百部组织培养中不定根的诱导
植物组培技术原理之生根培养
植物组培技术原理之生根培养当材料增殖到一定数量后，就要使部分培养物分流到生根培养阶段。
若不能及时将培养物转到生根培养基上去，就会使久不转移的苗子发黄老化，或因过分拥挤而使无效苗增多造成抛弃浪费。
根培养是使无根苗生根的过程，这个过程目的是使生出的不定根浓密而粗壮。
生根培养可采用1／2或者1/4MS培养基，全部去掉细胞分裂素，并加入适量的生长素(NAA、IBA等)。
诱导生根方法①将新梢基部浸入50或100×10-6I IBA溶液中处理4—8h；②在含有生长素的培养基中培养4-6d；③直接移入含有生长素的生根培养基中。
上述三种方法均能诱导新梢生根，但前二种方法对新生根的生长发育则更为有利。
而第三种对幼根的生长有抑制作用。
其原因是当根原始体形成后较高浓度生长素的继续存在，则不利于幼根的生长发育。
不过这种方法比较可行。
另外也可采用下列方法就可生根：①延长在增殖培养基中的培养时间；②有意降低一些增殖倍率，减少细胞分裂素的用量(即将增殖与生根合并为一步)；③切割粗壮的嫩枝在营养钵中直接生根，此方法则没有生根阶段。
可以省去一次培养基制作，切割下的插穗可用生长素溶液浸蘸处理，但这种方法只适于一些容易生根的作物。
另外少数植物生根比较困难时，则需要在培养基中放置滤纸桥，使其略高于液面，靠滤纸的吸水性供应水和营养，从而诱发生根。
从胚状体发育成的小苗，常常有原先已分化的根，这种根可以不经诱导生根阶段而生长。
但因经胚状体途径发育的苗数特别多，并且个体较小，所以也常需要一个低浓度或没有植物激素的培养基培养的阶段，以便壮苗生根。
试管内生根壮苗的阶段，为了成功地将苗移植到试管外的环境中，以使试管苗适应外界的环境条件。
通常不同植物的适宜驯化温度不同。
如菊花，以18～20℃为宜。
实践证明植物生长的温度过高不但会牵涉到蒸腾加强。
而且还牵涉到菌类易滋生的问题。
温度过低使幼苗生长迟缓，或不易成活。
春季低温时苗床可加设电热线，使墓质温度略高于气温2～3℃，这不但有利于生根和促进根系发达，而且还有利于提前成活。
百合的组织培养
百合的组织培养【摘要】将百合鳞片的不同部位接种于加油不同激素和不同浓度BA和NAA 的6种培养基上，一周后接种的百合鳞片开始变绿，2周后，鳞片的受伤部位出现绿色的愈伤组织,，再经2—3周培养，产生愈伤组织的部位逐渐形成小鳞茎，并开始有叶片长出。
其中2号培养基MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L的分化率最高。
实验结果表明，鳞片的不同部位分化能力也有差异，其中下部分化效果最好；激素6-BA和NAA浓度的配比，与鳞片分化小鳞茎的速度、数量和质量有着重要的关系。
【关键词】百合；鳞茎；组织培养1.百合的简介百合是百合科百合属（LiliumL.）各个种、杂交种、园艺品种的总称。
它是著名的球根花卉，其地下部分为众多肥厚鳞片组成的鳞茎。
百合花花姿优美，花大色艳，历来深受世界各国人民的喜爱，为世界名贵切花之一，广泛用于盆栽、花坛、花境及专类园。
从考古文物中发现百合花用作观赏已有三千六百五十多年的历史。
此外，多种百合的鳞茎、茎、花、种子均可入药，百合的鳞茎及花营养丰富，可制作多种美味佳肴。
芳香的百合可提取芳香油制成香料。
全世界百合属植物约一百种，起源于我国的就有四十七种和十八个变种，占世界百合属植物的一半以上。
1.1实验目的和意义传统的花卉繁殖是靠播种、扦插、分株、压条、嫁接这些措施来实现的，然而在花卉业迅猛发展的今天，传统的育种技术已经无法满足生产需要，因而人们对花卉的繁殖技术提出了更高的要求。
在世界各国植物生理工作者的努力下，利用组织培养进行花卉繁殖的技术日趋成熟。
目前已有很多花卉可以利用组织培养为花卉提供种苗。
今天，我们所享用的花卉产品之所以能够如此之高的品质，与花卉组织培养的应用不无关联。
百合植物资源丰富，栽培历史悠久，花色多样，它不仅适用于庭院栽培，布置花境，也可盆栽观赏，并早已成为花卉研究领域的佼佼者。
百合虽然观赏性很高，但大多抗性很弱，尤其抗寒性。
一般在东北地区种植商品百合时，每年秋季必须起球，窖藏或者冷库存放，这大大增加了百合的生产成本，限制了东北地区花卉业的发展。
百部种植技术百部种植技术和产量(最新)
