生物样品中汞含量检测方法的研究进展
综 述
?其它专题综述?
生物样品中汞含量检测方法的研究进展
高 宇Ξ综述 颜崇淮 沈晓明审校
(上海第二医科大学附属新华医院上海儿童医学中心,上海市儿科医学研究所 200092)
摘 要:汞普遍存在于自然环境中,工业生产亦可以产生汞化合物从而造成对环境的污染和人体的危害。通过检测生物样品中的汞含量,可以衡量人体汞暴露水平和评价环境污染程度。目前主要检测的汞种类为无机汞,甲基汞,二甲基汞(很少)。本文就不同种类汞(无机汞和甲基汞)含量的基本分析检测步骤和不同生物样品中汞含量检测方法进行综述。
关键词:汞;检测
中图分类号:R135113文献标识码:A文章编号:100623730(2003)0320146202
目前一般非职业性人群主要通过牙充填物、增白性化妆品、涂料和泻药等暴露于无机汞和汞蒸气,而长期食用被汞污染的鱼类产品是一般人群甲基汞暴露的主要来源[1]。由于有机汞的链短、结构呈脂溶性,使其易于穿过细胞膜,并与巯基高亲和力结合,导致其毒性大于无机汞,并更易于在体内蓄积[1,2]。
1 汞检测的主要步骤
111 样品的收集 低浓度的汞不稳定,样品收集后立即冷冻,如需存放,应在其中添加一些稳定剂,例如氧化剂和复合物形成剂来稳定二价汞离子,低pH值和高离子浓度可稳定甲基汞[2,3]。聚四氟乙烯(PTFE)试管优于聚氯乙烯试管和玻璃试管,因为后两者易于吸附汞可导致汞含量减少,所有器皿均应事先用硝酸浸泡和双蒸水清洗[2,3]。
112 样品的消解 此步的关键是要能完全释放样品中的汞,并且要能避免汞的挥发损失;如果需分别测定无机汞和甲基汞时,消解时其种类不应发生转化[2]。分别测定无机汞和甲基汞时的样品消解主要包括酸、碱消解两种方法,还可采用湿法回流装置可增加消化效率[3,4]。测定总汞时样品的消解一般使用强酸和氧化剂联用的方法,缺点是消化过程中产生的高温可使汞挥发损失,产生的过量酸性气体可能干扰以后的还原步骤[5]。目前密闭微波消解样品的方法比较受欢迎,因其消解效率高,能完全降解样品中有机汞,同时可以避免汞的挥发[6]。还有学者[7]认为使用酸和溴化物消解的方法既快速又能减少汞的损失,因为溴的存在可以稳定样品中的汞。113 汞的萃取和浓缩(preconcentration) 测定甲基汞时,必须对样品进行汞的萃取;如果样品中汞的浓度很低(一般为pg?l-1)时,为了使其达到原子检测仪所需浓度,常常有必要进行汞的浓缩[2]。
11311 萃取 (1)液2液萃取:用含有卤盐的酸性有机溶剂消解样品,用半胱氨酸或硫代硫酸盐把甲基汞从苯或甲苯等有机相中逆萃取到水相中去,用酸使CH3HgX从2SH中释放出来,再次把汞萃取到有机相中以清除萃取剂,提高汞的纯度[8]。(2)气2液萃取:碱消解后,四乙基硼酸钠等乙基化溶剂与汞形成易挥发、无极性的乙基化汞[3]。(3)固2液萃取:巯基棉纤维柱或含二硫氨基甲酸酯的树脂从液态溶剂中吸附甲基汞,随后连续到流动进样(FI)分析系统或用酸洗脱[4]。11312 浓缩 冷凝集捕获、乙基化汞复合物的形成、氢化汞复合物的形成和金汞齐化富集等方法都可用来进行汞的浓缩[2～4]。
114 无机汞和甲基汞的分离
11411 非色谱法分离技术 应用卤化酸和有机溶剂把甲基汞从无机汞中分离出来的液-液抽提方法比较常用,一般用于“离线(off2line)”模式,即不连续分析过程[2,9]。可以利用甲基汞和二价汞对还原剂反应不同,如二价汞可被SnCl2还原为Hg0,而甲基汞不能被还原从而达到分离的目的[7]。此外可以用巯基棉纤维柱等固-液萃取的方法,甲基汞滞留在柱内,而二价汞则通过之,随后连续到流动进样分析(FI A)系统中,甲基汞氧化成为无机汞后从柱内释放出来[4]。
11412 色谱分离技术 色谱在线(on2line)偶联元素特异性检测器正逐渐成为分离检测微量元素的最普遍的方法,汞的检测也不例外[2]。对于易挥发性汞元素或其衍生物,气相色谱(G S)技术可作为其分离的首选方法[3]。高效液相(HP LC)技术由于其检测的灵敏度要求不高,灵活性好,存在更多的分离方法,因此对复杂环境样品中的汞分离可比G S取得更为满意的结果,但缺乏高灵敏度是其主要缺陷,因此最有效的检测方法为HP LC偶联汞特异性的检测仪器,即所谓杂交偶联技术[10]。
115 汞的检测技术 目前最常用的检测方法仍为原子吸收分光光谱(AAS),包括不同灵敏度的检测形式,如在石英管产生冷蒸气的冷蒸气原子吸收分光光谱(C VAAS)和在石墨炉产生电热蒸气的电热原子吸收分光光谱(ET AAS)[2]。AAS的主要缺点是灵敏度和特异度不高,可通过汞的提纯来提高其检测灵敏度[7]。ET AAS是AAS体系中较独特的一种方法,E2 T AAS有极低的检出极限和较高选择性,但其不连续操作的特性使之更适合于非色谱分离的离线过程[2]。
汞原子的吸收和荧光发生均在紫外区域的同一波长(254nm)下,因此无须使汞原子化即可由原子荧光光谱(AFS)检测,AFS不失为灵敏度和选择性最高的汞原子检测方法之一[7]。
等离子分析体系可以充分发挥元素特异性检测仪的分析潜能,很接近原子检测仪的理想状态,因此色谱与电感偶合等离子体质谱(ICP2MS)、电感偶合等离子体发射光谱(ICP2AES)和微波等离子体发射光谱(MIPES)的偶联技术目前倍受人们关注,但由于仪器价格昂贵、操作技术性高限制了其应用的广泛性[2,11]。
2 生物样品中汞的分析方法
211 血汞 血汞含量仅反映了人体急性汞暴露的水平[1],因为在长期慢性汞暴露情况下,汞易于富集于不同的组织器官,如无机汞易于富集于肝肾,而甲基汞易于富集于神经系统尤其是大脑中。但对于胎儿而言,G randjean等[12]认为测量脐带血中汞含量能较精确代表达到胎儿循环的汞含量,较母亲发汞更能精确反映胎儿的汞暴露水平。
21111 收集处理 Liang等[3]用硝酸浸泡过的聚四氟乙烯试管中加入肝素或E DT A抗凝剂,加入血样本后,立即充分摇匀,并置于4℃下的冰箱里保存。如果需要运输,可置于双层包装的塑料袋中冷冻保存。样本应于采集后的数天内进行分析,如果总汞和甲基汞都要分析,采血量至少1ml,最好为5ml。
21112 分析 Liang等[3]采用碱消解血样、液-液萃取和乙基化作用后用G S2C VAFS检测全血中的甲基汞含量,检出极限
641国外医学临床生物化学与检验学分册 2003年第24卷第3期
Ξ作者简介:高宇(1978～),男,安徽人,上海第二医科大学附属新华医院儿科医学研究所博士在读,研究方向为儿童保健。
值为0102ng/g。
Brunetto等[9]在密闭的顶方(headspace,HS)进样系统中用浓硫酸消解样品,SnCl2还原后用AAS检测,检出极限值为016μg/L;分析甲基汞时,则在HS系统中用碘乙酸和浓硫酸消解样品,在线冷凝集捕获提高其浓度,G S2AAS检测,其检出极限值为012μg/L。
212 发汞 头发的基质蛋白质中富含硫氨基酸,汞易于与其中的巯基相结合。发汞浓度高于血汞和尿汞,慢性暴露时,发汞浓度大约是血汞的300倍,所以能够较好地反映人体长期的汞暴露水平,不同长度处的发汞值能代表不同时期的汞暴露情况,并且由于头发取样简单没有创伤,易于被人们接受,运输和保存也很简便,因此目前对人群的流行病学调查多采用发汞来衡量人体的暴露情况,但头发易被外源污染,因此彻底清洗很重要[4,11]。
21211 收集处理 Razagui等[11]采样和处理方法如下:用外科剪从枕后区域剪下一束头发,约200～400mg,剪去远端,保留长度约为5cm,随后放入可封闭的聚乙烯袋中。每份样本剪成平均长度为1cm,混匀,依次经过丙酮、去离子水、丙酮洗涤,反复3次,然后置于105℃的炉中干燥。
21212 分析 Li等[4]用碱消解样品,巯基棉纤维吸收柱分离甲基汞,酸洗脱后加入Thio2M ichler酮(T MK),与甲基汞形成红色复合物,再用丁醇萃取之,分光光度法检测,其检出极限为30nm ol/L。作者认为该方法灵敏度较高,选择性好,仪器价格便宜易于操作,可用该方法对人群发甲基汞进行快速筛查。
Razagui等[11]采用密闭的微波消解样品和ICP2MS检测的方法,汞检出极限为0139μg/L。ICP2MS的检出极限低,因此该方法可以减少繁杂耗时的汞萃取浓缩过程。
213 尿汞 由于汞在人体内的半衰期较长,尿可以作为衡量长期汞暴露的指标,但由于汞在人体不同组织内分布不同,尿汞水平往往与临床症状不相符,但当评价低浓度的无机汞暴露时,血液的分析会受到甲基汞的干扰,而此时尿的分析就比较简便有效[1]。
21311 收集处理 所有盛装尿液的塑料瓶都要事先用1m ol/ L的硝酸浸泡,并用双蒸水冲洗3次,室温下干燥。样品置于塑料瓶中,加入醋酸(1%v/v)酸化后4℃下保存[13]。
