酸性转化酶(Acid invertase,AI)测试盒使用说明
http://www.solarbio.com酸性转化酶(Acidinvertase,AI)测试盒使用说明
分光光度法50管/24样
货号:BC0560
产品内容:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体50mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入25mL试剂一充分溶解备用;用不完的试剂4℃
保存;
试剂三:液体30mL×1瓶,4℃保存。
产品简介:
蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代
谢关键酶之一。根据最适pH,将高等植物Ivr分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)
两种类型。AI(EC3.2.1.26)主要存在于细胞液泡或自由空间中,最适pH为4.5~5.0(酸
性),通过降解液泡中蔗糖,调节液泡中蔗糖的利用和果实内糖类的积累。
AI催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合
物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与AI活性成正比。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸
馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
http://www.solarbio.com按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL
提取液),进行冰浴匀浆。12000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤及加样表:
按下表操作:试剂名称(μL)测定管标准管
样本200200
试剂一/800
试剂二800/
混匀,37℃准确水浴30min后,煮沸10min左右(盖紧,以防止水分散
失),流水冷却后充分混匀(以保证浓度不变)
试剂三500500
混匀,煮沸10min左右(盖紧,以防止水分流失),流水冷却后充分混匀,510nm处蒸馏水
调零,记录各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以
相应稀释倍数),ΔA=A测定-A对照。
三、AI活性计算:
标准条件下测定的回归方程为y=0.0016x-0.001;x为标准品浓度(µg/mL),y为吸光值。
1、按蛋白浓度计算
单位定义:37℃每mg蛋白每分钟产生1µg还原糖定义为一个酶活性单位。
NI活性(U/mgprot)=[(ΔA+0.001)÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr)÷T=20.8×(ΔA+0.001)÷
Cpr
2、按鲜重计算
http://www.solarbio.com单位定义:37℃每g组织每分钟产生1µg还原糖定义为一个酶活性单位。
NI活性(U/g)=[(ΔA+0.001)÷0.0016×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=20.8×(ΔA+0.001)÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.2mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,
mg/mL;W:样本鲜重,g;T:反应时间:30min。
NADP-苹果酸酶(NADP-ME)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4365
第1页,共3页本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!-上海液质检测技术有限公司NADP-苹果酸酶(NADP-ME)活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4365规格:100T/96S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。试剂名称规格保存条件提取液液体110mL×1瓶4℃保存试剂一液体20mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三粉剂×1支4℃保存试剂四粉剂×1支-20℃保存溶液的配制:1、试剂二:用时加入10mL提取液充分溶解备用;2、试剂三:用时加入用时每支加1mL双蒸水充分溶解备用;3、试剂四:用时每支加500μL双蒸水充分溶解备用;4、工作液:在7.5mL试剂二中加入1mL试剂三和0.5mL试剂四,可以根据比例现用现配。微量法
