江苏省部分地区动物弓形虫病血清学调查
犬猫弓形虫病分析
• 在细胞内可形成多个虫体的集合体，称假包囊，囊内的个 体即滋体或速殖子，为急性期病例的常见形态。宿主细胞 破裂后，滋养体再侵犯其他组织细胞，如此反复增殖，可 致宿主死亡。但更多见的情况是宿主产生免疫力，使原虫 繁殖减慢，此外有囊壁形成，称为包囊，囊内原虫称缓殖 子。包囊在中间宿主体内可存在数月、数年，甚至终生 （隐性感染状态）。
• 在预防动物弓形虫病中，应限制养畜（禽）场养猫，防止 饲料被猫污染；采取灭鼠措施，切断鼠-猫-畜禽的传递环 节；用屠宰场废弃物和动物尸体做动物饲料时，必须经高 温无害处理；发现患病动物应隔离治疗；在疾病流行期， 可应用磺胺类药物预防，控制疾病的爆发流行。
• 为避免人体感染，在接触患病动物、尸体、病料后应严格 消毒；养成反前洗手的卫生习惯，不食生肉；限制养猫， 减少与猫的接触机会。
3.4检测技术
• 弓形虫病诊断方法大致可分为三类：一是 病原学的检查方法如镜检、滋养体分离法、 卵囊分离法等；二是免疫学的方法，如 ELISA、补体结合实验、免疫印迹和免疫层 析等方法；三是主要以分子生物学术如分 子杂交技术、DNA体外扩增技术即聚合酶 链反应等为基础发展起来的方法，如控针 技术、免疫Pቤተ መጻሕፍቲ ባይዱR和巢式PCR等。
关键词
• 弓形虫 检测 犬 猫
绪论
• 弓形虫病（toxoplasmosis）又称弓形体病，是由龚地弓 形虫引起的人畜共患病。在动物体内多为隐性感染，主要 侵犯眼、脑、心、肝、淋巴结等。可引发广泛的临床症状， 如弓形虫性脑炎、弓形虫视网膜炎、弓形虫性腹膜炎等。 • 传统的弓形虫检查方法如镜检、滋养体分离法、卵囊分离 法等费时、费力，且其特异性和敏感性不高，常常导致漏 诊或错误的诊断；分子生物学诊断技术虽然具有较高的敏 感性和特异性，但由于其操作复杂或实验条件要求较高， 难以推广应用；免疫学诊断方法是进行弓形虫感染调查、 临床弓形虫病筛选诊断的常规方法，具有敏感性高、特异 性强、操作简便快速等优点，所以免疫学方法仍是目前弓 形虫感染和弓形虫病的主要诊断手段。
猪弓形虫病的诊疗报告
猪弓形虫病的诊疗报告摘要:对一例病猪进行了流行病学调查和实验室检查,结合血清学和聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction, PCR)方法进行病例检测,结果表明,该例病猪是由弓形虫(Toxoplasma gondii Nicolle & Manceaux)感染引起｡关键词:猪;弓形虫病;聚合酶链式反应;诊断弓形体又叫弓形虫､弓浆虫或毒浆虫(Toxoplasma gondii Nicolle & Manceaux),属于一种单细胞原虫,是引发弓形虫病的病原体｡病原体寄生在终末宿主猫科动物体内生长繁殖,形成卵囊并随宿主粪便排出体外,发育成熟而具有感染力｡具有感染力的卵囊污染食物和水源,被中间宿主(人或猪等多种动物)食入或饮入后,经淋巴和血液进入组织器官,并侵入有核细胞内,造成组织器官的严重损害和机体免疫力下降,而出现患病体征｡据相关统计资料表明,一般猪场猪群感染率在20%以上,有的高达60%,死亡率达60%~80%｡弓形虫病一年四季均可发生,但以每年的4~10月多发,任何年龄的猪都可感染,而以10~50 kg的中小猪发病较严重｡临床上生产母猪(包括后备母猪)常有发病,但配种公猪很少发生,这可能与抵抗力有关[1-3]｡高床饲养的猪群少见发病,而平养的猪群则屡见不鲜,可能与猪只接触粪便的程度有关｡河南省信阳市平桥区某商品猪场养猪3 000多头,2010年4~5月期间猪群突然发病,在1个月内陆续死亡5头,20多头病危,另有100多头发病｡发病和死亡的猪以40~50 kg的中小猪为主｡作者主要就这起猪弓形虫病的流行特点､临床症状､诊断方法以及防治处理等方面做如下报告｡1材料与方法1.1材料1.1.1试验动物1头发病死亡的育肥猪;6头活猪,有育肥猪4头､母猪1头和空怀母猪1头,从6头活猪颈静脉随机无菌采集全血,每头约4 mL,得到血液样品｡1.1.2检测试剂Taq酶､PCR缓冲液(含Mg2+)､dNTP为大连宝生物公司产品;蛋白酶K为Merck公司产品;弓形虫抗原ELISA检测试剂盒购自武汉科前生物技术有限公司;小白鼠购自信阳职业技术学院｡