21312 分析 G allignani等[13]在FI系统中用盐酸消解,SnCl2还原和AAS检测的方法分析无机汞;用盐酸和K2S2O8作为氧化剂,在线微波消解后,SnCl2还原和AAS检测的方法分析总汞。检出极限均为011μg/L,总汞和无机汞值的差值即为有机汞。该研究表明该方法可以把有机汞完全转变为二价汞,较准确快速(每小时可测90个样本)地测量总汞含量,可以用做尿汞的快速筛查方法。
214 其他 T ao等[5]将鱼肉样品溶于羟化四甲胺(T M AH)中,经硝酸和高锰酸钾消解后,在FI系统中由NaBH4还原和C VAAS检测总汞,检测极限为011μg/L。T M AH可以使样品快速充分地溶解,从而可提高检测效率。
由于甲基汞的脂溶性和对生物膜的高通透性,使得鱼卵汞含量比较高,可作为评价环境污染的指标。Burguera等[14]取新鲜鱼卵,磨碎后,每条鱼取50～100ml,加入乳化剂,其成分为2∶3v/v的油2水混合物和01008%v/vT ween20。盐酸消解和硼氢化钠还原后由C VAAS检测无机汞,检出极限为0112μg/L。作者认为乳化剂的使用可增加样品的流动性,提高了分析检测的效率,尤其适用于粘滞度高的样本。
综上所述,生物样品中汞含量的检测步骤包括样品的收集、消解、萃取、分离和检测。目前测定不同种类汞含量最灵敏的方法为色谱在线偶联汞特异性的检测器。此外由M ile2 stone公司最新生产的DM A280自动测汞仪已引进上海新华医院儿科医学研究所,该仪器无需样品的预处理即可对固、液态样品中的总汞进行检测,快速(平均每5min测一个样品)、灵敏(检出极限为0102ng),大大简化了检测过程。
参考文献
1Behrman RE,K ilegman RM,Jens on H B.Nels on T extbook of Pe2 diatrics[M].16th edition.Philadephia:W B Saunders C o,2000, 215522156.
2Sanchez2uria J E,Sanz2Medel A.Inorgnic and methylmercury spe2 ciation in environmental sam ples[J].T alanta,1998,47:5092524. 3Liang L,Evens C,Lazoff,S,et al.Determination of methylmer2 cury in whole blood by ethylation2G C2C VAFS after alkaline diges2 tion2s olvent extraction[J].J Anal T oxicol,2000,24(5):3282332. 4Li H B,Chen F,Xu XR.A highly sensitive spectrophotometric method with s olid2phase extraction for the determination of methylmercure in human hair[J].J Anal T oxicol,2000,24(8): 7042707.
5T ao G,Willie S N,S turgeon RE.Determination of total mercury in biological tissues by flow injection cold vapour generation atomic abs orption spectrometry follwing tetramethylamm onium hydroxide digestion[J].Analyst,1998,123(6):121521218.
6C ominos X,Athanaselis S,D ona A,et al.Analysis of total mer2 cury in human tissues prepared by microwave decom positon using
a hydride generator system coupled to an atomic abs orption spec2
trometer[J].F orensic Science International,2001,118(1):432
47.
7Sandborgh2Englund G,Bjorknem I,Bjorkman L,et al.Determi2 nation of low levels of total mercury in blood and plasma by cold vapour atomic fluorescence spectrometry[J].Scand J Clin Lab In2 vest,1998,58(2):1552160.
8Brunetto MR,Luna JR,Z ambrano A,et al.Determination of methylmercury and inorganic mercury in whole blood by headspace cry ofocusing gas chromatography and atomic abs orpi2 tion spectrometry[J].Analyst,1999,124(10):149321499.
9G erbersmann C,Heisterkam p M,Adams FC,et al.T w o metholds for the speciation analysis of mercury in fish inv olving microwave2 assisted digestion and gas chromatography2atomic emission spec2 trometry[J].Analystica Chimica Acta,1997,350:2732285.
10Rio2Segade S,Bendicho C.On2line high2per formance liquid2chro2 matographic separation and cold atomic abs orption spectrometric determination of methylmercury and inorganic mercury[J].T alan2 ta,1999,48:4772484.
11Razagui I BA,Has well S J.The determination of mercury and sele2 nium in maternal and neonatal scalp hair by inductively coupled plasma2mass spectrometry[J].J Anal T oxicol,1997,21(2):1492 153.
12G randjean P,Budtz2Jorgensen E,White RF,et al.Methlymercury exposure biomarkers as indicators of neurotoxicity in children aged7years[J].Am J E pidemiol,1999,150(3):3012305.
13G allignani M,Bahsas H,Brunetto MR,et al.A time2based flow injection2cold vaporatomic abs orption spectrometry system with on2line microwave sam ple pretreatment for the determination of inorganic and total mercury in urine[J].Analytica Chimica Acta, 1998,369:57267.
14Burguera JL,Quintana I A,Salager JL,et al.The use of emulsions for the determination of methylmercure and inorganic mercury in fish2eggs oil by cold vapor generation in a flow injection system with atomic abs orption spectrometric detection[J].Analyst,1999, 124(4):5932599.