1．选地整地选择肥沃的、土层深厚的、排水良好的、疏松的砂质壤上种植，地选好后，清理场地、杂草根、大石块，深翻30厘米，耕细，做畦，畦宽120厘米，整平畦面。
2．繁殖方法百部可用种子繁殖，很方便。
也可用分株繁殖，利用分株繁殖地下块根长得快，能提前采收。
种子繁殖：用种子繁殖可分春季播种和秋季播种，秋播比春播好，出苗早，出苗率高。
春播北方在4月份左右，南方在3月份左右进行。
育苗分条播和穴播。
条播：按行距6～10厘米开沟，把种子均匀撒人沟土，覆土3～4厘米，播后浇水，用草覆盖苗床，经常浇水，保持土壤湿润。
幼苗高9～12厘米时移栽，按行株距24厘米Х18厘米移栽。
在播种育苗时可在畦沟内播种玉米一行。
穴播：按株行距15厘米Х24厘米开穴，3厘米深，每穴播种子5-6粒，覆土1.5厘米，盖稻草、麦草或薄膜，每公顷播种量15～22．5千克。
当8～9月采种后，南方立即进行秋播，行距24厘米开3厘米沟，把种子均匀播入沟中，覆土4～5厘米厚，每公顷约用种子30-45千克。
分株繁殖：在春天萌动之前（3月左右）或结合收获时选二年以上的植株，挖出地下根茎，剪除病根，剪残断根，大个的根作药用。
剪大块根时，不能单剪大的块根，上面未膨大的一小段也要剪净。
根茎部不需要的部分也要除去，细小的块根不要剪。
取上部根芽，按大小分成3～5株，每株要有芽2-3个，块根2-3个，作繁殖材料。
在整好的地里按行株距24厘米*18厘米，穴深15～18厘米栽植，使芽和土面垂直，先覆少量土使根部固定，再放少量土肥，覆土，浇水，覆少量上形成隔墒层。
2～3周即出苗。
栽后2—3年以上,采挖地下块根。
先选无病,粗壮植株留作种用，再将其它根处理。
百部两年生株产鲜品6kg，三年生株产鲜品平均10kg、种植的第3年进入旺盛生长期，四年生达15kg，一亩种植1200株左右，一亩可以达到四万元的效益。
百部，别称：百部草，婆妇草，药虱药。
为百部科植物"蔓生百部"的根，以块根入药。
园艺生物技术复习题及答案
植物组织培养部分7、与常规苗相比，试管苗具有哪些特点？(1)生长细弱；(2)光合作用差(3)叶片气孔数目少，活性差(4)根的吸收功能弱(5)对逆境的适应和抵抗能力差8、简述原生质体作为遗传操作和生理生化研究的材料有何特点？（1）没有细胞壁，有利于体细胞融合、体细胞杂交、基因转移和单细胞培养。
（2）原生质体能比较容易摄取外来的遗传物质。
基本概念1、植物组织培养(plant tissue culture)：是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称，也叫植物克隆。
亦称为离体培养或试管培养。
2、脱分化（dedifferentiation）：将已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。
一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化。
3、再分化（redifferentiation）：经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型，形成完整植株的过程。
4、外植体(explant)：由活体（in vivo)植物体上切取下来的，用于组织培养的各种接种材料。
包括各种器官、组织、细胞或原生质体等5、愈伤组织(callus)：在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。
6、器官发生(organ genesis)：由愈伤组织或外植体诱导形成不定根或不定芽，再获得再生植株的方法。
7、胚状体发生(embryo genesis)：是指在组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成具有双极性的胚状结构，而发育成再生植株的途径。
8、细胞全能性（cell totipotency）：即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。
9、母液（mother liquid）：是欲配制液的浓缩液。
配成比所需浓度高10-100倍。
百合的组织培养
