生防菌剂研究进展
芽孢杆菌对玉米真菌病害生物防治效果的研究进展
蒲 欣，吴茂华，刘 锋，等．芽孢杆菌对玉米真菌病害生物防治效果的研究进展［Ｊ］．江苏农业科学，２０２４，５２（４）：２３－３０．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２４．０４．００４芽孢杆菌对玉米真菌病害生物防治效果的研究进展蒲 欣，吴茂华，刘 锋，陈 松，任 尧，何 兵（四川师范大学生命科学学院，四川成都６１０１０１） 摘要：玉米是世界上三大粮食作物之一，对粮食安全有着重要影响。
近年来，随着全球气候变化，耕作机制转变等原因，玉米病害流行，尤以真菌病害为主，严重降低玉米的产量和品质。
常用的合成农药易造成环境污染且危害人类健康，而物理防治因成本高等问题防治效果不理想，生物防治因对环境友好等特点逐渐被应用于植物真菌病害防治，玉米主要依赖生防菌进行真菌病害的防治。
木霉属、假单胞杆菌属、芽孢杆菌属等多种生防菌被发现具有良好的生防效果，其中芽孢杆菌因在自然界中分布广、能产生抗逆性较强的芽孢且能促进植物生长而被应用于植物病害的防治中。
本文综述了玉米几种主要真菌病害的危害及芽孢杆菌应用于玉米叶斑病、穗腐病和纹枯病等真菌病害中的防效，总结了芽孢杆菌对空间和养分的竞争，抗生素、挥发性有机物等抗菌物质的生产和诱导植物抗性的生防机制研究进展，为生防菌剂的联合使用、提高抗菌物质产量提供研究思路。
关键词：芽孢杆菌；玉米；真菌病害；生物防治；抗菌物质；研究进展 中图分类号：Ｓ４７６；Ｓ４３５．１３１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２４）０４－００２３－０８收稿日期：２０２３－０４－２３基金项目：四川省自然科学基金（编号：２０２２ＮＳＦＳＣ１７２０）。
作者简介：蒲 欣（２０００—），女，四川南充人，硕士研究生，主要从事植物与微生物互作研究。
Ｅ－ｍａｉｌ：２５８０３９８７９８＠ｑｑ．ｃｏｍ。
通信作者：何 兵，博士，副教授，主要从事植物与微生物互作研究。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｅｂｉｎｇ＠ｓｉｃｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。
杀菌剂研究开发新进展
５４ Ｉ ／ ２ 襄化市蜴ｌ ６ ｏ①＠农 行 资 媒 。 化业深体
该 院杀 菌剂 申请 了中 国、美 国、欧 洲、 日本 等十 余项 药研 究服务 中心 承担的 国家农业 科技成果转化资金 项
专利 ， 取得 了我 国农 药登 记。 生物 电子等理论指导下 ， 目 “ 型杀菌剂 丙烷脒 中试 与示 范” ，转化期 间获得 在 新 开 发成功 具有 自主知识 产权 的 甲氧基 丙烯酸 酯类杀 菌 两项 国家发 明专利 ，属 国内首 家合 成 ，具有 自主知识 剂 。沈 阳化工 研究 院又 发现新 化合 物 Ｓ － ０ １ ＹＰ Ｚ ７ ，它 产权 的烷基脒类 杀菌剂 。其产 品丙烷脒对作物灰霉 病
菌灵产生抗性 的病 害灰霉病有特效 ；②以天 然产 物为 治市场 １－ ０年的三唑类杀菌剂 的霸主地位 ，特别是 ５２
先导化合物开发 的具有 独特作用机理 的新型杀 菌剂 ，
目前 已发展成 为欧洲谷物市场 的主要杀菌剂 品种 。新
如吡咯类和丙烯 酸酯类杀菌剂等不仅 活性 高 ，且 与 已 品种 的开 发是这类杀菌剂保持 快速发展 的关键 ，也是 知杀菌剂无交互抗性 ；③为增 强作物 自身对病 害免 疫 各大公司获得高额 利润回报 的手段 。据有关专家预测 ， 能力的植物激活 剂是近年来发展 的，具有全新 作用机 全球 甲氧基丙烯酸酯类杀菌 剂市场平均每年将 以约 ２ ％ 理的～类新颖杀 菌剂 ，如新一代植物 防病激 活剂 活化 的速 度逐 年上涨 ， 并将 成为 ６ 美元杀 菌剂市 场 的 ０亿 酯具有 “ 系统 自动抗病性 ”。 ２ 非 内吸性杀菌剂市场仍将 占据较大份额 由于 ． 主要发展方 向，其市场前景 非常广 阔。 ４ 三 唑类杀菌 剂仍将 继续成 为杀菌 剂体系 中的主 ．
生防芽孢杆菌的研究进展
生防芽孢杆菌的研究进展作者：彭研等来源：《山东农业科学》2013年第07期摘要：针对植物病害问题，概述了生防芽孢杆菌抗菌物质的种类、作用机制以及应用现状，讨论了生防芽孢杆菌在实际应用中存在的问题及发展前景。
关键词：生物防治；芽孢杆菌；拮抗作用中图分类号：S476+.1文献标识号：A文章编号：1001-4942（2013）07-0138-03微生物杀菌剂的特性和发展趋势与人类生态环境、食品安全和生物多样性具有良好的相容性，而且现代微生物工业化生产技术体系日趋完善。
因此，研发可替代化学杀菌剂的微生物杀菌剂是植物病害生物防治研究的重要方面[1～3]。
芽孢杆菌种群庞大，繁殖能力强，耐热、耐酸碱、理化性质稳定，抑菌谱广泛，为目前主要的生防菌株[4]。
