鱼的急性毒性实验设计
鱼类急性毒性实验
实验前24 h停止喂饲，每天清除粪便及食物残渣。驯养期间 死亡率不得超过10％，如果超过10％，则该批鱼不得用作实 验。
实验鱼应无明显的疾病和肉眼可见的畸形。
实验前两周内不应对其做疾病处理。
八、讨论与思考
1. 干扰鱼类LC50正常测定的因素有哪些？
2. 对一化学性质稳定的物质而言，试推测用
静态法、半静态法或动态法测定其对鱼类
(3) pH：6.0～8.0。
(4) 为避免对实验鱼不必要的扰动，实验液中溶解氧 > 4 mg/L。 (5) 水量：每克鱼0.5 L水以上。
2. 选自同一驯养池中规格大小一致的幼鱼。
实验前该鱼群应在与实验时相同的环境条件下，在连续曝气
的水中至少驯养两周。驯养期间每天投饵1次，每天换水1～
2次。
(2) 至少取6个容器，均加入标准稀释水。
其中一个为空白实验即对照实验， 以得到所要求的浓度范围。
表1 实验设计
浓度对数 1.00 0.80 0.60 0.40 0.20
其余容器中加入不同量的储备溶液， 浓度系列(mg/L) (3) 向每个容器中放入10尾或更多的实 验鱼。每个容器设3个平行样。
害的危险性；
阐明受试化合物急性毒性的剂量－反应关 系与中毒特征。
二、实验内容
根据静态测定法，用鲤鱼为试验生物测定
毒物在48 h后引起受试鲤鱼群体中50％鱼致
死的浓度。
在24 h，48 h记录试验鱼的死亡率，确定鱼 类死亡50%的受试物浓度，用LC50表示。
三、实验原理
急性毒性是指机体(人或实验动物)一次(或24 h内多次)接触 外来化合物之后所引起的中毒效应，甚至引起死亡。
斑马鱼LD50鱼类（斑马鱼）急性毒性（重铬酸钾）实验报告
斑马鱼LD50鱼类（斑马鱼）急性毒性（重铬酸钾）实验报告鱼类(斑马鱼)急性毒性(重铬酸钾)实验报告⼀、实验⽬的与实验要求1、通过本实验，熟悉和掌握急性毒性试验的设计、条件、操作步骤，以及试验结果的计算、分析和报告等全过程。
2、掌握常⽤的动物染毒途径和⽅法。
掌握急性毒性实验设计，操作⽅法，结果判定。
3、了解⼀次或24⼩时内多次给予受试化学物后，动物所产⽣的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因，观察受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死量。
能较熟练地计算出LC50及毒性判定。
4、对⽐观察毒物对斑马鱼的作⽤。
5、体验开放式实验教学，培养⽣物实验意识，提⾼学习的主动性、获取实验知识的能⼒和撰写实验报告⽔平。
⼆、实验⽅案1、实验仪器天平、⼿套、50mL烧杯、量筒、培养⽫、鱼缸、曝⽓装置2、实验药品斑马鱼100条、重铬酸钾、鱼⾷3、实验原理(1)⽅法的设置鱼类毒性实验⽅法可以分为静态法和动态法两⼤类。
本实验采⽤静态法，以96⼩时为⼀试验周期，在24、48、72、96⼩时记录斑马鱼的死亡率，确定斑马鱼死亡50%时的受试物浓度。
半数致死浓度⽤24h LC50、48h LC50、72h LC50和96h LC50表⽰，并记录⽆死亡的最⼤浓度和导致鱼类全部死亡的最⼩实验浓度。
(2)受试药物受试毒物要为常见毒物，并在⽔体中会存在，对鱼类养殖的影响较为严重。
另外受试毒物在⽔中应要稳定，不易分解，易溶解等。
(3)受试鱼类实验鱼类⼀般选择对污染物敏感，在⽣态类群中具有代表性，经济价值⽐较⾼，来源丰富、取材⽅便、遗传稳定，⽣物学背景资料丰富，⼤⼩适中，在室内条件下易于饲养和繁殖的种类。
斑马鱼是国际上通⽤的鱼类急性毒性实验鱼种。
建议的实验温度21-25℃，建议实验鱼的全长2.0?1cm。
(4)研究意义鱼类是⽔⽣⾷物链的顶级⽣物，也是⽔体中最为重要的经济动物。
在污染⽔体中，当污染物达到⼀定浓度时，就会引起鱼类各种中毒反应，例如⾏为失常，组织器官病变，⽣理功能紊乱乃⾄死亡。
氨氮对草鱼幼鱼的急性毒性试验