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温度：20-25℃ 光照：800-1200lx 每天9-14h照明 培养基：pH5.6-5.8
培养条件
根的培养
• 以毛百合为材料，在MS+NAA0.50.1mg/L 培养基上，形成肿胀的粗根， 将其切成小段 MS上进行培养，便能分化出苗。 • 毛百合试管苗5-6个月，能形成直径
17mm左右的鳞茎，移栽后成活情况良
好。
胚培养
• 在杂交育种工作中， 为防止杂种胚和母体 胚乳间不亲和，有可 能造成胚败育的情况 下，可采取胚培养， 以克服不亲和现象， 有利于育种工作的顺 利进行。 培养时仍以MS培养基较好，糖浓度是种类而异 常在20-40之间pH5.0较为适宜，NAA用量只宜 在0.1-0.001之间。加入适量BA有利于幼胚成活， 高BA会抑制胚根的产生，并促进胚组织愈伤组 织化，通常MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培养 促进愈伤组织生长，然后将长大的愈伤组织转移 到1/2MS不加任何激素的培养基上，约2个月后，
快速繁殖的实例
• 把最初培养得到的小鳞茎，每两个月用 20x90mm的培养皿，加入MS+NAA0.1+蔗 糖9%+活性炭0.5%的琼脂培养基，继代一 次。2个月后奖得到的小鳞片切割，转移到 MS+KT10的培养基上培养，给予25℃和 2.5w/㎡的连续光照。在经过2 个月在原小 鳞片的表面再生出无数成堆的、新的小鳞 片。再将这些成堆的小鳞片转移到加 100mLMS液体培养基的300mL锥形瓶中， 25℃,0.5w/ ㎡连续光照的条件下，用 180r/min的旋转摇床摇动培养1个月。这种 条件证明最适宜小鳞片的快速增长，所得 的小鳞片用于培养形成小鳞茎。
可形成大量的不定芽，延长培养时间，就会生根，
植物组织培养在实际当中的应用
植物组织培养在实际当中的应用简介：德国植物学家哈伯兰特(Haberlandt)在细胞学说的基础上，大胆提出要在试管中人工培育植物。
他预言离体的植物细胞具有发育上的全能性，能够发育成为完整的植物体。
这种细胞全能性理论是植物组织培养的理论基础。
细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，因此在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
这个概念虽然在本世纪初已经提出，但在当时的技术条件下，在实践上并没做到，经过几十年来组织培养技术的不断改进，目前细胞的全能性不但在理论上完全被证实，而且为组织培养在实践上的应用奠定了基础。
植物细胞要表现出全能性，须经过几个步骤：成熟细胞→分生细胞→胚状体→完整植株。
成熟细胞→愈伤组织→出根出芽→完整植株。
脱分化也就是已经分化定型的细胞，经过诱导成为重新恢复了分裂能力（也就是成为分生状态）细胞的过程。
关键字：脱分化,愈伤组织,原生质体,脱毒苗,培养基19世纪30年代，德国植物学家施莱登(M.J.Schleiden，1804—1881)和德国动物学家施旺(T.Schwann,1810—1882)创立了细胞学说，根据这一学说，如果给细胞提供和生物体内一样的条件，每个细胞都应该能够独立生活。
1902年，德国植物学家哈伯兰特(Haberlandt)在细胞学说的基础上，大胆提出要在试管中人工培育植物。
他预言离体的植物细胞具有发育上的全能性，能够发育成为完整的植物体。
这种细胞全能性理论是植物组织培养的理论基础。
细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，因此在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
这个概念虽然在本世纪初已经提出，但在当时的技术条件下，在实践上并没做到，经过几十年来组织培养技术的不断改进，目前细胞的全能性不但在理论上完全被证实，而且为组织培养在实践上的应用奠定了基础。
植物细胞要表现出全能性，须经过几个步骤：成熟细胞→分生细胞→胚状体→完整植株。
百合的组织培养
百合的组织培养一、百合叶片的组织培养(一)外植体百合鳞茎。
(二)灭菌方法取百合花茎于洗涤灵液中浸泡20min, 自来水冲洗20 min, 离花茎叶片基部上下各0.2cm 左右, 剪取0.5cm 带叶片茎段。
