分子生物学复习题

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医学分子生物学复习思考题及答案

医学分子生物学复习思考题及答案

医学分子生物学复习思考题及答案第十三章真核基因及基因组1、什么是基因组?答:基因组(genome)是指一个生物体内所有遗传信息的总和。

人类基因组包含了细胞核染色体DNA(常染色体和性染色体)及线粒体DNA所携带的所有遗传信息。

不同生物的基因及基因组的大小及复杂程度各不相同,所贮存的信息的量和质存在着巨大的差异。

2、真核基因的基本结构包括哪些?试述之。

答:真核基因的基本结构包括编码序列及非编码序列编码序列(coding seguence):包括编码蛋白质及功能RNA(mRNA、rRNA、tRNA、特定小分子RNA)的核苷酸序列。

真核基因的编码序列由外显子及内含子组成,外显子及内含子相间排列,称断裂基因。

内含子数目较外显子数少一个,组蛋白编码基因例外,不含有内含子。

外显子决定表达蛋白多肽及RNA的一级结构。

因此,外显子序列结构通常比较保守,一个碱基的突变常致基因功能的改变,而内含子序列相对变异较大。

每个内含子5’末端与外显子相接处,常为GT,3’末端与外显子相接处常为AG,这一共有序列是mRNA剪接加工时的剪接识别信号。

非编码序列(non-coding sequence):包括编码序列两侧(上游及下游)的对基因表达具有调控作用的一些调控序列:如启动子、增强子等外显子(exon);在基因序列中,出现在成熟mRNA分子上的序列。

内含子(intron):外显子之间、与mRNA剪接过程中被删除部分相对应的间隔序列。

3、什么事顺式作用元件?其化学本质是什么?顺式作用元件主要有哪些?答:非编码序列对基因表达起调控作用,又称调控序列。

位于结构基因(编码序列)的上游及下游,称它们为顺式作用元件(cis-acting element),包括启动子、增强子、沉默子、上游调控元件、加尾信号等。

4、真核基因启动子的功用是什么?其位置如何?答:DNA分子上能介导RNApol与DNA结合并形成转录起始复合物的序列,称之为启动子。

分子生物学复习题

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分⼦⽣物学复习题1、分⼦⽣物学的定义。

从分⼦⽔平研究⽣物⼤分⼦的结构与功能从⽽阐明⽣命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控。

2、简述分⼦⽣物学的主要研究内容。

a.DNA重组技术(基因⼯程)(1)可被⽤于⼤量⽣产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ;(2)可⽤于定向改造某些⽣物的基因组结构 ;(3)可被⽤来进⾏基础研究b.基因的表达调控在个体⽣长发育过程中⽣物遗传信息的表达按⼀定时序发⽣变化(时序调节),并随着内外环境的变化⽽不断加以修正(环境调控)。

c.⽣物⼤分⼦的结构和功能研究(结构分⼦⽣物学)⼀个⽣物⼤分⼦,⽆论是核酸、蛋⽩质或多糖,在发挥⽣物学功能时,必须具备两个前提:(1)拥有特定的空间结构(三维结构);(2)发挥⽣物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。

结构分⼦⽣物学就是研究⽣物⼤分⼦特定的空间结构及结构的运动变化与其⽣物学功能关系的科学。

它包括3个主要研究⽅向:(1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系d.基因组、功能基因组与⽣物信息学研究3、谈谈你对分⼦⽣物学未来发展的看法?(1)分⼦⽣物学的发展揭⽰了⽣命本质的⾼度有序性和⼀致性,是⼈类认识论上的重⼤飞跃。

⽣命活动的⼀致性,决定了⼆⼗⼀世纪的⽣物学将是真正的系统⽣物学,是⽣物学范围内所有学科在分⼦⽔平上的统⼀。

(2)分⼦⽣物学是⽬前⾃然学科中进展最迅速、最具活⼒和⽣⽓的领域,也是新世纪的带头学科。

(3)分⼦⽣物学是由⽣物化学、⽣物物理学、遗传学、微⽣物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会⽽产⽣并发展起来的,同时也推动这些学科的发展。

(4)分⼦⽣物学涉及认识⽣命的本质,它也就⾃然⼴泛的渗透到医学、药学各学科领域中,成为现代医药学重要的基础。

1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。

DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。

大学中医药专业考试复习资料--分子生物学及检验技术(单选填空)复习题

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大学中医药专业考试复习资料分子生物学及检验技术练习题一、单项选择1、维持DNA的一级结构是下列哪种化学键连接A 3’-5’磷酸二脂键B 肽键C 氢键D 二硫键2、人类基因组计划需要完成的图谱除外A 翻译图谱B 序列图谱C 转录图谱D 基因图谱3、真核生物染色体DNA的复制方式是A θ型B σ型C D环D 眼型4、有关真核生物中的mRNA描述正确的是A 在胞质内合成并发挥作用B 具有-CCA 的尾巴结构C 加工前体为rRNAD 有帽子结构和聚A尾5、核小体结构中不属于核心八聚体的组蛋白是:A H1B H2AC H2BD H36、以下不同类型的DNA三级结构不是闭环双链超螺旋结构的是A 真核生物染色体B 真核生物线粒体C 细菌核DNAD HPV-16病毒DNA7、以下那个是寡核苷酸探针的浓度(ug/ul)计算公式:A 50×A260样本×稀释倍数/1000B 40×A260样本×稀释倍数/1000C 33×A260样本×稀释倍数/1000D 55×A260样本×稀释倍数/10008、下列哪一种rRNA是原核生物特有的A 28S rRNAB 5.8S rRNAC 16S rRNAD 18S rRNA9、关于基因的定义正确的是A 基因是指一个生物体内DNA分子总量B 一个细胞中的染色体数量C 一个细胞内基因的总和D 为遗传单位,一个基因包括结构基因和调控基因10、不能用于核酸电泳支持介质有A 聚丙烯酰胺凝胶B 琼脂糖凝胶C 醋酸纤维素薄膜D 变性聚丙烯酰胺凝胶11、大多数质粒的结构均为A 双链线性DNAB 单链线性DNAC 闭合环状双链DNAD 闭合环状单链DNA12、RNA新链合成的方向是A N 端→ C 端B 5’→ 3’C 3’→ 5’D C端→N端13、下列不属于表观遗传现象的是A DNA单碱基突变B DNA甲基化C RNA干扰D 组蛋白修饰14、可移动的DNA序列又称转座因子,以下哪一种是长度小于2K的简单转座因子:A 转座子(Tn)B 可转座的噬菌体(phage Mu)C 转座子(Ty)D 插入序列(IS)15、大肠杆菌DNA聚合酶I具有的酶活性除外A 5’→ 3’聚合作用B 5’→ 3’外切酶活性C 3’→ 5’聚合作用D 3’→5’外切酶活性16、参与原核生物转录终止的因子是A α因子B ρ因子C β因子D σ因子17、下列说法错误的是A TaqDNA聚合酶的最佳的反应温度为72℃B TaqDNA聚合酶的活性依赖Mg2+而存在C TaqDNA聚合酶具有末端转移酶特性D TaqDNA聚合酶具备高保真特性,可以用于测序反应18、有关原核生物RNA聚合酶的描述正确的是A RNA聚合酶全酶才能识别辨认起始点B 全酶是由核心酶和α因子组成C RNA聚合酶全酶才能进行聚合反应D 核心酶不能单独存在19、PCR反应中的污染最主要的来自于:A 扩增产物的污染B 试剂及器材污染C 标本间的交叉污染D 实验人员的污染20、选出下列所有正确的叙述。

