BMP7对TGFβ 1诱导人近端肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质分泌的影响
转化生长因子β1诱导人肾小管上皮细胞转分化：Notch1受体阻断剂的影响
转化生长因子β1诱导人肾小管上皮细胞转分化：Notch1受体阻断剂的影响曾虹;周懿;姚国媛【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2014(018)051【摘要】背景：研究发现,在病理状态下各种细胞可通过转化生长因子β1的介导,促进肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化为肌成纤维细胞,进而加速肾小管间质纤维化的进展。
目的：验证Notch1受体特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂DAPT能否有效阻断、部分逆转或者完全逆转转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化。
方法：以体外培养的人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞为观察对象,建立转化生长因子β1诱导的肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化体外模型,实验分为空白对照组、10μg/L转化生长因子β1组、转化生长因子β1（10μg/L）＋γ-分泌酶抑制剂DAPT（5μmol/L）组、转化生长因子β1（10μg/L）＋γ-分泌酶抑制剂DAPT （5μmol/L）部分延迟加入组、转化生长因子β1（10μg/L）＋γ-分泌酶抑制剂DAPT（5μmol/L）延迟加入组。
分别于12,24,48,72 h,在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;用免疫组织化学法和RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白、E-钙粘连素蛋白和mR NA表达变化。
结果与结论：1在干预后在12,24,48,72 h,与空白对照组相比较,转化生长因子β1组α-平滑肌肌动蛋白蛋白和mR NA表达均明显增加（P〈0.05）,E-钙粘连素蛋白和mR NA表达逐渐减少（P〈0.05）。
2转化生长因子β1＋γ-分泌酶抑制剂DAPT组α-平滑肌肌动蛋白的蛋白和mR NA、E-钙粘连素蛋白和mR NA的表达各时间段均接近空白对照组（P〉0.05）。
3γ-分泌酶抑制剂DAPT部分延迟加入组,α-平滑肌肌动蛋白的蛋白和mR NA的表达在12h增加（P〈0.05）,之后其表达逐渐减少（P〈0.05）,E-钙粘连素蛋白表达在24 h 开始减少（P〈0.05）,之后逐渐增加,E-钙粘连素mR NA各时间段都与空白对照组相接近,72 h时α-平滑肌肌动蛋白与E-钙粘连素的蛋白及mR NA表达均与空白对照组无显著差异（P〉0.05）。
人参皂甙Rg1对TGF-β_1诱导的肾小管上皮细胞增殖及细胞外基质的影响
１２ 实 验方 法 ．
标抗体 ７ ｌ ７ｃ 孵育 １ — ０ｒｎ ５ ， ＝ ３ （ ５ ２ ｉ。每孔加入终 ａ 止液 ５ ｌ Ｏ 。于酶 标 仪 ４ ０ｎ 处 ， ５ ｍ 以空 白对 照孔 调
零， 直接测 定各孔 Ｃ ｌ Ｉ， ｏ－ ｏ— Ｃ ｌⅢ和 Ｆ Ｎ水平 。
关键词 ： 人参皂甙 Ｒ ｌ 肾小管上皮 细胞 ； ｇ； 转化生 长因子一 。细胞外基质 ｐ；
中图分类号 ： ６２ Ｒ ９ 文献标志码 ： Ｂ 文章编号 ：０２２６ ２ １ ）９０ ２ ￣ １０ －６ Ｘ（０ ０ ３ －０ ８ ２
肾问质纤 维化是 各种 慢性 肾脏病进 展至终 末期 肾病 的共 同途 径 … ， 已证 实 肾小 管 上 皮细 胞 凋亡 和 增 殖能 力 下 降 在 其 发 生 发 展 中起 重 要 作 用 Ｊ 。转 化生 长 因 子一 Ｔ Ｆｐ ） 作 用 于 肾 小 管 上 皮 细 ｐ （ Ｇ — 可
测仪测 定培养 １ ３ ５ ｄ时 ４ ０ ｎ 波 长 各 孔 吸 光 度 、 、 ９ ｍ 值（ Ａ值 ） ￣ＣｌＩ Ｃ １ 。（ ｏ 、ｏ Ⅲ和 Ｆ — ． Ｎ水平 ： 培养 ５ｄ时 取 出 留存 的细胞 培养 上 清 液 ， 于包３ ４ ． ９— ２代 肾小 管上 皮
影响， 现报 告如下 并探 讨其 机制 。
１ 材 料 与 方 法
继续孵 育 ４ｈ 终止 培养 ， ， 翻板法 小 心 弃去 孑 内培 养 Ｌ 上清 液 ； Ｌ 人 ７ 二 甲基 亚 砜 ， 荡 １ ｉ， 每孑 加 ５ 振 ０ｍｎ
使 结 晶物充分溶 解 。
１２２ 观察 项 目 ①细胞 增殖 率 ： 用酶 联免 疫检 ．． 采
镰形棘豆总黄酮对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞分泌细胞外基质成分的影响
