显微操作时间对猪ICSI胚胎早期发育的影响
猪第一极体核物质参与卵母细胞受精及其胚胎发育的研究
外受精和单精子注射后2-细胞卵裂率分别达到12．9% 和29．8% 。结论：猪第一极体核物质具有参与卵母细胞受
精和进一步胚胎发育的能力。据此推测利用第一极体将有可能繁殖正常仔猪后代。
关键词：猪；第一极体；重组卵母细胞；重组胚体外发育
2．College of Life Science，N anjing Norm al Univesity，N a可ing 210097，China)
Abstract：The aim of the present study was to explore whether the nuclei materials of first polar body (F PB)in porcine ooeyte could participate in fertilization and further developed into norm al porcine embryo in vitro．T he FPBs in M Ⅱoocytes were obtained by in vitro m aturation of the Cum ulus oocyte com plexes(CO Cs) from ovary follicles．Live FPB was injected into an enucleated oocyte recipient by m ierom anipulation after it Was isolated fro m m ature oocyte．T he oocytes reconstructed by FPB were fertilized by routine in vitro fertilization (IV F) or intracytoplas m sperm injection (ICSI)，the recom binant zygotes derived fro m FPBs were cultured in vitro to observe their ability of further developing in vitro．T he results show ed that successful rate of recom binant oocytes was as high as about 80% ，only about 20 % reeom bined oocytes were degenerated or disaggregated during the process of short culture and fertilization in vitro．Som e of recom binant oocytes were successfully developed into two-eell，four-eell and eight-eell stage em bryos，the cleavage rates of two-cell stage embryos were 12．9% and 29.8% after routine fertilization and ICSI，respectively．T he conclusion was that the nudei materials of porcine FPB could be able to participate in fertilization and further em bryonic developm ent．T his might im ply the possibility of reproducing norm al porcine offspring by using FPBs in future． Key words：pig；first polar body；recom binant oocyte；developm ent of recom binant embryo in vitro
ICSI与常规IVF的临床应用分析