染色液有瑞氏染液､HE染液｡1.1.3引物设计根据GenBank中已登录的猪弓形体基因序列(AF146527),利用Primer5.0软件设计一对引物,上游引物P1为5′-CGTGACTCGGGCCCAGCTGCGTCTG-3′;下游引物P2为5′-CGCTGCAGACACAGTGCATCTGGAT-3′｡预计PCR扩增产物长度为463bp｡1.1.4主要仪器为实验室现有的PCR仪(美国AB公司)､高速冷冻离心机(Sigma 公司)､尼康E200显微镜､尼康4500数码照相机｡1.2兽医检查1.2.1涂片对发病死亡的育肥猪进行剖检,剖检时,取病死猪的血液､心包液和腹腔液进行涂片,用瑞氏染色法染色后光学显微镜检查,进行流行病学调查｡1.2.2病理学检查按常规方法对发病死亡的育肥猪进行尸体剖检,记录眼观病变情况｡1.2.3血清学检测将采集到的4头育肥猪的全血在高速冷冻离心机上5 000 r/min离心8 min,分离血清｡采用猪弓形虫酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测｡1.3PCR检测剖解时无菌分别取一块肺脏､肝脏､淋巴结以及脾脏组织,放入无菌塑料袋中,于-70℃环境备用｡1.3.1DNA的提取取病料肺､肝､淋巴结组织研碎,后加10倍生理盐水接种小白鼠腹腔,每只接种0.5 mL｡待小白鼠出现被毛粗乱､呼吸促迫症状,从其腹水收取弓形虫速殖子,计数后加入SDS裂解液和蛋白酶K,混匀后置于37℃消化过夜｡消化好的虫体悬浮液再加入5 mol/L NaCl溶液和5% CTAB溶液,65℃水浴10 min;苯酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1)溶液抽提2次,用异丙醇沉淀,70%乙醇洗涤;适量的灭菌水溶解,-20℃保存｡1.3.2PCR反应PCR反应体系为50 μL,DNA模板添加量为0.5 μg｡PCR反应程序为94℃预变性5 min;94℃变性30 s,53℃退火30 s,72℃延伸30 s,35个循环;最后72℃延伸10 min｡PCR产物经12 g/L琼脂糖凝胶电泳观察结果[4-7]｡选取其中一阳性样品的463 bp左右的PCR扩增产物片段,用TaKaRa公司的DNA片段琼脂糖凝胶回收试剂盒回收后,与T-Easy载体(Promega)连接,转化Escherichia coli JM109感受态细胞,筛选阳性重组质粒,送上海生工生物技术服务有限责任公司测序｡2结果与分析2.1临床症状患猪突然减食或废食｡稽留高热,体温常达41.5~42.0℃或更高,并稽留不退,一般持续5~10 d或更长｡咳嗽,有明显的呼吸症状,常呈腹式呼吸｡腹泻,鼻､耳､四肢及股内外侧､胸腹部､臀背部等处皮肤出现紫红色出血点或由出血点融合而成的瘀血斑块,甚至有的遍及全身而遍体紫红(图1)｡2.2病理变化体表瘀血发绀或有坏死结痂斑块;胸腔､腹腔出现积液,色浅黄;肺､脾､肝等实质器官具有特征性病变,肺膨大(水肿),被膜紧张有光泽,表面可见大小不等的紫红色坏死病灶,小叶间质明显增宽(图2);脾肿大,表面有灰白色坏死点,脾髓如泥;肝肿胀浑浊,表面和切面可见灰白色坏死病灶(图3)｡全身淋巴结显著肿大,特别是颌下､肺门､肝门等处淋巴结比正常的大2~3倍｡胃黏膜潮红,肠道明显充血,肠黏膜可见多量坏死病灶,肠系膜淋巴呈绳索样肿大(图4)｡2.3涂片观察血液涂片用瑞氏液染色,镜检发现月牙形滋养体,核为红色,细胞质为蓝色(图5)｡2.4血清学诊断试验设猪弓形虫血清抗体大于0.494判为阳性,小于0.422判为阴性,在0.422~0.494之间为可疑｡得到的猪弓形虫血清抗体ELISA检测结果分别是育肥猪1号0.936､育肥猪2号0.867､育肥猪3号0.927､育肥猪4号0.831､母猪0.922､空怀母猪0.910,由此可见,所检测样品的抗体均为阳性｡2.5PCR结果剖检猪所采样品出现了与预期大小一致的目的条带,且为阳性(图6)｡