2019届二轮复习 非选择题专题特训—— 基因工程与蛋白质工程 作业(全国通用)
2019届二轮复习 狂刷10 DNA的复制和基因表达 作业(适用全国)
1．如图表示细胞内的某种生命活动，下列叙述错误的是A．图示的生命活动为DNA复制，且复制起点有多个B．图示生命活动中可同时发生氢键的断裂和形成C．人体口腔上皮细胞中可进行多次该项生命活动D．图示生命活动可发生在细胞核、线粒体或叶绿体中【答案】C2．若将处于G1期的胡萝卜愈伤组织细胞置于含3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸培养液中，培养至第二次分裂中期。
下列有关叙述正确的是A．每条染色体中的两条染色单体均含3HB．每个DNA分子的两条脱氧核苷酸链均含3HC．每个DNA分子中只有一条脱氧核苷酸链含3HD．所有染色体的DNA分子中，含3H的脱氧核苷酸链占总链数的1/4【答案】A【解析】若将处于G1期的胡萝卜愈伤组织细胞置于含3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸培养液中，在间期的S期时DNA复制1次，所以第一次细胞分裂完成后得到的2个子细胞中DNA分子都只有1条链被标记，培养至第二次分裂中期，每条染色体中的两条染色单体均含3H标记，A正确。
第二次分裂中期，1/2的DNA分子的两条脱氧核苷酸链均含3H，1/2的DNA分子一条脱氧核苷酸链含3H，BC错误。
所有染色体的DNA分子中，含3H的脱氧核苷酸链占总链数的3/4，D错误。
3．若以1分子含500个碱基对的DNA（不含放射性）为模板，在含15N的环境中进行复制n次，下列相关叙述正确的是A．复制过程中，需要消耗（2n-1）×1 000个核糖核苷酸B．子代DNA中，两条链均含有15N的DNA分子有（2n-1）个C．细胞内DNA复制主要发生在细胞核、线粒体和核糖体中D．DNA复制过程可以在体外完成，但在体外复制时模板DNA不能太大【答案】D4．在研究细胞DNA复制时，先在低剂量3H标记的脱氧核苷酸培养基中培养细胞，3H可以掺入正在复制的DNA分子中，使其带上放射性标记。
几分钟后，将细胞移到含有高剂量3H标记的脱氧核苷酸培养基中培养一段时间，收集、裂解细胞，抽取其中的DNA进行放射性自显影检测，结果如图。
2019届高考生物二轮复习训练14基因突变、基因重组和染色体变异作业(适用全国)
1．用人工诱变的方法使黄色短杆菌的某基因模板链的部分脱氧核苷酸序列发生如下变化：CCGCTAACG→CCGCGAACG，那么黄色短杆菌将发生的变化和结果是(可能用到的密码子：天冬氨酸—GAU、GAC；丙氨酸—GCA、GCU、GCC、GCG)A．基因突变，性状改变B．基因突变，性状没有改变C．染色体结构改变，性状没有改变D．染色体数目改变，性状改变【答案】A2．某地中海贫血症的致病原因是基因中编码血红蛋白β链第39位氨基酸的编码序列发生了点突变（含氮碱基C→T），导致mRNA中第39位密码子变为终止密码子。
下列关于该病的说法错误的是A．患者红细胞中血红蛋白的空间结构与正常人的不同B．在光学显微镜下可观察到胞嘧啶C替换为胸腺嘧啶TC．患者血红蛋白β链的mRNA的碱基序列与正常人的不同D．该病例说明基因可通过控制蛋白质的结构进而控制生物性状【答案】B【解析】根据以上分析可知，患者的基因突变导致血红蛋白的结构发生了改变，因此其血红蛋白的空间结构与正常人的不同，A正确；胞嘧啶C替换为胸腺嘧啶T属于基因内部结构的改变，在光学显微镜下是观察不到的，B错误；根据以上分析已知，编码血红蛋白β链的基因发生了碱基对的替换，使得mRNA 中第39位密码子变为终止密码子，因此患者血红蛋白β链的mRNA的碱基序列与正常人的不同，C正确；该病例说明基因可通过控制蛋白质的结构进而控制生物性状，D正确。
3．除草剂敏感型的大豆经辐射获得抗性突变体，且敏感基因与抗性基因是1对等位基因。
下列相关叙述正确的是A．突变体若为1条染色体的片段缺失所致，则该抗性基因一定为隐性基因B．突变体若为1对同源染色体相同位置的片段缺失所致，则再经诱变可恢复为敏感型C．突变体若为基因突变所致，则再经诱变不可能恢复为敏感型D．抗性基因若为敏感基因中的单个碱基对替换所致，则该抗性基因一定不能编码肽链【答案】A4．下列过程中无基因重组发生的是A．减数分裂时果蝇的红眼基因和长翅基因分配到同一个精子中B．用高茎豌豆自交后代出现3∶1的性状分离比C．肺炎双球菌转化实验中的R型菌转化为S型菌D．同源染色体内非姐妹染色单体间的交叉互换【答案】B【解析】基因重组是指生物体在进行有性生殖过程中，控制不同性状的基因的重新组合，其前提条件是两对或两对以上的等位基因位于非同源染色体上。