体外受精一胚胎移植( I VF—ET) 相似。
关键 词 卵母细胞质内单精子显微注射；体外受精
中图分 类号：R71
文献标 志码：B
文章编号：10 05 —9 30X( 2 010 ) 0 5—07 35—0 3
卵母细胞质内单精子显微注射(i nt r ac yt opl a s mi c s per m i nj ect i on。I CSI ) 技术是将单个精子通过显微注射的方法注入 到卵子细胞质内．从而使精子和卵子被动结合受精．形成受 精卵并进行胚胎移植。I CSI 技术被广泛应用于男性严重少、 弱、畸形精子症及梗阻性无精子症、部分非梗阻性无精子症 的治疗．还町用于治疗既往常规体外受精(I VF)受精失败，不 明原因 不孕的患 者。1992 年比利时自 由大学Pa l er mo等… 应用I CSI 方法进 行辅助受精获得成功．首次 报道I CSI 是治 疗常规1VF无法解决的严莺男性因素引起的不育。标志着辅 助牛殖技术研究 新的咀程碑。本研究对应用 I CSI 和常规体 外受 精 胚胎移植( i n vi t r o f er t i l i zat i on—embr yo t r ansp or t a t i on．1vF—ET) 技术1 303周期进行分析。评价I CSI的临床应 用价值 及其安全 性。
HCG(Pr of as i ．瑞士Ser ono公司产品) 10 000 I U。34～36 h后 取卵。培养室收集卵母细胞进行培养，主要根据精液情况及 病史 选择常规 I VF或I CSI 方式 受精．约 16 h后观察 受精情 况，第3天观察卵裂情况对胚胎进行评分，选择2～3个胚胎 移植。移植后剩余的优质胚胎经病人同意进行冷冻保存。胚 胎移植后行黄体支持。术后14 d测尿HCG或血pHCG．阳 性后7～14 d B超见孕囊及心管搏动为临床妊娠．黄体支持 至妊 娠3个月 。 1．3 统计学处 理：本 研究资 料采用SPSS 10．0统计软件进 行x2检验．P<o．05为差异有统计学意义。
体外受精-胚胎移技术发展趋势论文
体外受精-胚胎移技术发展趋势【中图分类号】r473.71【文献标识码】b【文章编号】1672-3783(2012)04-0015-01体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and em．bryo transfer，ivf-et)技术是近年在世界范围内被广泛应用、并迅速发展的一项高、新、尖的科技项目。
其应用于人类的临床医学，为了延续生殖过程，在了解生殖过程的基础上，在其发生障碍时给予医学帮助势在必行，由此产生一门新兴技术——辅助生育技术（assisted reproductive technology,art）此技术的出现立刻推动了人生科技向更高、更深层次发展，并超越了人类生殖本身的意义。
1 体外受精及其相关技术在临床医学的应用1.1 体外受精-胚胎移植（ivf-et）:体外受精是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。
在生物学中，把体外受精胚胎移植到母体后获得的动物称试管动物(test tube animal)。
试管婴儿是伴随体外授精技术的发展而来的，是指分别将卵子与精子取出后，置于试管内使其受精，再将胚胎前体——受精卵移植回母体子宫内发育成胎儿。
试管婴儿是用人工方法让卵子和精子在体外受精并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。
1.2 体外受精-胚胎移植(ivf-et)的相关辅助技术1.2.1 卵子胞浆内单精子注射（intracytoplasmoc sperminjection,icsi）:体外受精-胚胎移植(ivf-et)开辟了女性不孕症治疗新纪元，但仍有约30%男性不能通过常规ivf-et技术生育，因为少弱精症的精子不能穿透卵母细胞透明带而是先融合，因而受精率低，为此产生了显微辅助受精技术。
1992年比利时布鲁塞尔自由大学palermo等的卵浆内单精子注射（intracytoplasmoc sperm injection,icsi）辅助受精，即在显微镜下将单个精子直接注射到卵母细胞胞浆内，从而达到受精目的。
