细胞生物学实验2016(学生)

实验室规则和要求

一般规定

1.上课第一天请先熟悉环境，牢记“安全”是进行任何实验最重要的事项。

2.在实验室内请穿著实验衣（最好长及膝盖下），避免穿著凉鞋、拖鞋（脚

趾不要裸露）。留有长发者，需以橡皮圈束于后，以防止引火危险或污染实验。

3.在实验室内禁止吸烟、吃东西、饮食、化妆、嚼口香糖、嬉戏奔跑，食

物饮料勿存放于实验室的冰箱中，实验桌上勿堆放书包、书籍、衣服外

套及杂物等。

4.所有实验仪器、耗材、药品等均属实验室所有，不得携出实验室外。每

组分配之仪器、耗材请在课程开始前确定清点与保管，课程结束后如数

清点缴回。公用仪器请善加爱惜使用。实验前后，请把工作区域清理擦

拭，并随时保持环境清洁。

5.实验前详阅实验内容，了解实验细节的原理及操作，注意上课所告知的

注意事项。实验进行中有任何状况或疑问，随时发问，切勿私自变更实

验程序。打翻任何药品试剂及器皿时，请随即清理。实验后，适切记下

自己的结果，严禁抄袭，确实关闭不用之电源、水、酒精灯及瓦斯等。

6.身体不适、睡眠不足、精神不济或注意力无法集中，请立即停止实验。

实验时间若延长，请注意时间的管制及自身的安全，不可自行逗留实验

室。

7.实验完毕，请清理实验室、倒垃圾、灭菌、关闭灯光及冷气，离开实验

室前记得洗手。

8.任何意外事件应立即报告教师或实验室管理人员，并应熟知相关之应变

措施。

药品

1.使用任何药品，请先看清楚标示说明、注意事项，翻阅物质安全资料，

查明是否对人体造成伤害，使用完毕请放回原位。

2.新配制的试剂请清楚注明内容物、浓度、注意事项及配制日期，为避免

污染，勿将未用完的药剂倒回容器内。

3.挥发性、腐蚀性、有毒溶剂（如甲醇、丙酮、醋酸、氯仿、盐酸、硫酸、

-巯基乙醇、甲醛、酚等）要在排烟柜中戴手套量取配制，取用完应随即盖好盖子，若不小心打翻试剂，马上处理。

4.有毒、致癌药剂例如丙稀酰胺（神经毒）、溴化乙啶（突变剂）、SDS（粉

尘）请戴手套及口罩取用，并勿到处污染，脱下手套后，养成洗手的好

习惯。

5.使用后的实验试剂和材料，应放在专用的收集桶内。固体培养基、琼脂

糖或有毒物品不得倒入水槽或下水道中。

6.使用刻度吸管取物时，切勿用嘴吸取，请用自动吸管或吸耳球。

仪器

1.使用仪器前先了解其性能、配备及正确操作方法，零件及附件严禁拆卸，

勿私自调整，并注意插座电压（110V或220V）之类别。

2.使用离心机时，离心管要两两对称、重量平衡，离心机未停下不得打开

盖子。冷冻离心机于开机状态时，务必盖紧盖子，以保持离心槽之低温并避免结霜。

3.电源供应器有高电压，切勿触摸电极或电泳槽内溶液，手湿切勿开启电

源。

4.使用微波炉加热，不可有铝箔等金属物品，瓶盖必须松开，以免爆炸。

加热后戴防热手套取出瓶子，务必轻摇晃，确认不会突沸。水浴锅、干燥器等，使用前熟悉操作手续，严防烫伤。

5.操作台上有酒精等有机溶剂及易燃物（如甲醇、乙醇、乙醚、瓦斯等）

要远离火苗，不可留置火焰燃烧，万一着火，应力持镇定，沉着处理。

酒精或乙醚等着火时，应使用泡沫灭火剂或湿毛巾覆盖，勿使用水冲泼。

6.实验完毕后需清理实验台，除需收回共用物品外，不留任何器皿。倾倒

的试剂、水渍应擦干净，保证实验台和实验前同样清洁。

7.值日组协助实验室管理人员收回共用物品，清洁仪器，清理实验台，打

扫实验室。

第一部分基础实验

实验1 显微技术概述

实验目的：

使学生了解基本的细胞生物学实验操作，熟悉常规和常用的实验方法。锻炼学生动手能力，增强学生基本科研技能和科研思路；了解目前常用细胞生物学研究方法。

任务：

细胞生物学作为高校生命科学的主干课程之一，从本质上讲是一门实验科学，因此设置实验课程十分重要，学生可以通过这一教学环节掌握细胞生物学的基本研究手段和方法，并更深入理解理论课的各方面内容。进一步讲，细胞是生物构成的基本单位，是理解一切生命现象的基础，许多细胞生物学实验方法也用于遗传学，分子生物学，生物化学等科学实验研究，在将来的各项工作中将会有广泛的实际用途。

培养目标：

使学生掌握细胞生物学实验技术，提高学生分析问题和解决问题的能力，为了今后独立进行科研工作打下坚实的基础。

实验2 细胞膜的渗透性

一、实验目的

了解细胞膜的渗透性质及各种物质跨膜进入细胞的不同速度

二、实验原理

将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的渗透性不同，有的溶质可以渗入，有的溶质则不能渗入；渗入的溶质能够提高红细胞膜的渗透压，

所以水分进入细胞引起溶血。由于溶质渗入速度不同，因此溶血的时间也不相同。

三、实验器材与试剂

器材：

50ml小烧杯，10ml移液管，试管（1～10ml），试管架。

试剂：

0.17mol/L氯化钠，0.17mol/L氯化铵，0.17mol/L醋酸胺，0.17mol/L硝酸钠，0.12mol/L草酸铵，0.12mol/L硫酸钠，0.32mol/L葡萄糖，0.32mol/L甘油，0.32mol/L乙醇，0.32mol/L丙酮。

实验材料：

动物血液（如羊血）

四、实验步骤

1、羊血细胞悬浮液

取50ml小烧杯一只，加一份羊血和10份0.17mol/L氯化钠溶液，形成一种不透明的红色溶液，即稀释的羊血。

2、低渗溶液

取试管一只，加入5ml蒸馏水，再加0.5ml稀释的羊血，注意观察溶液颜色变化，由不透明的红色逐渐澄清，说明红细胞发生破裂造成溶血，全部红细胞溶血后光线比较容易透过溶液。

3、羊红细胞渗透性

（1）取试管一支，加入0.17mol/L氯化钠溶液5ml，再加入0.5ml稀释的羊血，轻轻摇动，观察颜色变化及溶血现象，说明原因。

（2）取试管一支，加入0.17mol/L氯化铵溶液5ml，再加入0.5ml稀释的羊血，轻轻摇动，观察颜色变化及溶血现象，说明原因。

（3）另外8种等渗溶液进行同上实验

记录实验结果并简单分析

表1 不同低渗溶液中红细胞溶血现象