(2002210229收稿 2003204203修回)
本文编辑:陈新黔
741
国外医学临床生物化学与检验学分册 2003年第24卷第3期
常见的微生物检测方法
常见的微生物检测 方法
摘要：微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常见的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其它生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，一般情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长一般指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同
时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和她们的生长抑制紧密相关。因此有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，因此测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，能够从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 体积测量法：又称测菌丝浓度法。 经过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法：
病原微生物检测新方法
病原微生物检测新方法 检测高致病性病原微生物样本时存在前处理困难，步骤多、时间长、重复性与可扩展性差、需要高温灭活等问题，所以在临床实验室难以实现标准化。自动聚焦声学技术是在传统超声波处理基础上的技术革新，聚焦声波能够以极低的能量输入获得良好的样本处理结果，避免传统超声能量过剩可能引起的样本处理过度及热损伤。 AFA技术在DNA剪切中的准确稳定的表现使其在NGS领域备受推崇。其实该技术在微量珍贵以及难处理的医学样本制备中也有不俗的表现，可有效提高生物大分子得率，获得足够且高质量的核酸样本用于下游分析。这是现有条件下提高检测灵敏度的有效手段，可减低可疑或者假阴性结果。 有数据表明：对于珍贵/微量及难处理的样本，基于AFA聚焦超声技术的生物大分子制备方案，其优势不仅仅表现在得率，纯度，完整性等表面价值，更重要的是提升了下游数据价值：1.qPCR 扩增效率提高；2医学样本如痰液中病毒核酸有效释放；3宏基因组样本有效破碎以便下游检出更多革兰氏阳性菌；4
文库复杂度提升，基因密集区以及GC富含区测序深度提升；5融合基因检出提升等。 呼吸道合胞病毒（Human Respiratory Syncytial Virus, RSV）是一种RNA病毒，可导致发热、鼻炎、咽炎及上呼吸道感染等症状。在老年人患者中，病毒载量较低，为了保证检测的准确性，需要灵敏度更高的检测方法如RT-PCR法。 在呼吸道合胞病毒的鉴定案例中，比较了聚焦超声技术(AFA)处理痰液结合MNAzyme探针法与Glass beads研磨方法处理痰液结合探针法对RSV病毒提取及扩增效率的影响。 结果显示，与Glass beads方法相比，经Covaris AFA超声法处理后提取的核酸样本，检测到的Ct值明显减小(变化范围1.0 - 4.0 log)，即经Covaris AFA 超声法处理的样本提取的病毒RNA得率更高。尤其是在7号样品中，使用Glass beads方法处理的样本，检测RSV-B呈阴性，而Covaris方法处理的样本检测结果为阳性。 在这个案例中，Covaris AFA超声法处理痰液的时间仅为30秒。这是因为聚焦超声技术的声波频率（500kHz）远远高于普通水浴超声，集中的能量可以
浅谈水环境中汞离子的检测技术
浅谈水环境中汞离子的检测技术 汞及其化合物对人体健康存在多种危害，若存在于天然水体中，则会对大范围的人群以及动物造成威胁。它能够在生物体内累积，通过食物链转移到人体内。人体内累积的微量汞无法通过自身代谢进行排泄，便会直接导致心脏、肝、甲状腺疾病，引起神经系统紊乱，慢性汞中毒，甚至引发恶性肿瘤的形成。 人们应该对1956年在日本水俣镇发生的一切还有着深刻的印象。1956 年，水俣湾附近发现了一种奇怪的病。这种病症最初出现在猫身上，被称为“猫舞蹈症”。病猫步态不稳，抽搐、麻痹，甚至跳海死去，被称为“自杀猫”。随后不久，此地也发现了患这种病症的人。患者由于脑中枢神经和末梢神经被侵害，轻者口齿不清、步履蹒跚、面部痴呆、手足麻痹、感觉障碍、视觉丧失、震颤、手足变形，重者神经失常，或酣睡，或兴奋，身体弯弓高叫，直至死亡。这就是日后轰动世界的“水俣病”，是最早出现的由于工业废水排放污染造成的公害病。然而，罪魁祸首就是“汞”。 溶解态的二价汞离子往往具有较高的化学活性，是排入天然水体中汞污染物的主要存在形式，其化合物具有较高的水溶性，也是汞形态转换的枢纽。因此，水环境中的汞离子的分析测定必然成为人们十分关注的课题，本文将针对汞离子的各种测定方法做简单的介绍。 一、分光光度法
分光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。该方法实验设备简单、仪器造价低、检测简便、具有较高的检测灵敏度，因而被广泛地应用于各种领域，包括本文所涉及的水中汞离子的测定。 其中双硫腙法在汞的比色分析中应用最广，已成为检测汞的国家标准方法之一。测试时将pH0~13的水溶液与含双硫腙的有机溶液一起振摇，二价汞离子与其反应生成络合物完全进入有机相中，根据此络合物在最大波长490nm的吸收值就可以实现对汞离子的测定。为了解决双硫腙法试验条件苛刻、选择性差、灵敏度不够高、需要使用有机溶剂等问题，实现水环境中汞的快速灵敏性测定，人们已经开发出一系列用于汞离子分光光度法检测的显色剂。研究发现，罗丹明B能与汞络阴离子形成多元离子缔合物，在聚乙烯醇存在下对汞离子进行光度法测定。赵书林等人合成6-甲氧基苯并噻唑重氮氨基偶氮苯，严国兵等人合成1-偶氮苯3-（6-甲基氧-2-苯并噻唑）-三氮烯等显色剂，将其与汞进行显色反应，较好的实现了汞离子的测定。 分光光度法测定汞离子，虽然反应的灵敏度较高，但如何降低显色反应时间，实现即时测量；如何设计和制备汞离子特异性显色剂；在与汞离子化学性质相近的重金属离子存在时如何防止发生误读的情况发生，是显色剂选择中需要解决的几个问题。 二、原子发射光谱法
(完整word版)重金属检测方法汇总
重金属检测方法汇总 重金属检测方法及应用 一、重金属的危害特性 从环境污染方面所说的重金属，实际上主要是指汞、镉、铅、铬、砷等金属或类金属，也指具有一定毒性的一般重金属，如铜、锌、镍、钴、锡等。我们从自然性、毒性、活性和持久性、生物可分解性、生物累积性，对生物体作用的加和性等几个方面对重金属的危害稍作论述。 （一）自然性： 长期生活在自然环境中的人类，对于自然物质有较强的适应能力。有人分析了人体中60多种常见元素的分布规律，发现其中绝大多数元素在人体血液中的百分含量与它们在地壳中的百分含量极为相似。但是，人类对人工合成的化学物质，其耐受力则要小得多。所以区别污染物的自然或人工属性，有助于估计它们对人类的危害程度。铅、镉、汞、砷等重金属，是由于工业活动的发展，引起在人类周围环境中的富集，通过大气、水、食品等进入人体，在人体某些器官内积累，造成慢性中毒，危害人体健康。 （二）毒性： 决定污染物毒性强弱的主要因素是其物质性质、含量和存在形态。例如铬有二价、三价和六价三种形式，其中六价铬的毒性很强，而三价铬是人体新陈代谢的重要元素之一。在天然水体中一般重金属产生毒性的范围大约在1～10mg/L之间，而汞，镉等产生毒性的范围在0.01～0.001mg/L之间。 （三）时空分布性： 污染物进入环境后，随着水和空气的流动，被稀释扩散，可能造成点源到面源更大范围的污染，而且在不同空间的位置上，污染物的浓度和强度分布随着时间的变化而不同。