icsi操作流程
icsi操作流程ICSI操作流程ICSI（intracytoplasmic sperm injection）是一种辅助生殖技术，常用于治疗男性不育症或其他生殖问题。
本文将介绍ICSI的操作流程。
1. 确定适应症在进行ICSI操作之前，首先要对患者进行详细的病史调查和相关检查，明确是否适合进行ICSI。
常见的适应症包括精子数量或质量异常、精子无法正常进入子宫、精子与卵子结合能力差等。
2. 准备工作在进行ICSI操作之前，需要对患者进行一些准备工作。
首先是女性患者的促排卵治疗，以增加卵子的数量。
其次是男性患者的精液提取，通常通过手动或机械方法采集精子。
3. 卵子采集ICSI操作需要获取女性患者的卵子。
一般会在女性排卵期进行卵子采集。
此时，医生会使用超声引导下的穿刺技术，将细长的针管插入卵巢，抽取成熟的卵泡。
4. 精子准备在卵子采集后，需要对精子进行准备。
通常会选择质量较好的精子进行操作。
首先，将采集到的精液放入离心管中，通过离心分离出较好质量的精子。
然后，使用显微镜观察精子的形态和运动情况，选择最佳的精子。
5. 卵子处理将精子与卵子结合是ICSI操作的关键步骤。
先将卵子放置在培养皿中，然后使用显微注射针将精子直接注入卵子的细胞质中。
注射时需要非常小心，以免对卵子造成损伤。
6. 培养和移植注射完成后，将注射过的卵子放置在培养皿中进行培养。
培养时间一般为24-48小时。
在培养过程中，医生会观察卵子的发育情况，判断是否有受精成功的迹象。
如果卵子受精成功并发育良好，医生会选择最佳的时机将胚胎移植回母体子宫。
7. 后续处理胚胎移植完成后，患者需要进行一段时间的休息和观察。
医生会根据患者的具体情况，制定适当的后续处理方案。
通常会建议患者进行一段时间的休息和避免剧烈运动，以提高胚胎着床的成功率。
ICSI操作是一种复杂的辅助生殖技术，需要经验丰富的医生和专业的设备来完成。
通过ICSI，许多不育患者得以实现生育的愿望。
中国农业大学动物繁殖学题库总结(朱士恩 田见晖)
一、名词解释1.安静排卵安静排卵也称为安静发情，即母畜无发情表现，但卵泡能发育成熟而排卵。
2.外激素动物体向外界排放的一种或多种化学物质的混合物，它可以引起接受它的动物发生一种或多种生理和行为反应，这种化学物质称为外激素。
3.妊娠黄体动物发情、排卵并配种（或输精），其妊娠后黄体要维持到分娩前才退化，这种黄体称为妊娠黄体。
4.辅助受精技术需要借助显微操作仪来完成受精过程，所以辅助受精技术又称为显微受精。
5.动物转基因技术指通过一定的方法，把人工重组的外源DNA导入受体动物的基因组（knock in），或把受体基因组中的一段DNA敲除（knock out），从而使受体动物的遗传信息发生人为的改变，且这种改变能遗传给后代的一种生物技术。
6.人工授精指使用器械采集公畜的精液，再用器械把经过检查和处理后精液输入到母畜生殖道内的技术。
7.糖酵解指数在无氧时，109精子在37℃条件下，1h分解果糖的毫克数称为精子的果糖酵解指数。
8.不返情率配种后一定时间内，不再表现发情母畜数占配种母畜数的百分比。
9.胎位胎儿背部与母体背部的关系。
胎儿背部朝向母体背部，伏卧在子宫内称上位；胎儿背部朝向母体腹壁称侧位，又分为左侧上位和右侧上位；胎儿背部朝向母体腹部，仰卧在子宫内称下位。
10.血液-睾丸屏障血液和淋巴液不能直接进入精细管，使发育中的生精细胞免受血液化学变化的影响，是靠精细管外周的肌细胞和足细胞间的特殊连接完成的。
这种结构称为血液-睾丸屏障。
11.发情指母畜随着初情期的到来，在生殖激素的调节作用下，伴随卵泡的成熟、排卵所出现的周期性生理现象，称为发情。
12.公猪外激素指公猪睾丸中可合成两种特殊气味的化学物质，即环戊烷多氢菲相似物和睾酮相似物，均属于类固醇类相似激素，贮存于公猪脂肪中，由包皮腺和唾液腺等排出体外。
13.乏情期指非发情季节期间，动物卵巢处于静止状态，不发情排卵，称为乏情期。
14.超数排卵指母畜发情周期的适当时间，采用促性腺激素处理，使其卵巢有比自然条件下较多的卵泡发育并排卵的方法。
不同时间行补救lCSI的结局分析