硕士研究生分子生物学复习题答案

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硕士研究生分子生物学复习JUJU一、名词解释1. 基因gene:是指核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,是指贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列.2. 基因组genome:是指细胞或生物体中,一套完整单倍体的遗传物质的总和.基因组的结构主要指不同的基因功能区域在核酸分子中的分布和排列情况,基因组的功能是储存和表达遗传信息.3. 基因家族gene family:是指核苷酸序列或编码产物的结构具有一定程度同源性的一组基因.同一个家族的基因成员是由同一祖先基因进化而来.4. 假基因pseudogene:在多基因家族中,某些成员并不能表达出有功能的产物,这些基因称为假基因,用ψ表示.假基因与有功能的基因同源,原来也可能是有功能的基因,由于缺失、倒位或点突变等原因失去活性,成为无功能的基因,它们或者不能转录,或者转录后生成无功能的异常多肽.5. 质粒plasmid:是存在于细菌细胞质中的一类独立于染色体的遗传成分,它是由环形双链DNA组成的复制子.质粒DNA分子可以持续稳定的处于染色体外的游离状态,但在一定条件下又会可逆的整合到宿主染色体上,随染色体的复制而复制,并通过细胞分裂传递到后代.6. 基因超家族gene superfamily:是指一组由多基因家族及单基因组成的更大的基因家族.它们的结构有程度不等的同源性,可能是由于基因扩增后又经过结构上的轻微改变,因此它们可能都起源于相同的祖先基因.但是它们的功能并不一定相同,这一点正是与多基因家族的差别.这些基因在进化上也有亲缘关系,但亲缘关系较远.如免疫球蛋白超家族.7. 卫星DNAsatellite DNA:为非编码区串联重复序列.通常存在于内含子和间隔DNA内.重复次数从数次至数百次,甚至几十万次,串联重复单位从最短的2bp 起,长短不等.这类重复顺序组成卫星DNA的基础.可分为三类:大/小/微卫星DNA.8. 基因多态性:是指由于等位基因间在特定位点上DNA序列存在差异造成的,一般发生在基因序列中不编码蛋白质的区域和没有重要调节功能的区域.9. 操纵子operator:是阻遏蛋白识别与结合的一小段DNA序列,转录过程存在阻遏调控机制的基因中均含有这样的序列.操纵子紧接在启动子下游,通常与启动子有部分重叠.10. 顺式作用元件cis-acting elements:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的DNA序列.原核生物中主要是启动子、阻遏蛋白结合位点、正调控蛋白结合位点、增强子等.真核生物中包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等.11. 反式作用因子trans-acting elements:在真核生物中,基因特异性转录因子称为反式作用因子,这些因子通常是通过与增强子或上游启动元件结合而发挥作用.反式作用因子通过与通用转录因子及RNA聚合酶相互作用而刺激转录,这些相互作用促进前起始复合物的形成.12. 增强子enhancer:是一种较短的DNA序列,能够被反式作用因子识别与结合.反式作用因子与增强子元件结合后能够调控通常为增强临近基因的转录.增强子序列通常是数个形成一簇,位于转录起始点上游-100~-300bp处,但在基因之外或某些内含子中也有增强子序列.13. 启动子promoter:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列.启动子具有方向性,一般位于结构基因转录起始点的上游,启动子本身并不被转录.也有一些真核生物启动子位于转录起始点下游,且可以被转录14. 载体vector:携带外源DNA进入宿主细胞,并在宿主细胞中进行无性繁殖或表达的小分子DNA. 这种DNA进入受体细胞后,可自主复制,或插入到基因组中,随受体细胞的基因组一起复制.载体上还常带有特定的药物抗性基因,便于筛选.按功能可分为克隆载体和表达载体,按来源可分为质粒、噬菌体、噬菌粒、粘粒、病毒和人工染色体载体等.15. 基因工程gene engineering:将基因进行克隆,并利用克隆的基因表达、制备特定的蛋白或多肽产物,或定向改造细胞乃至生物个体的特性所用的方法及相关的工作统称为基因工程./是在分子水平上,用人工方法提取或制备DNA, 在体外切割、拼接和重新组合,然后通过载体把重组的DNA分子导入受体细胞,使外源DNA在受体细胞中进行复制与表达,生产出人们所需要的产物,或定向创造生物新性状,并使之稳定地传给下一代.16. PCRpolymerase chain reaction:聚合酶链式反应.是在DNA聚合酶、模版DNA、引物和4种dNTP存在的条件下进行的体外酶促DNA合成反应,是在体外特异性扩增位于两段已知序列之间的DNA区段的一种方法./其原理是依据细胞中DNA半保留复制机理,DNA在不同温度下变性、复性的特性,人为控制温度高温变性、低温退火、中温延伸循环多次后使目的基因得到扩增.17. RNAiRNA interference:RNA干涉,是指外源性的dsRNA所致的细胞内有效的和特异性的基因封闭.其作用机制是双链RNA被特异的核酸酶降解,产生干扰小RNAsiRNA,这些siRNA与同源的靶RNA互补结合,特异性酶降解靶RNA,从而抑制、下调基因表达.已经发展成为基因治疗、基因结构功能研究的快速而有效的方法./是指在生物体细胞内,dsRNA引起同源mRNA的特异性降解,因而抑制相应基因表达的过程.是一种转录后水平的基因沉默,在生物体内普遍存在./指在生物体细胞内,外源性dsRNA酶切产生siRNA引起同源mRNA的特异性降解,因而抑制相应基因表达的过程. 是一种转录后水平的基因沉默,在生物体内普遍存在外源性dsRNA被一种叫DICER的dsRNA内切酶剪切产生siRNA,其可识别靶mRNA分子并使其被相应的核糖核酸酶切割成片段,从而抑制正常基因的表达,正常时生物体内不会有RNAi现象,只有在外源性RNA导入的情况下会发生.18. 分子杂交nucleic acid hybridization:是指具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下按碱基酸对原则形成双链的过程.19. 基因诊断gene diagnosis:是以DNA和RNA作为诊断材料,通过检查基因的存在、缺陷或异常表达,对人体状态和疾病作出诊断的方法和过程.其基本原理是检测DNA或RNA的结构变化与否,量的多少及表达功能是否正常,以确定被检查者是否存在基因水平的异常变化,以此作为疾病诊断的依据.20. 基因治疗gene therapy:是应用基因或基因产物,治疗疾病的一种方法.狭义的说,基因治疗是把外界的正常或治疗基因,通过载体转移到人体的靶细胞,进行基因修饰和表达,改善疾病的一种治疗手段.21. miRNAmicroRNA:是真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,其大小长约20~25nt.成熟的miRNA是由较长的初级转录产物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的,随后组装进RNA诱导的沉默复合体,通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA,并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或阻遏靶mRNA的翻译./长度约20-25个碱基对的非编码单链RNA,通过与 mRNA3'UTR互补的机制结合到mRNA上,抑制其转录或直接导致其降解,从而抑制基因表达.有高等生物基因组编码,在物种进化中相当保守.miRNAs的表达具组织特异性和时序性,在细胞生长和发育过程的调节中起多种作用22. 反义RNAanti-sense RNA:其碱基序列正好与mRNA互补,从而可与mRNA配对结合形成双链,抑制mRNA作为模板进行翻译.23. 转染transfection:指真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程.24. 转化transformation:是指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞,并使之获得新的表型的过程.转化现象在自然界普遍存在,是常见的基因转移方式之一.25. 基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和效应的全过程.但并非所有基因表达过程都产生蛋白质,rRNA、tRNA编码基因转录生成RNA的过程也属于基因表达.26. 限制性核酸内切酶restriction endonuclease:是一类能识别双链DNA分子中特定核苷酸序列,并在识别序列内或附近特异切割双链DNA的核酸内切酶. 27. 基因组学genomics:指对所有基因进行基因组作图包括遗传图谱、物理图谱、转录图谱,核酸序列分析,基因定位和基因功能分析的一门科学.包括结构基因组学、功能基因组学、比较基因组学.28. 蛋白质组学proteomics:是对不同时间和空间发挥功能的特定蛋白群体的研究,它是指从整体角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成分、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律的一个新的研究领域.蛋白质组学的研究技术体系包括:样品制备,双向聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质的染色,凝胶图像分析,蛋白质分析,蛋白质组数据库等./是指对在一定时间内或某一特定环境条件下,细胞、组织或有机体内所表达的所有蛋白质即蛋白质组进行系统的、总的研究的一门学科.旨在阐明生物体全部蛋白质的表达模式和功能模式,内容包括鉴定蛋白质表达、存在方式、结构、功能的互相作用方式等,它不同于传统的蛋白质学科,是在生物体或其细胞的整体蛋白质水平上进行的,从一个机体或一个细胞的蛋白质整体活动来揭示生命规律.包括表达蛋白质组学和细胞图形功能蛋白质组学.29. 顺反子cistron:编码单条多肽链的一个遗传功能单位,即转录单位.有单顺反子和多顺反子./即是由结构基因转录出的、并作为模板与核蛋白体结合、指导蛋白质合成的一类RNA分子.在真核细胞中一种mRNA分子只能翻译出一种蛋白质,为单顺反子.在原核细胞中一种mRNA分子可翻译出多种蛋白质,为多顺反子.二、问答题1. 真核生物基因组结构特点. P351结构基因:真核生物的结构基因是不连续的,编码氨基酸的序列被非编码序列打断,因而被成为断裂基因.编码序列之间的序列称为内含子,被隔开的编码序列称为外显子.2顺式调控元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的DNA序列.