2.6PCR产物的克隆和序列测定测序分析结果表明,克隆的基因片段长度为463 bp,核苷酸序列经测定提交后证实,所克隆的基因为猪弓形虫的部分基因,其核苷酸序列为:TGACTCGGGCCCAGCTGCGTCTGTCGGGATGAGACCGCGGAGCCGAAGTGCGTTTTCTTTTTTTGACTTTTTTTTGTTTTTTCACAGGCAAGCTCGCCTGTGCTTGGAGCCACAGAAGGGACAGAAGTCGAAGGGGACTACAGACGCGATGCCGCTCCTCCAGCCGTCTTGGAGGAGAGATATCAGGACTGTAGATGAAGGCGAGGGTGAGGATGAGGGGGTGGCGTGGTTGGGAAGCGACGAGAGTCGGAGAGGGAGAAGATGTTTCCGGCTTGGCTGCTTTTCCTGGAGGGTGGAAAAAGAGACACCGGAATGCGATCCAGACGAGACGACGCTTTCCTCGTGGTGATGGCGGAGAGAATTGAAGAGTGGAGAAGAGGGCGAGGGAGACAGAGTCGGAGGCTTGGACGAAGGGAGGAGGAGGGGTAGGAGAGGAATCCAGATGCACTGTGTCTGCAG｡3讨论3.1诊断根据PCR和血清学检测结果为阳性,可以判定该次疫情是由弓形虫感染引起的｡依据其临床症状和病理变化特点,该起猪弓形虫病为急性感染｡3.2猪弓形虫病与猪瘟在临床上的鉴别诊断猪弓形虫病在临床表现上,有些症状与猪瘟颇为相似,这常常导致误诊｡其实,猪弓形虫病与猪瘟在临床上的表现虽然相似,但却不尽相同,只要仔细观察,是不难分辨的,总结我们的临床经验,可从下面几点进行鉴别｡3.2.1体表出血(瘀血)斑点不同猪瘟的体表皮肤出血仅发生于耳尖､四肢内侧､腹下等皮薄处,而猪弓形虫病的出血点或瘀血斑块则全身到处可见,特别是在胸背部､荐臀部等皮肤厚实的部位出现,这是猪瘟患猪所少见的｡猪瘟出血是局限性､散在性的出血点(如火鸡蛋或麻雀蛋样),即使融合也不会形成大斑块,程度较轻微;而猪弓形虫病患猪的出血则呈广泛性､弥漫性的瘀血斑块,甚至有的瘀血斑块互相融合遍及全身｡猪瘟体表出血斑点呈紫黑色或蓝黑色,颜色较深;猪弓形虫病患猪体表瘀血斑块多呈紫红色,颜色相对较浅｡3.2.2排泄物不同猪瘟便秘阶段排出的粒状干硬粪团呈灰黑或灰褐色,后期拉稀呈黄褐色水样腹泻,尿液浅黄色;而猪弓形虫病患猪排的粒状干硬粪团呈暗红色,后期拉稀呈酱油(煤焦油)样半流体黏稠粪便｡尿液呈鲜橘黄色｡3.2.3体温不同猪瘟病猪虽体温升高,但高热稽留时间相对较短,常于高热后不久就下降到40.5℃,而持续低烧不退;猪弓形虫病患猪的高热稽留时间较长,41.5℃以上高热可稽留7~10 d或更长时间｡3.2.4病理变化不同典型临床症状的猪瘟虽已不多见,但解剖病变仍具有特征性,即以全身性出血为主,如皮下组织和实质器官表面的针头状散在性出血,以及全身淋巴结肿大出血,淋巴结切面红白相间(大理石样);而弓形虫病猪内脏器官则以出现大量的坏死病灶为特点,虽然全身淋巴结肿大,但却没有周边出血和切面红(黑)白相间的病理变化｡3.2.5发病季节不同两者虽一年四季均可发生,但猪瘟多发生于寒冷季节(深秋､冬季和初春);弓形虫病病原体(卵囊)需要一定的温度和湿度条件才能发育成熟而具备感染力,所以多在高温高湿季节(4~10月)出现｡3.3预防措施猪弓形虫病一旦在猪场发生,病原很难清除,将会在场内经久不息,必须采取综合措施,全面防范,否则后患无穷｡猫是弓形虫的终末宿主,是传播本病的罪魁祸首,猪场内应禁止养猫和防止野猫进入(毒饵诱杀或人工捕杀);定期灭鼠,加强饲料及原料的保管贮存,避免猫鼠进入饲料仓库,禁止使用被猫､鼠粪尿污染的饲料喂猪;定期全场消毒,清除粪污,减少环境中的病原数量和传播机会;定期在饲料中添加磺胺类药物,新出现病例的猪场或曾发生过猪弓形虫病的猪场,添加药物混饲进行群体预防尤为必要｡应于发现确诊病例之后或于每年4月气温回升之时实行全场加药,实施群体预防;在添加磺胺类药物时,应按常规比例添加磺胺增效剂;为减少磺胺类药物对猪体肾脏的毒害及副作用,还应同时添加小苏打[8]｡3.4治疗猪弓形虫病病原对磺胺类药物敏感,早期和足够疗程治疗,疗效相当确切,应在发现病例后尽快做出确诊并立即用药,以阻止病原体在病猪体内的繁殖和减少对机体的危害｡常用的药物是磺胺六甲(磺胺间甲氧嘧啶)､磺胺五甲(磺胺对甲氧嘧啶)和增效磺胺嘧啶钠注射液(可按75 mL/kg肌注,首剂加倍),这些药物每天2次,连用2 d后,再以同样剂量每天用药1次,继续连用3~5 d[8],一般都会康复｡参考文献:[1] 林曦. 