表１ 氨 氮对 草鱼 幼鱼 的急性 毒性 试验 （ 平均 数 ±标 准 差 ，重 复数 ＝３ ） 非 离子 氨 总氨氨 浓度（ 毫 浓度 （ 毫 克／ 升） 克／ 升） ２ ４ 小 时 死 亡率 （ ％ ）
４ ８ 小 时 ７ ２ 小 时 ９ ６ 小时
式 ，非 离子氨 的毒性 是离子铵 毒性 的 ３ ０ ０ 倍 。Ｎ Ｈ 不
度组 的草鱼行为变化不 明显 ，而试验鱼接触高浓度氨 氮后，鱼苗开始急躁不安 ，随 即行动减缓 、侧游 、侧 翻 ，且体色变淡 ，出现 陆续死亡现象 ，死亡后 ， 口和
鳃盖张开 。
能渗过 生物表面 ，因此它对生物无 明显 的毒害 。以前 关于氨 的毒性 ，常 以总氨 （ Ｎ Ｈ 。 ＋Ｎ Ｈ ） 的浓度 表示 ，然 而在 ｐ Ｈ 值等 水质条件 不 同时 ，即使总氨 量一样 ，毒 性也 可能相差很惊人 ，而非离子氨浓度表示毒性 ，就
通过 ｐ ｒ ｏ ｂ ｉ ｔ 法 分析 得 出半致死 浓度 和 安全浓 度
结果见表 ２ 。草鱼 幼鱼在 ２ ４ 、４ ８ 、７ ２ 、９ ６ 小 时非离子 氨 半致 死浓 度 分别 为 ： １ ． １ ５ 、０ ． ８ ５ 、０ ． ６ ８ 、０ ． ４ ７ 毫
供准确 的基础数据 。
一
、
材 料 与方 法 省水产科学研 究所 同
批孵 化的鱼苗 ，在室外水 泥池暂养 ２ 周 ，日投喂饲料
两次 （ ８ ： ０ ０ 、１ ６ ： ０ ０ ） ，基本饱 食 ，暂 养期 问为 自然光 照 ，正式试验前饥饿 ２ ４ 小时 。 整 个 试 验 期 间温 度 为 （ ３ ３± １ ） ℃ ，ｐ Ｈ （ ７ ． ２ ±
安全浓度计算公式：
（ Ｓ ｃ ） ＝９ ６ Ｌ Ｃ 。 ×０ ． １
鱼的急性毒性试验
鱼的急性毒性试验一、实验目的和要求：通过本试验，熟悉和掌握鱼类急性毒性试验的设计、条件、操作步骤，以及试验结果的计算、分析和报告等全过程。
二、实验原理：鱼类对水环境的变化反应十分灵敏，当水体中的污染物达到一定程度时，就会引起一系列中毒反应，例如行为异常、生理功能紊乱、组织细胞病变直至死亡。
在规定的条件下，使鱼接触含不同浓度受试物的水溶液，实验至少进行24h，最好以96h为一个实验周期，在24h、48h、72h、96h时记录实验鱼的死亡率，确定鱼类死亡50%时的受试物浓度。
鱼类毒性试验在研究水污染及水环境质量中占重要地位。
通过鱼类急性毒性试验可以评价受试物仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效成都，也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。
三、实验材料：1.实验鱼的选择和驯养12×6 小锦鲤鱼体长7-12cm 体宽3-5cm 体重 7-12g不同浓度的苯酚（mg/L）0、24、48、96、192、3842、实验仪器设备（1）实验容器实验容器一般用玻璃或其他化学惰性材质制成的水槽。
容器体积可以根据试验鱼的体重确定，通常以每升水中鱼的负荷不得超过2g（最好为1g）。
一些小型鱼类幼鱼可选择500ml 或1000ml烧杯为实验容器。
容器的深度必须超过16cm，水体表面积越大越好。
同一实验应采用相同规格和质量的容器。
为防止鱼类跳出容器，可在容器上加上网罩。
实验容器使用后，必须彻底洗净，以除去所有毒性残留物。
（2）其他吸光光度计3、实验用水：曝气水四、操作步骤：1、设置5个浓度组，1个空白对照组，选择不同浓度的苯酚（mg/L）0、24、48、96、192、384。
每个浓度放入12条小锦鲤鱼。
采用直接投毒方式，将配制的苯酚溶液直接倒入水槽中，搅拌均匀。
分别分为1、2、3、4、5、6组。
染毒后观察其活动状况，并每隔两个小时观察其生长活动、记录鱼死亡数量。
在72h 后检查受试鱼的状况。
鱼类急性毒性试验 水环境保护课件
4、停食: 试验前24h停食.