镰形棘豆总黄酮对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞分泌细胞外基质成分的影响高博;李钦;杨丽霞;李晓东;姜华【期刊名称】《中医研究》【年(卷),期】2013(026)003【摘要】目的:探讨镰形棘豆总黄酮含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)分泌细胞外基质成分:Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)和纤连蛋白(FN)mRNA表达的影响.方法:将HK-2 细胞用含体积分数10 % 胎牛血清的 DMEM / F12(1:1)培养基培养;实验分为 4 组:空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β 110 pg/L)、空白血清对照组(TGF-β110 pg/L +体积分数10%空白血清)、干预组(TGF-β110 pg/L +体积分数10%镰形棘豆总黄酮含药血清).药物干预24 h后,荧光定量PCR检测ColⅠ、Col Ⅲ和FN 的mRNA表达.结果:HK-2细胞经TGF-β1诱导后,ColⅠ、Col Ⅲ和FN 的mRNA表达上升,与空白对照组对比,差别有统计学意义(P＜0.05);经镰形棘豆总黄酮含药血清干预后,其表达逐步下降,与单纯TGF-β1诱导组对比,差别有统计学意义(P＜0.05),而空白血清无此作用.结论:镰形棘豆总黄酮在一定程度上能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞ColⅠ、Col Ⅲ和FN 的mRNA表达,减少细胞外基质成分的分泌,具有防治肾间质纤维化的作用.【总页数】3页(P65-67)【作者】高博;李钦;杨丽霞;李晓东;姜华【作者单位】甘肃省中医学校,甘肃,兰州,730050;甘肃省中医学校,甘肃,兰州,730050;甘肃省中医药研究院,甘肃,兰州,730050;甘肃省中医药研究院,甘肃,兰州,730050;甘肃省中医药研究院,甘肃,兰州,730050【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.镰形棘豆总黄酮对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞增殖的研究 [J], 王晓红;杨晓云;李钦;杨丽霞;李晓东;姜华2.镰形棘豆总黄酮含药血清对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞VEGF mRNA表达的影响 [J], 程涛;杨丽霞;李钦;李晓东;姜华;刘铜华3.镰形棘豆总黄酮含药血清对TGF-β_1诱导的人肾小管上皮细胞VEGF mRNA表达的影响 [J], 程涛;杨丽霞;李钦;李晓东;姜华;刘铜华;4.姜黄素对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞转分化及分泌细胞外基质成分的影响[J], 杨丽霞;李彧;王谦;李健;李亚东;刘铜华;牛建昭5.调节M2型丙酮酸激酶对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞周期阻滞和细胞外基质分泌的影响 [J], 吴洪銮;安宁;陈小翠;庞浩文;杨陈;刘华锋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
骨形成蛋白7在糖尿病大鼠肾脏中的表达及意义
骨形成蛋白7在糖尿病大鼠肾脏中的表达及意义杜月光;杨明华;柴可夫;金国瑛【摘要】[目的]观察骨形成蛋白7(BMP7)、转化生长因子β1(TGFβ1)在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及其与病程的关系，以探讨BMP7在糖尿病肾病发病中的作用。
[方法]64只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组各32只。
以四氧嘧啶复制糖尿病模型。
动态观察空腹血糖(FBG)、24h尿微量蛋白，光镜(PAS染色)观察肾脏病理，RT-PCR技术检测肾脏组织中BMP7、TG-Fβ1mRNA表达。
[结果]与正常组比较，糖尿病模型大鼠BMP7mRNA表达降低，而TGFβ1mRNA表达升高(P＜0.01)；并且随着病变的加重，BMP7mRNA表达水平呈下降趋势，而TGFβ1mRNA表达逐渐升高。
相关性分析显示，与肾功能分别呈负相关和正相关。
[结论]在糖尿病大鼠肾脏组织中BMP7表达减少，而TGFβl表达增加，表明在DN发生和发展过程中其重要作用。
%[Objective]To explore the effect ofBMP7 and TGFβl on the Diabetic Nephropathy by investigating the expression of BMP-7 and TGFJ31 mRNA in kidneys of diabetic rats.