2019-2020年高考生物二轮复习 专题16 基因工程、细胞工程练习
2019-2020年高考生物二轮复习专题16 基因工程、细胞工程练习1.干扰素α-1b是我国第一个批准生产的基因工程药物,该药物利用大肠杆菌作为受体获得,具有抗病毒、抑制肿瘤细胞增生、调节人体免疫功能的作用,广泛用于病毒性疾病和多种肿瘤的治疗,是当前国际公认的病毒性疾病治疗的首选药物和肿瘤生物治疗的主要药物。
(1)原核生物经常作为受体细胞是由于其具有其他生物没有的特点:、、等。
(2)是基因工程的核心,其目的是使目的基因在中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够和发挥作用。
(3)为使干扰素基因在大肠杆菌细胞内表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的和之间。
(4)采用技术可检测干扰素基因是否成功导入大肠杆菌的DNA上。
2.(xx江苏两市一模)为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
请回答下列问题。
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用法从陆地棉基因文库中获取酶D基因,从拟南芥基因文库中获取转运肽基因,所含三种限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切点如上图所示。
用和酶处理两个基因后,可得到端与端(填图中字母)相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的T-DNA中,构建并导入农杆菌中。
将获得的农杆菌接种在含的固体培养基上培养得到含融合基因的单菌落,再利用液体培养基振荡培养,可以得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是,进一步筛选后获得转基因油菜细胞,该细胞通过技术,可培育成转基因油菜植株。
(4)用法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。
3.(xx河南陕州月考)回答有关基因工程的问题。
(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生末端。
若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生(填“相同”或“不同”)黏性末端的限制酶。
2019届二轮复习 选择题专题特训——物质的输入与输出 作业(全国通用)
选择题专题特训2. 物质的输入与输出(时间：15分钟)1．(2018·华中师大新高考联盟质评)下列关于物质跨膜运输载体的叙述，正确的是()A．被动运输不存在载体饱和现象B．水和氨基酸分子共用相同的载体进入细胞C．细胞膜上的载体多数为蛋白质，少数为RNAD．温度可通过影响载体结构进而影响主动运输速率解析被动运输中的协助扩散需要载体，会出现载体饱和现象，即细胞膜上的载体蛋白数量有限，在运输过程中当所有载体蛋白都已承担相应的运输任务时，运输的速率不再因所处环境条件的改善(变)而加快，A错误；载体具有特异性，B 错误；细胞膜上的载体的化学本质是蛋白质，不是RNA，注意“载体”与“酶”的区别，C错误；载体是蛋白质，温度可通过影响载体蛋白的结构进而影响主动运输的速率，D正确。
答案 D2．(2018·湖北山东部分重点高中联考)下列有关物质跨膜运输的叙述正确的是()A．人工的无蛋白质的脂双层膜与细胞膜在功能上的主要区别是前者无选择透过性B．物质通过主动运输、协助扩散、胞吞和胞吐的方式进出生物膜均需要消耗能量C．洋葱不同部位的鳞片叶外表皮细胞在相同浓度的溶液中发生质壁分离程度可能不同D．低温影响矿质元素离子的吸收速率，但是不会影响水分子通过半透膜的速率解析两者均有选择透过性，他们的主要区别应该是前者无主动运输功能，A错误；协助扩散不需要消耗能量，B错误；无论是同一个洋葱还是不同的洋葱，不同部位的细胞内液渗透压可能不同，C正确；低温既影响矿质元素离子的吸收速率也影响水分子通过半透膜的速率，前者可以影响酶活性，从而影响呼吸速率；后者是影响水分子的运动速率，D错误。
答案 C3．(2018·西北师大附中二模)加拿大的糖枫的分泌液中含有较高浓度的蔗糖，采割时收集树液用来制作枫糖浆。