（六）预备试验
• 预备试验:从最高全存活浓度及最 低全死亡浓度之间,选择下一步正 式试验的浓度范围。
• 以10为公比作为间隔: • 如：1－0.1－0.01－0.001mg/L; • 每缸中置3－5尾鱼,时间为24－48h.
（七）正式试验
1、 用软网将鱼捕出后，随机放入每 个浓度组,每试验鱼10尾。
10
0
•
3.5
0
•
1
0
•
0.35
5
•
0.035
5
•
0.01
5
• 因此进行正式试验的浓度范围
应为0.35-1%.
正式 试 验 结 果
浓度 123Fra bibliotek4T
P
%
0
5
5
5
5
20 0
0.35 5
5
3
4
17 15
0.48 2
2
4
3
12 40
0.62 3
1
1
2
7
65
0.80 1
6
2
1
4
80
1.0 0
0
0
0
1
90
T是试验结果时，每种浓度中活动的大型溞总数。
实验斑马鱼的急性毒性实验
实验斑马鱼的急性毒性实验xx年xx月xx日•实验准备•实验方法•实验结果•实验结论目录01实验准备1实验设备23用于养殖斑马鱼的实验器皿，应选择适合斑马鱼体型大小的器皿。
实验室器皿为了保持实验环境中的温度稳定，需要使用恒温设备，如恒温水浴或恒温箱。
恒温设备显微镜或放大镜等观察设备，用于观察斑马鱼的生长状况和行为变化。
观察设备选择健康、无损伤的斑马鱼鱼种，年龄和体重均应符合实验要求。
实验鱼种使用清洁、无污染的养殖用水，并经过充分曝气和过滤，以保证水质良好。
养殖用水实验动物受试物质对照物质饲料和水质改良剂用于比较实验结果的空白对照或标准对照。
用于维持斑马鱼生命活动的必要物质。
03实验材料02 01待测试的化学物质或药物。
02实验方法评估目标化合物对斑马鱼的急性毒性作用，了解其安全浓度范围。
实验设计实验目的健康成年斑马鱼，体重相近，年龄相同。
实验动物设置多个浓度组，如0（对照组）、0.1mg/L、1mg/L、10mg/L、100mg/L等。
实验分组实验过程准备实验所需器材和试剂，设置不同浓度的目标化合物。
实验准备受试动物观察指标实验时间将斑马鱼暴露在不同浓度的目标化合物中。
观察并记录每组斑马鱼的死亡率、行为变化、呼吸频率等指标。
设定实验时间为24小时，根据需要可适当延长。
整理实验数据，包括各浓度组死亡数、行为变化等指标。
数据整理计算半数致死浓度（LC50）等毒性指标，评估目标化合物的毒性作用。
数据分析绘制浓度-效应曲线，直观展示化合物对斑马鱼的毒性作用。
结果呈现数据分析03实验结果实验数据记录•实验日期：2023年3月1日•实验地点：实验室1号水族箱•实验温度：25±1℃•实验时间：24小时•实验动物：成年斑马鱼（50±5g）•实验溶液浓度：0（对照组），0.1，0.5，1.0，2.0mg/L •实验记录员：张三数据分析结果•死亡率统计•对照组：0%•0.1mg/L组：10%•0.5mg/L组：30%• 1.0mg/L组：60%• 2.0mg/L组：100%•中毒症状观察•对照组：无异常•0.1mg/L组：鱼体活动稍显迟缓，呼吸频率增加•0.5mg/L组：鱼体活动明显迟缓，呼吸急促，部分鱼体出现失衡• 1.0mg/L组：鱼体活动严重受限，呼吸急促，部分鱼体出现侧翻和抽搐现象• 2.0mg/L组：鱼体全部死亡，未观察到呼吸和活动现象//example/file/acute_toxicity_table.xlsx)（请点击链接查看）[急性毒性实验结果统计表.xlsx](https//example/file/acute_toxicity_chart.png)（请点击链接查看）[急性毒性实验结果柱状图.png](https 结果图表展示04实验结论实验目的本实验旨在研究不同浓度梯度的重金属对斑马鱼急性毒性的影响，以评估重金属的毒性作用和安全阈值。
鱼类的急性毒性实验推选PPT资料
3