生防芽孢杆菌主要有枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）、多粘芽孢杆菌（Bacillus polymyxa）、蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）、巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）和短小芽孢杆菌（Bacillus pumilis）等。
1生防芽孢杆菌抗菌物质的种类生防芽孢杆菌抗菌物质主要为抗生素、细胞壁降解酶和其他抗菌蛋白及挥发性抗菌物质等。
根据抗菌物质的合成途径，可以分为核糖体途径合成的抗菌物质，如细菌素、细胞壁降解酶、其他抗菌蛋白；非核糖体合成的抗菌物质，如脂肽类、多肽类、挥发性抗菌物质、其他抗菌物质[5，6]。
1.1细菌素细菌素是由细菌核糖体产生的具有抑菌活性的小分子量抗菌肽。
如枯草芽孢杆菌产生的枯草菌素（Subtilin）、细菌素（Subtilosin）、杀葡孢菌素（Botrycidin AJ316）、Alirin B-1，巨大芽孢杆菌产生的巨杆菌素（Megacins）等。
他们大都具有低分子量、水溶性好、热稳定、酸碱耐受性强和广谱抗菌等特点，最近发现的植物乳杆菌（L. plantarum）TN635能够合成对真菌热带假丝酵母（Candida tropicalis ）R2CIP203和革兰氏阴性菌──肠道沙门氏菌（Salmonella enterica） ATCC43972均有抑制作用的细菌素[5～8]。
我国微生物农药的研发与应用研究进展
我国农作物种植面积广阔，种植作物种类多样，在农业生产中，农作物常常受到多种病虫草害的危害。
化学农药因其适用范围广、作用效果迅速、使用方便等被广泛用于防治各类病虫草害，但使用化学农药也容易造成人畜中毒、杀害有益生物等，同时由于化学农药的滥用使得部分害虫、致病菌和杂草的抗药性增强，导致防治难度加大。
相比于化学农药，以真菌、细菌和病毒等生物活体或其代谢产物为主要成分的生物农药对生物和环境更加友好，自20世纪80年代以来，生物农药迅速发展，行业市场规模逐步扩大。
生物农药可分为微生物农药、植物源农药和生物化学农药等，经农业农村部农药检定所查询，截至2022年12月31日，我国在有效登记状态的农药登记产品为45172个，其中生物农药产品2159个 (未包括农用抗生素和天敌)，占全部农药总数的4.78%，占比非常低。
在生物农药中，微生物农药是研究热点之一。
在《农药登记资料要求》中规定，微生物农药是指以天然的或经基因修饰的细菌、真菌和病毒等微生物活体为有效成分的农药，按用途可分为微生物杀虫剂、微生物杀菌剂和微生物除草剂等。
该类农药具有有效成分来源广泛、选择性强、对人畜毒性低等优点。
经农业农村部农药检定所查询，截至2016年12月31日，我国已登记微生物农药有效成分42个，到2022年12月31日，已达56种，可见微生物农药呈逐年增长趋势。
我国的微生物农药发展已经进入了一个相对快速发展的阶段，生防微生物不断增多，各种新型微生物农药也不断涌现。
已有研究对微生物农药常见剂型种类及特点、产品质量、安全性评价和使用技术相关标准、助剂研发、管理现状、产业发展等方面进行了详尽的阐述，但尚缺乏典型微生物农药在防治重大病虫害方面应用情况的综述报道。
鉴于此，本文梳理了我国近几年一些原创的、新型的微生物杀虫剂、杀菌剂和除草剂在生防菌株筛选、产品创制与应用等方面的研究进展，并对微生物农药发展提出建议和展望，旨在为行业相关单位和人员提供参考。
植物病害生防菌抗菌活性物质研究进展
植物病害生防菌抗菌活性物质研究进展
谭鸿升
【期刊名称】《农业研究与应用》
【年(卷),期】2024(37)1
【摘要】生防菌是一类能产生多种活性物质,从而防治植物病害的有益微生物。
利用这些微生物产生的抗菌活性物质进行病害防治是未来绿色农业的发展方向。
本文从抗菌物质的资源挖掘、成分种类、作用机制等方面归纳梳理了植物生防菌抗菌活性物质的研究进展,并提出该研究领域尚存在的问题及今后的研究方向,以期为进一步开展植物生防微生物资源的研究和开发利用提供理论参考。
【总页数】9页(P66-74)
【作者】谭鸿升
【作者单位】昆明学院农学与生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】S476
【相关文献】
1.生防菌弗氏链霉菌S-221所产抗菌物质的抗菌活性测定
2.产抗菌活性物质植物内生菌的研究进展
3.植物内生菌抗菌活性物质研究进展
4.植物内生菌抗菌活性物质的研究进展
5.植物内生菌抗菌活性物质的研究进展
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微生物抗菌剂的研发及应用研究
新型农用微生物杀菌剂的研制及应用一、立项依据和研究基础植物真菌病害导致的农作物减产和采后损失一直以来都是阻碍农业生产的关键问题之一。