家畜病理学[M]. 第三版. 北京:中国农业出版社,1997. 326-329.[2] 殷震,刘景华. 动物病毒学[M]. 第二版. 北京: 科学出版社,1997.[3] 蒋金书. 动物原虫病学[M]. 北京: 中国农业大学出版社,2000.258-272.[4] 单连玉,杨秀珍,杨树森. PCR技术诊断弓形虫病的研究进展[J]. 国外医学——寄生虫病分册,2002,29(2):58-65.[5] 甘绍伯,佟玉品,尹清源. 聚合酶链式反应检测弓形虫的实验研究[J]. 中国人兽共患病杂志,1999,15(2):27-31.[6] 单连玉,杨秀珍,刘佩梅. PCR技术检测RH 株弓形虫组织内感染的实验研究[J]. 天津医科大学学报,2002,8(4):416-419.[7] 崔平,刘红彬, 方素芳, 等. PCR检测猪弓形虫病方法的建立[J]. 中国动物检疫, 2009,26(5):62-63.[8] 朱芬花. 中西医结合治疗猪弓形体病[J]. 中兽医医药杂志,2010,29(2):32.。
大熊猫布鲁氏菌病、弓形虫病以及心丝虫病的血清学调查研究
大熊猫布鲁氏菌病、弓形虫病以及心丝虫病的血清学调查研究钟志军;黄祥明;杨洋;吴孔菊;徐晓阳;曹雪峰;兰景超;彭广能【摘要】为摸清大熊猫布鲁氏菌病、弓形虫病以及心丝虫病的血清学感染资料,采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验以及外膜蛋白BCSP3基因PCR扩增检测布鲁氏菌病;同时采用弓形虫间接血凝试验和犬心丝虫抗原快速诊断对样品进行检测.结果表明,6只大熊猫RBPT检测为阳性,进一步采用SAT和血液细菌BCSP31基因PCR扩增结果均为阴性,排除了布鲁氏菌感染;大熊猫蜀兰弓形虫抗体检测呈阳性,复查也为阳性,表明存在弓形虫感染;所有大熊猫心丝虫抗原检测结果均为阴性,表明无心丝虫感染.本次检测的3种疾病中,仅发现1只熊猫(蜀兰)存在弓形虫感染,布鲁氏菌病和心丝虫病均为阴性,表明目前成都大熊猫繁育研究基地内大熊猫疾病的预防工作成果显著.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2014(033)006【总页数】4页(P836-839)【关键词】大熊猫;布鲁氏菌病;弓形虫病;心丝虫病【作者】钟志军;黄祥明;杨洋;吴孔菊;徐晓阳;曹雪峰;兰景超;彭广能【作者单位】四川农业大学动物医学院,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;成都大熊猫繁育研究基地,四川省濒危野生动物保护生物学省部共建实验室,成都610081;四川农业大学动物医学院,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;成都大熊猫繁育研究基地,四川省濒危野生动物保护生物学省部共建实验室,成都610081;四川农业大学动物医学院,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;四川农业大学动物医学院,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;成都大熊猫繁育研究基地,四川省濒危野生动物保护生物学省部共建实验室,成都610081;四川农业大学动物医学院,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014【正文语种】中文【中图分类】Q959.8;S85大熊猫Ailuropoda melanoleuca是我国特有的珍稀野生动物，被列为国家Ⅰ级保护动物。
近年来家兔主要传染性疾病--弓形虫病和附红细胞体病
近年来家兔主要传染性疾病--弓形虫病和附红细胞体病
谷子林
【期刊名称】《中国农村科技》
【年(卷),期】2005(000)004
【摘要】@@ 弓形虫病rn刚地弓形虫是寄生于人类和许多动物组织细胞内的原虫,可侵犯脊椎动物的多种细胞,并在细胞内繁殖,最后破坏宿主细胞,释放出虫体,导致一系列病理变化.弓形虫病是重要的人畜共患疾病,猫是终端宿主,有200多种动物可患该病,已呈全球性流行,对人类健康和畜牧业生产构成严重威胁,引起医学界和兽医界的普遍重视.