（四）活性和持久性： 活性和持久性表明污染物在环境中的稳定程度。活性高的污染物质，在环境中或在处理过程中易发生化学反应，毒性降低，但也可能生成比原来毒性更强的污染物，构成二次污染。如汞可转化成甲基汞，毒性很强。与活性相反，持久性则表示有些污染物质能长期地保持其危害性，如重金属铅、镉等都具有毒性且在自然界难以降解，并可产生生物蓄积，长期威胁人类的健康和生存。 （五）生物可分解性： 有些污染物能被生物所吸收、利用并分解，最后生成无害的稳定物质。大多数有机物都有被生物分解的可能性，而大多数重金属都不易被生物分解，因此重金属污染一但发生，治理更难，危害更大。 （六）生物累积性： 生物累积性包括两个方面：一是污染物在环境中通过食物链和化学物理作用而累积。二是污染物在人体某些器官组织中由于长期摄入的累积。如镉可在人体的肝、肾等器官组织中蓄积，造成各器官组织的损伤。又如1953年至1961年，发生在日本的水俣病事件，无机汞在海水中转化成甲基汞，被鱼类、贝类摄入累积，经过食物链的生物放大作用，当地居民食用后中毒。 （七）对生物体作用的加和性： 多种污染物质同时存在，对生物体相互作用。污染物对生物体的作用加和性有两类：一类是协同作用，混合污染物使其对环境的危害比污染物质的简单相加更为严重；另一类是拮抗作用，污染物共存时使危害互相削弱。 二、重金属的定量检测技术
提高测定水中总汞含量准确度的方法
提高测定水中总汞含量准确度的方法 摘要：作者就影响水质总汞测定的诸多因素进行了详细的研究分析，并对国产测汞仪进行了改装，提高了其检测限及灵敏度。 关键词：水质总汞；监测；硫酸；重铬酸钾水质总汞是进行环境监测和无公害农产品产地认定时的一个必测项目，汞污染对人类有着极大的危害，属于严格监测项目。水质总汞的测定一般采用HJ597-2011《水质总汞的测定冷原子吸收分光光度法》（替代GB7468-87）。在按照新标准的实际操作中，笔者发现存在测汞仪灵敏度低、稳定性差、空白值高及线性较差等诸多问题。本文对能影响实验的因素，如仪器灵敏度、化学试剂含汞量、玻璃器皿等进行了详细分析研究，并仅对国产测汞仪配置了一个烧瓶，使其检测限、灵敏度便都符合了新标准的要求。 1 材料与方法 1.1 仪器 F732-V智能型测汞仪，DZKW-S-4电热恒温水浴锅。 1.2 主要试剂 无汞水，硫酸（GR），硝酸（GR），盐酸（GR），高锰酸钾溶液（50 g/L），重铬酸钾溶液（0.5 g/L），氯化亚锡溶液（200 g/L），汞标准使用液（10.0 ug/L）。 1.3 水样的处理 量取200.0 mL样品移入500 mL锥形瓶中，依次加入5.00 mL浓硫磷、5.00 mL硝酸溶液和4.00 mL高锰酸钾溶液，摇匀，然后加入4.00 mL过硫酸钾溶液，置于沸水浴中在近沸状态保温1 h，取下冷却。测定前，边摇边滴加盐酸羟胺溶液，直至刚好使过剩的高锰酸钾及器壁上的二氧化锰全部褪色为止，待测。 1.4 校准曲线的绘制 分别量取0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00和5.00 mL汞标准使用液（浓度为10 ug/L）于200 mL容量瓶中，用稀释液定容至标线，总汞质量浓度分别为0.000、0.025、0.050、0.100、0.150、0.200和0.250 ug/L。将上述标准系列依次移至250 mL反应装置中，加入5.00 mL氯化亚锡溶液，迅速插入吹气头，由低浓度至高浓度测定响应值。以零浓度校正后的响应值为纵坐标，对应的总汞质量浓度（ug/L）为横坐标，绘制校准曲线。 2 结果与论讨 2.1 对国产测汞仪进行优化配置 笔者使用的F732-V型测汞仪所配备的还原瓶最大容量为80 mL，而新标准中测定水样和制作校准曲线，都需要250 mL以上的还原瓶。为满足标准要求，同时使还原瓶又要与测汞仪匹配，经反复试验，用250 mL的平底烧瓶，代替测汞仪上的80 mL还原瓶（如果烧瓶口太大，可加一个橡皮环），用它绘制的校准曲线符合新标准的要求。使用该装置连续20次测定空白溶液，计算出标准偏差SD，按DL=3×SD/k（DL为最低检出限，k为校正曲线斜率），得出汞的最低检出限为DL=0.005 ug/L。而标准里的检出限为0.01 ug/L。 2.1.1 线性方程与相关系数使用该装置在最佳仪器条件下测定汞校准曲线，得到如下结果（见表1）。 2.1.2 精密度用该装置对总汞质量浓度为0.40 ug/L的样品测定20次，相对标准偏差为 3.0 %，符合要求。
食品中有害微生物快速检测方法概述
(一)、概述 食用被微生物污染的食品而导致的疾病，称作食源性疾病。导致这类疾病的微生物叫食源性致病菌。随着人们居住和卫生条件的不断改善，以及抗生素的滥用，人类对病菌的抵抗能力却在不断下降，食源性疾病一直呈上升的趋势。因此，对食品中致病菌的监测和检验也就越显示其重要性，常规的检验大多依靠培养目标微生物的方法来确定食品是否受到此微生物的污染，这些方法需要一定的培养时间，少则2～3天，多至数周，才能确定。而现行有效的一些快速检测方法不仅可以大大缩短检测时间提高微生物检出率并可用于微生物计数、早期诊断、鉴定等方面，以做到快速、简便、准确。快速方法包括了微生物学、分子化学、生物化学、生物物理学、免疫学和血清学等领域。 （二）、常见、常用的快速、简便的检测微生物数量的方法如下： 1、活细胞计数的改进方法 （1）、旋转平皿计数方法 （2）、疏水性栅格滤膜法（HGMF）或等格法（isogrid method） （3）、血膜系统（Pertrifilm） （4）、酶底物技术（ColiComplete） （5）、直接外荧光滤过技术（DEFT） （6）、“即用胶”系统（SimPlate） 2、用于估计微生物数量的新方法 （1）、阻抗法 （2）、A TP生物发光技术 3、其他方法 （1）、微量量热法 （2）、接触酶测定仪 （3）、放射测定法 （三）、食品中沙门氏菌的快速筛检方法 1、沙门氏菌显色培养基法 2、免疫学方法 3、分子生物学方法 4、自动传导法 （四）、大肠杆菌O157：H7快速检测方法 大肠杆菌O157：H7肠出血性大肠杆菌的主要血清型，自1982年在美国被分离并命名以来，陆续发现本菌与轻度腹泻、溶血性尿毒综合症、出血性肠炎、婴儿猝死综合症等多种人类病症密切相关，是食源性疾病的一种重要致病菌。E.coli O157：H7属于肠杆菌科埃希氏菌属，为革兰氏阴性杆菌，有鞭毛。近年来作为食品卫生及流行病学的研究热点，E.coli O157：H7的分离和鉴定方法已取得了较大进展。利用其生化特征、免疫原性建立的方法以及现代分子生物学技术的应用，可以从多方面对E.coli O157：H7进行检测。 1、E.coli O157：H7鉴别培养基及显色培养基 2、免疫学检测方法 3、分子生物学方法 （五）、金黄色葡萄球菌的快速检测方法 金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈普通串状排列无芽孢，无鞭毛，不能运动。该菌在自然界中分布广泛，如空气、水、土壤、饲料和一些物品上，是最常见的化脓性球菌之一，食品受其污染的机会很多。金黄色葡萄球菌食物中毒是其肠毒引起的，目前已确认的肠毒素至少有A,B,C1,C2,C3,D,E和F8个型。由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的中毒爆发事件，近年来
水样中汞离子(Hg2+)浓度检测试剂盒 微量法