化学农药作为作物病害防控的重要措施，有效保障了农产品的高产和稳产，同时也带来了食品安全和环境安全的隐患。
因此，创制安全高效的微生物农药成为当今国际研发的热点。
生物防治植物真菌病害因为在应用中具有对环境安全、无污染、特异性强、不产生抗药性并且能够提高农田生态系统的生物多样性等优点而受到越来越多的关注。
其中微生物菌剂资源的匮乏是目前制约我国生物菌剂健康发展的4大瓶颈之一。
目前，越老越多的研究将资源的开发瞄中了植物内生菌的开发方面。
内生菌可以被用来防治植物真菌病害，并且部分菌株已经被研发成生物农药用于农业生产当中。
为了给生物防治植物真菌病害提供新的菌种资源，我们近年来开展了生防菌资源的开发研究工作，积累了丰富的经验，同时获得了几株对植物病原真菌抗性强，广谱性高的生防菌，并发表了相关研究论文和申报了国家发明专利。
在对中药内生菌的研究中，我们从独角莲块茎（Typhonium giganteum Engl.）中获得了2株广谱性植物病原真菌拮抗芽孢杆菌，并命名为TG-116和TG119。
通过实验室拮抗实验和盆栽试验发现，对辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）、辣椒炭疽病菌（Colletotrichum capsici）、马铃薯立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum）、黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum）、黄瓜灰霉病菌（Botrytis cinerea）及番瓜绵疫病菌（Pythium aphanidermatum）等7种供试植物病原菌均有良好拮抗作用（图1-2.表1-2）。
图1 TG116菌株对植物病原真菌的抑制作用表1. TG116菌株对植物病原真菌的抑菌活性植物病原真菌Pathogenic fungi 抑菌率Inhibition rate（%）辣椒疫霉病菌P. capsici 81.98辣椒炭疽病菌C. capsici 74.42马铃薯立枯丝核菌R. solani74.88小麦赤霉病菌F. graminearum84.83黄瓜枯萎病菌F. oxysporum75.78黄瓜灰霉病菌B. cinerea72.85番瓜绵疫病菌P. aphanidermatum78.69表2 TG119菌株对植物病原真菌的抑菌活性植物病原真菌发酵液抑菌率（%）菌液抑菌率（%）小麦赤霉病菌（F. graminearum）76.85 89.23辣椒疫霉病菌（P. capsici）81.68 86.62黄瓜枯萎病菌（F. oxysporum）71.61 74.55辣椒炭疽病菌（C. capsici）70.61 74.02黄瓜灰霉病菌（B. cinerea）70.98 82.98番瓜绵疫病菌（P. aphanidermatum）79.75 81.44马铃薯立枯丝核菌（R. solani）74.66 76.59图2 TG116菌株对植物病原真菌菌丝的拮抗形态通过盆栽试验表明，经地衣芽孢杆菌TG116灌根处理后，黄瓜叶部组织中的POD、PPO、PAL等防御酶类活性升高；尤其在同时接种TG116和黄瓜枯萎病病原菌后，3种防御酶类活性上升的幅度比单独接种要高；同时黄瓜叶片中MDA含量降低，减轻植株细胞膜脂过氧化损伤。
生物防治对于玉米主要病害的研究进展
２ ２ ４ ・
农林 科研
生物 防治对于玉米主要病害 的研 究进 展
摘 要： 在我 国各 玉米产 区主要 的病 害有 ４种 ， 即茎基腐病、 丝黑穗病、 纹枯病和全蚀病。 自 从２ ０世纪 ７ ０年代初期 ， 全 国开展 玉米病 害联 合攻关研 究以来， 在病原茵种类、 致病机理、 流行规律 、 抗病 育种和综合防治等方面做 了大量的工作 ， 取得 了一定成绩。但近些年来 ， 随着耕作 和栽培制度的改变 ， 品种轮 换及 高油、 高淀粉 品种 大面积种植 ， 玉米的土传病 害有逐年加 重的趋势。一般年份发病率 大约在 １ ０ ％ ３ ０ ％严重年份甚 至可以达到 ６ ０ ％￣ Ｘ 上， 产量显著 降低。所 以土传病害 已成 为玉米稳产、 高产的主要 制约因素之一。本文就玉米主要病 害 和现今 的生防方法进行初步探 讨。 关键词 ： 丝黑穗病； 茎腐病； 假 单胞 茵； 芽孢杆 茵 １下面介绍几种主要微生物作为生防菌剂的研究进展 镰刀菌 、 串珠镰刀菌 、 肿囊腐霉 、 禾生腐霉 、 瓜果腐霉￥ 等 引起 的。近 １ ． １ 细菌 。常见的对土传病害具有生物 防治作用 的细菌主要有 ２ Ｏ年来 ， 对茎腐病生防研究较多 ， 多数 生防菌是 从根表或根 围土壤 两大类群 ： 假单胞菌（ Ｐ ｓ ｅ ｕ ｄ ｏ ｍ ｏ ｎ ａ ｓ ） 和芽孢杆菌（ Ｂ ａ ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｏ 中分离 的对镰刀菌和腐霉菌有拮抗作用的细菌 、 真菌和放线菌 。