[ Methods] SD rats were randomly divided into control group and diabetes model group. The diabetes model was established by injection of Alloxan through vena caudalis. The fasting blood glucose(FBG) , Urineprotein(Upro) were checked with biochemical methods. The morphological changes of renal tissue were examined under microscopy on sections stained with PAS. The mRNA expression was tested by RT-PCR. [Results]Compared with the control group, in DM model group,the expression of BMP7 mRNA expression was greatly decreased,TGFβl mRNA were significantly increased. With the aggravation of the disease,BMP-7mRNA was apt to an obvious decrease, while TGFβ1 mRNA showed an adverse change. [Conclusion]The expression of BMP7 mRNA was decreased an d TGFβl mRNA were increased in kidney of diabetic rats, suggesting BMP7 and TGFβ1 played important role in the occurrence and progressions of diabetic nephropathy.【期刊名称】《浙江中医药大学学报》【年(卷),期】2011(035)004【总页数】4页(P559-561,564)【关键词】糖尿病肾病；BMP7；TGFβ1【作者】杜月光;杨明华;柴可夫;金国瑛【作者单位】浙江中医药大学基础医学院,杭州310053;浙江省中医药研究所;浙江中医药大学基础医学院,杭州310053;浙江中医药大学基础医学院,杭州310053【正文语种】中文【中图分类】R331糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy，DN）是糖尿病主要的微血管并发症，也是引起慢性肾功能衰竭的主要原因。
核心蛋白聚糖对转化生长因子β1诱导人近端肾小管上皮细胞转分化的影响
Ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ａ ｕ ｔ ｈ ｏ ｒ ： Ｂ Ａ Ｏ Ｈｕ ａ ． ｎ ｇ（ Ｅ ｍａ ｉ ｌ ： ｂ ａ ｏ ｈ ｙ ６ ７ ＠ｈ ｏ ｔ ｍａ ｉ Ｌ ｃ ｏ ｎ） ｒ
【 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】 ０ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｃ ｏ ｒ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｏ ｇ ｌ ｙ ｃ ａ ｎ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｈ ｕ ｍａ ｎ
胞 ； 细 胞 分 化
Ｅ ｆｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｃ ｏ ｒ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｏ ｇ ｌ ｙ ｃ ａ ｎ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｄ ｉ ｆｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｈ ｕ ｍａ ｎ ｒ ｅ ｎ ａ ｌ ｔ ｕ ｂ ｕ ｌ ａ ｒ ｅ ｐ ｉ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ａ ｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ
置显微镜下观察加入刺激因子 ４ ８ ｈ后 ， 各组细 胞形态 学变化 ； 应用 逆转 录一 聚合酶链 反 应 （ Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ）
检 测 核 心 蛋 白聚 糖 对 Ｔ Ｇ Ｆ ． Ｂ 。 诱导的 Ｈ Ｋ 一 ２细 胞 内 ０ 【 平滑 肌肌 动蛋 白 （ ０ 【 一Ｓ ＭＡ） 、 波形 蛋 白 、 角 蛋 白 ｍ Ｒ Ｎ Ａ表 达 的影 响 。结 果 Ｂ组 与 Ａ组 相 比 较 ， 细胞形 态发生 明显 变化 ， 大部分细 胞拉 长呈梭 形 ， 似 成纤维细胞 ； Ｅ组 和 Ｆ组 比 Ｂ组 梭 形 样 细 胞 明显 减 少 ， 尤 其 是 Ｆ组 梭 形 样 细 胞 减 少 更 明 显 ； Ｃ组 和 Ｄ
红景天苷对转化生长因子-β1诱导人肾小管上皮细胞逆向分化的影响