产品说明:ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。NADP-ME催化NADP+还原成NADPH,在340nm下测定NADPH增加速率。注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器和蒸馏水。操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、细菌、细胞或组织样本的制备:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,弃上清,按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)。8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。2、血清(浆)样本:直接检测。第2页,共3页本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!-上海液质检测技术有限公司二、测定步骤1、紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。2、将试剂一在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)中保温15min左右。3、操作表:试剂名称(μL)测定管试剂一200工作液90样本10将上述试剂按顺序加入微量石英比色皿/96孔UV板中混匀,在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种),340nm波长下记录初始吸光度A1和反应1min后的吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。三、NADP-ME活性计算a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下1、组织中NADP-ME活力的计算:(1)按样本蛋白浓度计算:单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟生成1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。NADP-ME(U/mgprot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V样)÷T=4823×ΔA÷Cpr(2)按样本质量计算:单位的定义:每g组织在反应体系中每分钟生成1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。NADP-ME(U/g质量)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样÷V样总×W)÷T=4823×ΔA÷W2、细菌或细胞中NADP-ME活力的计算:(1)按样本蛋白浓度计算:单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟生成1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。NADP-ME(U/mgprot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V样)÷T=4823×ΔA÷Cpr(2)按细菌或细胞数量计算:单位的定义:每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟生成1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。NADP-ME(U/104cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样÷V样总×500)÷T=9.65×ΔA3、血清(浆)中NADP-ME活力的计算:单位的定义:每mL血清在反应体系中每分钟生成1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。NADP-ME(U/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=4823×ΔAV反总:反应体系总体积,3×10-4L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,1min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万;109:单位换算系数,1mol=109nmol。b.用96孔板测定的计算公式将上述公式中的d-1cm改为d-0.6cm进行计算。注意事项:1、若A2-A1大于0.5,需将样本用提取液稀释,使A2-A1小于0.5,可提高检测灵敏度。2、实验时,试剂三、试剂四和样本在冰上放置,以免变性和失活。试剂一37℃或25℃水浴放置。第3页,共3页本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!-上海液质检测技术有限公司3、比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃,取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水,将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。用96孔板做时尽量保持反应温度在37℃或25℃。4、最好两个人同时做此实验,一个人比色,一个人计时,以保证实验结果的准确性。用96孔板做时尽量做到样本反应时间一致。5、如果ΔA<0.01,可将反应时间延长5分钟或10分钟。
试剂盒使用说明书
1人G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)水平。用纯化的人G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1),再与HRP标记的G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份
封板膜2片(48)2片(96)
密封袋1个1个
酶标包被板1×481×962-8℃保存
标准品:450pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存
标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存
酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存
样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞
酸性木聚糖酶(Acidic Xylanase,ACX)测定试剂盒说明书
第1页,共2页
货号:MS2618 规格:100管/48样
酸性木聚糖酶(Acidic Xylanase,ACX)测定试剂盒说明书
微量法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。
测定原理:
ACX在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算ACX活力。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、恒温水浴锅,可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
缓冲液:液体65mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。(若出现白色絮状或颗粒状沉淀,可60℃加热
溶解后使用)。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
粗酶提取:
1. 发酵液:发酵液于8000g,4℃,离心15min,取上清,作为待测样品。
2. 酶干粉:称约0.1mg,加1mL缓冲液溶解待测。
3. 组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL缓冲液)进行冰浴匀浆,然后8000g,4℃,离心10min,取上清待测。
测定操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至540nm。
2、操作表
植物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)说明书
1 植物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定植物组织,细胞及相关液体样本中乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的活性。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)水平。用纯化的植物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入乙酰辅酶A羧化酶(ACC),再与HRP标记的乙酰辅酶A羧化酶(ACC)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙酰辅酶A羧化酶(ACC)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中植物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:2700 U/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
样本处理及要求:
1. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
过氧化氢酶测试盒说明书
过氧化氢酶过氧化氢酶((CAT)测试盒说明书 (可见光法可见光法)) 说明书修订日期说明书修订日期::2015.09.24 Cat.No:KGT017 Store at 4℃ for 6 months For Research Use Only(科研专用) 一.测定原理测定原理 过氧化氢酶(CAT)分解H2O2的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止,剩余的H202与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物,在405nm处测定其生成量,可计算出CAT的活力。 二.试剂组成与配制 100T/96样 试剂一试剂一::液体100ml×1瓶,4℃保存6个月; 试剂二试剂二::底物液体10ml×1瓶,4℃保存6个月; 试剂三试剂三::显色粉剂一瓶,4℃保存6个月。加双蒸水至100ml溶解,4℃保存1个月。(如果底部有不溶粉末沉淀,直接取上清使用,不影响测定结果) 试剂四试剂四::液体10ml×1瓶,4℃保存6个月。天冷时会凝固,临用前37℃水浴至透明方可使用。 三.操作步骤 (一、)、血清血清血清((浆)的检测的检测:: 1、操作表操作表((如): 对照管 测定管 血清(浆)(ml) 0.1 试剂一(37℃预温)(ml) 1.0 1.0 试剂二(37℃预温)(ml) 0.1 0.1 混匀,37℃准确反应1分钟(60秒) 试剂三(ml) 1.0 1.0 试剂四(ml) 0.1 0.1 血清(浆)(ml) 0.1 混匀,0.5cm光径,405nm处,双蒸水调零,测各管吸光度。 注:一般样本没有溶血一般样本没有溶血,,脂血等显著差异情况脂血等显著差异情况,,对照管的样本更换成双蒸水对照管的样本更换成双蒸水,,做1~2管对照即可管对照即可。。如需如需做做样本样本自身自身自身对照对照对照,,则试剂盒试剂盒所所测定测定样本样本样本数量数量数量减减至48样。 2、血清中的CAT活力的计算活力的计算:: (1、)、定义定义定义::每毫升血清或血浆每秒钟分解1µmol的H2O2的量为一个活力单位。 (2、)、计算公式计算公式计算公式:: 样本测试前稀释倍数取样601*271值)OD测定值OD照((U/ml)活力CAT血清××××−=量对注:*271为斜率的倒数 (3、)、计算举例计算举例计算举例:: 取血清0.1ml做CAT活力测定,测得对照管的吸光度为0.720,测定管吸光度为0.675,则计算结果为: ml/03.211.06012710.675).7200((U/ml)活力CAT血清U=××××−= 注:为方便操作为方便操作,,您可将测试前的准备工作做好您可将测试前的准备工作做好,,编好试管编好试管,,加入样本0.1ml,然后将所有的管子均放入37℃水浴箱中预温3-5分钟分钟。。测试时测试时,,管中加入试剂二0.1ml,同时准确记时同时准确记时,,并立即混匀并立即混匀,,放入37℃水浴中浴中,,当反应到1分钟时立即加入显色剂终止反应分钟时立即加入显色剂终止反应,,混匀混匀。。依次再测第二依次再测第二、、第三...对照管和测定管对照管和测定管。。每次均要将对照管及测定管同时测定均要将对照管及测定管同时测定。。 (二、)、全血的检测全血的检测全血的检测:: 1、1:99溶血夜的制备溶血夜的制备::取50µl全血加双蒸水至5ml充分混匀后放置10分钟,待测。 2、操作表操作表:: 空白对照管 测定管 自身对照管 双蒸水(ml) 0.05 2.1 1:99溶血夜(ml) 0.05 0.05 试剂一(37℃预温)(ml) 1.0 1.0 试剂二(37℃预温)(ml) 0.1 0.1 混匀,37℃准确反应1分钟(60秒) 试剂三(ml) 1.0 1.0 混匀,0.5cm光径,405nm处,双蒸水调零,测各管吸光度。 3、血红蛋白中CAT活力的计算: (1)、定义定义::每毫克血红蛋白每秒钟分解1µmol的H2O2的量为一个活力单位。 (2)、计算公式: (3、)、计算举例计算举例计算举例: 取1:99小鼠溶血夜0.05ml进行CAT检测,测得空白对照管吸光度为0.105,测定管吸光度为0.516,同时测得1:99溶血夜的血红蛋白含量为1.324mgHb/ml。则计算结果为: (三、)、组织样本的检测组织样本的检测组织样本的检测:: 1、组织匀浆夜的制备组织匀浆夜的制备::准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件下,制备成10%的组织匀浆,2500转/分离心10分钟取上清,再用生理盐水稀释成最佳取样浓度,待测((最佳取样浓度摸索见附录最佳取样浓度摸索见附录))。 2、操作表操作表:: 对照管 测定管 组织匀浆(ml) 0.05 试剂一(37℃预温)(ml) 1.0 1.0 试剂二(37℃预温)(ml) 0.1
血管紧张素转化酶(ACE)测定试剂盒(FAPGG底物法)产品技术要求sainuopu
血管紧张素转化酶(ACE)测定试剂盒(FAPGG底物法)
适用范围:用于体外定量测定人体血清中血管紧张素转化酶的活性。
1.1试剂盒包装规格
试剂:1×20ml;试剂:2×60ml;试剂:3×40ml;试剂:4×60ml;试剂:4×400ml;试剂:1×8L;试剂:2×30ml。
校准品(选配,冻干品):1×1ml,1×3ml,1×5ml。
质控品(选配,冻干品):1×1ml,1×3ml,1×5ml。
1.2试剂盒主要组成成分
组 成 浓 度
试剂 1-氧代-2-羟基吡啶(HPO) 1.3 g/L
氯化钠 18 g/L
4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙磺酸 N-(2-羟乙基)哌嗪-N′-(2-乙磺酸) (HEPES) 12 g/L
N-3-(2-呋喃基)丙烯酰]-L-苯丙氨酰-甘氨酰-甘氨酸(FAPGG) 0.22 g/L
校准品 聚乙二醇6000(PEG6000) 5 g/L
牛血清白蛋白(BSA firv) 35 g/L
十二水合磷酸氢二钠 2.87 g/L
磷酸二氢钾 0.26 g/L
血管紧张素转化酶 80U/L(目标浓度,具体
组 成 浓 度
浓度见标签)
质控品 聚乙二醇6000(PEG6000) 5 g/L
牛血清白蛋白(BSA firv) 35 g/L
十二水合磷酸氢二钠 2.87 g/L
磷酸二氢钾 0.26 g/L
血管紧张素转化酶 30 U/L(目标浓度,具体靶值范围见标签)
2.1 外观
液体单试剂:无色至浅黄色澄清液体。
校准品:冻干品,复溶后为无色至浅黄色液体。
质控品:冻干品,复溶后为无色至浅黄色液体。
2.2 净含量
液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度:在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不小于0.6。
2.3.2试剂空白吸光度变化率:在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度变化率(ΔA/min)应不大于0.01。
PAPP-A ELISA 试剂盒 说明书
使用手册
LegalManufacturer:Distributedby:
DRGInstrumentsGmbH,GermanyDRGInternational,Inc.
DivisionofDRGInternational,Inc1167U.S.Highway22E
Frauenbergstr.18,D-35039MarburgMountainside,NJ07092USA
Telefon:+49(0)6421-17000Telephone:(908)233-2079Fax:+49-(0)6421-170050Fax:(908)233-0758
Internet:www.drg-diagnostics.deInternet:
E-mail:**********************E-mail:**************************
0197PAPP-A
ELISA试剂盒:EIA-2397
使用手册
LegalManufacturer:Distributedby:
DRGInstrumentsGmbH,GermanyDRGInternational,Inc.