不同时间行补救lCSI的结局分析目的回顾对常规IVF（体外授精）后受精失败卵子在不同时间段实施补救ICSI（卵胞浆内单精子显微注射）的结局，旨在探索补救ICSI的最佳时间段。
方法于不同时间对24个周期的180枚未受精卵子行补救ICSI，按卵子补救时间分为三组，A组于受精后4～6h行补救ICSI，B组于受精后6～8h行补救ICSI，C组于受精后18～20h行补救ICSI，比较三组的受精率、卵裂率、可移植胚胎率。
结果A组的受精率、卵裂率、可移植胚胎率分别为80﹪、91.7﹪、72.7﹪。
B 组的受精率、卵裂率、可移植胚胎率分别为66.7﹪、88.1﹪、70.3﹪。
C组的受精率、卵裂率、可移植胚胎率分别为35.1﹪、55.0﹪、36.4﹪。
A组的受精率、卵裂率、可移植胚胎率与B组的相比较差异无统计学意义（P>0.05）。
C组的受精率、卵裂率、可移植胚胎率与A组和B组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论常规体外受精后失败的卵子在4～8h内实施早期补救ICSI，可提高受精率、卵裂率、可移植胚胎率，可能有助于改善妊娠结局。
标签：体外受精；补救ICSI；妊娠结局常规体外受精失败在临床中的发生率约为5～10﹪，且主要发生于原发性不孕不育患者。
目前主要采取补救ICSI的方法来降低受精失败率，以减少患者的损失。
补救ICSI的实施的时机在患者治疗的临床结局中具有重要意义，为探讨补救ICSI的合适时机，本中心回顾分析了常规体外受精后未受精卵在不同时间段实施补救ICSI的结局，现报道如下。
1资料与方法1.1 一般资料回顾分析2012年6月～2014年6月于本中心接受常规IVF 后未受精的24个周期。
所有纳入研究的患者均对本研究知情并签署知情同意书。
患者均为原发不孕者或经三次及以上人工授精治疗后未妊娠。
腹腔镜及输卵管造影检查证实输卵管通畅，且排卵正常。
获卵数超过4枚。
男方精液分析结果提示正常或有轻度弱精子症。
年龄均在26～37岁，平均年龄为（32.4±1.3）岁；平均不孕年限为（5.5±2.3）年。
IVF-ET过程中不同受精方式对胚胎发育和临床妊娠率的影响
IVF-ET过程中不同受精方式对胚胎发育和临床妊娠率的影响摘要】目的探讨在辅助生殖过程中不同受精方式对胚胎发育与临床妊娠率的影响。
方法选择2010年5月-2011年12月在广东省韶关市妇幼保健院生殖医学中心进行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的不孕症患者598例，按受精方式分为两组，A组为常规体外受精患者523例;B组为卵泡浆单精子注射（ICSI）患者75例，比较2组受精率、优质胚胎率、临床妊娠率等指标是否存在差异。
结果两组受精率、优质胚胎率、临床妊娠率等指标不存在差异，结果无统计学意义。
结论与常规IVF相比，ICSI是一种有效的治疗男性因素不孕的方法。
【关键词】体外受精-胚胎移植（IVF-ET）卵泡浆单精子注射（ICSI）受精率优质胚胎率临床妊娠率体外受精与胚胎移植（IVE-ET）又称试管婴儿，就是采用促排卵药物促进卵泡发育，取出卵子，放入培养液中培养一阶段，处理好精液后，获取质量好的精子进行体外受精；待发育成早期胚胎（4-16个细胞）时选择1-3个优质胚胎用移植管移植到妇女子宫腔内，使其着床发育成胎儿全过程。
而卵泡浆内单精子注射技术是将一个精子通过卵子透明带、卵膜，直接注射到卵子胞浆中。
本研究比较2种受精方式的差异，为临床治疗提供依据。
1 资料与方法1.1一般资料选择2010年5月至2011年12月在韶关市妇幼保健院生殖医学中心进行IVF-ET患者598例，按既往妊娠史和精液分析情况，分为IVF受精组（A组）和ICSI受精组（B组），A组523例，B组75例。
1.2方法 598例患者采用促排卵药物促进卵泡发育，取出卵子放入培养液中培养一段时间，A组按常规IVF加精时间和方法进行，第1天拆除颗粒细胞观察卵子成熟度及受精情况；B组用注射针吸取一个形态及活力正常的精子，将精子制动，通过卵子透明带、卵膜，直接注射到卵子胞浆中， 16h后观察有无雌雄原核及第二极体。