【总页数】3页(P39-41)
【作者】谷子林
【作者单位】河北农业大学,保定,071001
【正文语种】中文
【中图分类】S829.1
【相关文献】
1.猪附红细胞体病并发弓形虫病的诊治 [J], 于俊凯;李延军;贾立军
2.近年来家兔主要的传染性疾病-球虫病和传染性鼻炎 [J], 谷子林
3.福建省家兔主要养殖地区弓形虫病的血清学调查 [J], 黄爱珠
4.猪蓝耳病、附红细胞体病、弓形虫病混合感染的诊治 [J], 刘佳佳;张士罡
5.近年来我国禽类传染性疾病的主要特征 [J], 李莉
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
牛弓形虫感染情况调查
近些年来，弓形虫感染逐渐从鸡、猪等动物向肉牛等大牲畜进行蔓延，牛一旦感染弓形虫，将会引发咳嗽、拉稀、牛喘以及淋巴结肿胀等症状，而且在使用相关药物进行治疗均无效，最终造成牛群死亡。
通过剖检可以发现，病牛的各淋巴结存在明显肿胀和水肿现象，而且还有出血点。
由此可以看出，弓形虫感染对肉牛等牲畜养殖具有严重危害，需要相关工作人员针对牛弓形虫感染情况有效开展调查工作，并及时进行治疗。
同时，相关研究人员需要针对牛弓形虫感染加大药物治疗研究力度，从而有效防治弓形虫感染。
一、牛弓形虫感染剖检情况在对病牛进行解剖后可以发现，在肝表面存在同心圆节，而且在浅部表面中心还出现了凹陷液化，由于深部结节，进而导致肝表面发生突起，对其切面进行观察，发现同样为同心圆形，而且在中心有黄豆和拇指大小不等的液化结节。
对其肾部位置进行观察，发现同样存在相同结节，在脾部也有结节存在，但为不明显同心圆形，而且脾包膜的结节表面有着明显的增厚和突起。
在病牛的心包腔、腹腔积液以及胸腔当中，有着明显的纤维渗出。
病牛胃肠由出血症状，而且粘膜发生脱落。
部分病牛出现流产，胎儿有水肿症状，而且病牛还有着较高的子宫炎发病率，子宫的收缩力也相对较差，存在许多积液，为巧克力色泽，在使用药物治疗后，效果较差。
针对各地送检的病牛内脏以及血液，在其中发现有焦虫存在，在经过细菌培养之后发现其均呈阴性。
将细菌经过小白鼠接种之后，可以发现其多数都严重感染了弓形虫，部分还检出了大肠杆菌以及沙门氏菌。
由此可以判定，牛群出现大批发病症状主要为弓形虫感染，同时还并发各种疫病混合感染。
针对弓形虫，以往采取磺胺类药物进行治疗，可以起到相应疗效，但在病原产生抗药性后逐渐失效。
二、牛弓形虫感染药物研究和治疗现状根据美国第十版《禽病学》进行分析，可以发现如今针对弓形虫，不仅缺乏治疗药物，而且也没有相关预防药物。
在以前，曾经有相关科学工作者在防治弓形虫研究中对弓形虫弱毒疫苗进行使用，但担心在畜体当中注射疫苗后，带虫会成为人畜传染源，因此该疫苗未能得到推广和应用。
弓形虫病免疫学诊断方法研究进展
敏感性和重复性。但由于在进行检查时必须使用活 的、有毒力的速殖子而存在巨大的危险性，限制了其 应用。随后在此基础上建立了免疫酶染色试验（ｉｍ—
ｍｕｎｏｅｎｚｙｍｉｃ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｔｅｓｔ，ＩＥＳＴ），它是以玻片上甲
醛固定的弓形虫虫体作为抗原，与血清样本中抗体
李健等［１３３将生物素标记的ＰＣＲ产物与地高辛
标记的特异性探针杂交，再通过酶免显色反应测出 ＯＤ值，以判断弓形虫感染情况。用此方法检测以 １０４、１０３弓形虫ＲＨ株速殖子腹腔接种小鼠的全血、 肝组织。结果ＰＣＲ—ＥＬＩＳＡ方法的检测阈值为２０垃 弓形虫ＤＮＡ，其灵敏度是常规ＰＣＲ的１０倍，并且 与人、小鼠疟原虫、旋毛虫等ＤＮＡ均无交叉反应。 同一样本重复测试５次，一致性良好。检测感染动 物肝组织及全血标本，１０４、１０３组分别在感染后第２ 天、第３天即可测出阳性，两种标本的阳性检出率无 统计学差异。ＰＣＲ—ＥＬＩＳＡ是一种快速、敏感、特异、 稳定的检测方法，可试用于临床弓形虫病的诊断及