下列有关说法正确的是()A．糖枫树叶变红与叶绿体中的色素有关B．N、P、K、Cu、Fe、I是加拿大糖枫需要的微量元素C．可利用斐林试剂定量检测糖浆的糖含量D．在生物体中，不是所有物质进出细胞都离不开载体的协助解析糖枫树叶变红与液泡中的花青素有关，A错误；植物需要的大量元素有C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg等，微量元素有Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo等，B错误；糖浆中的糖不是还原糖，不能用斐林试剂检测，C错误；物质出入细胞的方式有多种，需要载体协助的运输方式是协助扩散和主动运输，自由扩散不需要载体的协助，D正确。
2019届高考生物二轮复习训练11基因的分离定律作业(适用全国)
1．下列有关遗传学概念的叙述，正确的是 A．狗的长毛对卷毛为一对相对性状 B．F1代出现的性状即为显性性状 C．杂合子自交后代仍有杂合子 D．位于同源染色体相同位置的一定是等位基因 【答案】C 【解析】狗的长毛对短毛为一对相对性状，A错误；具有一对相对性状的纯合子杂交产生的子一代所表现出的性状才是显性性状，B错误；杂合子自交后代仍有杂合子，如Aa杂交后代有AA、Aa、aa，C正确；位于同源染色体上同一位置上控制着相对性状的基因才是等位基因，D错误。 2．水稻中非糯性(W)对糯性(w)为显性，非糯性品系所含淀粉遇碘呈蓝黑色，糯性品系所含淀粉遇碘呈红褐色。下面是对纯种的非糯性与糯性水稻的杂交后代进行观察的结果，其中能直接证明孟德尔的基因分离定律的一项是 A．杂交后亲本植株上结出的种子(F1)遇碘全部呈蓝黑色 B．F1自交后结出的种子(F2)遇碘后，3/4呈蓝黑色，1/4呈红褐色 C．F1产生的花粉遇碘后，一半呈蓝黑色，一半呈红褐色 D．F1测交所结出的种子遇碘后，一半呈蓝黑色，一半呈红褐色 【答案】C
3．下列关于基因分离定律的几组比例，最能体现基因分离定律实质的是 A．F1产生配子的比例为1∶1 B．F2表现型的比例为3∶1 C．F2基因型的比例为1∶2∶1 D．测交后代表现型的比例为1∶1 【答案】A 【解析】F1产生配子的比例为1∶1，说明减数分裂时等位基因随同源染色体的分开而分离，产生不同配子的比例为1∶1，因而最能说明基因分离定律的实质，A正确；F2表现型的比例为3∶1是性状分离比，不能说明基因分离定律实质，B错误； F2基因型的比例为1∶2∶1，只能体现子二代的基因型种类及比例，不能说明基因分离定律实质，C错误；测交后代表现型的比例为1∶1，是性状分离比，说明F1产生配子的比例为1∶1，D错误。 4．某同学的父亲是B型血，母亲是AB型血，那么该同学的血型不可能是 A．O型 B．A型 C．B型 D．AB型 【答案】A
2019届二轮复习 选择题专题特训—— DNA的结构与复制 作业(全国通用)
选择题专题特训 8.DNA的结构与复制 ( 时间：15分钟) 1．(2018·河北邯郸市摸底考试)下列关于遗传物质的叙述，正确的是( ) A．豌豆的遗传物质主要是DNA B．病毒的遗传物质都是RNA C．烟草花叶病毒的遗传物质水解产生4种脱氧核苷酸 D．真核生物、原核生物、部分病毒的遗传物质是DNA 解析 豌豆的遗传物质是DNA，A错误；病毒的遗传物质是DNA或RNA，B错误；烟草花叶病毒的遗传物质是RNA，其初步水解产生4种核糖核苷酸，C错误；真核生物、原核生物、部分病毒的遗传物质是DNA, D正确。 答案 D 2．(2018·河北邢台市模拟)在探索遗传物质的过程中，赫尔希和蔡斯做了T2噬菌体侵染细菌的实验。下列有关叙述正确的是( ) A．该实验证明了DNA是主要的遗传物质 B．用含有充足有机物的完全培养基培养T2噬菌体 C．分别用含有32P的T2噬菌体和含有35S 的T2噬菌体进行侵染实验 D．用32P标记T2噬菌体的蛋白质，用35S标记T2噬菌体的DNA 解析 该实验证明了DNA是遗传物质，A错误；T2噬菌体是病毒，不能在培养基中独立生存，因此不能用含有充足有机物的完全培养基培养T2噬菌体，B错误；分别用含有32P的T2噬菌体和含有35S的T2噬菌体进行侵染实验，证明DNA是遗传物质，C正确；用32P标记T2噬菌体的DNA，用35S标记T2噬菌体的蛋白质，D错误。 答案 C 3．(2018·安阳市调研)一个含有m个碱基的双链DNA分子中，有腺嘌呤n个。下列有关叙述中，错误的是( ) A．脱氧核糖和磷酸基团交替排列构成了该DNA分子的基本骨架 B．在第4次复制时需要4(m－2n)个胞嘧啶脱氧核苷酸作原料 C．在该DNA分子中，碱基之间的氢键数为(3m－2n)/2 D．