红景天苷对转化生长因子-β1诱导人肾小管上皮细胞逆向分化的影响王颖航;刘君亮;叶豆丹;高阳;徐多多;潘志【摘要】目的:阐释红景天苷对转化生长因子-β1 (TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HKC)表型转分化的效应,探讨其对Ⅰ型(Col Ⅰ)和Ⅲ型(ColⅢ)胶原蛋白表达的影响.方法:体外培养HKC,应用不同浓度红景天苷处理经TGF-β1诱导活化的HKC细胞,显微镜观察细胞形态改变,免疫组化法检测角化蛋白-18和α-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测Col Ⅰ型和ColⅢ型胶原蛋白表达.结果:HKC细胞经过TGF-β1诱导,细胞角化蛋白-18表达明显下调,α-SMA、ColⅠ、ColⅢ型胶原表达明显上调,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).经红景天苷干预后,其表达有所下降,与TGF-β1诱导组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:红景天苷可抑制TGF-β1诱导的HKC表型转分化,同时可以抑制肾小管上皮细胞外基质成分Col Ⅰ、ColⅢ型胶原的合成,在一定程度上具有阻止肾小管间质纤维化的作用.【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2013(013)012【总页数】3页(P1083-1085)【关键词】红景天苷;肾小管上皮细胞转分化;细胞外基质【作者】王颖航;刘君亮;叶豆丹;高阳;徐多多;潘志【作者单位】长春中医药大学第一附属医院风湿免疫科,长春130021;长春中医药大学研发中心,长春130117;长春中医药大学研发中心,长春130117;长春中医药大学研发中心,长春130117;长春中医药大学研发中心,长春130117;长春中医药大学研发中心,长春130117【正文语种】中文【中图分类】R965肾纤维化(包括肾小球硬化和小管间质纤维化)，以过量细胞外基质(ECM)在肾间质积聚、肾脏组织结构破坏及功能丧失为主要特征，是决定多种肾脏疾病发展和预后的重要因素，肾小管上皮细胞转分化为肾间质纤维化发生的重要机制［1-3］，研究表明，在异常生理状态下，肾小管上皮细胞可发生结构和功能损伤，分泌多种炎症因子和细胞因子，通过表型转化为肌成纤维细胞，随后进入间质异常的合成细胞外基质。
miR-21对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间质转分化的影响
【基金项目】浙江省自然科学基金资助项目（ＬＱ１４Ｈ２９０００４）；浙江中医药大学比较医学创新团队资助项目（ＸＴＤ２０１３０１）【收稿日期】２０１６ ０７ ２１【修回日期】２０１７ ０１ ３０△【通讯作者】Ｔｅｌ：０５７１ ８６６１３６６２；Ｅ ｍａｉｌ：ｗｄｊ０３６９＠１２６．ｃｏｍｍｉＲ ２１对ＴＧＦ β１诱导的肾小管上皮细胞间质转分化的影响 蔡月琴，褚燕青，朱科燕，陈诚，王德军１△（浙江中医药大学动物实验研究中心／比较医学研究所，杭州３１５７００）【摘要】目的：观察ｍｉＲ ２１在转化生长因子β１（ＴＧＦ β１）诱导的人肾小管上皮细胞（ＨＫ ２细胞）上皮间质转分化（ＥＭＴ）中的作用，并探讨ｍｉＲ ２１参与调控ＨＫ ２细胞ＥＭＴ的可能靶点。
方法：体外培养的ＨＫ ２细胞分为６组：正常对照组、转化生长因子β１（ＴＧＦ β１）模型组、ｍｉＲ ２１ｍｉｍｉｃ阴性组、ｍｉＲ ２１ｍｉｍｉｃ组、ｍｉＲ ２１ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ阴性组和ｍｉＲ ２１ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ组。
细胞经４ｎｇ／ｍｌＴＧＦ β１处理建立ＥＭＴ模型，检测ｍｉＲ ２１和ＥＭＴ相关指标的表达变化，利用基因转染技术，将ｍｉＲ ２１ｍｉｍｉｃ质粒或ｍｉＲ ２１ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ质粒转染经ＴＧＦ β１处理的ＨＫ ２细胞，使细胞过表达或抑制表达ｍｉＲ ２１，在此基础上观察细胞ＥＭＴ相关指标的变化以及磷酸酯酶（ＰＴＥＮ）基因的影响。
结果：①与正常组相比，模型组的ｍｉＲ ２１含量显著升高（Ｐ＜０．０５），上皮表型标志物Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ的ｍＲＮＡ和蛋白表达水平均显著降低（Ｐ＜０．０１），间质表型标志物α平滑肌肌动蛋白（α ＳＭＡ）ｍＲＮＡ和蛋白水平也显著升高（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；②转染ｍｉＲ ２１ｍｉｍｉｃ后，与ｍｉＲ ２１ｍｉｍｉｃ阴性对照组相比，ｍｉＲ ２１含量显著升高（Ｐ＜０．０１），ＰＴＥＮ、Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ的ｍＲＮＡ和蛋白水平显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），α ＳＭＡｍＲＮＡ和蛋白水平显著升高（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；转染ｍｉＲ ２１ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ后，与ｍｉＲ ２１ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ阴性对照组相比，ｍｉＲ ２１含量显著降低（Ｐ＜０．０１），ＰＴＥＮ、Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ的ｍＲＮＡ和蛋白含量显著升高（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），α ＳＭＡｍＲＮＡ、蛋白水平显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。