４．４ ＰＣＲ—ＥＬＩＳＡ
ＥＬＩＳＡ对猪弓形虫病的ＩｇＧ抗体检测结果一致性
较好［８］。但如存在类风湿因子、抗核抗体则产生非 特异性染色，可引起假阳性反应，同时判定结果易带 主观性。 ４酶联免疫吸附试验 ＥＬＩＳＡ是当前诊断弓形虫感染应用最广的技 术。间接ＥＬＩＳＡ法检测弓形虫ＩｇＭ抗体，发现急 性病例检出率较高，但类风湿因子阳性者出现假阳 性反应。近年来，新发展的双夹心ＥＬＩＳＡ检测 ＩｇＭ，是采用抗ＩｇＭ抗体包板，样本中的ＩｇＧ、类风
等。
１
染色试验 ＤＴ曾被视为是弓形虫病病原特有的血清学检
测方法和最有价值的检测手段，具有良好的特异性、
实验用兔弓形虫病血清学调查
关键词
兔 弓形 虫 血清学
中图分类号：￥ ５ ．２９ ８２７ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１０ —７ ３２ １）８０ ６ —２ ０ ７ １３ （０ １ —０ ４０ ０ 释液对照孔 ，每孔加稀释液２ ｕ ５Ｌ。在 ｌ ｌ排 的第 １ ～０ 孔分 别 加入 １ １ 号待检血清２ ｕ ～０ ５ Ｌ，在 第１ 排的第 ｌＬ １ 孑 加入阳性对 照血清 ２ ｕ ５ Ｌ，并分别倍 比稀释 至第８ 。在第 １ 排的 第 ｌ 孔 ２
清至 另一离心管 中，编号 ，作 为待检血清 ，４Ｃ冰 箱中保 ＂
存备用 。
检测 结果提 示 ，试验 抽取 的５ 只 兔子样 品中 ， 弓形 ０
虫 感 染 的 阳 性 率 约 ７ ， 且 试 纸 条 检 测 的 灵 敏 度 高 于 ％
ห้องสมุดไป่ตู้
１１ 试验仪 器 针 头 、离心机 、微量 加样器 、 弓形 虫 ．． ２
操作烦琐 ，只停留在实验室阶段 ，对基层 的实验 动物 中 心 弓形 虫病 的检 测 带来 诸 多 障碍 。本 研 究制 备 的试 纸 条 ，可用 于快速 简便 的诊 断 ，以弥补基 层检验 设备 的缺 乏和技术 力量 的不足 。
带） 、质控 区（ ｃ带） 出现红色 为阳性 ：仅质 控区（ 均 ｃ带） ，
试 纸 条 等 由金 华 职 业 技 术 学 院动 物 医 学 研 究 所 提 供 。
１ 试 验 方 法 ． ２
Ｉ Ａ，表 明用于快速检测的试纸条的作用是可以确认的。 Ｈ ３ 讨论与小结
（ ）本次试验检 出实验用兔的 弓形虫感染率约７ １ ％，
１． Ｉ ． １ ＨＡ（ 向 间接 血 凝 ） ２ 反 法 反 应 在 ９ ￣ Ｖ型 微 量 有 机 ６Ｌ
性 兔 和 评 定 兔 群 的感 染 率 ，但 常 用 的Ｉ ＨＡ及Ｅ ＩＡ等 方 法 ＬＳ
一例金毛犬弓形虫感染的诊治
文章编号：1004-2342（2023）03-0055-03中图分类号：S829.2文献标识码：A弓形虫病是人畜共患原虫病，传播途径有垂直传播、接触传播和消化道传播等。
该病多为隐性感染，显性感染时在急性感染期表现出显著症状，人和动物的脑部、眼部、器官等多个部位遭受感染，孕期感染可能出现流产、死胎等症状，慢性感染临床症状表现不明显［1］。
全世界感染弓形虫的人口约占1/3，而中国的平均感染率在10%左右[2]。
笔者于2023年4月份接诊一例家养金毛犬急性弓形虫感染的病例，经过相关临床诊断和治疗措施，金毛犬恢复健康，现将详细的诊治经过总结如下。
