移液器使用培训教程

移液器使用培训教程

培训方式：

实际操作

音频/视频自学

移液器基本原理：

微量加样器（移液器，俗称为“移液枪”“枪”）最早出现于1956年，由德国生理化学研究所的科学家Schnitger发明，其后，在1958年德国Eppendorf公司开始生产按钮式微量加样器，成为世界上第一家生产微量加样器的公司。这些微量加样器的吸液范围在1—1000 ul之间，适用于临床常规化学实验室使用。微量加样器发展到今天，不但加样更为精确，而且品种也多种多样，如微量分配器、多通道微量加样器等，其加样的物理学原理有下面两种：①使用空气垫(又称活塞冲程)加样；②使用无空气垫的活塞正移动(positivedisplacement)加样。上述两种不同原理的微量加样器有其不同的特定应用范围。

A空气垫加样器（实验室常见的）

活塞冲程(空气垫)加样器可很方便地用于固定或可调体积液体的加样，加样体积的范围在小于1 ul至l0 ml之间。加样器中的空气垫的作用是将吸于塑料吸头内的液体样本与加样器内的活塞分隔开来，空气垫通过加样器活塞的弹簧样运动而移动，进而带动吸头中的液体，死体积和移液吸头中高度的增加决定了加样中这种空气垫的膨胀程度。因此，活塞移动的体积必须比所希望吸取的体积要大约2％～4％，温度、气压和空气湿度的影响必须通过对空气垫加样器进行结构上的改良而降低，使得在正常情况下不至于影响加样的准确度。一次性吸头是本加样系统的一个重要组成部分，其形状、材料特性及与加样器的吻合程度均对加样的准确度有很大的影响。

B活塞正移动加样器（实验室不常用）

以活塞正移动为原理的加样器和分配器与空气垫加样器所受物理因素的影响不同，因此，在空气垫加样器难以应用的情况下，活塞正移动加样器可以应用，如具有高蒸汽压的、高黏稠度以及密度大于2．0g／cm3的液体；又如在临床聚合酶链反应(PCR)测定中，为防止气溶胶的产生，最好使用活塞正移动加样器。活塞正移动加样器的吸头与空气垫加样器吸头有所不同，其内含一个可与加样器的活塞耦合的活塞，这种吸头一般由生产活塞正移动加样器的厂家配套生产，不能使用通常的吸头或不同厂家的吸头。

移液器基本操作流程

1. 设定移液体积

a选择合适量程的移液器

b旋转至设定刻度

c 注意不要超过移液器的最大量程

2. 接入吸头（枪头）

用移液枪选取合适大小的枪头，轻按使之完全密封

3. 吸液

轻轻压下按钮，将其从“初始位置”移动到“第一档”的位置，垂直握持移液器，将吸头浸入液体约2-4 mm的深度中2-3秒，慢慢释放按钮，使其返回到“初始位置”，溶液便被吸入枪头。从溶液中取出移液器。

（1）正向吸液：对于常规的液体，应将按钮按到第一档吸液，释放按钮。

（2）预润湿吸液：针对粘稠的液体，可先吸入样液，打出（反复3次左右），此时吸头内壁会吸附一层液体使表面吸附达到饱和，然后再吸入样液以达到精确移液的目的；

4. 放液

将“按钮”按到“第一档”位置，继续按压到“第二挡”位置。最后，完全放开按钮。注意放液过程要匀速，不能放手太快。

5．退吸头

按下卸尖按钮，将吸头扔到合适的废物容器中。

常见的错误操作：

1 错误：吸液时，移液器本身倾斜，导致移液不准确

正确：垂直吸液，慢吸慢放

2 错误：装配枪头时用力过猛，导致吸头难以脱卸，而且缩短移液器使用寿命

正确：装配枪头时用力均匀，徐徐加力

3 错误：平放带有残余液体的移液器

正确：将移液器挂放在移液器架上

4 错误：用大量程的移液器吸取小体积样品

正确：选择合适量程的移液器，保证所需移液量，在移液器可调节的较大读数范围内。

5 错误：吸液时直接按到了第二档

正确：吸液时应该直接按到第一档

6 错误：使用丙酮或者强腐蚀的液体清洗移液器

正确：可以用清洁剂，比如75%的乙醇、10%的漂白剂或中性肥皂，擦拭移液器。

7 错误：吸液，排液时用力太大，快按快收

正确：吸液时徐徐放松拇指，待液体完全进入吸头后再拿出；排液时缓缓按至第一档，然后再按到第二档。

移液器的保养

1. 一般不建议吸取具有强挥发性、强腐蚀性的液体；

2. 每次用完移液器后，应将刻度调至最大量程的位置；

3. 在任何场合下，禁止将移液器倒置；

4. 添加吸头时，应将移液器端垂直插入吸头，左右微微转动，上紧即可，而不可用移液器反复撞击吸头来上紧吸头。