十七 常用培养基配方

十七常用培养基配方

17.1 营养琼脂培养基

成分

蛋白胨10g

牛肉膏3g

氯化钠5g

琼脂15~20g

蒸馏水1000mL

制法：

将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2ML，校正PH7.2—7.4，加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装在三角锥瓶中，在121℃下高压灭菌15分钟。

17.2 乳糖胆盐发酵管培养基（单料）

成分

蛋白胨20g

猪胆盐5g

乳糖10g

0.04%溴甲酚紫水溶液25mL

蒸馏水1000ml

PH7.4

制法

将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正PH值，加入指示剂分装，每支管10ml，并放入一个小倒管（产气管），在115℃下高压灭菌15分钟。

注：双料乳糖胆盐发酵管培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。

17.3 乳糖发酵管培养基（单料）

成分

蛋白胨20g

乳糖10g

0.04%溴甲酚紫水溶液25ml

蒸馏水1000ml

PH7.4

制法

将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正PH，加入指示剂分装，每支管3ml，并放入一个小倒管（产生气），在115℃下高压灭菌15分钟。

注：双料乳糖发酵管培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。

17.4 伊红美琼脂（EMB）培养基

成分

蛋白胨10g

乳糖10g

磷酸氢二钾2g

琼脂2g

2%伊红溶液20ml

0.65%美兰溶液10 ml

蒸馏水1000ml

PH7.1

制法

将蛋白胨，磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于三角锥瓶内，在121℃下高压灭菌15分钟后备用。临用时加入乳糖并加热熔化琼脂，冷却至50—60℃，加入伊红和美蓝溶液摇匀，浇注平板。

17.5 远藤氏培养基

配方：

蛋白栋10.0g

乳糖10.0g

磷酸氯二钾 3.5g

亚硫酸氢钠 2.5g

碱性品红0.4g

琼脂10.0g

蒸馏水100ml

制备：

配料放入蒸馏水中，搅拌15分钟，使其溶解，分装到三角瓶或试管，121℃灭菌20分钟，冷却后贮于暗处，最佳温度为4—8℃以保持浅粉红色。

17.6 UBA培养基

酵母浸膏 6.1g

蛋白胨15g

番茄汁（244ml）12.2g

葡萄糖16g

K2HPO4 0.31g

KH2PO4 03.1g

MgSO²7H2O 0.12g

NaCl 0.006g

FeSO4²7H2O 0.006g

MnSO4²H2O 0.006g

琼脂12g蒸馏水750ml

啤酒250g

将上述配料加入水中，加热至沸，搅拌至完全溶解，趁热加入未脱气的啤酒，轻轻搅拌混合，用HCI 或NaOH调pH为6.0+0.1，分装于三角瓶中，，121℃蒸汽灭菌20min。待冷却后，放置在36±℃培养24h 小时备用。

17.7 乳酸杆菌培养基

UBA+ABP抑制剂溶液（UBA见前）

ABP抑制剂溶液

配料

放线菌酮0.1g

溴甲酚绿0.15g

无离子水80ml

2-苯乙醇20ml

配制

把溴甲酚绿放入50毫升水中，煮沸至完全溶解，把放线菌酮溶于30毫升水中，将两种溶液混合，分装于带螺旋盖的瓶中，每瓶20毫升，在121℃蒸汽灭菌10分钟，冷却后，每个瓶内加5毫升2-苯乙醇，并拧紧瓶盖。该溶液会分成两层，使用前须用力摇匀。

17.8 KOT培养基

配方

胰朊酶蛋白胨 5.0g

麦汁浸出生 2.5g

酵母浸出物 2.5g

肝浓缩物 1.0g

麦芽糖 5.0g

葡萄糖 5.0g

L-苹果酸0.5g

吐温-80 1ml

K2HPO4 0.5g

MgSO4²7H2O 0.125g

MnSO4²5H2O 0.025g

盐酸半光氨酸0.5g

胞苷0.2g

胸苷0.2g

啤酒800ml

放线菌酮100ml

NaN3 50mg

琼脂20g

蒸馏水至100ml

PH25.4

17.9 日本KL-2B培养基

配方：

胰蛋胨20.0g

麦汁浸生物10.0g

酵母浸出生 5.0g

麦芽糖10.0g

K2HPO4 3.0g

MgSO4²7H2O 1.0g

MnSO4²5H2O 0.25g

柠檬酸 2.75g

吐温-80 100mg

NaN3 50mg

琼脂20g

蒸馏水至1000ml

PH5.2

17.10 MRS麦芽糖琼脂培养基

没有一种单独的方法能够检测所有的乳酸细菌，这些细菌对各种糖的利用能力是有差别的，许多菌株能在好氧条件下在琼脂培养基上生长，而另一些菌株则更容易在厌氧条件下生长。

下面列出的培养基，能检测出许多种的乳酸细菌。但是，这些培养基不是绝对的，使用者可根据自己的经验进行修正后采用。

原理：液体样品培养在含有合适的不同种类琼脂培养基的培养皿中，计算活菌落数。

麦芽糖 5.0g

蛋白胨10.0g

牛肉浸膏粉8.0g

酵母浸出物 4.0g

葡萄糖20.0g

吐温-80 1.0ml

K2HPO4 2.0g

醋酸钠 5.0g

柠檬酸铵 2.0g

MnSO4²5H2O 0.2g

MgSO4²7H2O 0.05g

琼脂15g

在蒸馏水中溶解，并定容至1L。用1.0NHCl或0.1NNaOH调至4.7。蒸汽灭菌121℃，20分钟。

17.11 Ra-Ray培养基

NBB培养基是德国进行啤酒有害菌检查常用培养基，正如大家所知德国在有害菌研究领域处于领先地位，所以很多文献中提到使用NBB培养基有必要讲清楚。

NBB培养基是Prof.Back专门为检查啤酒有害菌而开发的。