在该DNA分子中，每个脱氧核糖上均连接着1个磷酸基团和1个含N碱基 解析 DNA分子外侧的脱氧核糖和磷酸交替连接构成了DNA分子的基本骨架，A正确；根据题干信息可知，该DNA分子中含胞嘧啶脱氧核苷酸为(m－2n)/2，与第三次复制相比，第四次复制后增加的DNA分子数是16－8＝8，由此可计算出需要的胞嘧啶脱氧核苷酸8×(m－2n)/2＝4(m－2n)个，B正确；A和T之间有2个氢键、C和G之间有3个氢键，碱基之间的氢键数为2n＋(m－2n)/2×3＝(3m－2n)/2，C正确；除3′端部的一个脱氧核糖外，其他脱氧核糖均连有2个磷酸和1个碱基，D错误。 答案 D 4．(2018·天一大联考)下列对探究遗传物质经典实验的叙述中，错误的是( ) A．在格里菲思的转化实验中，加热杀死的S型细菌的DNA并未失活 B．艾弗里的转化实验证明了DNA是S型细菌的遗传物质 C．格里菲思和艾弗里都是将DNA与蛋白质分开，单独观察它们的作用 D．艾弗里的转化实验及赫尔希与蔡斯的实验都设置了对照实验 解析 格里菲思将加热杀死的S型细菌与R型细菌混合后注射给小鼠，从小鼠体内分离出了S型细菌，说明高温并未使S型细菌DNA分子的结构遭到破坏，DNA并未失活，A正确；艾弗里的转化实验通过相互对照证明了DNA是S型细菌的遗传物质，B正确；格里菲思没有将DNA和蛋白质分开，赫尔希和蔡斯分别用放射性同位素32P和35S标记噬菌体的DNA和蛋白质进行对照，C错误，D正确。 答案 C 5．(2018·山西大学附中联考)下列有关双链DNA分子结构特点的叙述，正确的是( ) A．两端均含有1个游离的磷酸基团 B．每个核糖均连接一个碱基 C．每条链中A＋G和T＋C的数量相等 D．两条链中的碱基通过肽键连接起来，形成碱基对 解析 双链DNA中，两端均含有1个游离的磷酸基团，A正确；DNA的结构单位是脱氧核苷酸，不含有核糖，B错误；由于DNA中碱基A－T配对，C－G配对，故整个DNA中A＋G和T＋C的数量相等，C错误；两条链中的碱基通过氢键连接起来，形成碱基对，D错误。 答案 A 6．(2018·山东省部分重点高中调研)下列关于DNA复制的说法，错误的是( ) A．通过DNA复制，遗传信息在亲子代细胞间始终保持不变 B．以亲代DNA分子的两条母链分别作为模板进行复制 C．复制过程中，始终按照碱基互补配对原则进行 D．形成子链时，相邻脱氧核苷酸的脱氧核糖和磷酸基团之间可形成磷酸二酯键 解析 通过DNA复制，将遗传信息从亲代传给子代，从而保持了遗传信息的连续性，若复制出现差错，则会导致遗传信息在亲子代细胞间发生改变，A错误；在DNA复制过程中，以解开的亲代DNA分子两条母链的每一段为模板，以周围环境中的四种脱氧核苷酸为原料，按照碱基互补配对原则，在DNA聚合酶的作用下，各自合成与母链互补的一段子链， B、C正确；在形成子链时，相邻脱氧核苷酸的脱氧核糖和磷酸基团之间通过磷酸二酯键相连接， D正确。 答案 A 7．(2018·山西太原五中月考)某研究人员模拟科学家关于噬菌体侵染细菌的实验，进行了以下4个实验：①用未标记的噬菌体侵染35S标记的细菌；②用32P标记的噬菌体侵染未标记的细菌；③用未标记的噬菌体侵染3H标记的细菌；④用15N标记的噬菌体侵染未标记的细菌。 以上4个实验，经过一段时间后离心，检测到放射性的主要部位分别是( ) A．沉淀物、沉淀物、沉淀物和上清液、沉淀物和上清液 B．沉淀物、上清液、沉淀物、沉淀物和上清液 C．上清液、上清液、沉淀物和上清液、上清液 D．沉淀物、沉淀物、沉淀物、沉淀物和上清液 解析 用噬菌体侵染细菌一段时间后离心，上清液是噬菌体的蛋白质外壳，沉淀物是细菌(其中含有噬菌体的DNA)。用未标记的噬菌体侵染35S标记的细菌，上清液是没有放射性的；用32P标记的噬菌体侵染未标记的细菌，放射性主要体现在DNA即沉淀物中；用3H标记细菌，放射性在沉淀物中；而用15N标记的噬菌体含有放射性的物质是蛋白质和DNA，即放射性位于上清液和沉淀物中。 答案 D 8．(2018·安徽六安市二模)下图所示为噬菌体侵染细菌实验的过程，下列相关叙述错误的是( )
2019届高三生物二轮复习专题强化训练：(十六)基因工程与细胞工程
专题强化训练(十六) 基因工程与细胞工程 1．(2018·安徽江南十校检测)某蛋白质A为某真核生物中的一种糖蛋白，在医学临床上有重要的药用价值，现欲用基因工程技术，将控制该蛋白质合成的基因A转入到大肠杆菌中进行工厂化生产。请回答下列问题。
(1)获取基因A时，一般以基因A的mRNA为模板，在________酶作用下合成单链DNA，形成RNA－DNA杂交分子，然后在酶作用下得到单链DNA，最后在DNA聚合酶作用下得到双链DNA。
(2)构建基因表达载体时，要用到“分子缝合针”是________，其与DNA聚合酶在功能上的区别是____________________________________________________________。