水样中汞离子（Hg2+）浓度检测试剂盒微量法 注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。 货号:BC2825 规格:100T/96S 产品简介： Hg2+是水体中重要有毒重金属离子，易被生物体吸收并且积累，能够通过食物链进一步传递，从而造成伤害。典型的水俣病就是汞中毒的一种。 水样经消化后，在酸性环境中，Hg2+能与双硫腙生成橙色络合物，溶于三氯甲烷，在490nm测定吸光度，即可计算Hg2+含量。 试验中所需的仪器和试剂： 台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板（非聚丙烯/聚苯乙烯材质）、可调式移液枪、浓硫酸、浓硝酸、三氯甲烷、蒸馏水。 产品内容： 试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存，用时加2mL水溶解。 试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。 试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。 试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL蒸馏水备用。 试剂五：粉剂×1瓶，4℃避光保存。加三氯甲烷（自备）50mL充分溶解。 试剂六：液体20mL×1瓶，4℃保存。 标准品：液体1mL×1支，4000nmol/mL Hg2+，室温保存。临用前用水稀释400倍即10nmol/mL标准溶液。 样品处理 每采集1000mL水样后立即加入7mL硝酸，调节每个样品的pH，使之低于或等于1。若取样后不能立即测量，向每升样品中加入试剂二4mL或更多，使之呈现持久的淡红色。 操作步骤：
1、可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至490nm，氯仿调零。 2、操作表： 在1.5mLEP管中分别加入： 试剂名称（μL）测定管标准管空白管水样400- 标准溶液-400 蒸馏水--400 浓硫酸161616 浓硝酸444 试剂一131313 试剂二242424 封口膜封口，充分混匀，震荡2min。95℃水浴中消化2小时，冷却至大约40℃。 试剂三808080 震荡至EP管内溶液澄清透明，开盖放置10min，期间摇荡数次，使其中气体溢出。 试剂四323232 试剂五400400400 盖紧后充分震荡2min，静置10min，吸取下层有机相至1.5mL EP管中。 试剂六160160160充分震荡使有机相无绿色，静置分层后吸取200μL有机相于微量玻璃比色皿中/96孔板中，测定其在490nm波长下的吸光度，分别记为A测定，A标准，A空白，计算ΔA测定=A测定-A空白，ΔA标准=A标准-A空白。 汞离子浓度计算： Hg2+（nmol/mL）=C标准品×ΔA测定÷ΔA标准=10×ΔA测定÷ΔA标准。 C标准品：标准品浓度，10nmol/mL。 注意事项： 1.水样中1000μg/L铜离子，20μg/L银离子，10μg/L金离子，5μg/L铂离子对测定无干扰。 2.测定过程中应注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到有毒及危险试剂。 3.当吸光度大于0.6时，建议稀释后测定。 4.含悬浮物和（或）有机物较少的水可把加热时间缩短为1h，不含悬浮物的较清洁水可把加热时间缩短为30min。
原子荧光法测定水中的汞方法证实
原子荧光法测定水中的汞方法证实 发表时间：2019-07-12T14:39:33.580Z 来源：《建筑学研究前沿》2019年6期作者：莫杰君[导读] 为了保证能够顺利应用原子荧光测定水中的汞分析的有效性和应用性，在方法投入使用之前，需要对方法进行相关的证实实验。 佛山市南海区环境保护监测站广东省佛山市 528200 摘要：应用原子荧光法测定水中的汞的浓度，方法依据是《水质汞、砷、硒、铋和锑的测定原子荧光法》（HJ 694-2014）。现通过标准曲线、最低检出限、精密度、准确度（盲样测试和加标回收试验）等指标对应用以上方法测定水中汞进行相关证实实验。关键词：原子荧光；汞；方法证实汞污染，是指由汞或含汞化合物所引起的环境污染。现在人类活动越来越频繁，活动中会造成水体汞污染，这些污染主要来自氯碱、塑料、电池、电子等工业排放的废水以及废旧医疗器械[1]。我国作为全球汞使用量和排放量最大的国家，而且汞的毒性强，产生中毒的剂 量小，因此对水中汞的含量分析和评价是水污染环境分析管控的重要指标[2]。本方法中应用《水质汞、砷、硒、铋和锑的测定原子荧光法》（HJ 694-2014）测定水中汞的浓度，为了保证能够顺利应用原子荧光测定水中的汞分析的有效性和应用性，在方法投入使用之前，需要对方法进行相关的证实实验。 1 实验部分 1.1 方法原理 吸取经消解后的试液进入原子荧光仪，在酸性的硼氢化钾还原作用下，生成汞原子，氢化物在氩氢火焰中形成基态原子，其基态原子和汞原子受元素灯发射光的激发产生原子荧光，原子荧光值与试液中待测元素的含量在一定范围内呈正比关系[3]。 1.2 试样的制备 1.2.2 准确量取5.0mL混匀后的样品于10mL比色管中，加入1mL盐酸-硝酸溶液（VHCl：VHNO3=3：1），加塞混匀，置于沸水浴中恒温加热消解1h，期间摇动1～2次并开盖放气。1h后取出冷却，用纯水定容至标线并且混匀后待测。 1.2.3 空白试验 以纯水代替样品，按照1.2.2的步骤制备空白试样。 2 结果与讨论 2.1标准曲线的配制与绘制2.1.1 汞标准系列的配制：准确吸取30.00mL汞标准使用液（ρ（Hg）=10.0 μg/L）于100mL容量瓶中，加入10.0mL盐酸-硝酸溶液（VHCl：VHNO3=3：1），用水稀释至标线，混匀；仪器自动稀释到浓度为0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50、 3.00μg/L的标准系列。 2.1.2 绘制：换上汞金属的荧光灯，开机，开氩气，设置仪器测量条件至最佳测量条件，点火预热，预热完成后，以盐酸溶液（5%HCl）为载流，硼氢化钾溶液为还原剂，浓度由低到高依次测定汞标准系列的原子荧光值，以原子荧光值为纵坐标，汞质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，结果见表1。标准曲线满足相关系数r≥0.995的要求，线性良好。表1 汞标准曲线测试
微生物检验(完整版)
微生物检验（完整版） 名解 微生物：是一群个体微小结构简单肉眼不能看见的微小生物的总称 种：亲缘关系较近的微生物群体在进化发育阶段上有一定的共同形态和生理特征 微生物学：生物学的一个分支是研究微生物在一定条件下的形态结构生理生化遗传变异特性及微生物的进化分类生态等生命活动规律以及微生物之间与人类动植物自然界互相关系的一门科学 抗生素：是由某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭某些其他微生物和肿瘤细胞的微量生物活性物质 细菌素：是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质 条件致病菌：正常菌群在宿主体内具有相对稳定性一般不致病 消毒：指杀死物体上的病原微生物但不一定能杀死细菌芽孢的方法 灭菌：指杀灭物体上所有的微生物的方法 防腐：指防止或抑制微生物生长繁殖的方法 无菌：指没有货的微生物的存在 质粒：是细菌染色体外的遗传物质也是环状闭合的双联DNA分子比染色体小存在于细胞质中可自主复制 突变：是指细菌遗传物质的机构发生突然而稳定的改变所致的变异现象可遗传给后代 基因转移：外源性物质由供体菌转入受体细胞内的过程 基因重组：供体菌的基因进入受体菌细胞并在其中自行复制与表达或矛受体菌DNA整合在一起的过程 病毒：是一类个体微小结构简单只含一种核酸只能在活的易感细胞内以复制方式增殖的