在 假单胞菌广泛存在于植物根际 ，具有突出的防病 增产 的作用 ， 上述 拮抗菌 中有的 已开发成 生物制剂 ， 如Ｂ Ｇ 一 ２ （ 含Ｂ ｕ ｒ ｃ ｈ ｏ ｌ ｄ ｅ ｒ ｉ ａ和 其 中以 Ｐ ． ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｓ 等细菌的不同菌株研究最为广泛。假单胞菌属 Ｇ ｌ ｉ ｏ ｃ ｌ ａ ｄ ｉ ｕ ｍ ｖ ｉ ｒ ｅ ｎ ｓ ） ， Ｓ ｏ ｉ ｌ ｇ ａ ｒ ｄ （ 含Ｇ ｌ ｉ ｏ ｃ ｌ ａ ｄ ｉ ｕ ｍ ｖ ｉ ｒ ｅ ｎ ｓ ） 等。 国内生产 的 许 多 细菌 菌 株 ，可 以有 效 地抑 制 Ｐ ｙ ｔ ｈ ｉ ｕ ｍ ｓ ｐ ｐ ， Ｇ ａ ｅ ｕ ｍ ａ ｎ ｎ ｏ ｍ ｙ ｃ ｅ ｓ — 生物型种衣剂 Ｚ Ｓ Ｂ ， 对玉米茎腐 病和纹枯病苗期和成株期 的防治 均 ｇ ｒ ａ ｍ ｉ ｎ ｉ ｓ ｖ ａ ｒ ． ｔ ｒ ｉ ｔ ｉ ｃ ｉ ， Ｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｏ ｔ ｉ ｕ ｍ ｒ ｏ ｌ ｆ ｓ ｉ ｉ ， Ｆ ｕ ｓ ａ ｒ ｉ ｕ ｍ ， Ｅ ｒ ｗ ｉ ｎ ｉ ａ ｃ ａ ｒ ｏ ｔ ｏ ｖ ｏ ａ ｒ 等 多 有一定效果 。田间试验表 明： １ ： ４ ０的种子包衣量为最佳 。粉锈宁与 种真菌和细菌引起 的根部病害。对假单胞菌生防机制研究 表明 ， 不 Ｚ Ｓ Ｂ 混用 比单用粉锈宁拌种 防治茎腐病的效果好 。 同种 的防病机制是不 同的， 这些机制包括拮抗 、 诱导抗病 、 营养竞争 ２ ． ３玉米纹枯病。玉米纹枯病 是我国各玉米产 区普遍发生 的土 和寄生等 。 传性病 害 ， 近年来 日趋严重 。 引起该病 的丝核菌主要有 ３ 个种 ， 即立 虽然芽孢杆菌在生物防治方面受到的关注 比假单胞菌少 ， 但鉴 枯丝核菌 （ Ｒ ． ｓ ｏ ｌ ａ ｎ ｉ ） 、 玉蜀黍 丝核菌ｆ Ｒ ． ｚ ｅ ａ ｅ ） 和禾谷丝核菌（ Ｒ ． ｃ ｅ ｒ ｅ ａ ｌ ｉ ｓ ） 。 于它们具有内生芽孢 、 抗逆性强 、 繁殖速度快 、 营养要求简单 和易 于 目前 ， 玉米纹枯病的防治主要采取农业 防治 和化 学防治为 主 ， 辅 以 生物防治 的药剂有 ２ ０ ％井冈霉素可湿性粉 剂 ， 其 防效 较 在植物根圈定殖的特点 ， 在生防中也被广 泛地研究 和应用 。 目前用 生物防治 ， 于生 防的芽孢 杆菌种类有 ： 枯草芽孢杆菌 （ Ｂ ． ｓ ｕ ｂ ｔ ｉ ｌ ｉ ｓ ） 蜡状芽孢杆菌 稳 定 。 ３问 题 与展 望 ｆ Ｂ ． ｃ ｅ ｒ ｅ ｕ ｓ ） 和巨大芽孢 杆菌 ｆ Ｂ ． ｍｅ ｇ ａ ｔ ｅ ｒ ｉ ｕ ｍ ） 等． １ ． ２真菌 。 许多真菌资源对土传病 害具有很好的生防作用 。 木霉 土传病 害是植物 的顽疾 ， 治理困难 ， 通常使用 化学种衣剂 ， 但 因 （ Ｔ ｉ ｃ ｈ ｏ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｓ ｐ ｐ ） 是一类 分布 广 、 繁殖 快 、 具有 较高 生防价值 的真 其污染环境及频繁发生药害， 使其大面积推广受 到了较大 的限制 。 菌 。Ｗｅ ｎ ｉ ｎ ｄ ｌ ｉ ｎ ｇ（ １ ９ ３ ２ ）发现 ，在离体条件下木素木霉 （ Ｔ ｉ ｃ ｈ ｏ ｄ ｅ ｒ ｍ ａ 生物种衣剂 ， 由于缺乏高效价的拮抗菌株 、 作用靶标单一 、 易受环境 ｌ ｉ ｇ ｎ ｏ ｍｍ） 与立枯 丝核 （ Ｒ ｈ ｉ ｚ ｏ ｃ ｔ ｏ ｎ ｉ ａ ｓ ｏ ｌ ａ ｎ ｉ ） 共培 养 时 ， 木素木 霉 的菌 因素影响 防效不稳定等原 因， 使农 民不愿意使用 。 丝缠 绕着立枯丝核菌 ， 使其菌丝原生质凝结 、 细胞液泡 消失及菌丝 生防微 生物产业化进程发展较慢 。生 防菌剂发展滞后 的原 因不 解体 。毛壳菌 （ Ｃ ｈ ａ ｅ ｔ ｏ ｍ ｉ ｕ ｍ ｓ ｐ ｐ ） 通常存在于土壤 和有 机肥 中 ， 可 以 仅与生防菌的作用发挥受诸多因素制约有关 ， 而且也与某些生防菌 有效 降解 纤维素和有机 物 ，并对土壤 中的某些微生 物产生抑制作 剂成本高 ， 难于推广有关 。因此 ， 在致力 于生防菌的遗传改 良的 同 用 。近年来 ， 利用非致病镰刀菌菌株的交叉保 护作 用防治由镰刀 菌 时 ， 也应考虑生防菌剂 的成本 。 另外 ， 可 以考虑将多种生 防菌混和使 引起 的土传病害也得到广泛 的重视 。 马平等（ ２ ０ ０ １ ） 从棉花铃 内部分 用 ， 这样就能够实现多种生 防机制 （ 拈抗 、 竞争 、 诱导抗性 、 寄生 ） 同 离到两株 非致 病镰 刀菌 Ｖ Ｌ 一 １和 Ｖ Ｌ 一 ２ ，通过空间竞争 和营养竞 争 时起作用 ，避免单一生防菌应用而引起 的病 原微 生物产生抗性 ， 但 有效 地抑制黄萎病菌 的生长 ，对棉花黄萎病 的相对 防效分别达 到 混用的前提要保证这些生防菌互不排斥 ， 而且作用结果最好是协 同 ８ ７ ， ９ ％和 ６ ６ ． ４ ％。 