(3)基因在A细菌中表达出的蛋白质一般不具备天然状态下的活性，原因是___________ ______________________。
若要检测大肠杆菌是否表达出蛋白质A可以通过________检测。 (4)利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有4种脱氧核糖核苷酸、耐热性的DNA聚合酶、_________________________________(填两种)。
解析：(1)利用逆转录法合成目的基因的过程是：以基因A的mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA，形成RNA－DNA杂交分子，然后在酶作用下得到单链DNA，最后在DNA聚合酶作用下得到双链DNA。
(2)在基因工程中，“分子缝合针”指的是DNA连接酶，其与DNA聚合酶在功能上的区别是DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸连接到已有核苷酸链的末端，DNA连接酶是连接两个DNA片段；DNA聚合酶是以DNA的一条链为模板，DNA连接酶不需要模板。
(3)蛋白质A为糖蛋白，其上的糖链是在内质网和高尔基体上加上的，而大肠杆菌无这些细胞器，因此基因在A细菌中表达出的蛋白质一般不具备天然状态下的活性。可用抗原－抗体杂交法检测大肠杆菌是否表达出蛋白质A。
2019届高考生物三轮冲刺非选择题命题点强化训练：基因工程、蛋白质工程和细胞工程(含精品解析)
2019届高考生物三轮冲刺非选择题命题点强化训练：
要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶
要改变干扰素的功能，可以考虑对干扰素的________进行改造。
对干扰素进行改造，也可直接对干扰素基因进行改造，其原因是
___________________________________________
培育马铃薯脱毒苗所依据的原理是
___________________________________，该培育过程涉及
__________________________
(2)③过程中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是_____________________________。
制备单克隆抗体过程中要用到________________和________________制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于________
的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的________。
【三维设计】2019年高考生物二轮复习：非选择题规范专练(二)——遗传变异类
非选择题规范专练(二)——遗传变异类 1．肠道病毒EV71为单股正链RNA(＋RNA)病毒，是引起手足口病的主要病原体之一。下面为该病毒在宿主细胞内增殖的示意图。
据图回答下列问题： (1)图中物质M的合成场所是 ________________________________________________________________________。 催化①、②过程的物质N是 ________________________________________________________________________。 (2)假定病毒基因组＋RNA 含有7 500个碱基，其中A和U占碱基总数的40%。以病毒基因组＋RNA 为模板合成一条子代＋RNA的过程共需要碱基G和C______个。 (3)图中＋RNA有三方面的功能，分别是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)EV71病毒感染机体后，引发的特异性免疫有 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (5)病毒衣壳由VP1、VP2、VP3和VP4四种蛋白组成，其中VP1、VP2、VP3裸露于病毒表面，而VP4包埋在衣壳内侧并与RNA连接，另外VP1不受胃液中胃酸的破坏。若通过基因工程生产疫苗，四种蛋白中不宜作为抗原制成疫苗的是________，更适宜作为抗原制成口服疫苗的是__________________________。 2．