于取卵后第三天观察优质胚胎数，选择1-3个优质胚胎移植入子宫腔内，胚胎移植一个月后B超检查见心管搏动为临床妊娠。
《体外受精和早期胚》课件
体外受精和早期胚的课件将带你探索体外受精和早期胚的奥秘，了解其定义、 发展过程以及相关技术。让我们一起展望未来的生育科技吧！
概述
什么是体外受精和早期胚
体外受精是一种辅助生育技术，早期胚是指受精卵发育的早期阶段。
定义和发展过程
体外受精是在体外完成受精过程，早期胚是在子宫外培养的受精卵发育阶段。
体外受精技术
1 传统体外受精技术
操作流程复杂，由精子和卵子在培养皿中自 然结合。
ห้องสมุดไป่ตู้
2 ICSI技术
通过显微操作将单个精子注射到卵子内进行 受精。
早期胚的发育过程
早期胚的形成和发育
受精卵从单细胞发展为多细胞 胚胎。
第一周发育阶段
受精卵到达子宫，形成原始滋 养细胞。
第二周发育阶段
植入前期和植入期是早期胚发 育的关键阶段。
体外受精的成功率
影响成功率的因素 年龄、卵子和精子质量、子宫健康等。 如何提高成功率 合理调整生活方式、早期干预预防及治疗等。
注意事项
1 进行体外受精需要注意的事项
如遵守医生建议、定期检查等。
2 体外受精后的护理
如避免剧烈运动、保持心情愉快等。
结论
通过本课件，系统性的了解体外受精和早期胚的相关知识，意识到体外受精和早期胚在生育科技中的重要性。
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显 微 操 作 时 间对 猪 ＩＳ 胚 胎 早 期 发 育 的 影 响 ＣＩ
罗龙 兴 ， ， 秦祖 兴 ， 梁世 忠 邹 知 明 卢 晟 盛 ， 克 焕 ， ， 卢
（． １ 广西亚热带生物资 源保护利用重点实验 室， 广西 南宁 州畜牧 兽医学校 ， 广西 柳州 ５ ５０ ） ４ ０３ ５ ００ ；． ３ ０ ５２ 广西大学动物科学技 术学 院， 广西 南宁 ５ ００ ３广西柳 ３０ ５；
２１ ０ ０年 ２ ３卷 ５期
Ｖ０． ３ １２ Ｎｏ ５ ．
西
南
农
业
学
报
１９ ６５
Ｓ ｕｈ ｅｔ ｈｎ ｏ ｒａ ｆ ｇ ｉ ｌ ｒｌ ｃ ｎ ｅ ｏ ｔｗ ｓ Ｃ ｉａＪｕ ｎ ｌ ｒ ｕｔ ａ Ｓ ｉ ｃ ｓ ｏＡ ｃ ｕ ｅ
文 章 编 号 ：０ １— ８９ ２ １ ）５—１９ Ｏ １０ ４ ２ （０ ０ ０ ６ ５一 ３
不再 是受 精 的必 要 条件 ， 而 成 为辅 助生 殖 的重 要 从
不受季节限制 ， 世代间隔短 ， 大量猪卵母细胞获得较 为 容易 ， 其研 究不 易受 试 验材料 的限制 。因此 ， 以猪
Ｖ ｔｒ ａｙＳｈｏ，Ｇ ａｇｉ ｉｚｏ ４０ ３，ｈｎ ） ｅ ｉ ｒ ｃ ｏｌ ｕｎ ｘ Ｌｕｈｕ５ ５０ Ｃ ｉａ ｅｎ
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摘
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
要 ： 了进一步优化现有 的猪 卵胞质 内精子注射（Ｃ Ｉ体 系， 为 Ｉ Ｓ） 探讨 了１ Ｓ 操作 时间对猪 Ｉ Ｓ 胚胎早期发育的影响情况。结果 ＣＩ ＣＩ
表明． 囊胚形成率随着 ＩＳ 操作时问的延长而呈 现明显下 降趋 势， 中卵母细胞 在体 外 ４ ｈ内完成 Ｉ Ｓ 的囊胚形 成率 （ ． ０ ＣＩ 其 Ｃ Ｉ组 ５９ ％） 显著低 于其他 ３个处理（ ０ Ｏ ） Ｐ＜ ． １ 。可见 ， Ｓ 操作 时间越长 ， Ｉ Ｉ Ｃ 其胚胎早期发育率越低。
Ｌ ＯＬ ｎ．ｎ ， １ ｕｘ ｇ－ ＬＡ ＧＳｉｈｎ２ Ｚ ＵＺｉ ｉ ， ＵＳｅｇ ｈｎ Ｌ ｅ ｕｎ， Ｕ ｏｇ ｉ ・ ＱＮＺ －ｎ ， ＩＮ ｈ— ｏｇ ， Ｏ ｈ— ｎ Ｌ ｈｎ— ｅｇ一， ＵＫ — ａ ‘ ｘ ｇ ｉ 一 ｚ ｍｆ ｌ ｓ ｈ
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精 子胞 质 内显微 受精 （Ｃ Ｉ是 一种 辅助 生殖 技 ＩＳ） 术， 是借 助显 微操 作仪 将 精子 直接 注入 卵母 细胞 内 ， 克服 透 明带 与质 膜 的阻 碍 作 用 ， 精 子 的 活力 形 态 使