高糖环境下exendin-4对人肾小管上皮细胞CTGF、BMP-7表达的影响
高糖环境下exendin-4对人肾小管上皮细胞CTGF、BMP-7表达的影响张继敏;兰丽珍;孔瑜【摘要】目的探讨exendin-4对高糖环境下人肾小管上皮细胞(HK-2)结缔组织生长因子(CTGF)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)蛋白和mRNA表达的影响.方法将体外培养的HK-2细胞分为正常糖对照组(NG)、高糖组(HG)、甘露醇组(MG)、高糖+不同浓度的exendin-4组(分别exendin-4 10、20、40pmol/L),于培养48h后,采用免疫细胞化学、RT-PCR方法检测HK-2细胞CTGF、BMP-7蛋白和mRNA 表达量.结果与NG相比,HG组HK-2细胞CTGFmRNA和蛋白表达明显升高(P＜0.05),BMP-7 mRNA和蛋白表达明显降低(P＜0.05),加入exendin-4的各组HK-2细胞CTGF表达较HG组均明显降低(P＜0.05),BMP-7的表达较HG组均明显升高(P＜0.05).结论exendin-4可能会通过抑制高糖环境下HK-2细胞CTGF高表达,提高BMP-7的表达,改善糖尿病肾病.%Objective To investigate the effect of exendin -4 on the expression of connective tissue growth factor ( CTGF) and bone morphogenetic protein - 7 ( BMP 7 ) in human renal tubular epithelial cell cultured in high - glucose environment. Methods HK - 2 cells were subcultured under normal glucose (NG) ,high glucose (HG) , mannitol glucose (MG) and high glucose with different concentrations of exendin -4 group (including exendin -4 10 ,20,40pmol/L). The activity of CTGF and the expressions of BMP -7 protein and mRNA in cultured HK - 2 cells were detected with immunocytochemistry and RT - PCR at 48h. Results Compared with the normal group, the expression of CTGF significantly increased in the high glucose group (P <0.05) , the expression of BMP -7significantly decreased in the high glucose group(P <0. 05). Compared with the high glucose group, the expressions of CTGF was significantly lower in all the exendin -4 groups(P <0. 05) , the expressions of BMP -7 significantly increased in all the exendin -4 groups(P <0. 05). Conclusion Exendin -4 may modulate the process of diabetic nephropathy by inhibiting the expression of CTGF and increasing the expression of BMP -7 in high glucose - induced HK -2 cells.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2012(041)010【总页数】4页(P122-125)【关键词】胰高血糖素样肽-1;exendin-4;人肾小管上皮细胞;结缔组织生长因子;骨形态发生蛋白-7【作者】张继敏;兰丽珍;孔瑜【作者单位】030001 太原,山西医科大学;山西医科大学第一附属医院内分泌科;030001 太原,山西医科大学【正文语种】中文1．材料:(1)细胞株:人肾脏近端小管上皮细胞株(HK－ 2)购自中国协和医科大学细胞中心。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