果蝇是遗传学实验的好材料，某生物兴趣小组用果蝇做了下列实验： (1)该小组做染色体组型实验时，发现了一种染色体组成为XXY的雌果蝇，你认为这种雌果蝇形成的可能的原因有 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)在实验中，该小组偶然发现了一只棒眼雄果蝇，于是他们用野生型圆眼雌果蝇(纯合子)与该棒眼雄果蝇杂交，再将F1的雌雄果蝇自由交配得到F2，F1、F2的表现型及比例如下图1所示。设圆眼、棒眼这对相对性状的基因由B、b表示，根据图中信息，显性性状是________，推测这对等位基因位于X染色体上，原因是 ________________________________________________________________________。 如果上述推测正确，并考虑这对等位基因是否位于X、Y染色体的同源区段，则有关这对相对性状的基因型的种类可能为________种。雌雄的组合方式可能有________种。
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非选择题专题特训
16.基因工程与蛋白质工程
(时间：15分钟 )
1．(2018·陕西省榆林市二模)美国科学家从乙肝病毒中提取出相关抗原基因，并
将其植入土豆，从而培育出了含乙肝疫苗的转基因土豆， 主要操作过程如下图
所示(图中限制酶识别的DNA序列均不相同)。请回答下列问题：
(1)在获取抗原基因和切割质粒时，应选用的限制酶是________。
(2)在操作Ⅰ中会不会发生抗原基因或质粒的自我环化？________。理由是
____________________________________________________________。
(3)操作Ⅲ是对受体细胞进行筛选的过程，在所用培养基中需添加适量的卡那霉
素，原因是____________________________________________________。
(4)操作Ⅳ采用的是____________技术，该过程所用培养基中必须添加的植物激
素是____________。
答案 (1)PstⅠ和EcoRⅠ
(2)不会 在获取抗原基因和切割质粒时用了PstⅠ和EcoRⅠ两种酶，切割后得
到的抗原基因及质粒两端分别具有不同的黏性末端
(3)用含有卡那霉素的培养基可以筛选出成功导入了重组质粒的受体细胞
(4)植物组织培养 生长素和细胞分裂素
2．(2018·广东汕头二模)下图为转基因抗病毒马铃薯培育过程图，请据图回答有
关问题：
(1)PCR技术利用的基本原理是____________。利用该技术扩增目标DNA片段(子
链的延伸方向从5′向3′)，最好选择图中________(填字母)两种引物与模板DNA
结合。
(2)PCR体系经过n次循环可使DNA得到约2n倍扩增。若反应体系加入m条靶
DNA，经3次循环后图中所示目标DNA片段所占的比例________。
(3)在构建基因表达载体时，常用两种不同的限制酶切割目的基因和质粒，获得
不同的黏性末端，其主要目的是_____________________________________
_______________________________________________________________。
(4)G、H过程分别代表________________，经此过程将重组细胞培育成植株，涉
及的细胞工程技术是________________，若要检测培育出的植株是否真的抗病毒，
在个体水平可用________________的方法检测，
(5)研究表明，转基因植物可以通过花粉将外源基因扩散到其他植物，从而对生
态环境造成潜在的危害。因此，科学家设法将目的基因整合到受体细胞的
________(填“细胞核”或“叶绿体”)基因组中，以防止目的基因通过花粉向其
他植物扩散。
答案 (1)DNA双链复制 B和E (2)1/4
(3)使目的基因定向连接到载体上或防止目的基因和质粒自身环化和反向连接(随
意连接)
(4)脱分化和再分化 植物组织培养技术 抗病毒的接种试验 (5)叶绿体
3．(2018·山西临汾调研)基因编辑技术指对目标基因进行“编辑”，实现对特定
DNA片段的敲除、加入等。继CRSPRI/Cas9系统基因编辑技术风靡全球实验室
后，我国韩春雨研究团队提出了NgAgo－gDNA基因编辑工具，但却引起了科
学界的质疑。为了探究NgAgo－gDNA系统能否引发斑马鱼的Fabplla基因发生
突变导致其眼睛发育缺陷，复旦大学和南通大学联合进行了研究。请回答下列问
题：
(1)探究一：NgAgo－gDNA系统能否使斑马鱼眼睛缺陷？
方法：首先推测构成NgAgo蛋白的________，在试管中合成mRNA，并将其与