包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等.3基因家族:是指核苷酸序列或编码产物的结构具有一定程度同源性的一组基因.同一个家族的基因成员是由同一祖先基因进化而来.根据基因家族同源性程度的不同可以分为以下几型:①基因序列相同;②基因序列高度同源;③基因序列不同,编码产物具有同源功能区;④基因序列不用,编码产物具有小段保守基序;⑤基因超家族.4假基因:在多基因家族中,某些成员并不能表达出有功能的产物,这些基因称为假基因,用ψ表示.假基因与有功能的基因同源,原来也可能是有功能的基因,由于缺失、倒位或点突变等原因失去活性,成为无功能的基因,它们或者不能转录,或者转录后生成无功能的异常多肽.5重复序列:真核基因组存在大量重复序列,除了编码rRNA、tRNA、组蛋白及免疫球蛋白的结构基因外,大部分重复序列是非编码序列.根据出现频率不同可分为:高度重复序列、中度重复序列、单拷贝序列.6真核生物基因组中的转座子:是一些可以移动的遗传因素.7端粒:真核生物基因组染色体DNA为线性分子,其末端存在一种特殊的结构形式,称为端粒.该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体,只存在于真核细胞染色体末端.其在染色体的定位、复制、末端保护以及控制细胞寿命等方面起重要作用.8非编码序列:占基因组90%以上,编码序列小于DNA总量的5%.9为单基因结构,转录产物为单顺反子.10有多复制起点,每个复制起点大小不一.2. 真核生物和原核生物基因组结构的异同点. P35①真核基因组远远大于原核生物的基因组.②真核基因具有许多复制起点,每个复制子大小不一.原核基因只有一个复制起点.每一种真核生物都有一定的染色体数目,除了配子精子和卵子为单倍体外,体细胞一般为双倍体,即含两份同源的基因组,而原核基因组则是单拷贝的.③真核基因都是由一个结构基因与相关的调控区组成,转录产物为单顺反子monocistron,即一分子mRNA只能翻译成一种蛋白质.原核基因具有操纵子结构,即由几个功能相关的结构基因串联在一起,连同它们的调控序列组成一个转录单位.转录产物为多顺反子.④真核生物基因组中含有大量重复顺序,而原核生物基因组除rRNA、tRNA基因外,重复顺序不多.⑤真核生物基因组内非编码的顺序占90%以上.基因中非编码顺序所占的比例是真核生物与细菌、病毒的重要区别,且在一定程度上也是生物进化的标尺.⑥真核基因是断裂基因,即编码序列被非编码序列分隔开来,基因与基因间的非编码序列为间隔DNA,基因内非编码序列为内含子,被内含子隔开的编码序列则为外显子.而原核基因是连续的.⑦功能相关的基因构成各种基因家族,它们可串联在一起,亦可相距很远,但即使串联在一起的成簇的基因也是分别转录的.⑧真核生物基因组中也存在一些可以移动的遗传因素,这些DNA顺序并无明显生物学功能,似乎为自己的目的而组织,故有自私DNA之称,其移动多被RNA介导如哺乳动物及人类基因组中的逆转座子,也有被DNA介导的如果蝇及谷类中的DNA 转座子.1、原核结构基因无重叠现象,即同一部分DNA序列不编码两种蛋白质2、原核具有编码同工酶的基因3、原核DNA分子中有多种功能的识别区域,如复制起始区与终止区、转录启动区与终止区等,这些区域往往具有特殊序列,并含有反向重复序列.3. 人类基因组的组织结构特点.P371人类基因组的重复序列:按组织结构和分布特点分类①反向重复序列:是指两个顺序相同的拷贝在DNA链上呈反向排列.人类基因组中约含5%的反向重复序列,散布于整个基因组中,常见于基因组的调控区内,可能与复制转录的调控有关.②串联重复序列:特点是具有一个固定的重复单位,该重复单位头尾相连形成重复顺序片段,约占人类基因组10%.A.编码区串联重复序列:如组蛋白基因、5sRNA基因等,其意义在于快速大量合成相应基因的mRNA.B.非编码区串联重复序列:其通常存在于间隔DNA和内含子内,是组成卫星DNA的基础.③散在重复序列:除串联重复和反向重复序列之外的所有重复序列,不论重复次数多少,都可归在散在重复序列.根据重复序列的长度可分为短散在核元件和长散在核元件.2人类基因组中的DNA多态性:DNA多态性是指发生在DNA水平的多态性.在人类漫长的进化过程中,由于染色体结构的改变、DNA突变、重组、交换以及转座子的插入等,使得除了单卵双胞得个体外,没有两个个体的DNA组成是完全相同的.人类基因组多态性都是按孟德尔规律遗传的,具有体细胞稳定性和种系稳定性,因此可用它们作为染色体上疾病基因座位的遗传标记.①基因多态性:是由于等位基因间在特定位点上DNA序列存在差异造成的.②限制性片段长度多态性:是指突变、重排、单个核苷酸的插入或缺失可使DNA 顺序发生改变,其中有些可能造成限制酶切位点的增加、缺失或易位,致使DNA分子的限制酶切位点数目、位置发生改变.用限制酶切割不用个体基因组时,所产生的限制性片段的数目和每个片段的长度不同.③串联重复序列多态性:是以相同的核心序列按首尾相连的形式串联排列在一起形成一段特殊的序列的重复次数有较大变化.为DNA序列长度多态性.主要发生在小卫星和微卫星DNA.④单核甘酸多态性:是指基因组内特定核苷酸位置上存在不同的碱基,其中最少的一种在群体中的频率不低于1%.4. 原核生物基因表达调控机制.P78原核生物基因的转录和翻译偶联,mRNA降解快、半衰期短.原核生物基因表达调控主要在转录水平,其次是翻译水平.有两种方式:起始调控启动子调控和终止调控衰减子调控,转录是通过负调控因子和正调控因子进行复合调控的.以大肠杆菌E.coli为例介绍.1)转录起始调控的主要模式:①σ因子控制特定基因的表达:不同的σ因子可以竞争结合RNA聚合酶,RNA聚合酶的核心酶与不同σ因子组成的全酶识别不同基因的启动子.②乳糖操纵子的转录调控:在大肠杆菌的许多操纵子中,基因的转录不是由单一因子调控的,而是通过负调控因子和正调控因子进行复合调控的.细菌通常优先以葡萄糖作为能源,葡萄糖代谢产物能抑制细胞腺苷酸环化酶和激活磷酸二酯酶的活性,结果使细胞内的cAMP水平降低.葡萄糖耗尽时,细胞内cAMP水平升高,即可通过CAP调控其它操纵子的表达.E.coli的乳糖操纵子有Z、Y、A三个结构基因,编码β-半乳糖甘酶、乳糖透酶和半乳糖甘乙酰化酶,结构基因上游有一个启动子P和一个操纵子O.启动子上游有一个CAP蛋白的结合位点.启动子、操纵子和CAP结合位点共同构成乳糖操纵子的调控区.I基因是调节基因,编码产生阻遏蛋白.阻遏蛋白为四聚体,每个亚基相同.在没有乳糖的条件下,阻遏蛋白能与操纵子结合.由于操纵子与启动子有部分重叠,阻遏蛋白与操纵子结合后,抑制结构基因的转录.但是阻遏蛋白的抑制作用并不是绝对的.乳糖存在时,乳糖经透酶作用进入细胞,经β-半乳糖甘酶催化,转变成半乳糖和葡萄糖,同时催化一小部分乳糖转变成异乳糖.异乳糖作为诱导剂与阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白构象发生改变,导致阻遏蛋白与操纵基因的解聚,引起结构基因的转录.lac操纵子中的lac启动子是弱启动子,RNA聚合酶与之结合的能力很弱,只有CAP结合到启动子上游的CAP结合位点后,促进RNA聚合酶与启动子的结合,才能有效转录.在这种调控中,CAP起正调控作用.乳糖操纵子的转录起始由CAP和阻遏蛋白两种调控因子来控制,可因葡萄糖和乳糖的存在与否而有4种不同的组合.A.葡萄糖存在、乳糖不存在:此时无诱导剂存在,阻遏蛋白与DNA结合,而且由于葡萄糖的存在,CAP也不能发挥正调控作用,基因处于关闭状态.B.葡萄糖和乳糖都不存在:在没有葡萄糖的情况下,CAP可以发挥正调控作用.但由于没有诱导剂,阻遏蛋白的负调节作用是基因仍然处于关闭状态.C.葡萄糖和乳糖都存在:乳糖的存在对基因的转录产生诱导作用.但由于葡萄糖的存在使细胞cAMP水平降低,cAMP-CAP复合物不能形成,CAP不能结合到CAP 结合位点上,转录仍不能启动,基因处于关闭状态.D.葡萄糖不存在、乳糖存在:此时CAP可以发挥正调控作用,阻遏蛋白由于诱导剂的存在而失去负调控作用,基因被打开,启动转录.1阻遏蛋白的负性调节:在没有乳糖的条件下,阻遏蛋白能与操纵序列O结合,抑制了RNA聚合酶与启动子P的结合,从而抑制酶与启动子的结合,使乳糖操纵子处于阻遏状态.2CAP的正性调节:分解代谢基因激活CAP分子内存在DNA和CAMP结合位点,当没有葡萄糖使,CAMP浓度升高,CAMP与CAP结合,CAMP-CAP复合物结合于CAP结合位点,提高了乳糖操纵子的转录活性.3不同生长条件下的协调调节:是指LAC操纵子阻遏蛋白的负性调节与CAP的正性调节机制协调合作.CAP不能激活被阻遏蛋白封闭的基因转录,反之没有CAP的存在来加强转录活性,即使阻遏蛋白从操纵子上解离,基因仍无转录活性.具体以下4种情况.③阿拉伯糖操纵子的转录调控④色氨酸操纵子的转录调控⑤DNA片段倒位对基因表达的调控转录终止的调控:分为依赖p因子和不依赖p因子的终止调控,核糖体也参与转录终止.2)翻译的可调控性及调控方式:①SD序列对翻译的影响A.SD序列的顺序及位置对翻译的影响不同的SD序列有一定的差异,因而翻译起始效率不一样.SD序列的核心序列是六个嘌呤AGGAGG,SD序列与核糖体小亚基中16S rRNA 3’端的互补序列配对结合,使起始密码子定位于翻译起始部位.SD1、SD2、SD3的序列可以不同,SD1/ORF1,SD2/ORF2,SD3/ORF3的AUG和SD 之间的距离也不同.核糖体以不同的效率结合不同的SD和起始翻译.SD序列位于起始密码子AUG上游8~13个碱基处,不同的开放阅读框上游的SD序列与起始密码子之间的距离是不同的,这使得起始密码子在翻译起始部位定位的精确度不同,因而翻译的起始效率也不相同.此外,某些蛋白质与SD序列的结合也会影响mRNA与核糖体的结合,从而影响蛋白质的翻译.不同的SD序列有一定的差异,因而翻译起始效率不一样.SD序列与起始密码子之间的距离,也影响mRNA翻译效率.核糖体以不同的效率结合不同的SD和起始翻译. 不同的开放阅读框上游的SD序列与起始密码子之间的距离是不同,这使起始密码子在翻译起始部位定位的精确度不同,因而翻译的起始效率也不同. B. mRNA二级结构隐蔽SD序列的作用在某些mRNA分子中,核糖体结合位点在茎环中,使核糖体无法结合,只有破坏茎环结构,核糖体才能结合.红霉素抗性的细菌编码一种红霉素甲基化酶,该酶使核糖体23S mRNA上特定位点的一个腺嘌呤甲基化,阻止红霉素的结合.红霉素通过该位点结合于核糖体,抑制蛋白质合成.②mRNA的稳定性许多细菌mRNA降解速度很快,细菌的生理状态和环境因素都会影响mRNA的降解速度.细菌mRNA的降解是由核酸内、外切酶共同完成的.③翻译产物对翻译的调控:如核糖体蛋白的调控、翻译终止因子RF2调节自身的翻译.1.核糖体蛋白:核糖体蛋白合成的控制主要是在翻译水平.每个操纵子转录的mRNA所编码的蛋白质中都有一种蛋白或两种蛋白形成的一个复合物可以结合到多顺反子上游的一个特定部位,阻止核糖体结合和起始翻译.2.翻译终止因子RF2调节自身的翻译:RF2 识别终止密码 UGA 和 UAA,RF1 识别终止密码 UAG 和 UAA.④小分子RNA的调控作用1.调整基因表达产物的类型2.低水平表达基因的控制5. 真核生物转录水平的基因表达调控机制.P89。