最近 ， 也有关 于淡紫拟青霉 、 厚壁孢 子轮枝菌 、 小盾 或加性效应 。 壳霉 和菌根真菌具有生防作用 的报道 。 生防菌 的遗传学研究 己相 当广 泛和深入 ，但 也存在一些不 足。 １ ． ３放线菌。 放线菌广泛存在于土壤 和植物根际等环境 中 ， 作为 例如 ： 重组微生物可能会发生基 因任意扩散 ， 因此 ， 需进一步完善对 生防菌已在生产上被成功的应用 。 如２ ０世纪 ７ ０ 年代澳大利亚 Ｋ ｅ ｒ ｒ 基 因工程微生物安全性的评价和完善基 因环境释放 的监测方法 。 由 从 土壤 中分离到土壤放 线杆菌 Ａ ｇ ｒ ｏ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｕ ｍ ｒ ａ ｄ ｉ ｏ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ Ｋ ８ ４利 用 质粒控制的异源基 因与染色体修饰的异源基 因相 比稳定性 较差 ， 易 其活菌制剂及其产 生的抗生素 Ａ ｇ ｒ ｏ ｃ ｉ ｎ ８ ４可有 效防治桃树 根癌病 ； 向土著微生物 转移 ， 因此 ， 生 防菌 的遗传 改 良要从质粒转入 染色体 最近 ，王琦等 （ ２ ０ ０ ３ ）从菜丛根病株 根面和根 内分离 ３株链霉 菌 修 饰 研 究 。 （ Ｓ ｔ ｒ ｅ ｐ ｔ ｏ ｍｙ ｃ ｅ ｓ ） ， 该菌的代 谢液能够 抑制 甜菜 坏死 黄脉病毒（ Ｂ Ｎ Ｙ Ｖ Ｖ ） 植物 内微生物是近年来 发展起来 的很 有应用前 景的一类 有益 的传毒介体 甜菜多粘 菌（ Ｐ ｌ ｙ ｍ ｙ ｘ ａ ｂ ｅ ｔ ａ ｅ ） 的休眠孢子 萌发 ， 使游动 孢 微生 物 ， 它们与植物在进 化过程中建立 了一种和谐 的关系 ， 可 以提 子泳动减缓。酶联免疫检测表明 ， 拮抗 菌处 理的根系 内 Ｂ Ｎ Ｙ Ｖ Ｖ数 供植 物所需要 的营养物 质如 Ｎ 源 及一些 激素参 与植 物的 防卫功 量低 于对 照 。 能 。而 内生细菌可 以从植物体内获得充分的生长营养 ， 受到植物 的 ２接着介绍几种玉米主要土传病 害的生物防治 保护 ， 使其免遭外部恶劣环境 的影 响。由于内生细菌系统地存在 于 ２ ． １ 玉 米丝黑穗 病 。玉米 丝黑穗 病是 由玉米 丝轴 团散 黑粉 菌 植物 的细胞间隙或细胞 内， 相对于其它生防 因子而 言 ， 有很 大 的优 （ Ｓ ｐ ｈ ａ ｃ ｅ ｌ ｏ ｔ ｈ ｅ ｃ ａ ｒ ｅ ｉ ｌ ｉ ａ ｎ ａ ） ￣ ｌ 起 的一种幼苗侵入 的系统性病 害， 主要危 势 。若能将生防菌 的抗生素合成基因导人某些内生菌内 ， 借助 内生 害雌穗 和雄穗 。侵入前是 防治 的最适时期。中国军事医学科学院根 细菌与植物建立的紧密联系 ，生防基因可以在植 物内部发生作用 ， 据 植 物 营 养 学 和 土 壤 生 态 学 原 理 研 制 开 发 的 阿姆 斯 生 物 肥 可 明 显 效应更 为直接 ， 免去 了转 基因植物研究 的复杂程序 ， 将是很 有应用 降低 玉米丝黑穗病 的发生 ， 同时能使玉米增产 。 该肥 中含��
生防菌TJ防治瓜类白粉病初步研究
天 津 农 学 院 学 报 Ｊｕｎｌ ｆ ｉ ｊ ｒ ｕｔｒｌ ｉｅ ｉ ｏｒａ Ｔａ ｉ Ａｇｉ ｌ ａＵｎｖｒ ｔ ｏ ｎｎ ｃ ｕ ｓｙ
、０ ． ９， ． ，１ １ Ｎｏ １
Ｍ ａｃ ２ １ ｒ ｈ， ０ ２
文章编号： １０ － ３ ４（ ０ ２ １０ ２ — ３ ０ ８ ５ ９ ２ １ ）０ — ０ ７ ０
表 １ 。
表 １ 瓜类白粉病 田间药效试验设计
砸 苗剌 倍 斯
１ ３ ０倍 ３ ７ ． ０ ． ９ ０ ２
２ ４ ０倍 ０ ４７ ６ ． ． ４１
３ ８． ． ５ ６４
５ ７． ． ２ ９７
３ ５０倍 ５ ５ ． ０ ． ４ ９０ ４ 清水 １． ３１ 一
１． ５． １． ６． ２ ． ６． ８８ ６７ ７ ８２ ９ ３８ ２１
黄瓜用药 时间
１ ２
３ ４
甜瓜用药 时间
１ ３ ０倍 ０
２ ４ ０倍 ２ ． ５ ． ２ ． ５ ． ２ ． ５ ． ０ １ ６ ０３ ４０ ７０ ８ ４８ ４
限性 ，尤其是化学农药 的长期使用不仅引发严 重的食品安全问题 ，导致环境污染 ，对非靶标生 物造成危害 ，而且在一定程度上促进了病原菌抗 药性的产生用 现已发现 ， 。 白粉病菌对苯丙咪唑类 、
有 机磷 类 、羟基 嘧 啶类 、 甲氧基 丙稀 酸 酯类 和苯
１ 材料 与方法
１１ 供 试作 物 ．
生防菌 Ｔ 防治瓜 类白粉病初步研究 Ｊ
耿以工 ，谷 医林 ，李宁 ，陈招荣。 ，王远宏 通 作 ＇信 者
（．天津市农业技术推广 站，天津 ３ ０ ６ ；２ 河 南农业大学 植保学院，郑州 ４ ００ ； １ ００ １ ． ５ ０ ２ ３ 天津农学 院 园艺系 ，天津 ３ ０ ８ ） ． ０ ３４ 摘 要 ：细菌Ｔ是一株生防菌株 ，室 内测定显示 ，其对瓜类 白粉病有很好的防治效果 。本研究通过 Ｊ