BMP7对TGFβ 1诱导人近端肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质分泌的影响 优秀毕业论文 精品参考文献资料 英文缩略词表 a-SMA(a-smooth muscle actin) a一平滑肌肌动蛋白
BMP-7(bone moiphogenctic
protein-7)
骨形态发生蛋白一7
Col I(type I collagen)
I型胶原
DEPC(diethyl pyrocaeoonate) 焦碳酸二乙酯
E-cadhcrin B钙粘连素
ECM(extmcellular matrix) 细胞外基质
ELISA(enzyme linked immunosorbent assay) 酶联免疫吸附实验
EMT(epithelial-to-mesenchymal transition) 蚴胞·间充质转分化
CrGF(connectivc tissue growth factor) 结缔组织生长因子
fN(h'bronectin) 纤维连接蛋白
HK-2(human renal proximal tubular epithelial
cells) 人近端肾小管上皮细胞
MET(mesenehymal-to-epithclial transition) 间充质细胞．E皮细胞转化 MMP-2(malri metalloproteinase-2) 基质金属蛋白酶-2 MFB(myofibroblast) 肌成纤维细胞 MCP-l(monocyte chcmoatWactant protein-I) 单核细胞趋化蛋白．1
"IGF冯,(transforming growth factor一01) 转化生长因子B
l
Tm(mbmommrstitial fibrosis) 肾小管间质纤维化
TIMP-I(tissue inlu'bitor of the matri metalloproteinase-1)
组织基质金属蛋白酶抑制物．1
TEC(r砌tubular epithelial cell) 肾小管E皮细胞
PAI-1(plasminogen activator inlu'bitor-1) 纤溶酶原激活物抑制剂一1 PBS(phosphate buffered saline) 磷酸盐缓冲液
RT-PCR(reverse Iranscription-polymerase chain system) 反转录一聚合酶链式反
应 SDS(sodium dodecyl sulphate) 十二烷基磺酸钠
I兀Jo(unilateral ureteral obstruction) 单侧输尿管梗阻
2 优秀毕业论文 精品参考文献资料 学位论文原创性声明和版权使用授权书 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究 工作所取得的真实成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡献的个人和集 体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名(手写)：聱
导师签名(手写)：
学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借 阅。本人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。同时 授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书)
作者签名(手写)： 导师签名(手写)：
印o T年
∥月r『日 优秀毕业论文 精品参考文献资料 BMP-7对TG椰1诱导人近端肾小管上皮细胞 转分化及细胞外基质分泌的影响 摘要 目的：观察骨形态发生蛋8-7(洲)对转化生长因子-81(TGF-B1)诱导人近端肾小
管上皮细胞(HK-2)向间充质细胞转分化(D仉’)及细胞外基质(ECM)分泌的影响，探 讨其逆转肾间质纤维化的可能机制。
方法：将HK-2细胞在体外与TGF-B1或TGF-B1+BMP-7共培养，分成对照组，不同浓 度TGF-B1诱导组，TGF-B1不同时间诱导组，3ng／ml TGF-B1加不同浓度BMP-7组。相差显 微镜观察细胞形态的改变；间接免疫荧光测定a-SMA、E-cadherin的表达； RT-PCR检
测 a-SMA、E-cadherin、Col I a1、FN、PAI-1 mRNA的表达；Western Blot检测a-SMA、E,odherin 蛋白的表达；ELISA方法测定细胞E清液Col I、FN的表达。 结果：(1)随着TGF-B1浓度的增加及作用时间的延长，HK-2细胞形态逐渐发生改变， 由立方形铺路石样转变为梭形长条样；在3ng／ml TGF-81诱导48h后再加A．200ng／na BMP-7 组中，可见到已转变为梭形长条样的细胞大部分逆转回原来的形态。(2)免疫荧光检测显示， 正常HK-2细胞表达F_,cadhadn、而无a-SMA表达，经3ng／ml TGF-B1刺激4811后，细胞浆 中a-SMA表达明显增强，细胞质膜E-eadherin表达显著减弱；去除TGF-BI，再加入200ng／ml BMP-7干预48h，能明显抑制a-．SMA的表达、恢复E-eadherin的表达。(3)TGF-81在