非细胞型微生物 复制周期：病毒的增殖被人为分成吸附穿入脱壳生物合成装配成熟与释放七个步骤的完整过程 缺陷病毒：是指因病毒基因组不完整或因基因某一点改变而不能进行正常增殖的病毒 顿挫感染：病毒进入宿主细胞若细胞缺乏病毒复制所需的酶能量和必要成分等则病毒无法合成自身成分不能够装配和释放子代病毒的现象 干扰现象：两种病毒感染同一种细胞时可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象 人工自动免疫：是将疫苗等免疫原接种于人体刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答使机体获得特异性免疫力 人工被动免疫：是指注射含某种病毒特异性中和抗体的免疫血清等一系列细胞因子是机体立即获得特异性免疫 干扰素：是由病毒或干扰素诱生剂作用于中性粒细胞成纤维细胞或免疫细胞产生的一种糖蛋白 致病性：一定种类的病原微生物在一定的条件下能在特殊的宿主体内引起特定疾病的能力半数致死量：在规定时间内通过一定途径能使一定体重或年龄的某种动物半数死亡或感染需要的最小病原体数量或毒素量 急性感染：发作突然病程较短一般是数天或数周 局部感染：病原体侵入机体后局限就在一定部位生长繁殖引起病变的一种感染类型 毒血症：致病菌侵入宿主体后只在机体局部生长繁殖病菌不进入血液循环但其产生的外毒素入血引起特殊的毒性症状 败血症：致病菌侵入血流后在其中大量繁殖并产生毒性产物引起全身性毒性症状 内毒素血症：革兰阴性菌侵入血流并在其中大量繁殖崩解后释放出大量毒素也可有病灶
汞离子的检测
水环境中汞离子的检测 引言：汞是唯一在常温下呈液态且易流动的金属，主要用于科学仪器、汞锅炉、汞泵及汞气灯中，在医药上也广泛应用，长期以来，汞产品在人们的生活中随处可见。环境中的汞能被动植物富集，经生物转化作用转变成毒性更大的有机汞，各种形式的汞可通过水体及食物链进入人体，对机体产生毒性作用，长时间暴露在高汞环境中，可以导致脑损伤和死亡。因此，环境中的痕量汞检测极为重要。目前检测痕量汞的方法主要有原子吸收法、原子荧光法、紫外分光光度法等等。 关键词：Hg2+ 检测荧光法紫外分光光度法 一、二硫腙单色法 二硫腙单色法，通常用王水分解试验，以EDTA、柠檬酸钠为隐蔽剂，于pH 2～5用二硫腙—苯萃取汞。二硫腙汞的黄色络合物与过剩的二硫腙同时萃取至苯层中，与铁、钙、铜、铅、锌、铊、铋、镉、镍、钴、锰、金、银、铂和钯等分离。然后吸取有机相，用碱性洗液洗除有机相中过量的二硫腙，利用苯层中二硫腙汞的橙黄色进行比色。 实验方法：二硫腙贮备液0.1% 称取0.1克二硫腙，放于烧杯中，加50毫升苯溶解，移入分液漏斗中，加10%氢氧化铵溶液30～40毫升、饱和亚硫酸钠溶液2毫升、EDTA—柠檬酸钠混合溶液3毫升，萃取1分钟。静置分层后，将水相放入另一分液漏斗中，苯相再按上述方法用氨水、亚硫酸钠、EDTA—柠檬酸钠洗两次。合并水相，弃去苯相。水相再用20～30毫升苯洗1次，弃去苯相。然后将水相用
1∶1盐酸酸化至二硫腙变绿（或析出沉淀），加20～30毫升苯萃取，静置分层后，将苯相放入100毫升容量瓶中，水相再用苯萃取一次。合并苯相并用苯稀释至刻度、摇匀，保存于暗处，备用。 称取1克试样，通过长颈玻璃小漏斗，装入单球玻管的玻球内。置于电炉上灼烧15～30分钟，继在喷灯上灼烧，待玻球软化后，将其拉去。稍冷，立即加入盐酸、硝酸混合酸2毫升于玻管内，将玻管置于盛沸水的烧杯中，煮沸10分钟。将溶液移入盛有5毫升碱性洗液的10毫升具塞比色管中，摇匀。待冷却后，加入0.005%二硫腙工作溶液1毫升，振摇150次以上，分层后与标准系列进行目视比色。 二、荧光法[1] 通过设计荧光染料标记的DNA序列实现荧光法检测Hg2+的法，干扰小，比较利于复杂样品中Hg2+的检测。 实验方法：仪器采用日立F-2700型荧光分光光度计（日本）用于表征荧光光谱；Phs-3C型酸度计（上海雷磁仪器公司）用于调节体系的pH值；QL-901型旋涡混合器（上海天呈医流生物医学公司）用于混合溶液。 材料采用碳纳米管（CNTS）购买自中国科学院成都有机化学研究所（经混酸处理后备用）。DNA（TAMRA－polyT）购自上海生工生物工程技术服务有限公司中国），用去离子水溶解配成溶液后于4℃冰箱中避光保存。实验中使用0.1mL磷酸盐缓冲，其他试剂均为分析纯。 向1.0mL离心管中，保持V总为500 L的条件下，按顺序依次
金属检测手段
无损检测中的UT RT MT PT ET 都是什么意思？ 射线检测 Radiographic Testing（缩写 RT）； 超声检测 Ultrasonic Testing（缩写 UT）； 磁粉检测 Magnetic particle Testing（缩写 MT）； 渗透检测 Penetrant Testing （缩写 PT）； 涡流检测 Eddy Current Testing （缩写 ET）； 一、射线照相法（RT） 是指用X射线或g射线穿透试件，以胶片作为记录信息的器材的无损检测方法，该方法是最基本的，应用最广泛的一种非破坏性检验方法。 1、射线照相检验法的原理：射线能穿透肉眼无法穿透的物质使胶片感光，当X射线或r射线照射胶片时，与普通光线一样，能使胶片乳剂层中的卤化银产生潜影，由于不同密度的物质对射线的吸收系数不同，照射到胶片各处的射线能量也就会产生差异，便可根据暗室处理后的底片各处黑度差来判别缺陷。 2、射线照相法的特点：射线照相法的优点和局限性总结如下： a.可以获得缺陷的直观图像，定性准确，对长度、宽度尺寸的定量也比较准确； b.检测结果有直接记录，可长期保存； c. 对体积型缺陷（气孔、夹渣、夹钨、烧穿、咬边、焊瘤、凹坑等）检出率很高，对面积型缺陷（未焊透、未熔合、裂纹等），如果照相角度不适当，容易漏检； d.适宜检验厚度较薄的工件而不宜较厚的工件，因为检验厚工件需要高能量的射线设备，而且随着厚度的增加，其检验灵敏度也会下降； e.适宜检验对接焊缝，不适宜检验角焊缝以及板材、棒材、锻件等； f.对缺陷在工件中厚度方向的位置、尺寸（高度）的确定比较困难； g.检测成本高、速度慢； h.具有辐射生物效应，无损检测超声波探伤仪能够杀伤生物细胞，损害生物组织，危及生物器官的正常功能。 总的来说，RT的特性是——定性更准确，有可供长期保存的直观图像，总体成本相对较高，而且射线对人体有害，检验速度会较慢。无损检测X光机用于工业部门的工业检测X光机通常为工业无损检测X光机（无损耗检测），此类便携式X光机可以检测各类工业元器件、电子元件、电路内部。例如插座插头橡胶内部线路连接，二极管内部焊接等的检测。BJI-XZ、BJI-UC等工业检测X光机是可连接电脑进行图像处理的X光机，此类工业检测便携式X光机为工厂家电维修领域提供了出色的解决方案。 二、超声波检测（UT） 1）、超声波检测的定义：通过超声波与试件相互作用，就反射、透无损检测设备射和散射的波进行研究，对试件进行宏观缺陷检测、几何特性测量、组织结构和力学性能变化的检测和表征，并进而对其特定应用性进行评价的技术。2）、超声波工作的原理：主要是基于超声波在试件中的传播特性。 a.声源产生超声波，采用一定的方式使超声波进入试件； b.超声波在试件中传播并与试件材料以及其中的缺陷相互作用，使其传播方向或特征被改变； c.改变后的超声波通过检测设备被接收，并可对其进行处理和分析； d.根据接收的超声波的特征，评估试件本身及其内部是否存在缺陷及缺陷的特性。
病原微生物检测操作规程
病原微生物检测操作规程 一、打开标本及处理 接受和打开标本的人员应当了解标本对身体健康的潜在危害，并接受过如何采用标准防护方法的培训，尤其是处理破碎或泄漏的容器时更应如此。标本的内层容器要在生物安全柜内打开，并准备好消毒剂。 标本打开处理时： 1．应当在生物安全柜内打开标本管。 2．必须戴手套，并建议对眼睛和黏膜进行保护（护目镜或面罩）。3．打开标本管时，应用纸或纱布抓住塞子以防止喷溅。 二、避免感染性物质的注入 1．通过认真练习和仔细操作，可以避免破损玻璃器皿的刺伤所引起的接种感染。应尽可能用塑料制品代替玻璃制品。 2．锐器损伤（如通过皮下注射针头、巴斯德玻璃吸管以及破碎的玻璃）可能引起意外注入感染性物质。 3．以下两点可以减少针刺损伤：（a）减少注射器和针头的使用（可用一些简单的工具来打开瓶塞，然后使用吸管取样而不用注射器和针头）；（b）在必须使用注射器和针头时，采取锐器安全装置。4．不要重新给用过的注射器针头戴护套。一次性物品应丢弃在防/耐穿透的带盖容器中。