植物病害生物防治
植物病害生物防治研究进展【摘要】：近几十年来，人类经济迅速发展的同时人们对食物安全和环境安全也提出了更多的要求，如今针对植物病害华雪农药已不是理想的防治方法，而植物病害生物防治研究发展迅速。
本文就植物病害生物防治的发展概况和研究进展及前景展开论述。
【关键词】：植物病害; 生物防治; 发展现状；展望1植物病害生物防治的发展概况植物病害生物防治的科学记载是从sanfprd (1926)报道土壤中某些拮抗性微生物对于报道土壤中某些拮抗性微生物对于土传病原菌的抑制性开始的1151。
因为当时美国马铃薯上发生一种放线菌引起的疮痴病。
MillaJ月于1921年曾报道施用绿肥可以减轻这种病害，而经Sanfo记分析证明是由于绿肥促使土中拮抗性放线菌增长所致，并指出其生物学防治的实质。
这一发现当时并未引起普遍关注，不久由于青霉素的问世，人们再次掀起寻找拮抗微生物的高潮，尤其是土城腐生拮抗性放线菌发展较快，植病生防方面也开展了拮抗性放线菌的分离和应用研究，主要作为一种活菌剂用于土壤和种子处理以防治苗期病害，收到显著效果。
我国植物生防的研究工作开始于50年代初期，曾经选出一批有效菌种用于生产实践。
60年代开始，由拮抗性放线菌发展为利用一些快速生长繁殖的真菌、细菌以及病毒等;从腐生的土壤微生物到植物体微生态系中微生物的利用;病害种类从种传和土传病害到地上部的气传和虫传病害。
70年代以来，病害生物防治的研究和实践十分活跃，而且发展迅速。
80年代，浙江、山西、四川等地应用拮抗性木霉菌防治丝核菌和小菌核菌所致根病已有报道。
近几年来，国内外有关生物防治的文献资料急剧增加，国际性学术交流日益频繁。
生物防治的生产实践也在扩大。
目前、虽然生防技术的生产应用还处于温室和小面积田间试验阶段，但大面积生物防治也在一些病害的实践中取得可喜成果。
2.植物病害生物防治的研究进展2.1生防菌的开发利用2.1.1 木霉属真菌的应用木霉菌是土壤中资源丰富的生防真菌, 具有重要的生防价值, 有广阔的发展前途, 可寄生18 个属中的29 种植物病原菌[1]。
松材线虫生防真菌伊氏线虫菌研究进展
第56卷第1期林业科学Vol.56,No.1 2020年1月SCIENTIA SILVAE SINICAE Jan.,2020doi：10.11707/j.1001-74WW.20200118松材线虫生防真菌伊氏线虫菌研究进展!茅裕婷马涛蓝来娇温秀军（华南农业大学林学与风景园林学院广东省森林植物种质创新与利用重点实验室广州510642）摘要：松材线虫病对森林生态健康有显著影响，可以导致松林大面积死亡,有效预防松材线虫病是维护森林生态系统的重要'施（伊氏线虫菌是一种松材线虫的内寄生真菌,具有作为松材线虫病生物防治的天敌的潜力（近几年,对于这种鲜为人知的真菌的研究增多（本文从该菌的发现+形态学+培养+侵染机制+分子层面研究和生物防治应用等方面较系统全面地介绍该菌（伊氏线虫菌共有6个菌株,能产生月形抱子和杆状抱子2种类型的抱子,月形抱子能黏附到松材线虫体表并寄生于体内将其杀死（伊氏线虫菌能在松树和松树分泌的树脂中存活,通过产生宿主松树的香味而引诱松材线虫（培养条件对伊氏线虫菌生长+产抱、抱子侵染活力的影响较大，可以在培养基中添加甘氨酸等增强其对环境的抗性（伊氏线虫菌基因组已被完整测序,还克隆岀1个对松材线虫具有强毒力的丝氨酸蛋白酶基因，同时在菌株细胞内发现内生细菌的存在，可以通过分子方法检测该菌（在温室和野外采用树干注射+树冠喷洒和伤口接种等不同方法施用含有该真菌的生防菌,均显示其能降低松材线虫对松树的侵染（目前对于该菌的研究主要集中在实验室,对于林间防治应用也有研究,但还是较少（关于该菌未来的研究可以从几方面开展：1）分子层面弄清其侵染机制；2）商品化生物制剂；3）野外防治方案；4）松褐天牛与伊氏线虫菌之间的关系（关键词：伊氏线虫菌；松材线虫；生物防治中图分类号：S718.81文献标识码：A文章编号：1001-7488（2020）01-0180-11Advances in Esteya vermicola,A Potential Biocontrol Fungus forPine Wood NematodsMao Yuting Ma Tao Lan Laijiao Wen Xiujun（Guangdong Key Laboratory for Innovative Development and Utilization of Forest Plant Germplasm College of Forestry andLandscape Architecture,South China Agricultural University Guangzhou510642）Abstract:Pine wilt disease has a significant impact on the forest