分子生物学总复习期末考试总复习

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分子生物学课程重点,以及一份真题。

1、绪论(1)分子生物学的概念分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐明蛋白质与蛋白质、蛋白质与核酸之间的互作及其基因表达调控机理的学科。

(3)经典历史事迹1928年格里菲斯证明了某种转化因子是遗传物质1944年艾弗里做了肺炎双球杆菌转换实验1953年沃森和克里克提出双螺旋结构桑格尔两次诺贝尔学奖2、染色体与 DNA(1)真核生物染色体具体组成成分为:组蛋白、非组蛋白和DNA。

在真核细胞染色体中,DNA与蛋白质完全融合在一起,其蛋白质与相应DNA的质量之比约为2:1。

这些蛋白质在维持染色体结构中起着重要作用。

(2)组蛋白组蛋白是染色体的结构蛋白,其与DNA组成核小体。

根据其凝胶电泳性质可将其分为H1、H2A、H2B、H3及H4。

组蛋白含有大量的赖氨酸和精氨酸,其中H3、H4富含精氨酸,H1富含赖氨酸。

H2A、H2B 介于两者之间。

H1易分离,不保守;组蛋白的特性:①进化上的极端保守,②无组织特异性;③肽链上分布的不对称性;组蛋白的修饰作用⑤富含赖氨酸的组蛋白H5(3)C值反常现象C值:一种生物单倍体基因组DNA的总量。

一般情况,真核生物C值是随着生物进化而增加,高等生物的C值一般大于低等生物。

(4)DNA的结构•DNA的一级结构即是指四种核苷酸的连接及排列顺序,表示该DNA分子的化学构成。

•DNA二级结构是指两条多核苷酸链反相平行盘绕所生成的双螺旋盘绕结构。

DNA的二级结构分两大类:一类是右手螺旋,如A-DNA和B-DNA;另一类是左手螺旋,即Z-DNA。

DNA三级结构:是双螺旋进一步缠绕,形成核小体,染色质,染色体等超螺旋结构,5、每轮碱基数10•DNA的高级结构指DNA双螺旋进一步扭曲盘旋所形成的特定空间结构。

超螺旋结构是DNA高级结构的主要形式(非唯一形式),可分为正超螺旋和负超螺旋两类,它们在不同类型的拓扑异构酶(通过催化DNA链的断裂和结合,从而影响DNA的拓扑状态。