三、血清的分离 1．只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。 2．操作时应戴手套以及眼睛和黏膜的保护装置。 3．规范的实验操作技术可以避免或尽量减少喷溅和气溶胶的产生。血液和血清应当小心吸取，而不能倾倒。严禁用口吸液。4．移液管使用后应完全浸入消毒液中。移液管应在消毒液中浸泡适当的时间，然后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。 5．带有血凝块的废弃标本管，在加盖后应放在适当的防漏容器内高压灭菌和/或焚烧。 6．应备有适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出标本。 四、对血液和其他体液、组织及排泄物的标准防护方法 设计标准防护方法（其中包括“常规预防措施”）以降低从已知或未知感染源的微生物传播危险。 五、玻璃器皿和“锐器” 1．尽可能用塑料制品代替玻璃制品。只能用实验室级别（硼硅酸盐）的玻璃，任何破碎或有裂痕的玻璃制品均应丢弃。 2．不能将皮下注射针作为移液管使用。 六、用于显微镜观察的盖玻片和涂片 用于显微镜观察的血液、唾液和粪便标本在固定和染色时，不必杀死涂片上的所有微生物和病毒。应当用镊子拿取这些东西，妥善储存，并经清除污染和/或高压灭菌后再丢弃。 七、一次性接种环
金属硬度检测方法
金属硬度检测方法 作者：张凤林 硬度是评定金属材料力学性能最常用的指标之一。硬度的实质是材料抵抗另一较硬材料压入的能力。硬度检测是评价金属力学性能最迅速、最经济、最简单的一种试验方法。硬度检测的主要目的就是测定材料的适用性，或材料为使用目的所进行的特殊硬化或软化处理的效果。对于被检测材料而言，硬度是代表着在一定压头和试验力作用下所反映出的弹性、塑性、强度、韧性及磨损抗力等多种物理量的综合性能。由于通过硬度试验可以反映金属材料在不同的化学成分、组织结构和热处理工艺条件下性能的差异，因此硬度试验广泛应用于金属性能的检验、监督热处理工艺质量和新材料的研制。 金属硬度检测主要有两类试验方法。一类是静态试验方法，这类方法试验力的施加是缓慢而无冲击的。硬度的测定主要决定于压痕的深度、压痕投影面积或压痕凹印面积的大小。静态试验方法包括布氏、洛氏、维氏、努氏、韦氏、巴氏等。其中布、洛、维三种试验方法是应用最广的，它们是金属硬度检测的主要试验方法。这里的洛氏硬度试验又是应用最多的，它被广泛用于产品的检验，据统计，目前应用中的硬度计70%是洛氏硬度计。另一类试验方法是动态试验法，这类方法试验力的施加是动态的和冲击性的。这里包括肖氏和里氏硬度试验法。动态试验法主要用于大型的，不可移动工件的硬度检测。 各种金属硬度计就是根据上述试验方法设计的。下面分别介绍基于各种试验方法的硬度计的原理、特点与应用。 1.布氏硬度计（GB/T231.1—2002） 1.1布氏硬度计原理 对直径为D的硬质合金球压头施加规定的试验力，使压头压入试样表面，经规定的保持时间后，除去试验力，测量试样表面的压痕直径d，布氏硬度用试验力除以压痕表面积的商来计算。 HB =F / S ……………… (1-1) =F / πDh ……………… (1-2) 式中： F ——试验力，N； S ——压痕表面积，mm； D ——球压头直径，mm； h ——压痕深度， mm； d ——压痕直径，mm。 1、2布氏硬度计的特点： 布氏硬度试验的优点是其硬度代表性好，由于通常采用的是10 mm直径球压头，3000kg试验力，其压痕面积较大，能反映较大范围内金属各组成相综合影响的平均值，而不受个别组成相及微小不均匀度的影响，因此特别适用于测定灰铸铁、轴承合金和具有粗大晶粒的金属材料。它的试验数据稳定，重现性好，精度高于洛氏，低于维氏。此外布氏硬度值与抗拉强度值之间存在较好的对应关系。
水中汞测定冷原子吸收法方法验证
XXXXX-XXX 检测分析方法验证报告 XXXXX字〔2014〕第XX号 方法名称：冷原子吸收分光光度法测定 水中的总汞 验证人员：XXXX 审核人员：XXXX 验证日期：二零一四年X月X日 XXXXXXXXXXX
声明事项 1. XXXXXX。 2.XXXXXXX。 3.XXXXXXX。 4.XXXXXX。
项目名称：冷原子吸收分光光度法测定水的中总汞负责科室：XXX 项目负责人：XXX 参加人员：XXX 报告编写人：XXX 审核： 审定：
冷原子吸收分光光度法测定水的中总汞警告：重铬酸钾、汞及其化合物毒性很强，操作时应加强通风，操作人员应佩戴防护器具，避免接触皮肤和衣物。 1 适用范围 《水质总汞的测定冷原子吸收分光光度法》（HJ 597-2011）规定了测定水中总汞的冷原子吸收分光光度法。 本标准适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中总汞的测定。若有机物含量较高，本标准规定的消解试剂最大用量不足以氧化样品中有机物时，则本标准不适用。 采用高锰酸钾-过硫酸钾消解法，当取样量为100ml 时，检出限0.02μg/L，测定下限为0.08μg/L；当取样量为200ml时，检出限为0.01μg/L，测定下限为0.04μg/L。 2 方法原理 在加热条件下，用高锰酸钾和过硫酸钾在硫酸-硝酸介质中消解样品；或用溴酸钾-溴化钾混合剂在硫酸介质中消解样品；或在硝酸-盐酸介质中用微波消解仪消解样品。消解后的样品中所含汞全部转化为二价汞，用盐酸羟胺将过剩的氧化剂还原，再用氯化亚锡将二价汞还原成金属汞。在室温下通入空气或氮气，将金属汞气化，载入冷原子吸收汞分析仪，于253.7nm波长处测定响应值，汞的含量与响应值成正比。 3 试剂和材料 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为去离子水。 3.1重铬酸钾（K2Cr2O7）：优级纯。 3.2浓硫酸：ρ（H2SO4）= 1.84 g/ml，优级纯。 3.3浓盐酸：ρ（HCl）= 1.19 g/ml，优级纯。 3.4浓硝酸：ρ（HNO3）= 1.42 g/ml，优级纯。 3.5硝酸溶液：1+1 量取100ml浓硝酸，缓慢倒入100ml水中。
病原微生物的检验项目及结果解释教程文件
病原微生物的检验项目及结果解释
病原微生物的检验项目及结果解释 微生物检查包括：细菌、真菌、衣原体、支原体及病毒等。这对于查明致病原因和选择用药十分重要。但除细菌和真菌外，直接查找方法比较复杂。细菌培养，采集血、痰、咽试子、大便、小便、创面分泌物等标本进行培养，看有无致病菌生长，正常应为阴性或少量非致病菌；真菌检查，标本涂片或培养，检出真菌为不正常。 病原微生物的检验主要是检测与l临床患者致病性有关的病原性微生物，对感染性疾病进行快速、准确地诊断，密切结合临床提出及时有效的治疗方案，防止微生物产生耐药性和医院内感染的发生。 基础知识 1.什么是微生物?什么是病原微生物? 微生物是需借助光学显微镜或电-y：显微镜放大观察到的结构简单，个体微小的生物的总称。微生物的种类很多，医学微生物尤其是临床微生物主要有细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体等。 微生物在自然界中广泛存在，与人类和自然界其他生物共生共存，绝大多数对人类和自然界是有益的，只有少部分可以引起人类和动植物发生疾病，这部分微生物才称为病原微生物，比如结核分枝杆菌可引起结核病，痢疾杆菌可以引起痢疾等。 2.什么是细菌?细菌分哪几种? 细菌是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。其体积微小，以微米作为测量单位，无色半透明，只有经过染色才能观察到细菌的轮廓及其结构。经革兰染色，可将细菌分为两大类，即革兰阳性菌和革兰阴性菌。细菌主要由细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等部分构成，有的细菌还有夹膜、鞭毛、菌毛等特殊结构。根据形状则可分为三类，即：球菌、杆菌和螺旋菌(包括弧形菌)。 3.什么是病毒?病毒分哪几种? 病毒是结构最简单、体积最微小(纳米)的一类非细胞型微生物，介于生命和非生命之间的一种物质形式，其必须严格寄生在活细胞内，含有单一种核酸即脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)的基因组和蛋白质外壳，没有细胞结构，对抗生素不敏感，但对于干扰素敏感。按传播途径病毒可分为呼吸道病毒、胃肠道病毒、经性传播感染的病毒和狂犬病毒等。按感染部位与症状特征则分为肝炎病毒、出血热病毒、疱疹病毒、侵犯神经系统的病毒和肿瘤病毒等。
