定相：固体吸附剂，如硅胶、氧化铝等，较常使 用的是5～10μm的硅胶吸附剂。 流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。 基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸； 适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有
K分配系数，但K值大，表明该溶质分子在固定相上被吸 附得多，吸附作用强，该组分的保留时间长，分配系数也 大。吸附平衡常数K可以由吸附等温线数据求出。
等温吸附线与色谱峰形：
拖尾峰(凸形等温吸附线)： 被吸附分子首先占据强吸附力 的点。低浓度时，主要被强吸附 力的点吸附，保留时间长。 浓度高时，较多溶质分子被吸附力弱的点吸附，造成色 谱峰中心部分运动速率较快，峰前移，而后沿部分吸附力 相对较强，运动速率较慢，形成拖尾峰。 液-固吸附分离模式适用于分离相对分子质量中等的油溶 性试样，对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性。
不同待测离子与反离子形成离子对的能力不同，分配 系数存在差异，导致在固定相中滞留时间不同，从而实现 色谱分离。
离子对的容量因子k可表示为：
VS 1 k DX K XY [Y ]水相 VM
则组分的保留时间：
L 1 tR (1 K XY [Y ]水相 ） u
3.离子交换色谱分离固定相
结构类别： （1）薄壳型离子交换树脂 薄壳玻璃珠为担体，表面涂约 1%的离子交换树脂。 （2）离子交换键合固定相 薄壳键合型；微粒硅胶键合型 （键合离子交换基团）。 树脂类别： （1） 阳离子交换树脂（强酸性 、弱酸性）。 （2） 阴离子交换树脂（强碱性 、弱碱性）。
4. 空间排阻分离固定相
cs VR Vm K Vp cm
分子完全排斥时，K = 0； 可自由进入孔道时，K = 1；
部分进入时，K = 0～１；
保留体积位于： Vm～Vm+Vp
14.6 亲和色谱(AC) Affinity chromatograph 原理：利用生物大分子和固定相表面存在的某种特异性
亲和力，进行选择性分离。
14.3 离子交换色谱
固定相：阴离子交
换树脂或阳离子离子交
换树脂。 流动相：阴离子交 换树脂作固定相，采用 酸性水溶液；阳离子交
换树脂作固定相，采用
碱性水溶 。
基本原理
平衡时，平衡常数为
K B/A [R B][A] [B][R A]
对于磺酸型阳离子交换树脂，一价阳离子的KB/A值顺序：
间隔基：环氧、联胺等；
配基：酶、抗原等；
这种固载化的配基将只能和 具有亲和力特性吸附的生物大 定相
1.液-固吸附分离固定相
种类：硅胶、氧化铝、分子筛、聚酰 胺等。种类有限，应用面相对较窄。 结构类型：全多孔型和薄壳型； 粒度：5～10 μm。
固定相与流动相互不相溶。
14.2 液-液分配色谱
基本原理：组分在固定相和流动相上的分配。 流动相：亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流动相 的极性小于固定液的极性(正相 normal phase)，反之流动相 的极性大于固定液的极性(反相 reverse phase)。正相与反相 的出峰顺序相反。 固定相：早期涂渍固定液，现已不采用。 化学键合固定相：将基团通过化学反应键合到硅胶（担 体）表面的游离羟基上，如C18柱（反相柱）。
Cs+>Rb+> K+>NH4+> Na+>H+>Li+ 二价阳离子的KB/A值顺序： Ba2+>Pb2+> Sr2+>Ca2+> Cd2+>Cu2+ 对于季胺型阴离子交换树脂，一价阴离子的KB/A值顺序： ClO4-> I-> HSO4-> SCN-> NO3-> Br-> NO2-> CN-> Cl-> BrO3-> OH-> HCO3-> H2PO4-> IO3-> CH3COO-> F-
14.3 液相色谱的流动相
1. 流动相特性
（1）流动相组成改变，极性改变，可 显著改变组分分离状况。 （2）亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性 小于固定相的极性，正相，极性柱也称正相柱。 （3）若流动相的极性大于固定液的极性，则称为反相液液 色谱，非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上 的出峰顺序相反。
2. 流动相类别
按流动相组成分：单组分和多组分；
按极性分：极性、弱极性、非极性；
按使用方式分：固定组成淋洗和梯度淋洗。
常用溶剂： 己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、
乙腈、水。
采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动
相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。
3. 流动相选择
在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。
X-进入流动相后，生成疏水性离子对Y+X-。
基本原理：
形成的离子对化合物X+Y-，在两相间进行分配： X+水相 + Y-水相 = X+Y-有机相 平衡常数： [X Y ]有机相 K XY [X ]水相 [Y ]水相 溶质在两相间的分配系数DX为：
DX [X Y ]有机相 [X ]水相 K XY [Y ]
2. 液-液分配及离子对分离固定相
（1）全多孔型担体 氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体；早期采用 100μm的大颗粒，表面涂渍固定液，性能不佳已不多见。 现采用10μm以下的小颗粒，化学键合制备柱填料。 （2）表面多孔型担体 （薄壳型微珠担体） 30～40μm的玻璃微球， 表面附着一层厚度为1 ～ 2μm的多孔硅胶。 表面积小，柱容量低。
14.5 排阻色谱 size- exclusion chromatography
基本原理：
色谱柱的总体积为 Vtol = Vm + Vp + Vg
Vm为死体积，即对应于完全
排斥分子流出体积；Vp 为孔