lOng／ml 内呈剂量依赖性匕调a-SMAmRNA的表达。在3ng／ml TGF冯I诱导下，a-SMAmRNA表达 随作用时间的延长而增加，E．eadherin mRNA表达随作用时间的延长而逐渐减少。在3ng／
ml TGF-BI与BMP-7共同干预下，a-SMA mRNA及蛋白的表达随着BMP-7(100 ng／ml
枷O ng／m1)的浓度增加而减少，400 ng压llI
BMP-7即可显著减少a-SMA mRNA及蛋
白的表达 (PTGF-B1的持续刺激下，E-adherin mRNA及蛋白的表达随着BMP-7
的浓度增加而逐渐增加，400 ng／ml BMP-7即可显著增加F．,-odherin mRNA及蛋白的表达
(咖．01)。(4)在3ng／ml TGF-St诱导下，随刺激时间的延长，Col I
al、FN
mRNA表达
3 优秀毕业论文 精品参考文献资料 逐渐增加： BMP-7呈剂量依赖性抑制Col I、FN的表达，400 ng／IIll BMP-7即可显著抑 制Col I、FN的表达(P增 JJI(P<0．01)；BMP-7呈剂量依赖性抑制PAI-1 mRNA表达，400ng／m_l BMP-7可明显减少PAI-1 mRNA表达(P．<0．01)。
结论：(1)TGF-B1呈剂量和时间依赖性匕调a-SMA的表达、抑制E-cadherin的表达， 诱导HK-2细胞转分化，并促进Col I、FN的合成。(2)BMP-7可呈剂量依赖性地抑制TGF-Bl 诱导下a-SMAmRNA和蛋白的表达，并通过再诱导E-cadhcdn mRNA和蛋白的表达抑制、 逆转TGF-B1诱导的EMT。(3)BMP-7可呈剂量依赖性抑制TGF-Bl诱导下HK-2细胞外基 质成分C以I、FNmRNA和蛋白的表达；抑制PAI-1mRNA的表达，即BMP-7可抑制硎
l
诱导下肾小管上皮细胞ECM的合成、促进ECM降解。 关键词：骨形态发生蛋白质类转化生长因子B上皮细胞 转分化细胞外基质 优秀毕业论文 精品参考文献资料 Effects of BMP-7 on
Epithelial-to-Mensenchymal Transition and Extraceilular
Matrix Accumulation in Human Renal Proximal
Epithelial Cells Induced by TGF-Ih
Objective：To investigate the effects of bone morphogcnic
protein(BMP)-7
on epithelial-to-mesenchymal昀nsi60n㈣and
the expression 0f 6bIoIlec面(FN)and
type
collagen I(Col I)in human renal proximal tubular ce郴-2)inducedby transforming growth factor-B1
(TGF-B1)，and to
explore the possible
mc《?Jlanisms of BMP-7 for the inlffoifion and rwemal of
嗽lal intcmtitial fibrosis．
Methods：HK-2 cells、)l眦treated with TGF-BI
or a combination of TGF-Bx and
BMP-7．HK-2
cells divided into the following groups according to different f础Ol'S：Control
group, TGF-B1(different time and concentration)group,3ng／ml TGF-81+BMP-7(different concentration) group．Morphological clI．anges wefc assessed by phase contrast micrcsoopy．The
expression of a-SMA and E-cadherin were arlalysed by indirect immunofluorescencc J王T-PCR and Western Blot
respectively．The mRNA levels of extracelluar
n强由敦components(Col I al and Frq)and
plasminogen activator inlu'bitior(PAI)-1 were measured by RT-PCR．．The∞o'etion of Col I and FN protein was quantitated by ELISA． Results：(1)TGF-81 trealment of confluent HK-2 cells resulted in distinct morphological changes