硫柳汞中汞离子的检查方法
中国医药导报CHINA MEDICAL HERALD （下转第96页） 硫柳汞作为一种药用辅料，长期以来一直被用做生物制品包括许多疫苗的防腐剂，尤其用在多剂量反复取用的药剂瓶中[1]。目前，硫柳汞的安全性还存在争议。由于其生产制备工艺，贮存过程可能带来的游离汞离子具有不容忽视的毒副作用，比如急性中毒、神经系统毒性、肾损伤、免疫损伤、皮肤过敏反应、致癌、生殖胚胎毒性致畸等[2]，所以对其中游离汞离子的检查尤为重要。然而目前《中国药典》却没有收载硫柳汞的质量标准，《卫生部药品标准》二部第五册[3]中收录了硫柳汞的质量标准,是由上海市药检所于1996年起草的。本试验就硫柳汞中汞离子的检查项目，参照国内外的质量标准：《美国药典》第32版[4]、《英国药典》2008年版[5]及《欧洲药典》第6版[6]、《卫生部药品标准》二部第五册进行探讨,以确定硫柳汞中汞离子的检查方法。1仪器与试药1.1仪器 P221S 型电子天平（德国Sartorius 公司）；UV-2401PC 型紫外可见分光光度仪（日本岛津公司）。1.2试药 硫柳汞（北京益利精细化学有限公司，批号：20010226）；醋酸汞，碘化钾，硫化亚铁，氯化汞，均为分析纯。氨试液，稀盐酸为自制。2方法与结果 2.1《美国药典》方法 2.1.1碘试液精密称取碘化钾3 3.20g ，置100ml 量瓶中，加水75ml ，振摇使之溶解，加水至刻度，摇匀。 2.1.2对照品溶液制备精密称取氯化汞191.1mg ，置200ml 量瓶中，加水100ml 使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取上述溶液5ml 置50ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀（标准 溶液中氯化汞的浓度约为95.55μg/ml ）。 2.1.3供试品溶液制备精密称取硫柳汞500mg ，置100ml 量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀。A 液：精密量取供试品溶液10ml ，置50ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。B 液：分别精密量取供试品溶液10ml 和标准品溶液5ml ，置50ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。 2.1.4测定方法精密量取对照品溶液1ml 和碘试液5ml ，置10ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。在200～400nm 波长范围扫描，生成的四碘合汞配离子的最大吸收波长在323nm 处。取5个10ml 量瓶，编号分别为：C 、D 、E 、F 、R 液。C 液：精密量取A 液5ml ，加水稀释至刻度，摇匀；D 液：精密量取A 液5ml ，加碘试液稀释至刻度，摇匀；E 液：精密量取B 液5ml ，加水稀释至刻度，摇匀；F 液：精密量取B 液5ml ，加碘试液稀释至刻度，摇匀；R 液：精密量取碘试液5ml ，加水稀释至刻度，摇匀；以水为空白，在323nm 波长处分别测定C 、D 、E 、F 、R 液的吸光度。 2.1.5结果汞离子的百分浓度为200.59/271.50×5C/W ×Au/As ，其中：Au=A D -A R -A C ，As=A F -A R -A E -Au ，C 为对照品溶液中氯化汞的浓度（μg/ml ），W 为硫柳汞的重量（mg ）。200.59为汞的原子量，271.50为氯化汞的分子量。A C 、A D 、A E 、A F 、A R 分别为C 、D 、E 、F 、R 液的吸光度值。结果见表1。硫柳汞中游离汞离子的浓度平均值为0.60%。 2.2我国《卫生部药品标准》方法 2.2.1硫化氨试液的配置取氨试液60ml ，通入硫化氢使之饱和后，再加氨试液40ml ，按这个比例配制若干。硫化氢气体可以用硫化亚铁与稀盐酸反应制得，要求现用现配制。2.2.2操作过程称取硫柳汞0.1g ，加水10ml 溶解以后，置 硫柳汞中汞离子的检查方法 高岩1，郑帅2，裘一兰3 （1.大连市沙河口区医院，辽宁大连116021；2.大连市周水子国际机场医院，辽宁大连 116033； 3.大连市药品检验所，辽宁大连116021） [摘要]目的：建立硫柳汞中汞离子的检查方法。方法：采用紫外分光光度法进行测定。检测波长：323nm 。结果：通过对两种方法的检测灵敏度和限度进行比较，发现国外药典记载紫外分光光度法测定结果可准确的定量为0.60%。结 论：采用紫外分光光度法测定硫柳汞中汞离子的方法简单、方便，专属性好。[关键词]紫外分光光度法；汞离子；硫柳汞；测定[中图分类号]R927.2[文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2010）04（a ）-094-02 The method for determination of mercury ion in thiomersal GAO Yan 1,ZHENG Shuai 2,QIU Yilan 3 (1.The Hospital in Shahekou District,Dalian City,Dalian 116021,China; 2.The Hospital of International Airport in Zhoushuizi,Dalian 116033,China;3.Institute for Drug Control of Dalian City,Dalian 116021,China) [Abstract]Objective:To establish a method for the determination of mercury in thiomersalate by UV-spectrophotometric.Methods:UV-spectrophotometric was be used.The detection wavelength was at 323nm.Results:Compared with of sen -sitivities and limits of the two methods,we found that the limit concentration of mercury ion in sample was about 0.65%by the method listed in the Ministry of Health Drug Standard,which was nearly as the same as the concentration of 0.6%de -termined by UV-spectrophotometric.Conclusion:The method is fast,reliable,accurate and can be used in the quality control of mercury ion in thiomersalate. [Key words]UV-spectrophotometric;Mercury ion;Thiomersal;Contend detormination 94