选用的试验鱼在试验前必须在实验室内经过驯养，使 之适应实验室条件的生活环境和进行健康选择。驯养鱼应 该与试验相同水质水温的水体中至少驯养7d，使其适应试 验环境，不应长期养殖（＜2个月）。驯养期间，应每天换 水，可每天喂食1-2次，但在试验前一天应停止喂食，以免 试验时，剩余饵料及粪便影响水质。驯养期间试验鱼死亡 率不得超过5％，否则，可以认为这批鱼不符合试验鱼的要 求，应该继续驯养或者重新更换试验鱼进行驯养。
溶解氧测定仪、水硬度计、温度控制仪、pH计、分析 天平。
3
3．实验用水（稀释水）及水质条件 用来驯养和配置实验液的水，必须是未受污染的清
洁水。一般可采用天然河水、湖水或地下水，但需过滤 以除去大的悬浮物质。也可用自来水代替，但必须进行 人工曝气或放置3d以上脱氯。如果试验目的是评价工业 废水或化学物质对接纳水体的影响时，则最好采用接纳 水体的污染源上游水作为试验用稀释水。蒸馏水不适合 做稀释水，因为蒸馏水中已除去了自然界水中的盐类， 与实际差距太大，另外由于蒸馏器的影响，有时使蒸馏 水中带有对鱼类不利的金属离子，影响试验结果。
试验结束时，对照组的死亡率不得超过10％。
最好是当年生。鱼的平均体长以7cm以下为合适。金 如果试验目的是评价工业废水或化学物质对接纳水体的影响时，则最好采用接纳水体的污染源上游水作为试验用稀释水。
容器体积可根据试验鱼的体重确定，通常以每升水中鱼的负荷不得超过2g（最好为1g）。
在24h、48h、72鱼h、9体6h后短检查、受试身鱼的状宽况。，一般以3cm以下较为合适。同组鱼中 最大的体长不应超过最小的体长的倍。
3
（2）pH 水的pH与水生生物的代谢作用有密切关系。对毒
物的毒性作用也有一定的影响。因此，在实验中应维 持pH在鱼类适宜范围内。一般实验液的pH在～为宜。 如需调节pH，可用1M或的HCl和NaOH来调节受试物 贮备液的pH。调节贮备液的pH时不能使受试物浓度 明显改变，或发生化学反应或沉淀。 （3）溶解氧
鱼的急性毒性试验
三、实验材料：
1. 实验鱼的选择和驯养
12×6 小锦鲤鱼 体长 7-12cm 体宽 3-5cm 体重 7-12g 不同浓度的苯酚（mg/L）0、24、48、96、192、384
2、实验仪器设备
（1）实验容器 实验容器一般用玻璃或其他化学惰性材质制成的水槽。 容器体积可以根据试验鱼的体 重确定， 通常以每升水中鱼的负荷不得超过 2g （最好为 1g） 。 一些小型鱼类幼鱼可选择 500ml 或 1000ml 烧杯为实验容器。容器的深度必须超过 16cm，水体表面积越大越好。同一实验应 采用相同规格和质量的容器。 为防止鱼类跳出容器， 可在容器上加上网罩。 实验容器使用后， 必须彻底洗净，以除去所有毒性残留物。 （2）其他 吸光光度计
3、实验用水：
曝气水
四、操作步骤：
1、设置 5 个浓度组，1 个空白对照组，选择不同浓度的苯酚（mg/L）0、24、48、96、 192、384。每个浓度放入 12 条小锦鲤鱼。采用直接投毒方式，将配制的苯酚溶液直接 倒入水槽中，搅拌均匀。分别分为 1、2、3、4、5、6 组。染毒后观察其活动状况，并
（2）鱼的体表特征、脏体系数及肝脏酶活性影响 注：因第 6 组鱼缺少，所以没有第 6 组的实验结果
1、 各组鱼解剖前体表特征
组别 描述 项目 色素沉积
1
2
3
4
5
无
无
轻度
轻度
明显
出水
无
无
有
有
鳃
正常
正常
带一点深色
深色
深色
鳞片
紧密
较紧密
有轻微脱落
有脱落
有脱落
注：第 5 组样本经过冷冻保存，无法观察出水
五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验
五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验
昆明裂腹鱼是一种重要的淡水鱼类，广泛分布于昆明地区的水体中。
由于农药的广泛
使用，昆明裂腹鱼的生存环境受到了极大的威胁。
为了评估五种常见农药对昆明裂腹鱼幼
鱼的急性毒性，进行了以下试验。
选择了常用的五种农药，分别是杀虫剂甲氧氯丹、滴滴涕、敌敌畏，除草剂草甘膦和