分子生物学与检验技术复习题

分子生物学与检验技术复习题

分子生物学与检验技术复习题2套复习题(一)一、单选题1、分子生物学检验技术发展的第二个阶段是A.DNA测序技术B.生物芯片技术C.聚合酶链反应D.分子杂交技术2、下列不属于RNA水解产物的是A.胞嘧啶B.腺嘌呤C.胸腺嘧啶D.尿嘧啶3、不属于细胞增殖的物质准备和积累阶段的是A.G1期B.S期C.G2期D.M期4、下列哪种说法是错误的A.用于核酸提取的痰液标本应加入1mol/L NaOH初步处理B.用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C.用于RNA检测的样本短期可保存在-20℃D.如使用血清标本进行检测应尽快分离血清5、聚合酶链反应PCR的延伸温度是A.50℃B.60℃C.72℃D.95℃6、下列关于Taq DNA聚合酶的描述,错误的是A.使DNA链沿5´→3´方向延伸B.不具有3´→5´外切酶活性C.具有校正功能,能够修复错配的碱基D.催化形成3´, 5´-磷酸二酯键7、在PCR反应中,可以引起非靶序列扩增的是A.延伸时间过长B.引物加量过多C.缓冲液中镁离子含量过高D.温度过高8、关于SYBR Green I的描述,不正确的是A.荧光染料的成本低B.不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记C.操作比较简单D.特异性强9、DNA测序中,核酸分子储存和传递遗传信息是通过A.核苷的结构B.磷酸二酯键C.碱基顺序D.核苷酸的结构10、DNA探针的长度通常为A.1000-2000bpB.100-400bpC.<100bpD.400-500bp11、将待测DNA转移到硝酸纤维素膜上,再与探针进行杂交的技术是A.杂交淋巴瘤技术B.Western印迹杂交C.Southern印迹杂交D.Northern印迹杂交12、质粒的分子结构是A.线状双链DNA分子B.线状单链DNA分子C.环状双链DNA分子D.环状单链DNA分子13、以质粒为载体,将外源基因导入受体菌的过程称为A.转化B.转染C.感染D.转位14、蛋白质分离和提取的步骤可分为A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定15、用于蛋白质检测的标本长期保存于A.-20℃B.4℃C.-70℃D.室温16、用于检测HPV的分子生物学检测方法中,哪个具有高特异、高敏感、高通量、操作简便快速的特点A.核酸杂交技术B.流式荧光技术C.荧光定量PCRD.基因芯片技术17、检测TB的实验室技术中,哪种被认为是目前最先进的一种检测TB及其耐药性的方法A.PCR技术B.PCR-RFLP技术C.全自动结核杆菌检测技术 E.荧光定量PCR技术18、用于非结核杆菌PCR检测的痰液标本应置于A.1mol/L HCLB.生理盐水C.1mol/L NaOHD.变性剂19、临床检验标本可以短期保存于4℃的是A.DNAB.RNAC.蛋白质D.核酸20、核酸的最大吸收峰在A.260nmB.280nmC.320nmD.350nm21、移码突变导致蛋白质功能的改变属于A.点突变B.插入/缺失突变C.动态突变D.错义突变E.重复序列22、错义突变和无义突变属于A.点突变B.插入/缺失突变C.动态突变D.错义突变E.重复序列23、短串联重复序列的拷贝数发生扩增而产生的突变属于A.点突变B.插入/缺失突变C.动态突变D.错义突变E.重复序列24、杂交反应效率高,非特异性杂交少的探针是A.DNA探针B.RNA探针C.寡核苷酸探针D.杂交探针E.PCR探针25、最常用的探针是A.DNA探针B.RNA探针C.寡核苷酸探针D.杂交探针E.PCR探针26、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列的探针是A.DNA探针B.RNA探针C.寡核苷酸探针D.杂交探针E.PCR探针27、DNA双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,DNA分子成为单链,这一过程称A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期28、在第一次变性时应给予足够时间以便模板彻底变性,这一过程是A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期29、引物与互补的单链DNA模板结合,形成杂交链的过程是A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期30、哪一过程的反应时间取决于扩增产物长度A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期31、下列不属于L-α-氨基酸的是A.甘氨酸B.亮氨酸C.苏氨酸D.甲硫氨酸E.异亮氨酸32、下列密码子中,终止密码子是A.UUAB.UGAC.UGUD.UAUE.UCG33、下列有关真核生物结构基因的说法不正确的是A.结构基因大都为断裂基因B.产物多为单顺反子RNAC.含有大量的重复序列D.编码基因比非编码基因多34、在DNA重组技术中,最常用到的并存在于原核生物中的载体是A.YACB.人工染色体C.质粒D.噬菌体E.DNA35、下列说法错误的是A.用于检测的样本短期可保存在-20℃.B.用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C.如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D.外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E.用于核酸提取的痰液标本应加入lmol/L NaOH初步处理36、影响DNA分离纯化效果的是A.材料新鲜,低温保存B.加核酸酶抑制剂C.剧烈振荡D.除净蛋白质E.除净多糖37、下列哪种方法不早根据蛋白分子大小进行蛋白分离纯化的A.透析B.超滤C.凝胶过滤层析D.离子交换层析E.离心38、不能作为PCR模板的是A.DNAB.RNAC.质粒和DNAD.蛋白质E.cDNA39、PCR中的脱氧核苷三磷酸不包括A.dATPB.dTTPC.dCTPD.dGTPE.dUTP40、Southern杂交通常是指A.DNA和DNA杂交B.DNA和RNA杂交C.RNA和RNA杂交D.蛋白质和蛋白质杂交E.DNA和蛋白质杂交41、目前临床分子生物学检验的标志物主要以()为主A.核酸B.蛋白质C.代谢产物D.PCRE.基因组42、原核生物基因组中没有A.内含子B.外显子C.转录因子D.插入序列E.操纵子43、质粒的主要成分是A.多糖B.蛋白质C.氨基酸衍生物D.DNA分子E.脂类44、下列说法错误的是A.用于检测的样本短期可保存在-20℃B.用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C.如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D.外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E.用于核酸提取的痰液标本应加入lmol/L NaOH初步处理45、DNA链的Tm值主要取决于核酸分子的A.A-C含量B.A-T含量C.A-G含量D.G-C含量E.T-G含量46、下列不是影响DNA复性因素的是A.DNA浓度B.DNA的分子量C.温度D.碱基组成E.DNA的来源47、PCR反应体系的描述错误的是A.模板B.一条引物C.dNTPD.DNA聚合酶E.缓冲液48、有关PCR的描述下列不正确的是A.是一种酶促反应B.引物决定了扩增的特异性C.由变性、退火、延伸组成一个循环D.循环次数越多产物量就越大,可增加循环次数提高产物量E.扩增的对象是DNA序列49、关于定量PCR的描述,不正确的是A.可以定量或半定量PCR产物的方法B.定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C.水解探针技术中TaqMan探针的位置位于两条引物之间D.分子信标在自由状态下为发夹结构,荧光信号极低E.定量PCR在封闭状态下进行,有效避免了产物的实验室污染50、以下为荧光染料技术的优点,不正确的是A.适合任何一个反应体系B.荧光信号量与PCR反应产物量成正比,可以实时监测C.荧光信号的检测在每一次循环延伸后,简单方便D.不需要进行凝胶分离等二次处理PCR产物,避免污染E.特异性高51、Sanger双脱氧链终止法使用的链终止物是A.NTPB.dNTPC.ddNTPD.a-32P-dNTPE.a-35S-dNTP52、关于Westerm印迹以下说法正确的是A.需要对靶蛋白进行放射性核素标记B.缺点是不能对转移到固相膜上的蛋白质进行连续分析C.检测的灵敏性为0.1-1ngD.是由凝胶电泳和固相免疫组成E.固相膜保存时间短53、目前已知感染人类最小的DNA病毒是A.HIVB.HPVC.HBVD.HAVE.HCV54、下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A.可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B.可以实现对感染细菌的广谱快速检测C.可以对细菌进行基因分型D.可以检测病原菌耐药基因E.其检验技术都是PCR及其衍生技术55、不符合分子诊断特点的是A.灵敏度高B.特异性强C.样品获取便利D.易于早期诊断E.检测对象为自体基因56、下列因素中不会引起染色体畸变的是A.电离辐射B.妊娠反应C.环磷酰胺D.巨细胞病毒E.母亲年龄57、以下关于mtDNA的描述不正确的是A.mtDNA为闭合双链环状分子B.mtDNA非编码序列少,只占mtDNA6%C.mtDNA 重链(H)富含胞嘧啶,轻链(L)富含鸟嘌呤D.mtDNA呈母系遗传规律E.mtDNA在具有自主复制、转录功能58、以下不是原癌基因的特点的是A.广泛存在于生物界,是细胞生长必不可少的B.在进化过程中,基因序列呈高度保守性C.通过表达产物DNA来实现功能D.在某些因素的作用下会形成能够致瘤的癌基因E.对正常细胞不仅无害,而且是细胞发育、组织再生、创伤愈合等所必需59、CYP450与一氧化碳结合物的最大吸收峰所在波长是A.350nmB.450nmC.280nmD.460nmE.550nm60、在器官移植中HLA配型最重要的位点是A.HLA-DRB.HLA-AC.HLA-BD.HLA-DPE.HLA-C二、判断题1、分子生物学检测的靶标是蛋白质。

分子生物学复习题1

生物信息的传递(上)——从DNA到RNA一、名词解释1、增强子:DNA上能强化转录起始的序列,能够在启动子任何方向以及任何位置(上游或下游)作用。

2、RNA编辑:某些RNA,特别是mRNA的一种加工方式,发生编辑后,导致DNA所编码的遗传信息的改变。

3、不对称转录:DNA片段转录时,双链DNA中只有一条链作为转录的模板,这种转录方式称为不对称转录。

4、转录泡:是由DNA双链,RNA聚合酶与新合成的转录本RNA局部形成的结构,它贯穿于延长过程的始终。

5、转录单位:DNA链上从启动子直到终止子为止的长度称为一个转录单位。

一个转录单位可以包括一个基因,也可以包括几个基因。

6、选择性剪接:在mRNA前体的剪接过程中,参加剪接的外显子可以不按其线性次序剪接,内含子也可以不被切除而保留,即一个外显子或内含子是否出现在成熟mRNA中是可以选择的,这种剪接方式称为选择性剪接。

