超净工作台使用方法及维护

专业技能实习报告

学院：动物科学学院

专业：动物科学

年级： 2009级

姓名及学号：李俊，0909050095

指导教师：许厚强教授

2013年1月6 日

一．前言

为了增强我们的专业技能，巩固我们的专业知识，提高同学们的实际操作能力。本学期期末，学院给我们开展了专业技能实习。通过本学期的专业技能实习，提高了我们学习专业知识的主动性，加深我们对专业知识的掌握，同时还了解到了实验室的许多仪器的使用方法及其维护，比如超净工作台，电子天平，离心机，高压灭菌锅和移液枪等。通过老师的详细讲解和实际操作，再让我们学生自己来操作，在此过程中出现的错误与疑难，老师再次给我们一一解答，使我们对仪器的使用有了更加深刻的影响。为我们以后我们做毕业论文时，能熟悉地使用相关仪器；更为我们以后从事于动物科学专业的相关工作打下坚实的基础。

二．实习时间

2012年12月29日——2013年1月10日。

三．实习地点

动物科学学院实验楼三教四楼。

四．实习内容

（一）超净工作台

1.操作规程

1.1每次使用超净工作台时，实验人员应先开启超净工作台上的紫外灯，紫外照射30分钟后使用。

1.2开启超净工作台工作电源，关闭紫外灯，并用75%的酒精或0.5%过氧乙酸喷洒擦拭消毒工作台面。

1.3整个实验过程过程中，实验人员应按照无菌操作规程操作。

1.4实验结束后，用消毒液擦拭工作台面，关闭工作电源，重新开启紫外灯照射15分钟。

1.5如遇机组发生故障，应立即通知实验动物室，由专业人员检修合格后继续使用。

1.6实验人员应注意保持室内整洁。

1.7超净工作台的滤材每2年更换一次，并作好更换记录。

2.维护规程及维护方法

2.1根据环境的洁净程度，可定期（一般2～3个月）将粗滤布（涤纶无纺布）拆下清洗或给予更换。

2.2定期（一般为一周）对环境周围进行灭菌工作，同时经常用纱布沾酒精或丙酮等有机溶剂将紫外线杀菌灯表面擦干净，保持表面清洁，否则会影响杀菌效果。

2.3当加大风机电压已不能使风速达到0.32m/s时必须更换高效空气过滤器。

2.4更换过滤器时，可打开顶盖，更换时应注意过滤器上的箭头标志，箭头指向即为层流气流向。

（二）高压灭菌锅

1.使用方法

1.1开盖：向右转动手轮数圈，直至转到顶，使盖充分提起，拉起左立柱上的保险销，推开横梁移开锅盖。

1.2通电：接通电源，将控制面板上的电源开关按至ON处，此时欠压蜂鸣器响，显示本机锅内无压力，（当锅内压力升至0.03MPa时，蜂鸣器自动关闭），控制面板上缺水位和低水位均亮。

1.3加水：将纯水直接注入锅内约8升，观察控制面板上的高水位灯，亮时方可停止加水，当水过多应开启下排水阀放去多余水。

1.4放需灭菌的物品：把装有生理盐水的三角瓶放在灭菌筐内，应留有一定间隙，这样有利于蒸汽穿透，提高灭菌效果。

1.5盖上锅盖：将手轮向左旋转数圈，使锅盖向下压紧锅体，以确保密封开关处处于接通状态。当连锁灯亮时，显示容器密封到位。

1.6设定温度和时间：按一下确认键，按动增加键，将温度设定在121度，再按动一下确认键，按动增加键,设定时间为20分钟，最后再按确认键，温度和时间设定完毕。

1.7灭菌：第六步结束后，进入自动灭菌程序，当锅内压力达到约0.03MPa时，欠压蜂鸣器停止蜂鸣，压力灯亮，随温度升温，当灭菌室内到达所设定温度，加热灯灭，自动控制系统开始进行灭菌倒计时，并在控制面板上的设定窗内正在显示所需灭菌时间。

1.8灭菌结束：关电源，将排汽排水阀向左旋转，排除蒸汽，当压力表上压力指示针指到0时，方可启盖取出灭菌物品。

2.维护与保养

2.1推放灭菌物品时，严禁堵塞安全阀和放气阀，必须留出空位保证其空气畅通，否则易造成容器爆裂。

2.2灭菌液体时，盛液不超过容器的3/4。

2.3针对不同灭菌指标的物品，不能一起灭菌。

2.4灭菌终了时，若压力表指示针已经回复零位，而锅盖不易开启时，可将放气阀摘子置于放气位置，使外界空气进入锅内，真空消除后，方可开盖。

2.5压力表使用日久后，压力指示灯不正确或不能回复零位，应及时予以检修。

2.6经常保持设备的清洁与干燥，可以延长其使用寿命，橡胶密封圈使用日久会老化，应定期更换。

（三）移液枪

1.移液枪的使用

1.1量程的调节。在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。

1.2枪头的装配。在将枪头套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。

1.3移液的方法。移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。这时可以采取两种移液方法。

一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点（吸取固定体积的液体）。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。

二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按