单链gDNA混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中，进行胚胎培养。培养液需含有葡
萄糖、氨基酸、核苷酸、无机盐、有机盐、维生素和________等。小斑马鱼的形
成________(填“需要”或“不需要”)进行胚胎移植。单链gDNA与Fabplla基
因的碱基互补配对与Fabplla基因转录时的碱基互补配对相比，区别是
_______________________________________________________________。
结果：实验组斑马鱼胚胎出现了严重的眼睛缺陷。
(2)探究二：斑马鱼眼睛缺陷是否是由Fabplla基因发生突变引起的？
方法：从异常眼部表现型的斑马鱼胚胎细胞中提取Fabplla基因，对其使用PCR
技术进行扩增，并研究该基因在斑马鱼胚胎发育中的功能。PCR技术扩增Fabplla
基因时，需要提供模板、原料、________、引物等条件，将模板DNA加热至90～
95 ℃，该处理的目的是_________________________________________。
结果：NgAgo－gDNA系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla基因的mRNA
来恢复，而且对Fabplla基因测序结果发现其序列与对照组相同。
初步结论：___________________________________________________。
(3)转基因技术是一把双刃剑，引发了人们在食物安全、生物安全和________三
个方面发生激烈的争论。在食物安全方面，绝大多数科学家都能遵守科学道德，
如对外源DNA进行选择，避免产生对人体有毒害或过敏的
______________________________________________________________。
答案 (1)氨基酸序列 动物血清(或动物血浆) 不需要 前者碱基A—T配对，
后者碱基A—U配对
(2)热稳定DNA聚合酶(或Taq酶) 使目的基因DNA受热变性后解旋为单链 斑
马鱼眼睛缺陷是由Fabplla基因转录受阻导致的，而非基因突变引起的
(3)环境安全 蛋白质
4．(2018·河南六市二联)基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，
让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基
因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请
回答下列问题：
(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括
目的基因、________、标记基因等。
(2)动物基因工程常用的受体细胞是________________，因为该细胞的全能性高，
一般用________________法将目的基因导入受体细胞。
(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检测的
方法及结果是从转基因牛中提取____________，用____________杂交，如果出现
杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗
原蛋白。
(4)胚胎工程最后一道工序是胚胎移植，其实质是______________________
_______________________________________________________________。
(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行
分割？____________________________________________________________。
(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产
奶牛，可以采用________技术获得大量具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。
答案 (1)启动子、终止子、复制原点
(2)受精卵 显微注射
(3)蛋白质 相应的抗体进行抗原—抗体
(4)早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
(5)发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚
(6)体细胞核移植