华北理工大学生物制药考试重点全

1、中国几大药源是什么？

中国三大药源是化学药、生物药、中药---生化药物、微生物药物、生物制品

2、生物药物、生物制药定义1

生物药物：是以生物材料（生物体、生物组织或其成分：组织、细胞、细胞器、代谢物、排泄物等）为原料，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。

生物技术制药：采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产医药品，叫作生物技术制药。

16、解释单克隆抗体、多克隆抗体、抗体、免疫佐剂

单克隆抗体：由单一克隆B细胞杂交瘤产生的，只识别抗原分子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。

多克隆抗体：指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。

抗体：机体受抗原刺激后产生的，并且能与该抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。

免疫佐剂：由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。

3、生物药物分类

（1）重组DNA药物（2）基因药物（3）天然生物药物（4）合成或半合成生物药物

4、几类抗生素的主要特性及生产菌种1

A、β-内酰胺类抗生素：羧基有弱酸性：影响溶解度

β-内酰胺环不稳定

青霉素：菌种：最早的原始菌种是点青霉菌；现用产黄青霉菌

◆理化性质：1、溶解性：受pH影响

游离酸：易溶于有机溶剂，难溶于水

盐：易溶于水，几乎不溶于有机溶剂

2、酸碱性：有机弱酸

3、稳定性：pH在5-7较稳定，最稳定pH为6-6.5

4、降解反应：强酸、弱酸、碱性条件或酶、胺或醇、

5、聚合反应：氨苄青霉素在水溶液中易形成聚合物，是氨苄青霉素

过敏反应的主要过敏原之一。

6、过敏反应

◆青霉素的缺点：对酸不稳定==只能注射给药，不能口服

抗菌谱比较狭窄==对G+效果比对G-的效果好

耐药性

有严重的过敏性反应

B、氨基糖苷类抗生素

链霉素：菌种：灰色链霉菌

理化性质：

1、溶解性：易溶于水，难溶于有机溶剂

2、酸碱性：强碱性

3、稳定性：较稳定 pH4~7溶液数周内稳定

pH4.0~4.5最稳定

降解反应：酸、碱条件下水解出链霉胍等

4、醛基反应：与伯胺形成席夫碱

5、成盐：与磷钨酸、苦味酸、甲基橙等成盐沉淀，用于鉴别

与磺酸、羧酸、磷酸酯成盐，可溶于有机溶剂中，可用于溶媒萃取法。

与某些盐形成复盐，用于精制。

C、大环内酯类抗生素

共性：1、无色弱碱性化合物

2、微溶于水，在水中溶解度随温度上升而下降

3、酸性条件苷键易水解，碱性内酯环易破坏

◆红霉素：菌种：红霉素链霉菌

主要性质：1、酸碱性：二甲氨基呈碱性

2、溶解性：易溶于醇、丙酮、氯仿、酯，微溶于乙醚和水，在水中

溶解度55℃时最小

3、稳定性：pH6~8最稳定

D、四环类抗生素

◆四环素：菌种：金色链霉菌

性质：

1）、溶解性：在pH4.5~7.5之间难溶于水

游离碱能溶于吡啶、甲醇、丁醇等有机溶剂和稀酸、稀碱

盐酸盐能溶于水，不溶或微溶于有机溶剂

2）、稳定性：干燥低温稳定

水溶液碱性条件下不稳定，酸性条件下（pH4~5）较稳定

3、化学反应：差向异构化：弱酸性pH2~6

脱水反应：较强酸性pH<2时脱水

碱性条件下降解：弱碱性pH8，C环打开

螯合反应：与高价金属离子

成盐：四环素与尿素形成复盐，用于精制

与长链季胺碱成盐，带同萃取反应

5、基因工程药物制药的主要程序？

A、目的基因的克隆

B、构建DAN重组体，

C、DAN重组体转入宿主菌

D、构建工程菌，

E、工程菌发酵

F、表达产物的分离纯化，

G、产品的检验等。

获得目的基因--组建重组质粒--构建工程菌（或细胞）--培养工程菌--产物分离纯化--除菌过滤--半成品检定--成品检定--包装

6、基因工程载体分为哪几类？

克隆载体、转录载体、表达载体

1、常用基因工程制药载体类型和特点？

7、真核基因在原核细胞中表达载体必须具备条件？

⑴载体能够独立复制。载体本身是一个复制子，具有复制起点。

⑵应具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记，以利于外源基因的克隆鉴定和筛选。

⑶应具有很强的启动子，能为大肠杆菌RNA聚合酶所识别。

⑷应具有阻遏子，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录。

⑸应具有很强的终止子，只转录克隆的基因，所产生的mRNA较为稳定。

⑹所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号AUG和SD序列，以便转录后顺利翻译。8、质粒稳定性的分析方法

8、质粒不稳定的类型或表现形式? 1

质粒不稳定可分为：1

分裂不稳定：指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒子代菌的现象（常见）。

结构不稳定：指外源基因从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。9、为了提高质粒稳定性，工程菌培养采用什

么方法?

（1）选择合适的宿主菌

宿主菌的遗传特性对质粒的稳定性影响很大。

（2）选择合适的载体

含低拷贝质粒的工程菌产生不含质粒的子代菌的频率较大--增加质粒拷贝数

含高拷贝质粒的工程菌产生不含质粒的子代菌的频率较小--增加质粒拷贝数

（3）选择压力

在培养基中加入抗菌素抑制质粒丢失菌的生长，提高质粒稳定性。

注意：只能消除分裂不稳定性。

（4）两阶段培养法：

A、先使菌体生长至一定密度；

B、再诱导外源基因的表达

由于第一阶段外源基因未表达，减小了重组菌与质粒丢失菌的生长速率的

差别，增加了质粒稳定性。

（5）调控环境参数

如温度、pH、培养基组分和溶解氧浓度。

有些含质粒菌对发酵环境的改变比不含质粒菌反应慢，间歇改变培养条件以改变两种菌比生长速率，可改善质粒稳定性。通过间歇供氧和改变稀释数率，都可以提高质粒稳定性。

（6）固定化

10、基因表达的宿主细胞分类？

A、第一类为原核细胞：常用有大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、链霉菌等；

B、第二类为真核细胞：常用有酵母、丝状真菌、哺乳动物细胞等。

11、克隆真核基因的常用方法？

A、逆转录法

逆转录法就是先分离纯化目的基因的 mRNA，再反转录成 cDNA，然后进行 cDNA 的克隆表达。

⒈mRNA的纯化⒉cDNA第一链的合成

⒊cDNA第二链的合成⒋ cDNA的克隆

⒌将重组体导入宿主细胞⒍ cDNA文库的鉴定

⒎目的cDNA克隆的分离和鉴定

B、化学合成法

较小的蛋白质或多肽的编码基因可以用化学合成法合成。必须知道目的基因的核苷酸顺序或目的蛋白质的氨基酸顺序。