自叶片基部留叶片长1.5~ 2.0cm, 剪去以上大部叶片, 于0.1% 农用链霉素水溶液中浸泡1h, 自来水冲洗20 min; 无菌条件下, 75% 酒精处理2~ 3s; 0.1% 升汞溶液处理3~ 4 min, 无菌水洗5~ 6 遍, 备用接种。
(三)发育途径将叶片茎段接种于诱导分化培养基, 待诱导出芽后将芽接种于增殖培养基, 最后增殖芽进行生根诱导。
(四) 培养基以MS 和LS 为基础培养基, 细胞分裂素采用BA, 生长素采用NAA, 以二者不同浓度和比例制成诱导分化培养基和芽增殖培养基, 探求基础培养基MS 和LS 及不同浓度激素及其配比对新普百合诱导分化和不定芽增殖的效果。
生根培养基采用LS, 培养基中添加不同浓度生长素、活性炭, 研究生长素浓度及活性炭对生根苗的影响。
培养基均添加琼脂7g / L。
在103kPa、121℃条件下灭菌15min。
(五)培养条件培养室温度( 25±1℃) , 相对湿度60%~ 70% , 光强1800~ 2500lx , 光照每天12h。
(六)讨论愈伤组织的诱导及不定芽的分化设计8 种起始诱导培养基, 每种培养基接种50 片叶。
接种后, 在适宜培养基上, 15 天左右可见叶片基部膨大隆起, 继而生出黄绿色愈伤组织,20 天左右可长至0.5cm3 , 并生出绿色芽点后分化出芽, 50 天左右可长至2~ 3cm。
统计愈伤组织及不定芽诱导状况。
结果表明, 经50 天的培养后, 单一使用细胞10分裂素的处理效果不佳, 愈伤组织诱导率、不定芽分化率均较低。
因此在新普百合的诱导培养中需细胞分裂素( BA) 和生长素( NAA) 配合使用。
当BA 浓度较高时, 有利于愈伤组织的形成, 不利于不定芽的分化。
兰州百合鳞茎不定芽诱导和植株再生
ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｉ ｔ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｏ ｆ ｔ ｅ ｓ ｔ ｔ ｕ ｂ ｅ ｓ ｅ ｅ ｄ ｌ ｉ ｎ ｇ ｓ ． ｈｅ Ｔ ｐ ｌ ｎｔ ａ ｌ ｅ ｔ ｓ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｆ ｅ ｒ ｒ ｅ ｄ ｔ ｏ １ ／ ２ ＭＳ ｎｄ ａ Ｓ Ｍ ａ ｓ ｈｅ ｔ ｂ ａ ｓ ｉ ｃ ｍｅ ｄ ｉ ｍ ｕ ｓ ｕ ｐ ｐ ｌ ｅ —
芽的 生长 受到抑 制 ； 增 殖试验 中 ， Ｎ Ａ Ａ与 ６一Ｂ Ａ配合使 用 ， 可提 高芽的增 殖 率 ， 而且 新 芽产生 时 间早 ， 增 殖 倍 数 高； １ ／ ２ ＭＳ和 ＭＳ培 养基 中 Ｎ Ａ Ａ 可 以提 高百合 幼苗 生根 率 ， ６一Ｂ Ａ则 明显抑 制生根 量 。结论 ： 兰州 百 合 鳞 茎 片 不 同部 位 诱 导 丛 生 芽 的 诱 导 率 顺 序 为 下部 ＞中部 ＞上 部 ； 经炼苗移栽 ， 再 生 株 成 活 率 可 达
安徽科技学 院学 报 ， ２ ０ １ ６ ， ３ ０ （ ６ ） ： ２ ６— ３ １
Ｊ ｏ ｕ ｎａ ｒ ｌ ｏ ｆ Ａｎ ｈ ｕ ｉ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ
兰州 百 合鳞 茎不 定芽 诱 导和 植 株再 生
１ ００％ 。
关键 词 ： 百合 鳞 茎 ； 不 定芽诱 导 ； 植株 再 生
中图分 类号 ： Ｑ ８ １ ３ ． １ ＋ ２ 文献 标识 码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ６ ７ ３— ８ ７ ７ ２ （ ２ ０ １ ６ ） ０ ６— ０ ｏ ２ ６— ０ ６
Ａｄ ｖ ｅ ｎ ｔ ｉ ｔ ｉ Ｏ ｔ Ｉ Ｓ Ｓ ｈ ｏ ｏ ｔ ｓ Ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ Ｐ ｌ ａ ｎ ｔ Ｒｅ ｇ ｅ ｎ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
生根配方实例