1临床问诊患病犬为金毛犬，雌性，2岁，体重38kg ，幼龄时已完成犬瘟热、狂犬病与细小病毒疫苗接种，成年后未再免疫，经赣州宠裕康宠物医院B 型超声波检查，确定处于妊娠状态。
就诊前半个月，主人曾收养过一只流浪猫，还将猫与患犬放在家里一同饲养。
患犬就诊前4d 出现食欲不振，精神萎靡，久卧不动等症状。
通过仔细观察，发现病犬生殖器有红色分泌物流出，之后出现疑似孕囊排出情况，立即到宠物医院就诊。
2临床检查对患病犬进行全身检查，发现其体温上升（高达40.5℃），呼吸频率为32次/min ，鼻镜干燥，两眼角有少量分泌物，血性分泌物从阴门流出，诱咳阳性。
3实验室检查3.1血液生化指标检查采集3mL 患犬前肢静脉血，将血清分离，再作血液化生指标检查。
3.2影像学检查3.2.1X 射线检查。
X 光对患犬腹部进行检查。
3.2.2B 型超声波检查。
对患犬采取仰卧保定，腹部剃毛处理后使用B 型超声波检查其膀胱背侧子宫角区域。
3.3常见病原检测3.3.1犬瘟热抗原检测。
采集病犬的鼻腔、眼角分泌物，使用检测犬瘟热病毒的胶体金快速诊断试纸（韩国安捷ANIGEN)。
显示CDV 抗原呈阴性，此犬未感染犬瘟热。
3.3.2检测布鲁氏杆菌抗体与弓形体抗体。
使用摘要：弓形虫属孢子虫纲寄生虫，是一种广泛分布在人和猫、狗等动物细胞内的病原微生物。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
鼠等动物 中分离 成功 。２ 纪 ７ ０世 ０年代后 期 ， 弓形虫 病在 全
国范 围内大肆流行 ， ２ 至 ０世纪 ８ ０年代 中期 ， 广西壮族 自治区 卫生 防疫 站 牵 头开 展 了人 畜 弓形 虫 病 的 调 查 ， １ 有 ９个 省
江苏农业科学
孔
２１ ０ ２年第 ４ ０卷第 ２期
一 １ １一 ７
猛 ， 昀， 白 丁志 勇， 等．江苏省部分地 区动物 弓形虫病血清学调查［ ］ Ｊ ．江苏农业科学 ， １ ， （ ） １ １ １３ ２ ２４ ２ ：７ — ７ ０ ０
江苏省部分地 区动物 弓形 虫病 血清学调查
孔 猛， 昀， 白 丁志勇， 刘茂军， 冯志新， 熊祺琰， 白方方， 车巧林， 王海燕， 伟， 艳娜， 王占 韦 邵国青
关键词 ：弓形 虫病 ； 血清学 ； 调查 中图分类号 ： ８２ ５ Ｓ ５ ． 文 献标 志码 ： Ａ 文章编 号 ：０ ２—１０ （０ ２ ０ １０ ３２ ２ １ ）２—０７ ０ １１— ３
弓形 虫在世 界范 围内广泛 地感 染着人类 和 动物… 。人 类 感染 弓形虫主要是食人 了未 烹饪熟 的 肉制 品 ， 而在 这种没 有烹饪熟 的肉制品 中恰恰 含有 弓形虫包囊 、 速殖 子、 卵囊 等 ， 还有可能是食入 的其他食 物和水中含有 弓形 虫的卵囊或是机 会性地 从环境 中误食了 弓形虫 的卵囊 ； 而动物感染 弓形虫 主要是从环境中食入了弓形 虫卵囊 。Ｍｍ ａ 等在西班牙所作 ｎｒ 的一项调查 中发现 ， 牧场 中猫 的存在 与否 和羊群是否 感染 弓 形虫存在着十分密切的联 系 ： 为弓形虫 终末宿 主的猫感染 做
抗体 阳性率往往 比普 通 的饲 养场 动物 弓形虫 阳性 率高 出许
多 。Ｆ ｓｏ等对意大利 １７家农场 的羊奶制 品进行 弓形虫 血 ｕｅ １ 清学和抗原 的调查 ， 在这 １７家农场 中有 ４家农场 查到 了 弓 １ 形虫 的 Ｄ Ａ，１家农 场中查到 了弓形虫抗体 。可见在弓形 Ｎ ９ 虫病 的传播过程 中， 猫在其 中起 了至关重要的作 用。因此 ， 在