除虫菊酯。
接下来，收集活体昆明裂腹鱼幼鱼，确保其健康状况。
将昆明裂腹鱼分为多个组，每组分别暴露于不同农药的溶液中。
在试验中，首先确定了五种农药的不同浓度。
采用一系列浓度梯度的方法，逐渐加入
农药溶液，以得到五种农药的不同浓度。
然后，将昆明裂腹鱼幼鱼放入含有不同浓度农药
的水域中，并观察其行为和生理状况变化。
在试验期间，观察了昆明裂腹鱼幼鱼的行为、呼吸、食欲、游动活跃程度等指标。
通
过观察这些指标的变化，可以判断农药对昆明裂腹鱼的毒性程度。
还监测了鱼类的死亡率，以确定五种农药的致死浓度。
根据试验结果，在以下五种农药中，甲氧氯丹和滴滴涕对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性
较大。
在较高浓度下，昆明裂腹鱼幼鱼出现呼吸困难、食欲下降、游动迟缓等不良反应，
并最终导致死亡。
敌敌畏和草甘膦对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性较小，需要更高浓度才能导致
致死。
而除虫菊酯对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性几乎可以忽略，没有引起明显的不良反应。
鱼类的急性毒性实验.
3
2．实验仪器设备 （1）实验容器 实验容器一般用玻璃或其他化学惰性材质制成的水族 箱或水槽。容器体积可根据试验鱼的体重确定，通常以每 升水中鱼的负荷不得超过2g（最好为1g）。一些小型鱼类 幼鱼可选择500mL或 1000mL烧杯为实验容器。容器的深 度必须超过16cm，水体表面积越大越好。同一实验应采用 相同规格和质量的容器。为防止鱼类跳出容器，可在容器 上加上网罩。实验容器使用后，必须彻底洗净，以除去所 有毒性残留物。 （2）其他 溶解氧测定仪、水硬度计、温度控制仪、pH计、分析 天平。 Company Logo
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（1）试验期间，对照组鱼死亡率不得超过10％。 （2）试验期间，受试物实测浓度不能低于设置浓度的 80％。如果试验期间受试物实测浓度与设置浓度相差超 过20％，则应该以实测受试物浓度来表达试验结果。 （3）试验期间，尽可能维持恒定条件。
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选用的试验鱼在试验前必须在实验室内经过驯养，使 之适应实验室条件的生活环境和进行健康选择。驯养鱼应 该与试验相同水质水温的水体中至少驯养7d，使其适应试 验环境，不应长期养殖（＜2个月）。驯养期间，应每天换 水，可每天喂食1-2次，但在试验前一天应停止喂食，以免 试验时，剩余饵料及粪便影响水质。驯养期间试验鱼死亡 率不得超过5％，否则，可以认为这批鱼不符合试验鱼的要 求，应该继续驯养或者重新更换试验鱼进行驯养。 试验前必须挑选健康的鱼，即选择体色光泽、鱼鳍完 整舒展、行动活泼、逆水性强、大小无太大悬殊、无任何 疾病的鱼作为试验鱼。任何畸形鱼、外观上反常态的鱼都 不得作试验鱼。
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1．数据处理 以暴露浓度为横坐标，死亡率为纵坐标，在计 算机或对数概率纸上，绘制暴露浓度对死亡率的曲 线。用直线内插法或常用统计程序计算出 24h、48h、 72h、96h的半致死浓度（LC50）值，并计算95％的 置信限。 如果试验数据不适于计算LC50，可用不引起死 亡的最高浓度和引起100％死亡的最低死亡浓度估算 LC50的近似值，即这两个浓度的集合平均值。
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矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。