生根配方实例一、嘲哚乙酸吲哚乙酸是最早应用于农业上的生根剂，主要是促进不定根的产生，但因其在植物体内易降解而未成为常用商品。
目前市场商品有：1、50%吲乙萘乙酸可溶性粉混剂中吲哚乙酸含量为30%，此混剂可诱导不定根的生成，又能刺激作物的根系发育。
其使用方法：在花生、小麦上拌种使用浓度为20-30ppm；促沙棘扦插生根使用浓度为l00-200ppm。
2．吲哚乙酸+恶霜灵此混剂主要在水稻秧苗上使用，以吲哚乙酸(lOppm)+恶霜灵(lOppm)的浓度在移栽前几天淋浇秧苗，可明显促进秧苗移栽后生根、缓苗。
3．吲哚乙酸+邻苯二酚有研究表明，邻苯二酚可有效抑制植物体内吲哚乙酸氧化酶的生物活性，从而使吲哚乙酸充分发挥其诱导生根的作用。
两者混用浓度为吲哚乙酸lOppm+邻苯二酚5、Sppmo4．吲哚乙酸+糖精有实验结果表明，以吲哚乙酸200ppm+糖精l9ppm在菜豆，蔷薇幼苗上使用，可明显促进幼苗的侧根生成。
二、萘乙酸钠 a~萘乙酸钠是常用生根剂，可用于浸种、沾根，浸插枝，具有增加直根数最的作用。
罄独使用时浓度较大，但其生根效果烈好，但在高浓度下有抑制地上茎、枝生长的副作用，一般建议与复硝酚钠、维生素B等混用，使生根早。
生根多、地上部与根部干重也增加。
市场常见商品配方如下：1．复硝酚钠／维生素B+a-荼乙酸钠此混剂是最常用的生根配方之一，和复硝酚钠复配使用，既降低厂萘乙酸钠的使用浓度，又在保证生根效果的基础上，避免抑制地上苗生长的副作用。
混剂-般按2：1比例应用，可用于拌种、浇灌、喷施、扦插处理等方面。
2．a-萘乙酸钠+萘己酰胺+硫脲它们在混剂中浓度分别为20ppm、18ppm、93ppm，添加载体制成可溶性粉剂，可用于苹果、梨。
桃、葡萄及--赏植物的扦插生根。
3．a-萘乙酸钠+吲哚丁酸此混剂是世界上应用最广泛的生根剂，常以低浓度浸泡或高浓度浸蘸使用，可促进多种植物的扦插生根，早生根、多生根。
目前国内登记剂型有500%吲丁萘乙酸可溶粉剂（萘乙酸含量为10%）；10%吲丁萘乙酸可湿性粉（萘乙酸含量为2%）；2%吲丁萘乙酸可溶粉剂（萘乙酸含量为1%）；1、05%吲丁萘乙酸水剂（萘乙酸含量为O、2%）。
百香果离体组织培养再生技术研究
2023年第22期现代园艺百香果（.）是西番莲科西番莲属藤本植物，是热带、亚热带地区重要的经济作物，也是深受消费者喜爱的水果之一，目前，在我国广西、广东、台湾、福建、云南、海南等地区都有广泛栽培。
在生产中，百香果常由于茎基腐病、炭疽病、疫病、病毒病等病害的发生而导致严重减产[1]，造成生产效益降低。
而百香果生产繁殖以扦插、嫁接方式为主，利用无性繁殖方法会加大病毒感染风险，导致苗木品种性状逐渐退化[2]。
因此，培育健康苗木成为百香果产业生产的重中之重。
采用组织培养器官不定芽途径的技术路线，即在百香果带腋芽茎段中直接分化出不定芽，通过继代培养，使芽快速增殖而再生出完整植株的组培类型。
先在生长健康的百香果植株上，将带腋芽茎段部位作为外植体，消毒后通过初代培养诱导不定芽。
再经过继代增殖培养，将不定芽培养成健壮的无菌苗，进而通过诱导生根培养，将小苗培养成完整的植株。
最后通过驯化炼苗，得到健壮的百香果再生植株。
1材料与方法1.1试验材料紫果西番莲（）品种‘台农一号’，取材于广东省龙门县瑶佳丰农业有限公司的百香果生产基地。
1.2试验方法1.2.1外植体选择与预处理。
为筛选最佳的诱导器官不定芽的百香果组织培养外植体，在龙门县瑶佳丰农业有限公司的百香果生产基地温室大棚内，选取大棚植株茎尖、茎段、带腋芽茎段（茎节）、叶片4个部位器官作为外植体（见图1A），在龙门县上东村佳兆业乡村试验室内开展试验。
预处理：配制500倍液的多菌灵溶液，将修剪好的外植体置于其中浸泡15min，再用自来水缓流冲洗5h后，分别接种10瓶，每瓶6个外植体，重复3次，在相同培养条件下，于2周后统计外植体的成活率、污染率、出芽率，并记录外植体生长状况。
1.2.2培养基配置、培养条件以及消毒方法。
采用含有植物激素的固体MS培养基作为基本培养基，蔗糖含量20g/L，琼脂含量初代、继代培养为7.0g/L，生根培养为6.5g/L。
根据试验方案，加入不同组合配比的细胞分裂素、生长素等植物激素，使用NaOH溶液或HCl溶液，将pH 值调至5.85~5.95，并通过121℃、30min高压高温灭菌处理。