二、选择题1、有关RNA转录合成的叙述,其中错误的是 A 。

A、转录过程RNA聚合酶需要引物B、转录时只有一股DNA作为合成RNA的模板C、RNA链的生长方向是5'3'D、所有真核生物RNA聚合酶都不能特异性地识别promoter2、以下有关大肠杆菌转录的叙述,哪一个是正确的? B 。

A、-35区和-10区序列间的间隔序列是保守的B、-35区和-10区序列距离对转录效率非常重要C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处3、真核生物转录过程中RNA链延伸的方向是 A 。

A、5'3'方向B、3'5'方向C、N端C端D、C端N端4、真核生物mRNA转录后加工不包括 A 。

A、加CCA—OHB、5'端“帽子”结构C、3'端poly(A)尾巴D、内含子的剪接5、以下对DNA聚合酶和RNA聚合酶的叙述中,正确的是: B 。

A、RNA聚合酶的作用需要引物B、两种酶催化新链的延伸方向都是5'3'C、DNA聚合酶能以RNA作模板合成DNAD、RNA聚合酶用NDP作原料三、判断题1、在真核生物中,所有rRNA都是由RNA聚合酶Ⅱ转录的。

分子生物学复习题

分子生物学思考题一、名词解释1、C值矛盾:C value paradox一种生物单倍体基因组的总量往往与种系的进化复杂性不一致的现象,即基因组大小与遗传复杂性之间没有必然的联系,某些较低等的生物C值却很大。

2、DNA的重排:DNA rearrangement 是基因活性调节的一种方式。

这种调节主要是根据DNA片段在基因组中位置的变化,即从一个位置变换到另一个位置,从而改变基因的活性。

3、断裂基因(splite gene):真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因。

4、管家基因:house-keeping gene 是指所有细胞中均要表达的一类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。

管家基因是一类始终保持着低水平的甲基化并且一直处于活性转录状态5、奢侈基因:luxury gene 特定类型细胞中为其执行特定功能蛋白质编码的基因。

6、CpG岛: CpG双核苷酸在人类基因组中的分布很不均一,而在基因组的某些区段,CpG保持或高于正常概率,这些区段被称作CpG岛7、反式作用因子:能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上,参与调控靶基因转录效率的蛋白质。

8、顺式作用元件:存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。

顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等,它们的作用是参与基因表达的调控。

顺式作用元件本身不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点,要与反式作用因子相互作用而起作用。

9、RNA编辑:RNA editing RNA编辑是指在mRNA水平上改变遗传信息的过程。

具体说来,指基因转录产生的mRNA分子中,由于核苷酸的缺失,插入或置换,基因转录物的序列不与基因编码序列互补,使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成,不同于基因序列中的编码信息现象10、选择性剪接:alternative splicing选择性剪接(也叫可变剪接)是指从一个mRNA前体中通过不同的剪接方式(选择不同的剪接位点组合)产生不同的mRNA剪接异构体的过程,而最终的蛋白产物会表现出不同或者是相互拮抗的功能和结构特性,或者,在相同的细胞中由于表达水平的不同而导致不同的表型。

分子生物学实验复习题附答案(最新整理)

分⼦⽣物学实验复习题附答案(最新整理)分⼦⽣物学复习题实验⼀DNA的制备(1)为什么分⼦⽣物学实施时要担⼼EB?溴化⼄锭(Ethidium bromide)是DNA诱变剂,溴化⼄锭可以嵌⼊碱基分⼦中,导致错配。

具有⾼致癌性(接触致癌)(2)DNA加样缓冲液的⽤途是什么?由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产⽣不利的影响,在抽提缓冲液中需加⼊抗氧化剂或强还原剂(如巯基⼄醇)以降低这些酶类的活性。

线状DNA⼤⼩/kb60-520-110-0.87-0.56-0.44-0.23-0.1(4)琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理是什么DNA分⼦在pH值⾼于其等电点的溶液中带负电荷,在电场中向阳极移动。

DNA分⼦在电场中通过琼脂糖凝胶⽽泳动,除了电荷效应以外,还有分⼦筛效应。

由于DNA分⼦可⽚段的相对分⼦质量不同,移动速度也不同,所以可将相对分⼦质量不同或构象不同的DNA分离。

DNA⽚段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反⽐,因此通过已知⼤⼩的标准物移动的距离与未知⽚段的移动距离时⾏⽐较,便可测出未知⽚段的⼤⼩。

但是当DNA分⼦⼤⼩超过20kb时,普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。

此时电泳的迁移率不再依赖于分⼦⼤⼩,因此,就⽤琼脂糖凝胶电泳分离DNA时,分⼦⼤⼩不宜超过此值。

(5)琼脂糖凝胶电泳时胶中DNA是靠什么发出荧光的?为什么?溴化⼄锭是⼀种⾼度灵敏的荧光染⾊剂,可插⼊DNA双螺旋结构的两个碱基之间,形成⼀种荧光络合物。

在254nm波长紫外光照射下,呈现橙黄⾊的荧光。

⽤溴化⼄啶检测DNA,可检出10-9g以上的DNA 含量。

(6)制备基因组DNA时⽤到的以下试剂分别起什么作⽤?CTAB等离⼦型表⾯活性剂,能溶解细胞膜和核膜蛋⽩,使核蛋⽩解聚,从⽽使DNA得以游离出来氯仿有机溶剂,能使蛋⽩质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)⽔溶性很强,经离⼼后即可从抽提液中除去细胞碎⽚和⼤部分蛋⽩质。