ecological heelth,which can leed to large-scale deeth of pine forests.Effective prevention of pine wood nematode disease is an important meesure to maintain the forestecosystem.Esteya vermicola,is an endoparasitic f ungus of Bursaphelenchus xyloppilus,a pine wood nematode,and has potentiat as a biologicat cantrot agent for pine wood nematode disease.In recant years,the research on this little-knownfungat speciee hae increased.Based on this,this article eystematically introducee thcbacteria from theapects of itsdiscovee,morphology,culture,infection mechanism,moleculae level research and bioyoical cantrol applicatione. E. vermicola,,a total of six straine,can produca two typee of sporee:lunato sporee and rod-shaped sporee.Moon sporee canadhere to the surfaca of pine wood nematode and parasitize the nematode to kii nematodes. E.vermicola can survive in pine and in the resin secreted by pine,and atracte pine wood nematodes by producing the scant of host pine trees.The culture canditions have a great inOuenca on the growth,sporulation,and spore invasion of E.vermicola.Glycine can be added to the medium to enhancc its resistancc to the environment.The genome of E.vermicola hae been ccmpletely sequenccd,and a serine protease gene with highly virulent to B.xyloppilus has been cloned.Endophytic bacterio are also found in th）a e s of th）st eain,whiah aan b）d）tatd by mo e au ea em）thods.Th）app ei aation of bio aont eo e aontaining th）fungi in different ways,such as trunk injection,canopy spraying and wound inoculation in the greenhouse and in the收稿日期：2018-04-13'修回日期：2018-07-19。
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霜霉病
BCJB01和BMJBN02对葡萄霜霉病的室内防效实验
供试菌剂：BCJB01和BMJBN02 LB液体发酵稀释10倍液 葡萄品种：泽山1号
叶盘法检测菌株BMJBN02和BCJB01室内试验结果
木霉发酵工艺及制剂的研究
木霉菌液体发酵产厚垣孢子发酵工艺：
1、碳、氮源及无机盐的确定
木霉发酵工艺及制剂的研究
2、培养基质量分数正交实验
木霉发酵工艺及制剂的研究
最优组合：可溶性淀粉质量分数2%、豆粕质量分数5%、FeSO4 ·5H2O 0.02%， 诱导剂量1‰，诱导剂加入时间24小时，pH6.0。厚垣孢子总数为1.5×108cfu/ml。
霜霉病
BCJB01和BMJBN02悬浮剂对葡萄霜霉病的田间实验 试验按农业部药检所田间试验准则设计。实验统计结果见下表
BCJB01和BMJBN02悬浮剂田间防效
霜霉病
葡萄溃疡病
葡萄品种：毛葡萄
葡萄品种：红地球 试验数据由中国农业大学张立群教授提供
处理1 BAB-1 稀释60倍；处理2 W10稀释5倍；处理3 11K1 稀释5倍；CK 水 处理4 BMJBN02稀释50倍；处理5 BCJB01 稀释50倍；处理6 30%嘧菌酯稀释1500倍