DivisionofDRGInternational,Inc1167U.S.Highway22E
Frauenbergstr.18,D-35039MarburgMountainside,NJ07092USA
Telefon:+49(0)6421-17000Telephone:(908)233-2079Fax:+49-(0)6421-170050Fax:(908)233-0758
Internet:www.drg-diagnostics.deInternet:
E-mail:**********************E-mail:**************************
人中性转化酶NI酶联免疫分析
人中性转化酶 (NI) 酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:
96T
70U/L -3000U/L
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清 ,血浆及相关液体样本中硝酸还原酶( NR)的活性。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人中性转化酶 (NI) 水平。用纯化的人中性转化酶
(NI) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入中性转化酶 (NI) ,再与
HRP 标记的中性转化酶 (NI) 抗体结合,形成抗体 -抗原 -酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加
底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色, 并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的中性转化酶 (NI) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度 ( OD
值),通过标准曲线计算样品中人中性转化酶 (NI) 活性浓度。
试剂盒组成
1
2
3
4
5
6
30 倍浓缩洗涤液酶标试剂酶标包被板样品稀释液显色剂 A液显色剂 B液
20ml× 1 瓶
6ml × 1 瓶
12孔× 8条
6ml × 1 瓶
6ml × 1 瓶
6ml × 1/瓶
7 终止液
8 标准品( 4800U/L )
9 标准品稀释液
10 说明书
11 封板膜
12 密封袋
6ml ×1 瓶
0.5ml × 1 瓶
1.5ml × 1 瓶
1 份
2 张
1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于 -20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释: 本试剂盒提供原倍标准品一支, 用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
唾液酸酶检测试剂盒(酶反应法)产品技术要求huaye
唾液酸酶检测试剂盒(酶反应法)
适用范围:用于体外定性检测妇女阴道分泌物中唾液酸酶活性。
1.1包装规格:
50人份/盒
1.2主要成分:
每盒含50瓶试剂,每瓶试剂含0.25ml
每瓶试剂的主要成分为:
CL-5001 0.7mg/L
氢氧化钠 20g/L
氯化钾 10g/L
2.1外观
装液瓶外表光滑无破损,液体无色透明,瓶子与盖子衔接处无漏液,标识清晰。
2.2装量
每瓶试剂装量应≥0.25ml。
2.3 临界值
2.3.1本试剂盒的临界值为1.6U/ml
2.3.2阳性符合率
用20人份试剂检测2.0U/ml的唾液酸酶质控品,结果阳性率应≥95%。
2.3.3阴性符合率
用20人份试剂检测1.2U/ml的唾液酸酶质控品,结果阴性率应≥95%。
2.4特异性:
在试剂中分别加入8株108个菌/ml(1.大肠艾希氏菌CMCC 44103、CMCC
44113 ;2.表皮葡萄球菌CMCC 26069;3.金黄色葡萄球菌CMCC 26001;4.淋病奈瑟氏菌CMCC 29106、CMCC 29400;5.白色念珠菌CMCC 10231;6.变形杆菌CMCC
49101。),结果应不变色,呈阴性反应,对检测无干扰。
2.5批间差
抽取三个批次的试剂,每个批次40人份,检测临界值附近水平(同2.3),各浓度反应结果应一致。 2.6稳定性:
测试在产品有效期后一个月内的试剂盒,结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5的要求。
α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)试剂盒说明书
第 1 页 共 5 页 α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)试剂盒说明书
α淀粉酶(αamylase,αAL)试剂盒说明书
微量法100管/48样
注 意:正式测定前请取23个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
淀粉水解酶,包括α淀粉酶和β淀粉酶。αAL (EC 3.2.1.1)随机催化淀粉中α1,4糖苷键水解,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。
测定原理:
淀粉水解酶催化淀粉水解生成还原糖,还原糖还原3,5二硝基水杨酸生成棕红色物质,在540 nm有吸收峰;通过测定540 nm吸光度增加速率,计算淀粉酶活性。αAL耐热,但是β淀粉酶可在70℃钝化15min。因此粗酶液经过70℃钝化15min,就只有αAL能够催化淀粉水解。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体15mL×1瓶,室温保存。若有黄色晶体析出,可90℃加热溶解后再用。 第 2 页 共 5 页 试剂二:液体7.5mL×1瓶,4℃保存。若有沉淀析出,可70℃加热溶解后使用。
粗酶液提取:
组织:称取0.1~0.2g样本(建议称取约0.1g样本),加1 mL蒸馏水匀浆;将匀浆倒入离心管中,在室温下放置提取15min,每隔5min振荡1次,使其充分提取;3000g,25℃离心10min,吸取上清液并且加蒸馏水定容至10 mL,摇匀,即为淀粉酶原液。
血清(浆):直接检测。
操作步骤和加样表(在EP管中依次加入下列试剂):
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长到540
nm,蒸馏水调零。
2、 试剂一和试剂二40℃预热10min。
3、测定步骤:
试剂(μL)
对照管
测定管
α‑淀粉酶原液
75
75
70℃水浴15min左右,流水冷却。