临床分子生物学检验复习题带答案

单选:1、代表来自于上皮和外间充质两种不同的矿化组织的交界面的结构是A、牙本质牙骨质界B、釉质牙本质界C、牙乳头D、上皮根鞘E、牙囊2、关于釉柱的排列方向的临床意义,以下说法错误的是A、绞釉排列可增强抗剪切程度B、治疗龋洞时,不能保留悬空釉柱C、劈裂釉质时需要按照釉柱的排列方向进行D、平滑面龋呈尖端向釉牙本质界的三角形E、根面龋的形态与平滑面龋同为三角形3、在罩牙本质和透明层以内的牙本质称为A、管周牙本质B、管间牙本质C、前期牙本质D、球间牙本质E、髓周牙本质4、牙龈当中的胶原纤维束存在于A、上皮层B、固有层C、黏膜层D、黏膜下层E、棘层5、牙周膜中维持牙直立的主要力量且呈水平方向的主纤维是A、牙槽嵴组B、水平组C、斜行组D、根尖组E、根间组6、下列哪项不是被覆黏膜的特征A、无颗粒层B、无角化层C、上皮钉突短D、固有层界限不清E、无黏膜下层7、下列关于角质细胞棘细胞层叙述错误的是A、位于粒层的深部、细胞体积大B、由增生的基底细胞发育而来C、构成桥粒的蛋白质主要有桥粒芯蛋白和桥粒胶蛋白D、胞质常伸出许多小的刺状突起E、细胞多呈四边形8、以下属于以黏液性腺泡为主的混合性小涎腺的是A、腮腺B、下颌下腺C、舌下腺D、唇腺E、腭腺9、胞质内含有酶原颗粒的细胞是A、浆液细胞B、黏液细胞C、闰管细胞D、分泌管细胞E、肌上皮细胞10、侧舌隆突出现的时间是胚胎A、第四周B、第五周C、第六周D、第七周E、第八周11、胚胎第三周,前脑的下端出现的突起是A、额鼻突B、下颌突C、上颌突D、中鼻突E、球状突12、残余的牙板上皮可成为牙源性上皮性肿瘤或囊肿的来源,也可能被重新激活形成A、马牙B、上皮珠C、上皮根鞘D、多生牙E、异形牙13、牙髓细胞的来源为A、成牙本质细胞B、成釉细胞C、牙囊D、牙乳头的未分化间充质细胞E、成牙骨质细胞14、上皮隔的形成是上皮根鞘向根尖孔处生长弯曲多少角度形成A、90°B、60°C、50°D、45°E、30°15、单根牙的形成中,下列哪项组织能够诱导牙髓细胞形成成牙本质细胞A、上皮隔B、上皮根鞘C、牙囊D、牙乳头E、内釉上皮16、平滑面龋中,釉质晶体开始出现脱矿,晶体间孔隙较增大,用树胶可进入到孔隙中,属于平滑面龋的哪一层A、透明层B、暗层C、病损体层D、表层E、细菌侵入层17、平滑面龋的病损形态是A、烧瓶状,口小底大B、烧瓶状,口大底小C、浅碟状,口大底浅D、三角形,顶向釉牙本质界E、三角形,顶向釉质表面18、牙骨质龋临床上多见于A、乳前牙B、乳磨牙C、年轻恒牙根龋D、老年人冠龋E、老年人根龋19、釉质龋病变的主要部分是A、透明层B、暗层C、表层D、病损体部E、细菌侵入层20、以下哪一项不属于慢性牙髓炎的分类A、慢性闭锁性牙髓炎B、慢性溃疡性牙髓炎C、溃疡型慢性增生性牙髓炎D、上皮型慢性增生性牙髓炎E、牙髓网状变性21、以下选项哪一个是由病理性牙髓充血发展而来A、牙发育期间B、月经期C、妊娠期牙髓D、急性牙髓炎E、高空飞行22、龋损下方牙髓血管充血,血管通透性增加,液体渗出,组织水肿,有纤维蛋白渗出,此时称为A、急性牙周脓肿B、急性增生性牙髓炎C、急性化脓性牙髓炎D、急性浆液性根尖周炎E、急性浆液性牙髓炎23、急性根尖周炎最常见的排脓途径A、经龋洞排脓B、深的牙周袋排脓C、经黏膜、皮肤排脓D、可通过上颌窦排脓E、可通过耳道排脓24、根尖周肉芽肿患者若根尖部出现修复性反应,称为A、急性根尖周肉芽肿B、慢性根尖周脓肿C、急性根尖周脓肿D、致密性骨炎E、化脓性骨髓炎25、根尖周肉芽肿内上皮大多数可能来源于A、Serres 上皮剩余B、Malasssez 上皮剩余C、口腔粘膜上皮D、呼吸道上皮E、牙周袋壁上皮26、结合上皮向根方增殖,延伸,形成深牙周袋,是以下哪项病理表现A、牙周炎静止期B、牙周炎活动期C、牙周变性D、牙周创伤E、牙周萎缩27、慢性龈炎的病理变化主要有A、牙龈上皮出血B、牙龈上皮增生C、牙龈上皮脓肿D、龈沟壁处有炎症细胞浸润E、沟内上皮向根方增殖28、下列关于龈增生组织病理变化不正确的是A、纤维结缔组织增生B、粗大的胶原纤维束类似瘢痕组织结构C、胶原纤维水肿、变性D、毛细血管增生、扩张、充血E、炎症明显29、上皮基层下疱常见于A、红斑B、红斑狼疮C、天疱疮D、类天疱疮E、白斑30、下列哪项不是单纯性白斑的病理变化A、上皮表面过度角化B、上皮棘层增生C、上皮钉突增生延长D、上皮不典型增生E、上皮基底膜清晰31、慢性盘状红斑狼疮使用直接免疫荧光技术可检测出现荧光的是上皮的哪个具体部位A、角化层B、颗粒层C、棘层D、基底膜E、肌层32、腺样囊性癌又称为A、多形性腺瘤癌变B、Warthin瘤C、圆柱瘤D、腺淋巴瘤E、淋巴乳头状囊腺瘤33、肿瘤内含有筛孔状囊样腔隙,与藕的断面相似;孔内充满嗜酸或嗜碱性黏液样物质,有基底膜样结构,属于腺样囊性癌的哪种分型A、腺性型B、包膜型C、管状型D、黏液型E、实性型34、舍格伦综合征区别于其他涎腺慢性炎症的病理表现为A、从腺小叶中心淋巴细胞密集浸润B、腺小叶内导管形成上皮肌上皮岛C、腺小叶内腺泡全部消失,小叶轮廓仍保留,腺小叶缺乏纤维结缔组织D、腺小叶内导管增生扩张,形成囊腔或变性液化 E、病变小叶与正常腺小叶有界限,但无被膜间隔35、下列哪项不是慢性涎腺炎的病理表现A、小叶腺泡萎缩B、小叶导管上皮增生C、小叶导管扩张D、小叶轮廓保留E、小叶间质淋巴细胞浸润36、黏液囊肿常发生于A、下唇黏膜B、颊黏膜C、口底黏膜D、硬腭部黏膜E、软腭部黏膜37、含牙囊肿的定义是A、囊壁包含一个未萌出牙的牙根B、囊壁包含一个发育异常的牙体C、囊壁包含一个未萌出的牙体D、囊壁包含一个已萌出牙的牙根E、囊壁包含一个未萌出牙的牙冠38、成釉细胞瘤各分型的病理变化不包括A、上皮团块中出现纤维化B、上皮团块中出现囊性变C、上皮团块中出现颗粒性变D、上皮团块中出现鳞状化生E、上皮团块中出现角化珠39、最常见的牙源性肿瘤A、成釉细胞纤维瘤B、牙瘤C、Pindborg瘤D、牙源性角化囊性瘤E、成釉细胞瘤40、以下哪项为牙源性肿瘤A、含牙囊肿B、萌出囊肿C、黏液囊肿D、黏液纤维瘤E、Warthin瘤41、构成牙齿主体的是:A.釉质B.牙本质C.牙骨质D.牙髓E.牙周膜42、固有层内结缔组织乳头狭长,几乎接近上皮表面,乳头中含有许多毛细血管袢的黏膜是A、颊B、唇红C、舌腹D、软腭E、牙龈43、较易由淋巴道播散的口腔癌是A.唇癌B.颊癌C.牙龈癌D.舌癌E.腭癌44、侧支根管形成的原因是A、牙乳头部分坏死B、牙本质发育障碍C、颈环发育不良D、上皮根鞘断裂E、成牙本质细胞坏死45、口腔癌最常见的部位是A.颊B.唇C.口底D.舌E.牙龈46、关于慢性涎腺炎的病理表现,错误的是A.导管扩张B.腺泡萎缩C.纤维增生D.腺小叶坏死E.玻璃样变性47、关于附着龈,正确的是A.表面可见点彩B.色泽比游离龈稍红C.表面上皮无角化D.紧密附着于牙骨质,故名附着龈E.富有弹性,有一定活动度48、由牙周膜中的成纤维细胞形成的纤维不包括A.主纤维B.牙骨质中的穿通纤维C.固有牙槽骨中的穿通纤维D.牙骨质中的内源性纤维E.牙骨质中的外源性纤维49、关于牙槽骨生物学特性的叙述,不正确的是A、可由于不断新生而影响牙齿发育B、受到外界的压力,可表现为吸收C、具有高度的可塑性D、随牙齿的萌出而不断改建E、较牙骨质更容易吸收50、肉芽肿性唇炎的病理特点为A.固有层散在淋巴细胞浸润B.血管周围淋巴细胞浸润C.固有层淋巴细胞带状浸润D.结缔组织中淋巴细胞浸润并形成滤泡E.血管周围上皮样细胞及淋巴细胞结节样聚集51、腮腺肿瘤镜下见筛状结构,肿瘤细胞排列成圆形或卵圆形上皮团块,其间含大小不等的囊性腔隙,与藕的断面相似。

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泸州医学院 生物化学与分子生物

精品课程第一章 基因的结构与功能——复习测试题 制作:于海清 审校:李洪 2009年9月

第一部份 选择题 1.关于基因的说法,错误的是 A.基因是贮存遗传信息的单位 B.基因的一级结构信息存在于碱基序列中 C.为蛋白质编码的结构基因中不包含翻译调控序列 D.基因中存在调控转录和翻译的序列

2.结构基因的编码产物不包括 A.snRNA B.hnRNA C.启动子 D.转录因子

3.已知双链DNA的结构基因中,信息链的部分序列是5'AGGCTGACC3',其编码的RNA相应序列是 A.5'AGGCTGACC3' B.5'UCCGACUGG3' C.5'AGGCUGACC3' D.5'GGUCAGCCU3'

