叶绿素分离实验

一、叶绿体中色素的提取和分离说明

1、取材时要选用新鲜的颜色较深的叶片，以便使滤液中含较多的色素

2、研磨时加入二氧化硅的目的是为了研磨的充分，更有效的破坏细胞结构；加入少许碳酸钙的目的是为了防止在研磨过程中，叶绿素受到破坏。因为叶绿素分子结构中含有一个镁原子，当细胞破裂时，细胞液内有机酸的氢可以取代镁原子而成为褐色的去镁叶绿素，碳酸钙可中和有机酸以防止去镁反应的发生

3、研磨时要迅速、充分。一是因为丙酮容易挥发；二是为了使叶绿体完全破裂，从而能提取出较多的色素；三是叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。

4、制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角。这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，便于观察实验结果。

5、画滤液细线时，一定要细且直。这样可以防止色素带重叠，使色素分子均匀分布在一条直线上，做到扩散起点一致。重复划2～3次，是为了增加滤液细线上的色素分子数量，使实验效果更加明显。

6、分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解于层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。

7、识记实验结果的色素带分布及宽窄（四种四素扩散速度的先后顺序为：胡萝卜素－叶黄素－叶绿素a－叶绿素b）

二、习题

一、选择题

1、叶绿素不溶于( )

A．水B．石油醚C．丙酮D．苯

2、下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述中，不属于实验要求的是( )

A．提取高等植物叶绿体中的色素B．用纸层析法分离色素

C．了解各种色素的吸收光谱D．验证叶绿体中所含色素的种类

3、通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现四条色素带，自上而下依次为( )

A．胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿紊b B．胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素

C．叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素D．叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素

4、在进行叶绿素提取和分离的实验时，不能让层析液没及滤液细线的原因是( )

A．滤纸上几种色素会扩散不均影响实验效果B．滤纸上的滤液细线会变粗而使色素太分散

C．色素会溶解在层析液中，使实验结果不明显D．滤纸上的

几种色素会混合起来不分散

5、对“叶绿体中色素的提取和分离”实验中，下列描述正确的是

( )

以后，迅速研磨A．将5 g新鲜完整的菠菜叶，放入研钵中，加入丙酮、石英砂、CaCO

3

B．用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线处小心均匀地划出一条滤液细线，并连续迅速地重复划2～3次C．把划好细线的滤纸条插入层析液中，并不断摇晃，以求加快色素在滤纸条上的扩散

D．色素分子是有机物，不溶于水，所以研磨过程中加入丙酮是为了溶解色素

6、在叶绿体中的色素提取和分离实验中，四种色素在滤纸条上扩散速度最快的和最慢的是( )

A、胡萝卜素和叶绿素b

B、胡萝卜素和叶绿素a

B、叶黄素和叶绿素b D、叶黄素和叶绿素a

7、装置甲是用来验证绿色植物在有光条件下释放氧气的装置，装置乙和丙是另外两个装置，通常可作为本实验的对照实验的装置( )

A．乙和丙B．乙

C．丙D．乙和丙都不是

8、叶绿素体中的各种色素能够在滤纸上彼此分离的原因是( )

A．色素提取液中的不同色素已经分层

B．阳光的照射使各种色素能彼此分开

C．各种色素随层析液在滤纸上扩散速度不同

D．丙酮使色素溶解并分离的扩散速度不同

9、下列生物实验：①制作洋葱根尖分生区装片时，用10％盐酸处理根尖；②将重组质粒导人大肠杆菌，先用氯化钙溶液处理大肠杆菌；③用胰蛋白酶处理动物组织，使细胞分散开来，进行细胞培养；④用纤维素酶和果胶酶处理白菜和甘蓝体细胞，进行体细胞杂交；⑤为了更充分提取叶绿体中的色素，在研磨叶片时，加入二氧化硅。以上实际所用试剂的作用与细胞壁有关系的是( )

A．①②③④⑤B．①②③C．①②④⑤D．①④⑤

10、为了降低实验难度，使用纸层析法分离叶绿体中色素时，将使用毛细吸管在狭窄滤纸条上描绘滤液

细线的方法改为在圆形滤纸中心点样；用细棉线穿过样品中心作为层析液引流线，装

置如图所示。层析结果在滤纸上呈同心圆状分布，从外向内表示叶绿素b和叶黄素的

是( )

A．c和d B． c和8

C．d和b D．e和b

11、下列有关叶绿体和光合作用的几个简单的小实验，你认为哪一个的结果是不可能的( )

的密闭透明的照光小室内，3小时后在叶内淀粉中A．将经饥饿处理后的绿色正常叶片置于含有充足14CO

2

可检验到14C的存在

B．叶绿体色素的丙提取液放于自然光和三棱镜之间，从三棱镜的一侧观察，连续光谱中变暗(暗带)的区域是红光和蓝紫光区域

C．在温暖晴朗的一天下午，在某植物的向阳处采得一片叶，用酒精隔水加热脱色，并加碘液处理叶片，显微镜下观察到叶绿体变成蓝色

D．将叶绿素的丙酮提取液置于适宜光源下照射5 h，加碘液处理后溶液呈蓝色

12、在叶绿体色素的提取和分离实验中，如果没有丙酮和菠菜叶片，那么要保证分离后的色素带清晰，可以用来替代的实验材料是( )

A．酒精和麦苗B．酒精和大白菜C．蒸馏水和大白菜D．蒸馏水和麦苗

13、下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是( )

A．用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定

B．脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴

C．鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液

D．用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用14、下列有关实验的叙述中，正确的是( )

A．“叶绿体色素的提取和分离实验”可用蒸馏水和大白菜代替丙酮和菠菜叶

B．观察质壁分离实验时，可以选用人的口腔上皮细胞

C．在显微镜下观察到的分生区细胞中无叶绿体和大的液泡

D．把载有水绵和厌氧型细菌的临时装片放在密闭黑暗的环境中，用极细光束照射，厌氧细菌将主要集中在带状叶绿体接受光照的部位