de
DE
de
DE
def
DE
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EF
Hale Waihona Puke defEF--
防效 % 56.7 58.6 63.8 67.4 69.2
生防木霉菌LTR-2的遗传改良
利用ATMT方法构建了绿色木霉LTR-2的突变体库 筛选方法：突变体对番茄灰霉菌的重寄生能力进行筛选 结果：T2-60 、T2-58
A
B
显微镜下观察突变子对灰霉病菌丝的结合位点和接触缠绕情况
灰霉病
防治灰霉病的木霉资源筛选已获得木霉菌株500余株。 发现4株木霉菌对番茄灰霉病有良好的防治效果
26省 1203个样品
灰霉病
LTR-2
WS1-10
GD1-3
灰霉病
拮抗木霉防治黄瓜灰霉病的室内试验结果
拮抗霉
T91-2 T6-3 T9-4 T10-1 T8-2 T11
病情 指数 48.13 45.26 43.55 36.78 36.11
A 缠绕程度强
B 缠绕程度弱
生防木霉菌LTR-2的遗传改良
将几丁质酶基因chi42和葡聚糖酶基因glu14串联在同一个表达载体上， 并利用ATMT手段将双价抗病基因导入绿色木霉LTR-2基因组DNA上， 获得具有双价抗病基因的重组菌株L-15。
遗传改良木霉防治番茄灰霉病的室内试验结果
木霉发酵工艺及制剂的研究
近两年研究成果
近年来，在霜霉病、灰霉病、根结线虫的生物防治工作中，又有 新的收获。
新筛选到的芽孢杆菌BCJB01和BMJBN02对葡萄霜霉病的防效分 别为84.05%和73.30%，且菌株已被开发成悬浮剂和粉剂两种剂型，活 菌数量分别为30×108和100×108CFU；新筛选的木霉WS1-10、GD1-3、 TW20256和TW20111对灰霉病的抑制率为75%；新筛选的木霉T11-W 对根结线虫卵的寄生率为73.46%，新筛选的芽孢杆菌BCJB01对根结 线虫的防效为76.64%。
木霉悬浮种衣剂助剂的筛选
通过尝试法对8种润湿分散剂、3种成膜剂进行了筛选，结果如下：
观测结果表明，对照CK 严重絮凝，而十二烷基苯 磺酸钠悬浮率可达92.5%， 此外木霉LTR-2在2%十二 烷基苯磺酸钠浓度下活性 基本没有影响，同时价格 便宜，因此，选择作为种 衣剂的润湿剂。
霜霉病
BCJB01和BMJBN02对霜霉病孢子囊及游动孢子降解作用的显微观察
霜霉病
BCJB01和BMJBN02对霜霉病孢子囊及游动孢子降解作用的显微观察
霜霉病
显微观察结果： 在相同的处理条件下，水对照中孢子囊萌发明显； 波尔多液处理孢子囊均变形，导致孢子囊不能正常萌发； 生防细菌BMJBN02可使孢子囊变形，但对已萌发出来的游动
生防菌剂研究进展
前期研究成果
山东省科学院生物研究所应用微生物研究室，依托山东省 应用微生物重点实验室和生物制造技术研发平台，长期从事生 防菌剂的研究开发工作，先后研制了木霉菌母药、木霉菌制剂5 个（登记证号PD20096832、LS20061652、PD20096833、 PD20101573、PD20131786、），芽胞杆菌生物杀菌剂1个（登记 证号为PD20094534），微生物肥料6个，取得了较好的经济、社 会和环境效益;获得省级以上奖励10余项，其中省部级一等奖3项。
32.55
p=0.05 p=0.01
a
A
a
A
ab
AB
bc
BC
bc
BC
cd
CD
防效 % 20.3 25.0 27.9 39.1 40.2
46.1
拮抗菌
T16-2 gD3 gD1-3 LTR-2 WS1-10 CK
病情 指数 26.11 24.97 21.87 19.67 18.62
60.37
p=0.05 p=0.01
木霉菌LTR-2的液-固发酵新工艺: 液体发酵(种子)：1%葡萄糖，4%玉米粉，2%豆饼粉，0.05%硫
酸镁，0.1%磷酸二氢钾，0.02%消泡剂，pH6.0，培养条件： 30℃，转速150r/min，通气量1：0.5～1； 固体发酵：麦粒或玉米粒，添加10%稻壳，接种量3%；发酵培 养条件：水分控制在55%±5%，培养条件：温度控制在26℃35℃，料厚5-10CM，湿度45%-55%，培养时间48-72h； 产量：50×108cfu/克固料
孢子无作用； 而BCJB01并不抑制孢子囊的萌发， 菌体围绕在孢子囊周围，
在萌发口处等待游动孢子，待游动孢子游出后将其分解。
霜霉病
生防细菌胞壁降解酶活性测定
几丁质酶活性测定
霜霉病
纤维素酶活性测定
霜霉病
β-1,3-葡聚糖酶活性测定
霜霉病
BCJB01和BMJBN02的鉴定 BCJB01和BMJBN02的形态特征及生理生化测定标准参照沈萍等和东秀珠 等的方法进行；以菌株BCJB01和BMJBN02基因组DNA为模板，提取方法 参照蒋萍，用细菌通用引物扩增16S rDNA 序列，并将PCR 反应产物送山 东农科院测序中心测序。将测得的序列在NCBI中进行Blast比对，发现