4.真核生物基因的特点是 A.编码区连续 B.多顺反子RNA C.内含子不转录 D.断裂基因

5.关于外显子说法正确的是 A.外显子的数量是描述基因结构的重要特征 B.外显子转录后的序列出现在hnRNA中 C.外显子转录后的序列出现在成熟mRNA D.以上都对

6.断裂基因的叙述正确的是 A.结构基因中的DNA序列是断裂的 B.外显子与内含子的划分不是绝对的 C.转录产物无需剪接加工 D.全部结构基因序列均保留在成熟的mRNA分子中

7.原核生物的基因不包括 A.内含子 B.操纵子 C.启动子 D.起始密码子

8.原核和真核生物的基因都具有 A.操纵元件 B.顺式作用元件 C.反式作用因子 D.RNA聚合酶结合位点

9.原核生物不具有以下哪种转录调控序列 A.增强子 B.终止子 C.启动子 D.操纵元件

10.原核和真核生物共有的转录调控序列是 A.poly (A) 信号 B.启动子 C.操纵子 D.终止子

11.哪种不属于真核生物的转录调控序列 A.反式作用因子的结合位点 B.RNA聚合酶的结合位点 C.阻遏蛋白的结合位点 D.信息分子受体的结合位点

12.关于启动子叙述错误的是 A.原核和真核生物均有 B.调控转录起始 C.与RNA聚合酶结合 D.都不能被转录

13.关于操纵元件叙述错误的是 A.一段DNA序列 B.发挥正调控作用 C.位于启动子下游,通常与启动子有部分重叠

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精品课程D.原核生物所特有 14.顺式作用元件主要在什么水平发挥调控作用 A.转录水平 B.转录后加工 C.翻译水平 D.翻译后加工

15.能够与顺式作用元件发生相互作用的是 A.一小段DNA序列 B.一小段mRNA序列 C.一小段rRNA序列 D.某些蛋白质因子

16.顺式作用元件的本质是 A.蛋白质 B.DNA C.mRNA D.rRNA

17.真核生物的启动子 A.与RNA聚合酶的σ因子结合 B.tRNA基因的启动子序列可以被转录 C.位于转录起始点上游 D.II类启动子调控rRNA编码基因的转录

18.II类启动子调控的基因是 A.U6 snRNA B.28S rRNA C.mRNA D.tRNA

19.原核生物的启动子 A.根据所调控基因的不同分为I、II、III类 B.与RNA聚合酶全酶中的σ因子结合 C.不具有方向性 D.涉及转录因子-DNA的相互作用

20.原核生物和真核生物启动子的共同特点是 A.需要反式作用因子辅助作用 B.本身不被转录 C.与RNA聚合酶I、II、III相结合 D.涉及DNA-蛋白质的相互作用

21.真核生物的启动子不能控制哪个基因的转录 A.snRNA B.hnRNA C.5S rRNA D.16S rRNA

22.启动子位于 A.结构基因 B.DNA C.mRNA D.rRNA

23.哪项不是上游启动子元件的特点 A.位于TATA盒上游 B.与TATA盒共同组成启动子 C.提供转录后加工的信号 D.包括CAAT盒、CACA盒、GC盒等

24.增强子是 A.一段可转录的DNA序列 B.一段可翻译的mRNA序列 C.一段具有转录调控作用的DNA序列 D.一段具有翻译调控作用的mRNA序列

25.能编码多肽链的最小DNA单位是 A.内含子 B.复制子 C.转录子 D.启动子

第二部分 填空题 1. 结构基因编码________和________。 2. 基因包含________和________。 3. 真核生物mRNA具有5’端的________结构和3’端的________结构。 4. 原核生物和真核生物mRNA中都有________区和________区。 5. 常见的调控序列有________、 ________和________。

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精品课程第三部分 名词解释 1. 结构基因(structural gene) 2. 断裂基因(split gene) 3. 多顺反子RNA(polycistronic RNA) 4. 顺式作用元件(cis-acting element) 5. 启动子(promoter) 6. 增强子(enhancer) 7. 核酶(ribozyme) 8. 上游启动子元件(upstream promoter element)

第四部分 问答题 1. 顺式作用元件如何发挥转录调控作用? 2. 比较原核细胞和真核细胞mRNA的异同。 3. 如何认识和利用核酶? 4. 真核生物基因中的非编码序列有何意义? 5. 比较一般的真核生物基因与其转录初级产物、转录成熟产物的异同之处。

附录:参考答案 选择题参考答案 1.C 2.C 3.C 4.D 5.D 6.B 7.A 8.D 9.A 10.B 11.C 12.D 13.B 14.A 15.D 16.B 17.B 18. C 19.B 20.D 21.D 22.B 23.C 24.C 25.C

填空题参考答案 1.多肽链、特定RNA分子 2.结构基因、调控序列 3.m7Gppp帽子、poly(A)尾巴

4.编码、非翻译 5.启动子、增强子、沉默子

名词解释参考答案 1.指基因中编码RNA和蛋白质的核苷酸序列。它们在原核生物中连续排列,在真核生物中则间断排列。 2.真核生物的结构基因中,编码区与非编码区间隔排列。 3.一个RNA分子上包含几个结构基因的转录产物。原核生物的绝大多数基因和真核生物的个别基因可转录生成多顺反子RNA。 4.指调控真核生物结构基因转录的DNA序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和反应元件等。它们通过与一些蛋白质(如反式作用因子)相互作用来发挥转录调控作用。 5.指结构基因的转录起始位点附近的一段DNA序列,它结合RNA聚合酶(真核生物还需要结合其他蛋白质因子)后能够开放基因转录。 6. 指真核生物的一段DNA序列,不具有方向性,距离结构基因可远可近(甚至可以位于内含子)。它与某些蛋白质因子结合后,通常能够增强启动子的转录活性,有时也可以抑制转录。 7.指具有催化活性的RNA,其作用底物是RNA,主要参与RNA的加工成熟。 8.真核生物启动子上游的一些DNA序列,包括CAAT盒、CACA盒、GC盒等,它们构成启动子的一部分,通过与转录因子结合提高转录效率。

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问答题参考答案 1. (1) 真核生物基因中与转录调控相关的一些DNA片段称为顺式作用元件,包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和反应元件等。 (2) 顺式作用元件通常与一些蛋白质(如RNA聚合酶、转录因子)结合,作用形式包括DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质之间的相互作用。 (3) 顺式作用元件与蛋白质相互作用后,主要通过影响RNA聚合酶的DNA结合活性,增强或者减弱基因转录。 2. 原核生物和真核生物mRNA的相同点: (1) 都含有开放阅读框和非翻译区。 (2) 开放阅读框编码蛋白质,非翻译区调控翻译起始。 原核生物和真核生物mRNA的不同点: (1) 前者常为多顺反子RNA;后者常为单顺反子RNA。 (2) 前者5'端有与核糖体结合的SD序列;后者5'端有帽子结构,3'端有poly (A) 尾。 (3) 前者合成后很少被加工修饰;后者先合成hnRNA,经一系列修饰才变为成熟mRNA。 3. (1)核酶指具有催化活性的RNA,其作用底物是RNA。 (2)催化活性依赖于锤头状、发夹状等二级结构。 (3)主要功能是参与RNA的加工成熟。 (4)打破了酶是蛋白质的传统观念,为核酸先于蛋白质存在提供了依据。 (5)设计人工核酶,破坏疾病状态下过表达的RNA(如病毒RNA、癌基因的mRNA),是疾病治疗的策略之一。 4. (1)真核生物基因中的非编码序列包括内含子、顺式作用元件以及大量的重复序列。 (2)内含子将编码区隔断,可以通过转录后选择性剪接产生功能不同而结构仅有微小差别的RNA或蛋白质,丰富遗传信息的容量。此外,内含子对基因表达调控也有一定作用。

(3)顺式作用元件包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和反应元件等,决定基因表达的时空性。它们通过与RNA聚合酶以及一些转录因子相互作用,来激活或者抑制基因转录活性。 (4)高度重复序列和中度重复序列大多属于非编码区,与复制调控、基因表达调控相关。 5.一般的真核生物基因与hnRNA、mRNA的比较: (1)前者是双链DNA,后两者是单链RNA。 (2)前两者存在于细胞核,后者在细胞核中生成后转移到细胞质。 (3)前两者均包含外显子和内含子相应的区域,后者只包含外显子转录的区域。 (4)前者含有转录调控序列,后两者没有相应的序列。 (5)三者关系:基因转录生成hnRNA,hnRNA加工修饰形成成熟mRNA。

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