（ 江苏省农业科学 院兽 医研究所／ 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室／ 国家兽用生物制品工程技术研究 中心 ， 江苏南京 ２ ０ １ ） １０ ４
摘要 ：以间接 血凝 （Ｈ 试 验方法对江苏省部分地 区（ Ｉ Ａ） 徐州 、 连云港、 盐城 、 宿迁 、 南通 、 泰州 、 州、 扬 南京 、 常州 、 宜 兴、 昆山） 物弓形 虫病进行血清学调查 。试验 血清样 品稀释度在 １： ４时 ， 动 ６ 致敏血球 达到 ５ ％ 以上凝集 的血 清样 品 ０ 判为 阳性 。结果在所调查 的 １１０份血 清样 品 （ 、 羊 、 、 ０ 猪 牛、 猫 狗等动物 ） 中弓形虫抗 体呈 阳性 者为 １５份 ， ４ 占总调查 血清数 的 １ ． ％ ， 中 ９ ９份猪血清样 品中阳性样品数 １０份 ， ３２ 其 ３ ２ 占总调查猪血清样 品的 １ ． ％ ， ２ ８ 总体反映 出江 苏省 内 动物 弓形虫病感染的概况 。
区） 采集 的４７ ３ ９ 份猪血清样 品进行 弓形虫抗 体 的检 测 ， 结果 阳性样 品数１７０ ， ８ 份 阳性率达到 ３ ．４ ， 中７月份至次年 ７１％ 其 ２月份的 阳性 率比 ３ ＿ ＿６月的阳性率高 ， 随后 进行的各地 猪弓
通信作 者 ： 国青 ， 士 ， 邵 博 研究 员 ， 主要 从事 动物 传染 病研究 。Ｔ ｌ ｅ ：
１７ ９ ９年 江苏省 农业 科学 院 以间接血 凝法对 从 ４ ７个 县 （ 、 市
作者简介 ： 孔
猛 （９ ２ ） 男 ， 徽淮北人 ， １８ 一 ， 安 硕士 ， 事动 物传染病 从
研究。Ｔｌ（ ２ ）４ ９ ３ ４； ｅ：０ ５ ８３ ０ ３ Ｅ—ｍａ ：ｏｇ ｎＯ １ ＠１６ ｅｍ。 ｉ ｋｎｍｅｇ３ ６ ２ ．ｏ ｌ
（ ２ ）４ ９ ９ ３ Ｅ—ｍａ ：４ ９ ９ ３ １３ ｃｒ。 ０ ５ ８ ３ １７ ； ｉ ８ ３ １７ ＠ ６ ．ｏ ｌ ｎ
（ 上接 第 １０页） ７
表 ２ 不 同硒 浓度饲 料喂养鸭的增 重情况
参 考文 献 ：
［］ １宫 丽 ， 光．硒元素与健康［ ］ 环境科学与管理 ， ０ （ ） 马 Ｊ． ２ ７９ ： ０
ｌ ５—１ ２ ６． ９．
［］ 勃 ， ２熊 王新军．硒 的生化功能 及其与运 动的关 系［ ］ Ｊ ．安康 学
院学报 ，０ ９２ （ ） １ ３—１５ ２０ ，１ ２ ：０ ０． ［ 谢 慧玲 ， ３］ 张
７ ５—７ ． ６
晨．硒 的生 物学 功能 ［ ］ Ｊ ．地方 病通 报 ，０２（ ）： ２０ ３
弓形虫病 的血清学调查 中， 对猫血 清进行 弓形 虫抗体 的调查
有着极其重要的意义。 弓形虫在我 国发现较晚 ，９ ５年在福 建从猫 、 猪 和豚 １５ 兔、
弓形虫后可 向外界排出大量 的卵囊 ， 弓形虫 卵囊有着 非常厚 的囊壁 ， 可在外界环境 中存活非常久 的时 间， 以放养 为主的羊
以及其他动物饲养场凡是有猫 经常 出入的 ， 其动物群 弓形虫
收稿 日期 ：０ １ ５—１ ２ １ —０ ０ 基金项 目： 公益 性行业 （ 农业 ） 科研专 项 （ 号 ：０ ８ ３ １ ； 苏省 编 ２ ０ ０ ０７） 江 农 业三项工程项 目［ 编号 ：ｘ（ ０市 、０多个单 位参 加 ， 全 国范 围内人和 动物 的血 清 （ 对 共
计 １１０ ５份血清样品） ２ ７ 进行了检测 ， 检测结果显示平 均的感
染率为 ５ ， ％ 分离 出 ３ 弓形虫 株 ， 治 了 １ ７株 诊 １例病人 ， 明 表 弓形虫病在 全 国范 围的流行 状况 并不 是 特别 的广 。１７ — ９８